陈江鸿；陈国伟
目的 研究T103A变异MxA蛋白抑制水疱性口膜炎病毒(VSV)复制活性.方法 将野生型、T103A变异MxA蛋白表达载体和对照质粒分别瞬时转染Wish细胞,24 h后VSV感染细胞,48 h后用MTT法检测各组细胞增殖;另取Wish细胞转染上述3种质粒,转染24 h加入VSV感染细胞,24 h后收集细胞采用RT-PCR检测VSVmRNA水平;Western blot检测各组MxA蛋白表达.结果 野生型、T103A变异MxA蛋白均在Wish细胞有较好表达;MTT检测结果提示T103A变异组细胞增殖数显著低于野生型组(P<0.01);RT-PCR结果显示T103A变异组VSVmRNA水平显著高于野生型组(P<0.01),但与对照组比较差异无统计学意义(P0.05).结论 T103A变异MxA蛋白失去了抑制VSV复制活性.
作者：余治健；邓启文；曾位森 刊期： 2009年第05期
2009年4月24日开始在墨西哥、美国等地接连爆发新型甲型H1N1流感(疫情之初称人感染猪流感)病毒疫情,这一疫情迅猛发展.截至北京时间4月29日晚,甲型HlNl流感疫情目前已蔓延至23国,其中10国已有确诊病例.
作者：张宇锋；高志良 刊期： 2009年第05期
目的 测定广州市2006年Ⅰ型登革病毒流行株的E基因序列并进行分析.方法 收集广州市2006年登革热患者急性期血清,用C6/36细胞培养分离登革病毒,RT-PCR法扩增全长E基因,测定序列并绘制系统发生树,进行生物信息学分析.结果 59份标本中38份病毒分离培养阳性,获得广州市2006年Ⅰ型登革病毒流行株GZ2006/1707的E基因序列,其同源性与东南亚缅甸、泰国、柬埔寨等地的流行株接近,但与广州市2002年Ⅰ型登革病毒流行株GZ2002/281较远.结论 广州市2006年流行的登革病毒属输入性,但与2002年流行的登革病毒有不同的输入源.
作者：吴新伟；蒋力云；伍业健；罗雷；何丽娟；刘于飞；李向忠；王玉林 刊期： 2009年第05期
目的 扩增和测序肠出血型大肠埃希菌O157:H7 tir基因,利用生物信息学预测分析其结构和功能特征.以探讨Tir作为疫苗候选抗原的可能性.方法 利用PCR技术扩增咖基因并测序,应用生物信息学网站在线分析工具和vector NTI suite软件分析Tir蛋白结构和生物学功能,预测B细胞抗原表位.结果 该基因全长1 674 bp,编码558个氨基酸,蛋白质总体亲水性高,有稳定的理化性质.含有3个结构和功能域,两段穿膜结构,多个磷酸化位点,预测20个B细胞线性表位.结论 Tir毒力因子是很有前景的疫苗候选抗原,为肠出血型大肠埃希菌O157:H7的疫苗研究提供了理论依据.
作者：王玲；龙北国；胡黎平；罗军；陈健文；范宏英 刊期： 2009年第05期
目的 建立人血红蛋白(Hb)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂,探讨在大便潜血(FOB)检测中的应用.方法 采用固相双抗体夹心法建立检测Hb的TRFIA方法.并对该试剂的各项性能指标进行评价.结果 自制试剂盒的低检测量为0.8 ng/mL或32 ng(Hb)/g(粪便),线性范围为0.8～1 000 ng/mL或32～40 000ng(Hb)/g(粪便).分析内和分析间变异系数分别为3.4%～8.9%和5.2%～13.4%.与羊、鸡、牛、猪、兔、狗Hb不发生交叉反应.90份临床确诊标本用本试剂盒和胶体金免疫层析(GICA)试剂同时测试,TRFIA法的敏感性和特异性均为100%,GICA法的灵敏度和特异性分别为95.6%、100%.结论 Hb-TRFIA试剂盒各项指标均达到临床检测要求,适用于临床上大便潜血Hb的检测.
作者：杨凤爱；王征；李来庆；李明；吴英松 刊期： 2009年第05期
目的 利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立乙型肝炎病毒前S1抗原的检测试剂盒.方法 应用双抗体夹心法建立乙肝preS1抗原TRFIA检测试剂盒,对试剂盒的各项性能指标进行评估.结果 对280份血清样本进行检测并与国产酶联免疫法试剂盒对比,结果显示自制试剂盒的特异性更好;200份正常人血清样本检测结果表明,该试剂盒的cutoff值=阴性对照荧光值×4.5.用自制质控品检测分析内和分析间的精密度分别为3.4%～7.8%,6.9%～8.4%;检测HBsAg及HBeAg无交叉反应.结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求,TRFIA法精密度和特异性有较大提高,可替代酶免法试剂盒.
作者：胡妮娅；董志宁；周卓龙；李明；吴英松 刊期： 2009年第05期
目的 了解韶关市白喉流行趋势,评估流行病学及免疫学效果,制定针对性措施防止白喉疫情的反复.方法 采用描述流行病学方法.从流行病学、血清学等角度分析白喉流行病学及免疫学效果.结果 随着疫苗接种率的提高,人群免疫水平达到并维持较高水平,白喉发病率自1959年的48.13/10万降至1989年的0.07/10万,1991年报告后1例白喉病例,死亡率由6.19/10万降至1987年的0.02/10万,并经17年的流行病学、免疫学监测及法定传染病漏报调查证实,该市连续17年无白喉病例报告,成本效益比为1:12.53.结论 韶关市在疫苗高接种率的干预下,实现了消除白喉的目标,社会及经济效益显著.但仍需继续做好免疫接种及监测工作,加强成人发病研究,严防白喉重新流行.
作者：胡国超 刊期： 2009年第05期
卡介苗(BCG)由于其广泛应用的安全性及其免疫佐剂作用,以其为载体的重组疫苗研究日益被科学家们重视.本文简要概述了近年来硕大利什曼原虫、疟原虫、弓行虫、肝片吸虫等寄生虫重组BCG疫苗的构建及免疫机制的研究进展.
作者：叶艳菊；李文桂 刊期： 2009年第05期
目的 提取小鼠肝细胞核磷酸化蛋白并利用双向凝胶电泳分离小鼠肝细胞核磷酸化蛋白.方法 提取小鼠肝细胞核蛋白并利用金属磷酸盐亲和层析树脂纯化出磷酸化蛋白后,进行一维等电聚焦分离和二维聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,并挑选其中一个蛋白斑点进行质谱分析.结果 成功提取了肝细胞核磷酸化蛋白,通过双向凝胶电泳分离技术成功建立了小鼠肝细胞核磷酸化蛋白质组图谱.质谱鉴定结果证实被挑选蛋白斑点是小鼠核磷酸化蛋白.结论 磷酸化蛋白纯化技术结合二维凝胶电泳分离技术是研究肝细胞核磷酸化蛋白质组的有效方法,为进一步全面研究和鉴定小鼠肝细胞核磷酸化蛋白的功能打下了基础.
作者：夏高晓；李红梅；陈丽；赵明哲；胡水旺；王继刚；孙明晶；邓鹏；刘靖华；姜勇 刊期： 2009年第05期
目的 构建pSUPERIOR-A20可调控性载体,检测其在肝转移亚系中表达的可调控性.方法 通过基因芯片筛选出鼻咽癌肝转移相关基因,结合文献调研获得头颈部癌转移标签基因,并通过荧光定量PCR检测发现A20可能在鼻咽癌肝转移过程中发挥了重要作用.在线设计A20特异性干扰片段,选择相应酶切位点后将其插入pSUPERIOR质粒中,应用酶切鉴定和序列分析方法验证所构建载体的正确性.将pSUPERIOR质粒和Tet-on质粒共转染肝转移亚系5-8F-H3,PCR检测A20的表达.结果 Real-time PCR检测A20在肝转移亚系5-8F-H3中的表达显著上调,结果具有统计学意义(P=0.005).且成功构建了pSUPERIOR-A20载体,与Tet-on质粒共转染5-8F-H3后经嘌呤霉素筛选克隆,经荧光定量PCR检测阳性克隆A20基因的表达显著下调.结论 成功构建pSUPERIOR-A20载体,并可有效干扰鼻咽癌肝转移亚系5-8F-H3中A20基因的表达,为进一步研究A20在鼻咽癌肝转移中的作用奠定了良好的基础.
作者：刘芳；谢卫兵；周来勇；姚开泰 刊期： 2009年第05期
鉴于尘肺病的高发病率、高危害性和不可逆转性,探讨其发病机制以达到早发现、早诊断、早治疗具有重要意义.本文对目前研究的较为深入的自由基学说和细胞因子网络学说进行综述.
作者：顾春晖；刘移民 刊期： 2009年第05期
目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体尼妥珠单(nimotuzumab,h-R3)与化疗药物联合对结肠癌细胞株LoVo的作用.初步探讨其可能的作用机制.方法 采用MTT法测定不同药物单药、两药联合分别对结肠癌细胞株LoVo的IC50值;计算不同药物联合的q值,以确定药物联合的作用;流式细胞仪检测不同药物单药或者联合对细胞周期分布及凋亡比例的影响.结果 联合h-R3能显著提高伊立替康对LoVo细胞的细胞抑制率.诱导更多肿瘤细胞发生凋亡以及产生G0/G1期、G2/M期阻滞,与5-氟尿嘧啶联合具有类似的作用,但较伊立替康不明显,而与奥沙利铂联合无明显增效作用.结论 h-R3通过协同或相加作用提高伊立替康、氟尿嘧啶的细胞杀伤作用,其机制与促进细胞凋亡和影响细胞周期分布有关,奥沙利铂联合对LoVo细胞无明显增效作用.为进一步的体内及体外实验提供了一定的指导作用.
作者：李小燕；曹梦苒；吕成伟；郑大勇；苏宁；罗荣城 刊期： 2009年第05期
目的 检测中国广东地区汉族人群中类风湿关节炎(RA)发病与蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22(PTPN22)基因Arg620Trp/1858CT多态性的关系.方法 采用PCR-BFLP技术分析了广东汉族人群中148例散发RA患者和150例健康对照者PTPN22 1858位点基因型.结果 在中国广东地区汉族人群中PTPN22 1858位点仅存在等位基因C,与RA的发病无关.结论 中国广东地区汉族人群中,PTPN22 Arg620Trp多态性与RA的发病无关;PTPN22基因可能存在其他多态性位点,需作进一步探讨.
作者：赵丽；裘宇容 刊期： 2009年第05期
目的 分析3起发生在老人院内的诺如病毒胃肠炎局部暴发疫情的流行特征,为今后预防类似事件的发生提供参考依据.方法 收集2007年佛山市老人院诺如病毒胃肠炎暴发疫情现场流行病学调查报告,采用描述性流行病学方法对疫情调查处理情况进行分析.结果 2007年佛山市共报告3起老人院诺如病毒胃肠炎暴发疫情,共发病56例,无死亡病例;疫情集中发生在2～3月份:每起疫情均从部分患者粪便标本中检测诺如病毒Ⅱ型核酸;3起疫情主要以人-人密切接触的途径传播.结论 早发现、早报告、早处理疫情,以及日常加强院内卫生,强化护工的规范操作,是预防和控制诺如病毒胃肠炎在老人院发生的关键.
作者：梁自勉；李艳容；黄祖星 刊期： 2009年第05期
目的 采用ELISA技术,建立肺炎支原体(Mycoplmma pneumonia)抗原检测方法.方法 制备肺炎支原体的多克隆抗体,建立酶联免疫吸附法,检测标本中的肺炎支原体,对其敏感性和特异性进行检测.结果 本方法可以检测毒株的1/212的稀释样品,对甲型流感病毒(H3N2亚型、H1N1亚型)、乙型流感病毒、副流感病毒(Ⅰ型、Ⅲ型)、呼吸道腺病毒(Ⅲ型、Ⅶ型)、肺炎衣原体无特异性反应.结论 本肺炎支原体抗原检测方法可用于疑似肺炎支原体感染样品的临床诊断和鉴别诊断.
作者：周转；李军涛 刊期： 2009年第05期
目的 探讨充血性心力衰竭(CHF)患者血清白三烯B4(LTB4)水平与心功能的关系.方法 对82例CHF患者按纽约心脏病学会心功能分级标准分为Ⅱ-Ⅳ级组,根据超声心动图检查结果,将入选者分为左心室正常组(左心室舒张末期容积≤55 mm)和左心室增大组(左心室舒张末期容积≥55 mm),用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清LTB4含量,并与20例健康体检者进行对照.结果 CHF组患者血清LTB4含量明显高于正常对照组(P<0.01),心功能Ⅲ、Ⅳ级的血清含量均高于Ⅱ级(P<0.01),左室增大组较左室正常组LTB4血清含量显著升高(P<0.01),LTB4的血清含量与CHF患者的严重程度及心脏左室增大均呈正相关(P<0.01).结论 LTB4是心功能受损的敏感指标,可以作为CHF相关的非创伤性指标之一.
作者：余新东；王孝杰；李庆云 刊期： 2009年第05期
目的 通过检测糖尿病肾病合并冠心病患者血浆高敏C反应蛋白(hsCRP)及巨噬细胞移动抑制因子(MIF),了解hsCRP及MIF在糖尿病肾病合并冠心病患者中的变化,协助临床决策.方法 收入64例糖尿病肾病合并冠心病患者及57例糖尿病肾病但无明确冠心病依据的患者,同时收入54例健康志愿者,以ELISA法检测分析其血浆中高敏C反应蛋白及巨噬细胞移动抑制因子的变化.结果 糖尿病肾病合并冠心病组患者血浆hsCRP水平(9.93±2.58)mg/L及MIF水平(23.61±6.64)μg/L高于无明确冠心病依据的患者[hsCRP(7.37±1.32)mg/L,MIF(15.56±3.70)μg/L],差异有统计学意义(P均<0.05),两组患者血浆hsCRP及MIF水平又均显著高于对照组[hsCRP(3.51±2.00)mg/L,MIF(9.57±1.25)μg/L].结论 检测糖尿病肾病患者血浆hsCRP及MIF,可能有助于鉴别糖尿病肾病患者有无合并冠心病的危险.
作者：徐向明；何坚；贺军 刊期： 2009年第05期
目的 探讨自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者外周血Th1/Th2、Th3/Tr1细胞状态,分析它们在AIHA发病机制中的作用.方法 收集AIHA患者及健康者外周抗凝静脉血,分离纯化淋巴细胞.运用FITC-CD3单抗,Cy5-CD4单抗,PE-CRTH2单抗,以CD3/CD4设门作三色流式细胞术检测Th1/Th2细胞,ELISA法检测血清中Th3细胞相关的细胞因子TGF-β1的含量和Tr1细胞的相关因子IL-10的含量.结果 与正常对照相比,AIHA患者外周血CD3+CD4+CRTH2-T细胞(Th1)百分率、CD3+CD4+CRTH2+T细胞(Th2)百分率均下降(P<0.05),而CD4+CRTH2-T/CD4+CRTH2+T比例(Th1/Th2)均明显升高(P<0.01),Th3/Tr1细胞分泌的相关细胞因子TGF-β1和IL-10的含量均降低(P<0.05).结论 AIHA患者外周血存在细胞免疫功能失调,T细胞亚群极化状态发生改变,呈Th1型细胞优势,Th3/Tr1细胞因子含量下降,可能与AIHA的免疫学发病机制有关.
作者：罗祖军；李艳华 刊期： 2009年第05期
目的 评价重组人白细胞介素-1受体拮抗剂(rhlL-1Ra)治疗活动性类风湿关节炎(RA)的24周疗效及对RA影像学的影响.方法 采用多中心、随机、双盲、平行对照的临床试验研究,南方医院试验中心确诊的活动期RA受试者40例,依照方案以3:1比例,随机分为rhIL-1Ra组(治疗组)和MTX组(对照组),治疗组30例予rhIL-1Ra联合MTX治疗,对照组10例予MTX治疗,并进行随访观察,疗程均为24周.主要评价指标为12周和24周时较基线期达到RA疗效评价标准20(ACR20)的患者比例;次要评价指标包括随访12周及24周时较基线期达到RA疗效评价标准50、70(ACRS0、ACR70)的患者比例、晨僵持续时间、关节肿胀和关节触痛计数、VAS评分、健康评估问卷(HAQ)、急性期反应物水平(ESR、CRP),并对患者治疗前后的双腕关节进行影像学Sharp评分.结果 第12周时治疗组ACR20为73%、ACR50为37%、ACR70为13%,对照组ACR20为10%、ACR50为10%、ACR70为0%(P=0.000);第24周时治疗组ACR20为87%、ACR50为50%、ACR70为37%,对照组ACR20为50%、ACRS0为10%、ACR70为0%(P=0.000);其他各项疗效指标也反映出相似的改善程度及趋势(P=0.000).双腕关节Sharp评分:治疗组0周关节侵蚀评分平均值为2.33,治疗24周为2.23(P=0.795),0周关节狭窄评分的平均值为1.70,治疗24周为1.43(P=0.343);对照组0周关节侵蚀评分平均值为2.60,治疗24周为3.60(P=0.024),0周关节狭窄评分的平均值为1.70,治疗24周为2.50(P=0.019).结论 rhIL-1Ra联合MTX治疗RA 24周的疗效明显优于单用MTX,能明显控制RA病程并提示rhlL-IRa有可能阻止RA患者影像学的进展.
作者：戴森华；李娟；高国华；吕卓；谢红伟 刊期： 2009年第05期
目的 分析血小板输注无效(PTR)患者血小板同种抗体,并对其HPA及HLA-Ⅰ类抗原进行基因分型,探讨血小板输注无效与血小板同种抗原/HLA-Ⅰ类抗原相关性.方法 应用ELISA方法对17例血小板输注无效患者血清中的血小板抗体进行检测;运用PCR-SSP方法,采用HPA分型试剂盒检测血小板同种抗原7个抗原系统HPA-1、2、3、4、5、6、15,以及HLA分型试剂盒对HLA-A/B抗原进行基因分型.结果 6名患者单独表达HLA抗体,4名患者表达血小板特异性糖蛋白抗体,3例HLA抗体和血小板特异性糖蛋白抗体共同表达,其中以GP Ⅱ b/Ⅲa为主.对17例患者HPA系统和HLA-Ⅰ类抗原基因分型,发现HPA-3系统中a的基因频率高达0.676,b为0.324;HLA-A*02、HLA-A*24、HLA-A*11和HLA-B*60、HLA-B*13、HLA-B*46多见.结论 HLA抗体和血小板特异性糖蛋白抗体表达引起血小板输注无效,了解PTR与HPA/HLA-Ⅰ类抗原的相关性对指导临床血小板配合性输注具有重要意义.
作者：徐秀章；夏文杰；叶欣；付涌水；陈扬凯；邓晶；丁浩强；罗广平；许茹 刊期： 2009年第05期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
