朱惠国；戴裕海
目的 比较常见的3种商售RNA提取试剂对乙脑病毒检测的相对效率、耗时和成本,为实验室应用及检测结果的评价提供依据.方法 对乙脑病毒参考株悬液作10-1～10-4系列稀释,选用QIAGEN公司的QIAamp Viral RNA Mini Kit、Sangon生物公司的RNA提取试剂盒和Invitrogen公司的Trizol试剂3种核酸提取方法提取上述样本RNA,用TaqMan实时荧光定量反转录聚合酶链反应对其提取效率进行评价,并比较3种试剂(盒)的耗费时间和价格.结果 对不同稀释度乙脑病毒样本的检测,均以QIAGEN公司QIAamp Viral RNA MiniKit检测的敏感度高.以该试剂盒的提取效率为100%,则Invitrngen和Sangon生物公司RNA提取试剂(盒)的提取效率分别为77.4%～86.8%和64.2%～74.1%.3种试剂(盒)对cDNA起始模板量的估计也有明显的影响,差别达到1～3个数量级,以QIAGEN公司的试剂盒敏感.3种试剂(盒)提取RNA耗时分别为60 min、100 min和70 min,价格效率比分别为46元、23元和20元.结论 RNA提取试剂可影响JEV荧光定量PCR检测的结果,各实验室应根据实验目的 和实验室条件,合理选择病毒RNA提取试剂盒.
作者：陈亿雄；陈志永；柯雪梅；任旭琦；陈清 刊期： 2009年第05期
目的 提取小鼠肝细胞核磷酸化蛋白并利用双向凝胶电泳分离小鼠肝细胞核磷酸化蛋白.方法 提取小鼠肝细胞核蛋白并利用金属磷酸盐亲和层析树脂纯化出磷酸化蛋白后,进行一维等电聚焦分离和二维聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,并挑选其中一个蛋白斑点进行质谱分析.结果 成功提取了肝细胞核磷酸化蛋白,通过双向凝胶电泳分离技术成功建立了小鼠肝细胞核磷酸化蛋白质组图谱.质谱鉴定结果证实被挑选蛋白斑点是小鼠核磷酸化蛋白.结论 磷酸化蛋白纯化技术结合二维凝胶电泳分离技术是研究肝细胞核磷酸化蛋白质组的有效方法,为进一步全面研究和鉴定小鼠肝细胞核磷酸化蛋白的功能打下了基础.
作者：夏高晓；李红梅；陈丽；赵明哲；胡水旺；王继刚；孙明晶；邓鹏；刘靖华；姜勇 刊期： 2009年第05期
目的 了解韶关市白喉流行趋势,评估流行病学及免疫学效果,制定针对性措施防止白喉疫情的反复.方法 采用描述流行病学方法.从流行病学、血清学等角度分析白喉流行病学及免疫学效果.结果 随着疫苗接种率的提高,人群免疫水平达到并维持较高水平,白喉发病率自1959年的48.13/10万降至1989年的0.07/10万,1991年报告后1例白喉病例,死亡率由6.19/10万降至1987年的0.02/10万,并经17年的流行病学、免疫学监测及法定传染病漏报调查证实,该市连续17年无白喉病例报告,成本效益比为1:12.53.结论 韶关市在疫苗高接种率的干预下,实现了消除白喉的目标,社会及经济效益显著.但仍需继续做好免疫接种及监测工作,加强成人发病研究,严防白喉重新流行.
作者：胡国超 刊期： 2009年第05期
目的 探讨慢性乙型肝炎患者血清HA、PCⅢ水平与肝组织病理炎症分级纤维化分期的关系.方法 采用放射免疫法检测111例慢性乙型肝炎患者血清HA、PCⅢ水平,并与肝组织病理炎症分级和纤维化分期结果相比较.结果 血清HA、PCⅢ水平随着肝脏病理炎症活动及纤维化程度加重而增高.结论 联合检测血清HA、PCⅢ水平是反映肝脏炎症和纤维化的良好指标.
作者：汤桂芳；陈瑞玲 刊期： 2009年第05期
目的 了解近20年来湖北省实施的血吸虫病防治策略,对疫情控制的效果和变化趋势的影响.方法 将1989年以来全省开展的4次大型流行病学抽样调查和1次病情普查资料建立数据库,统计分析主要疫情指标变化,评价各防治时段的防治策略所产生的效果及影响.结果 近20年,湖北省实施了3种防治策略;全省人群、耕牛感染率和推算病人数指标呈现大幅下降;人群、耕牛感染率呈指数曲线下降趋势.结论 近20年,湖北省实施的3种防治策略的演变,与防治工作进程、社会经济改革和自然因素相关;3个时段的防治策略都发挥了应有的作用,为血防工作延续起到效果基奠和经验积累的作用.
作者：朱惠国；戴裕海 刊期： 2009年第05期
目的 采用ELISA技术,建立肺炎支原体(Mycoplmma pneumonia)抗原检测方法.方法 制备肺炎支原体的多克隆抗体,建立酶联免疫吸附法,检测标本中的肺炎支原体,对其敏感性和特异性进行检测.结果 本方法可以检测毒株的1/212的稀释样品,对甲型流感病毒(H3N2亚型、H1N1亚型)、乙型流感病毒、副流感病毒(Ⅰ型、Ⅲ型)、呼吸道腺病毒(Ⅲ型、Ⅶ型)、肺炎衣原体无特异性反应.结论 本肺炎支原体抗原检测方法可用于疑似肺炎支原体感染样品的临床诊断和鉴别诊断.
作者：周转；李军涛 刊期： 2009年第05期
目的 探讨初发2型糖尿病(T2DM)人群中颈动脉内中膜厚度(IMT)与各代谢指标的相关关系,探寻动脉粥样硬化的危险因素.方法 选择正常对照组(NC)44例、糖耐量正常的单纯肥胖组(Ob)42例、新诊的2型糖尿病患者60例.所有对象于清晨空腹测量身高、体重、腰围、臀围、血压,计算体重指数(BMI)和腰臀比(WHR);空腹检测各组生化指标,并同时行糖耐量试验(OGTT),检测OGTT中0、30、60、120 min各时点血糖及胰岛素值,利用Bergman小模型技术计算胰岛素敏感指数(ISI);并以高分辨率彩色血管多普勒超声检查颈总动脉(CCA)内中膜厚度.结果 IMT值T2DM组较NC组(P<0.01)及0b组显著升高(P<0.05).所有初发T2DM患者,IMT与年龄、甘油三酯(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、餐后2 h血糖(2hPG)及ISI呈正相关(P<0.05～0.01);与BMI、腰围呈负相关(P<0.05).在校正年龄、性别因素的影响后,IMT与BMI、腰围、TC、LDL-C及ISI无显著相关,与2hPG呈显著相关r=0.461,P<0.001).结论 2hPG是初发T2DM人群早期动脉粥样硬化(AS)的独立危险因素,降低2hPG有望改善T2DM人群的血管功能.
作者：李晓莉；林小波；谢乃强；苏建平；伍华 刊期： 2009年第05期
目的 分析献血者ABO血型反定型O细胞凝集原因,以确保受血者输血安全.方法 对江门市2000年1月至2008年6月间,采用微板法检测献血者ABO血型出现反定型O细胞凝集者进行冷凝集素效价测定、吸收放散试验、意外抗体鉴定等血型血清学检测.结果 308 410例献血者中有25例出现反定型O细胞凝集.其中血清中含有冷凝集素导致O细胞凝集16例:效价1:4～1:32者10例、效价≥1:64者6例;血清中存在意外抗体导致O细胞凝集9例:抗-M(IgM)5例、抗-Lea(IgM)2例、抗-Leb(IgM)1例、抗-P1(IgM)1例.结论 采用微板法检测献血者ABO血型出现反定型O细胞凝集时,应进行相关的血型血清学检测;非血源紧缺的情况下,反定型O细胞凝集者不宜作为献血者.
作者：王平；杨克坚；罗月明 刊期： 2009年第05期
目的 利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立乙型肝炎病毒前S1抗原的检测试剂盒.方法 应用双抗体夹心法建立乙肝preS1抗原TRFIA检测试剂盒,对试剂盒的各项性能指标进行评估.结果 对280份血清样本进行检测并与国产酶联免疫法试剂盒对比,结果显示自制试剂盒的特异性更好;200份正常人血清样本检测结果表明,该试剂盒的cutoff值=阴性对照荧光值×4.5.用自制质控品检测分析内和分析间的精密度分别为3.4%～7.8%,6.9%～8.4%;检测HBsAg及HBeAg无交叉反应.结论 试剂盒各项指标均达到临床检测要求,TRFIA法精密度和特异性有较大提高,可替代酶免法试剂盒.
作者：胡妮娅；董志宁；周卓龙；李明；吴英松 刊期： 2009年第05期
子宫肌瘤是女性生殖系统常见的良性肿瘤.近年来,以腹腔镜和官腔镜为代表的微创技术在子宫肌瘤治疗的应用中逐渐普及,如腹腔镜子宫切除术、腹腔镜子宫肌瘤切除术、官腔镜子宫肌瘤切除术,以及近年来越来越受到重视的阴式子宫切除术、阴式子宫肌瘤剔除术及子宫动脉栓塞术等.上述手术具有刨伤小、患者痛苦少、恢复快、住院时间短等优点,但适应证、手术方法、并发症又各不相同.
作者：陈江鸿；陈国伟 刊期： 2009年第05期
弓形虫是一种条件致病原虫,可造成人体急性和慢性感染.本文针对弓形虫急、慢性感染的生物学基础,从体外条件、人体的免疫力、特异性蛋白、中间体、离子通道和传导通路等方面综述了速殖子与缓殖子的相互转化及其可能的机制.
作者：李乐；谭峰；陈晓光 刊期： 2009年第05期
目的 了解本院呼吸道感染标本中嗜血杆菌的临床分布及耐药情况.方法 标本接种于嗜血杆菌巧克力平板,对分离到的嗜血杆菌进行鉴定、β-内酰胺酶试验和药敏试验.结果 嗜血杆菌β-内酰胺酶的产生率为21.8%,对氨苄西林、阿莫西林/棒酸、头孢呋辛、头孢噻肟、左旋氧氟沙星、红霉素、复方新诺明的耐药率分别为28.4%、16.4%、10.2%、3.1%、31.1%、90.2%和52.9%.结论 嗜血杆菌是呼吸道感染的主要致病菌.阿莫 西林/棒酸和二代三代头孢菌素的敏感率高于其他抗生素.加强嗜血杆菌耐药谱监测,合理使用抗生素是延缓耐药菌株快速上升的好方法.
作者：邓辉；薛永祥 刊期： 2009年第05期
目的 建立人血红蛋白(Hb)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂,探讨在大便潜血(FOB)检测中的应用.方法 采用固相双抗体夹心法建立检测Hb的TRFIA方法.并对该试剂的各项性能指标进行评价.结果 自制试剂盒的低检测量为0.8 ng/mL或32 ng(Hb)/g(粪便),线性范围为0.8～1 000 ng/mL或32～40 000ng(Hb)/g(粪便).分析内和分析间变异系数分别为3.4%～8.9%和5.2%～13.4%.与羊、鸡、牛、猪、兔、狗Hb不发生交叉反应.90份临床确诊标本用本试剂盒和胶体金免疫层析(GICA)试剂同时测试,TRFIA法的敏感性和特异性均为100%,GICA法的灵敏度和特异性分别为95.6%、100%.结论 Hb-TRFIA试剂盒各项指标均达到临床检测要求,适用于临床上大便潜血Hb的检测.
作者：杨凤爱；王征；李来庆；李明；吴英松 刊期： 2009年第05期
卡介苗(BCG)由于其广泛应用的安全性及其免疫佐剂作用,以其为载体的重组疫苗研究日益被科学家们重视.本文简要概述了近年来硕大利什曼原虫、疟原虫、弓行虫、肝片吸虫等寄生虫重组BCG疫苗的构建及免疫机制的研究进展.
作者：叶艳菊；李文桂 刊期： 2009年第05期
目的 利用反向点杂交技术建立HCV基因分型新方法.方法 在HCV 5'端非编码区(5'NCR)设计引物和分型探针(1.2.3.6型),采用反向点杂交分型技术对53例HCV RNA阳性(浓度均在102～107 IU/mL之间)血清进行分型,并以基因序列分析作为金标准,对新方法的敏感性、特异性和重复性进行评价.结果 反向点杂交基因分型新方法检出的基因型有52例:1b型32例占60.38%,2a型4例占7.55%,6a型8例占15.09%.3b型8例占15.09%;未检出的基因型有1例,用基因序列分析也未能确定型别(失败的原因应是该HCV RNA扩增产物浓度偏低2.24×102IU/mL).本研究的方法敏感性为98.1%,特异性为100%,随机抽取20份标本再次检测的结果与前次检测的结果完全一致,重复性好.结论 相对现有的型特异性PCR分型、基因芯片、核酸序列分析等各种方法,反向点杂交技术用于HCV基因分型是一种准确有效和简便经济的方法.
作者：唐文志；杨永强；黄小燕；戴小波；李宇雄；谭星蓉 刊期： 2009年第05期
目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)的单克隆抗体尼妥珠单(nimotuzumab,h-R3)与化疗药物联合对结肠癌细胞株LoVo的作用.初步探讨其可能的作用机制.方法 采用MTT法测定不同药物单药、两药联合分别对结肠癌细胞株LoVo的IC50值;计算不同药物联合的q值,以确定药物联合的作用;流式细胞仪检测不同药物单药或者联合对细胞周期分布及凋亡比例的影响.结果 联合h-R3能显著提高伊立替康对LoVo细胞的细胞抑制率.诱导更多肿瘤细胞发生凋亡以及产生G0/G1期、G2/M期阻滞,与5-氟尿嘧啶联合具有类似的作用,但较伊立替康不明显,而与奥沙利铂联合无明显增效作用.结论 h-R3通过协同或相加作用提高伊立替康、氟尿嘧啶的细胞杀伤作用,其机制与促进细胞凋亡和影响细胞周期分布有关,奥沙利铂联合对LoVo细胞无明显增效作用.为进一步的体内及体外实验提供了一定的指导作用.
作者：李小燕；曹梦苒；吕成伟；郑大勇；苏宁；罗荣城 刊期： 2009年第05期
目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOs)患者治疗过程中单一用药和联合用药对降低体重、提高排卵率和妊娠率有无差异.方法 将确诊为PCOS的患者56例随机分为3组,第1组单用达英-35治疗,第2组单用二甲双胍治疗,第3组联用达英一35和二甲双胍治疗,治疗3个月.分析患者在治疗前后血清中FSH、LH、T、FSH/LH、Ins的含量以及BMI、排卵率、妊娠率的变化.结果 联合用药治疗组的排卵率和妊娠率均显著高于单一用药组(P均<0.01),PCOS患者BMI、血清T的下降差异亦有统计学意义(P均<0.05),而血清P3H、LH含量的变化则无明显差异(P均0.05).结论 联合用药治疗PCOS患者在提高排卵率和妊娠率、降低体重指数、降低雄激素含量方面比单一用药的效果好.
作者：廖再成 刊期： 2009年第05期
目的 检测中国广东地区汉族人群中类风湿关节炎(RA)发病与蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22(PTPN22)基因Arg620Trp/1858CT多态性的关系.方法 采用PCR-BFLP技术分析了广东汉族人群中148例散发RA患者和150例健康对照者PTPN22 1858位点基因型.结果 在中国广东地区汉族人群中PTPN22 1858位点仅存在等位基因C,与RA的发病无关.结论 中国广东地区汉族人群中,PTPN22 Arg620Trp多态性与RA的发病无关;PTPN22基因可能存在其他多态性位点,需作进一步探讨.
作者：赵丽；裘宇容 刊期： 2009年第05期
目的 研究辣椒素受体(VR1)在氯喹引起搔痒中的作用及机制.方法 实验分4个部分,分别研究辣椒素受体拮抗剂辣椒平腹腔注射、局部应用辣椒素使VR1脱敏感、局部注射PKA抑制剂H89或PKC抑制剂bisindolylmaleimide Ⅰ、重复肥大细胞脱颗粒后颈背部注射氯喹200μg/100 μl 30 main内引起搔痒的次数,分为9小组,共使用6周龄C57BL/6J雄性小鼠63只.结果 腹腔内注射辣椒平、局部应用辣椒素与重复肥大细胞脱颗粒均明显抑制氯喹引起的搔痒,而H89与BIM对氯喹引起的搔痒均无明显作用.结论 氯喹通过肥大细胞脱颗粒引起搔痒,而辣椒素受体介导了氯喹引起的搔痒.
作者：季文进；魏涧琦；梁杰贤；赵国栋；李真；李红英 刊期： 2009年第05期
目的 通过检测糖尿病肾病合并冠心病患者血浆高敏C反应蛋白(hsCRP)及巨噬细胞移动抑制因子(MIF),了解hsCRP及MIF在糖尿病肾病合并冠心病患者中的变化,协助临床决策.方法 收入64例糖尿病肾病合并冠心病患者及57例糖尿病肾病但无明确冠心病依据的患者,同时收入54例健康志愿者,以ELISA法检测分析其血浆中高敏C反应蛋白及巨噬细胞移动抑制因子的变化.结果 糖尿病肾病合并冠心病组患者血浆hsCRP水平(9.93±2.58)mg/L及MIF水平(23.61±6.64)μg/L高于无明确冠心病依据的患者[hsCRP(7.37±1.32)mg/L,MIF(15.56±3.70)μg/L],差异有统计学意义(P均<0.05),两组患者血浆hsCRP及MIF水平又均显著高于对照组[hsCRP(3.51±2.00)mg/L,MIF(9.57±1.25)μg/L].结论 检测糖尿病肾病患者血浆hsCRP及MIF,可能有助于鉴别糖尿病肾病患者有无合并冠心病的危险.
作者：徐向明；何坚；贺军 刊期： 2009年第05期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
