廖波;钟严伟;邹幸;古豪伟
目的 利用pEGFP-N1质粒转染鼻咽癌细胞株,建立稳定表达绿色荧光蛋白的鼻咽癌细胞株CNE2-EGFP,为整体鼻咽癌可视化研究提供良好的试验材料.方法 利用脂质体转染法,将pEGFP-N1质粒转染鼻咽癌细胞株,通过G418抗性筛选、亚克隆扩增获得GFP稳定表达的人鼻咽癌细胞株CNE2-EGFP.结果 成功获得多个稳定表达GFP的人鼻咽癌细胞CNE2-EGFP细胞株,比较CNE2和CNE2-EGFP发现,两者生长曲线、细胞周期分布、裸鼠成瘤能力等均无显著性差异.结论 建立了非G418依赖、稳定表达GFP且保持母株细胞特性的人鼻咽癌细胞株CNE2-EGFP,为鼻咽癌整体可视化研究打下了坚实的基础.
作者:刘腾飞;谢卫兵;刘莉;姚开泰 刊期: 2009年第08期
目的 建立快速高通量的病原体检测方法多靶点液相芯片(multi analyte suspension array,MASA)法,分析早产孕妇病原微生物的分布情况.方法 利用多靶点液相芯片技术平台,结合细胞培养技术对350例早产孕妇的羊水及胎盘组织标本进行感染病原学分析,主要针对人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCVM)、单纯疱疹病毒(herpes simplex virus)Ⅰ+Ⅱ型、风疹病毒(rubella virus)、沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)和解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)、淋球菌(Neisseria gonorrhoea,NG)、梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)、弓形虫(Toxoplasma gondii)等常见微生物进行病原学研究.结果 在350例标本中至少被前述的一种病原体感染的标本有161例,阳性率为46%.其中HSV Ⅰ+Ⅱ感染率为4.3%、HCMV感染率为3.71%、TOX感染率为4.86%、RV感染率为4.57%、TP感染率为5.43%、Uu感染率为8%、Ct感染率为7.71%、NG感染率为7.43%,被两种以上病原体混合感染的早产孕妇有17例.MASA技术在致早产病原体分析中与培养法比较其特异性达到94%以上,敏感度达到95%以上.结论 致早产的病原微生物感染机率均等,都值得重视.基于MASA技术平台建立的多重液相基因芯片法具有快速、高通量、敏感、特异性高等诸多优点值得推广.
作者:吴润香;杨来智;何英;王琼;柳红;陆学东;刘键 刊期: 2009年第08期
目的 对自建生化检测系统进行初步性能评价.方法 依照NCCLS制定的EP10-A2文件,使用自建体系测定血清肌酸激酶(CK)、总胆固醇(Tch)、尿素(Urea)、无机磷(Pi)等四个项目,计算其偏差、总不精密度,及其截距、斜率、非线性、互染率、漂移性,并进行t检验.结果 CK、Tch低值、中值、高值偏差及总不精密度均在允许范围内;Urea、Pi低值偏差超过允许偏倚,中值、高值偏差及总不精密度均在允许范围内.CK截距、斜率、非线性、互染率、漂移性均无显著性差异.Tch、Pi截距有显著性差异,Urea斜率有显著性差异;Teh、Urea、Pi非线性、互染率、漂移性均无显著性差异.结论 使用自建生化检测体系测定CK、Tch、Urea、Pi,总不精密度均小于1/3 CLIA'88 TEa,互染率较低,稳定性较好;但Urea、Pi低值与标准检测体系存在一定的差距,准确度有待改善.
作者:孙宏华;石凌波;康红;胡远明;谢进进;沙瑶 刊期: 2009年第08期
目的 观察抗小鼠TLR2胞外段单表位(mTLR2ECD)抗体(TSP-2)对OVA诱导的小鼠过敏性哮喘气道炎症的影响.方法 用肺泡灌洗、组织切片及特异染色、免疫组化、ELISA法检测TSP-2对小鼠哮喘模型的气道炎症和炎症细胞的浸润以及肺组织中肺泡及支气管结构的影响.结果 发现静脉给予抗体TSP-2能有效抑制气道炎症和炎症细胞的浸润.主要表现在肺泡灌洗液中的白细胞浸润减少、减轻血清中OVA特异性IgE抗体的降低以及抑制OVA诱导的小鼠肺泡毛细血管充血水肿等病理变化.结论 抗体TSP-2对过敏性哮喘的病理变化有一定的抑制作用.
作者:杨翠兰;赵文忠;黄恩平;赵莉;罗深秋 刊期: 2009年第08期
目的 了解艾滋病职业暴露现状,探讨职业暴露后实施预防措施的影响因素.方法 对广州市第八人民医院2001-2008年发生的59例艾滋病职业暴露个案进行分析.结果 59例艾滋病职业暴露个案中,暴露方式以针刺伤为主,有41例,占69.5%;其次是经皮肤或粘膜接触,有17例,占28.8%;仅有1例为抓伤,占1.7%.暴露级别一级23例,占39.0%;二级35例,占59.3%;三级1例,占1.7%.暴露源的病毒载量水平轻度2例,占3.4%;重度41例,占69.5%;暴露源不明16例,占27.1%.59例中26例(44.1%)采用药物进行预防用药,其中23例(39.0%)采用基本用药程序,3例(5.1%)采用强化用药程序.所有暴露者经6个月观察,随访检测结果均为阴性.结论 医务人员对艾滋病患者和病毒携带者进行诊疗的过程中,应严格遵守安全防护措施,暴露后及时使用预防用药,可有效阻断发生艾滋病职业暴露后感染.
作者:陈燕清;陈桂珍;张复春;黄丽芬;吴茂盛 刊期: 2009年第08期
目的 探讨肿瘤组织巾过度表达的一种天冬酰胺肽链内切酶Legumain在肿瘤细胞侵润性生长和血管内皮导管形成中的作用及相关机制.方法 采用体外细胞培养的方法,观察在缺氧条件下人乳腺癌细胞MDA MB231和人静脉血管内皮细胞HUVEC中Legumain的蛋白表达量;观察Legumain对MDA MB231细胞的侵润能力的影响以及人工合成的Legumain抑制物(asparaginly endopepidase inhibitor,AEPI)对人静脉血管内皮细胞HUVEC小管腔形成能力的影响;用免疫组织化学的方法观察Legumain与整合素(Integrin)β1的结合情况.结果 Western-blot的结果表明,在缺氧条件下,体外培养的人乳腺癌细胞MDA MB231和人静脉血管内皮细胞HUVEC的Legumain蛋白表达量增加.应用免疫荧光双染色法对缺氧条件下培养的MDA MB231细胞进行染色,与正常条件下培养的细胞相比,缺氧条件下培养的MDA MB231细胞体积增大,胞浆内含有大量绿色的Legumain,成点状分布,并有部分Legumain分布在迁移中的细胞表面前缘,与红色的整合素β1重叠,呈现为黄色.在血管内皮细胞小管腔形成试验中,加入AEPI的实验组,HUVEC细胞的小管形成数量明显减少,分别为(13.2±0.85),(5.33±0.35),(0.57±0.23),与对照组(21.3±1.73)相比差异均具有统计学意义(P<0.001).细胞的侵润能力试验结果表明.加入激活的Legumain后,实验组中的MDA MB231细胞的侵袭能力增高,分别为(170.90±59.27和(321.22±22.39),与对照组(67.56±7.58)相比差异具有统计学意义(P<0.05).结论 缺氧条件下,MDA MB231细胞株和HUVEC细胞株的Legumain表达增加,能促进肿瘤细胞的迁移和血管内皮细胞的小管形成.其分子机理之一可能是通过与整合素β1结合.
作者:吴文苑;余涟;刘春;罗金刚;段朝晖 刊期: 2009年第08期
目的 研究住院肿瘤患者感染的细菌分布及耐药情况.方法 对198例住院肿瘤患者感染的病原菌进行分析,并统计其检测结果和药敏结果.结果 病原菌总检出率为75.4%,革兰阴性菌占60.8%,革兰阳性菌占28.9%,真菌占10.3%,主要致病菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌等,对大多数抗菌药物耐药.结论 肿瘤患者院内感染的致病菌以阴性杆菌为主,细菌耐药性明显增强;临床应严格控制抗生素的应用以降低细菌耐药性,合理、适当选用抗菌药物对降低肿瘤患者感染非常重要.
作者:廖致红;刘志华;徐秋红;马丽梅;潘柳吟 刊期: 2009年第08期
目的 探讨口腔诊室环境对消毒效果的影响因素,找出危险因素,提出控制措施.方法 以整体抽样的方法,采集广州市82家医院口腔科和口腔诊所消毒检测结果,主要包括空气消毒后取样监测、物体表面消毒后取样监测、无菌消毒液污染取样监测三项指标,探讨口腔诊室环境与消毒效果之间的关系,然后用Logistic回归分析方法对影响消毒效果的危险因素进行分析.结果 影响空气消毒效果监测结果的危险因素:医疗用房面积(P<0.05),有无污染区、清洁区、休息区的划分(P<0.01),有无用含氯消毒液拖地、擦桌面(P<0.01),消毒液的浓度是否标准(P<0.05);影响物体表面消毒效果监测结果的危险因素:有无用含氯消毒液拖地、擦桌面(P<0.01),消毒液更换时间是否正确(P<0.01);影响无菌消毒液污染监测结果的危险因素:消毒液的浓度是否标准(P<0.001),消毒液更换时间是否正确(P<0.05).结论 诊疗用房面积大小、诊疗设备多寡、消毒方式及医院或口腔诊所是否有严格的消毒管理制度直接影响口腔科消毒效果.
作者:贺佩兰;林慧;黄雁虹;江勇 刊期: 2009年第08期
目的 探讨卵巢早衰(premature ovary failure,POF)发病的可能危险因素,旨在找出卵巢早衰发病的高危因素,为卵巢早衰的预防提供科学依据,为进一步病因研究提供线索.方法 采用1∶1配比的病例对照研究方法.抽取POF组150例,健康对照组150例,资料收集后,对每一变量进行定义、赋值,使用Excel建立数据库,采用单因素和多因素的条件Logistic回归分析性研究.结果 单因素Logistic回归分析显示,婚姻状况,人工流产次数,心情,饮酒,吸烟等12个变量与POF的发生有关,经多因素Logistic回归分析后显示,婚姻状况(OR=5.753),人工流产次数(OR=2.076),吸烟(OR=3.002),心情(OR=0.164),蔬菜摄入频率(OR=0.341),腮腺炎(OR=11.460)7个变量与POF仍有关联.结论 POF的发病与生活方式,行为习惯,环境,医源性和感染有关.其中婚姻状况,人工流产次数,心情,饮酒,腮腺炎病史,蔬菜摄入频率是POF发生的主要影响因素.
作者:李玉华;何小红;王颖娴;朱国平 刊期: 2009年第08期
目的 分析深圳市某区一起诺如病毒感染性腹泻爆发的流行病学特征,为防治诺如病毒感染性腹泻提供科学依据.方法 采用病例对照研究相关方法开展此次疫情调查,比较病例与对照之间不同危险因素的暴露比例,采用RT-PCR检测诺如病毒抗原.结果 共报告46例诺如临床诊断病例.病例分布在该片区的3个单位,平均罹患率为12.64%.在危险因素的单因素分析中,只有A单位中饭前用自来水洗碗(OR=7.14,95%CI:1.83~27.88)、接触病人(OR=7.64,95%CI:1.33~43.76)结果具有统计学意义.在20份患者肛拭子样本中,有15份分离到诺如病毒.结论 此宗诺如病毒感染性腹泻爆发可能是由于水污染和接触病人导致传播的.采取加强饮食卫生管理、隔离治疗病人及带菌者、整改清洁饮用水管道等措施后疫情中止.
作者:秦彦珉;廖玉学;刘刚;曹彬;逯建华;潘柳波;吴辉 刊期: 2009年第08期
目的 观察动物感染广州管圆线虫后肺组织病理改变,以及应用抗广州管圆线虫成虫单克隆抗体进行感染鼠肺免疫组织化学研究.方法 20只大鼠实验室人工感染广州管圆线虫,组织学方法观察肺组织的形态学变化,免疫组织化学方法应用实验事制备的抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单克隆抗体IgG和IgM进行肺组织切片的免疫反应性研究.结果 受感染的大鼠肺组织肿胀实变,表面及切面质硬粗糙,有灰白色虫卵结节,病变范围广泛.HE染色镜下观察可见肺组织中有多个圆形、椭圆形的虫卵结节,结节周围组织细胞反应及纤维化,肺泡隔增厚,肺泡轮廓消失.结节内虫卵发育形成桑葚期、仔虫期及一期幼虫.用抗广州管圆线虫成虫单克隆抗体IgG和IgM分别行免疫组化,结果显示桑葚期虫卵表达IgG,而IgM则在桑葚期、仔虫期及一期幼虫等部位均有显著阳性表达.结论 广州管圆线虫感染所致大鼠肺脏病理改变,主要表现在肺内形成多个虫卵结节,并可致肺呈纤维化改变;抗广州管圆线虫成虫单克隆抗体IgG和IgM在肺组织虫卵结节内的阳性表达有显著差别.
作者:李晓恒;张仁利;陈木新;耿艺介;高世同;黄达娜 刊期: 2009年第08期
目的 评价力克肺疾与莫西沙星联合方案对耐多药肺结核(MDR-TB)的疗效.方法 100例MDR-TB患者随机分为两组,每组50例.治疗组用莫两沙星0.4 g/d,力克肺疾1.0 g/d.对照组用左氧氟沙星0.4 g/d,丁胺卡那霉素0.6 g/d,疗程12个月,同时辅以其他抗结核药.结果 第3个月末,治疗组痰菌转阴率为74%,明显优于对照组的43%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).疗程结束时,治疗组痰菌转阴率为96%,明显优于对照组的70%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 以力克肺疾与莫西沙星联合其他抗结核药物组成的化疗方案对MDR-TB疗效肯定,痰菌转阴速度快,值得继续临床探索.
作者:洪梅;郑泽锋;吴捷;翁加豪 刊期: 2009年第08期
目的 了解近年引起食物中毒的26株副溶性弧菌分离株的携带主要毒力基因的分子流行病学特征和耐药性状况,为制定相应的防控措施提供参考.方法 根据副溶血性弧菌耐热直接溶血素(TDH)和耐热相关溶血素(TRH)基因序列设计PCR引物,建立PCR反应体系,检测26株从2005年11月至2008年8月发生的8起散发性食物中毒事件中分离的副溶血性弧菌菌株的毒力基因TDH和TRH,K-B法测定其药物敏感性.结果 26株副溶血性弧菌有23株携带有TDH基因,阳性率为88%,所有菌株均未带有TRH基因:26株菌对亚胺培南、阿米卡星、头孢吡肟、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星、哌拉西林、头孢哌酮、头孢他啶、头孢西丁等13种药物未见有耐药菌株;但对磺胺异恶唑、替卡西林、氨苄西林等有较高的耐药率,分别达76.9%、69.2%、80.8%.而对复方新诺明、四环素、头孢呋辛酯、头孢噻吩、头孢唑啉等也有耐药菌株的存在.结论 带有TDH基因是近年引起食物中毒的副溶性弧菌分离株的主要分子流行病学特征,所分离菌株对多种常用药物敏感性高.研究结果为评价引起食物中毒的副溶性弧菌的分子流行病学特征和制定可行的防控措施提供了科学依据.
作者:赖植发;张勇;罗伟燕;刘奋;李波;刘哲民 刊期: 2009年第08期
目的 探索主要肝功能指标对乙型重型肝炎患者预后的影响.方法 应用Meta分析的方法对有关研究TBil、PTA、ALB、CHO、CHE、AFP、ALT及AST/ALT对乙型重型肝炎患者预后影响的文献进行系统评价.以加权平均数(WMD)作为评价指标.共纳入Meta分析的回顾性队列研究文献32篇,累计病例21949例.以受试者工作特征曲线(ROC)分析各指标对预后影响的敏感程度.结果 死亡组TBil水平高于生存组,差异具有统计学意义(P<0.01);死亡组FFA、ALB、CHO、CHE、AFP水平低于生存组,差异具有统计学意义(P<0.01);两组ALT及AST/ALT比较差异无统计学意义(P=0.54,0.09).AFP的ROC值高为0.943(P<0.01).结论 TBil可能是重型肝炎患者预后的危险因素,PTA、ALB、CHO、CHE和AFP可能是重型肝炎患者预后的保护因素,ALT和AST/ALT对重型肝炎患者预后无明显影响.AFP对预后的判断为敏感,其次为PTA和CHO.
作者:冉嘉;张耀;熊鸿燕 刊期: 2009年第08期
目的 调查重庆市燃煤型氟中毒病区流行因素,为制定防治对策提供科学依据.方法 调查病区儿童氟斑牙和防治现状.采样检测煤、泥土、空气、水、粮食、蔬菜、茶叶等氟含量;分析燃煤犁氟中毒流行因素,提出防治对策.结果 调查666个病区村8~12岁儿童86509人,氟斑牙检出率为51.05%,缺损率为4.30%,指数为0.83;检测病区煤、拌煤土、煤混土、土壤的平均氟含量(310.56 mg/kg、360.51 mg/kg、293.62 mg/kg、497.54 mg/kg)显著高于非病区(48.68 mg/kg、275.66 mg/kg、150.20 mg/kg、269.98 mg/kg),煤渣氟病区(209.14 mg/kg)和非病区(186.59 mg/kg)无显著性差异;水和辣椒氟病区(0.30mg/L、25.50 mg/kg)著高于非病区(0.18 mg/L、2.83mg/kg),大米、土豆、蔬菜氟含量非病区(1.31 mg/kg、0.64 mg/kg、1.10 mg/kg)显著高于病区(0.77 mg/kg、0.44mg/kg、0.48 mg/kg);3个重、中度病区村室内空气氟(13.56~14.68 μg/m3)显著高于非病区和1个病区村(1.00、0.31 μg/m3);病区居民饮茶氟摄入量(2.45 mg/人)显著大于非病区(1.80 mg/人);病区居民大米食用率为100%,年人均食用量为77.68 kg,玉米食用率为54.63%,年人均食用率为17.79 kg,炉灶合格正确使用率为53.44%.结论 重庆市燃煤型氟中毒流行因素主要为病区居民使用高氟煤煮饭、取暖,释放出氟化物污染室内空气,经呼吸道进入人体致病.氟化物经呼吸道进入人体的致病机制和致病力有待深入研究.饮茶是否为燃煤型氟中毒病区的另一因素,有待进一步研究.改炉改灶仍是目前防治燃煤型氟中毒的主要措施.
作者:肖邦忠;陈静;晏维;廖文芳;罗兴建;周倩如;张洁;吴成果 刊期: 2009年第08期
目的 探讨热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)在对抗氯化钻(cobalt chloride,CoCl2)诱导H9C2心肌细胞损伤中的作用.方法 应用不同浓度的CoCl2处理H9C2心肌细胞,建立化学性缺氧诱导心肌细胞损伤的实验模型.应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Western-blot法检测HSP90的表达:双氯荧光素染色荧光显微镜照相检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)检测试剂盒分析SOD活性抑制率.结果 在400~1000 μmol/L浓度范围内,CoCl2处理H9C2心肌细胞36 h,呈剂量依赖性地抑制细胞存活率.在0.5~36 h时间范围内,600μmol/L CoCl2呈时间依赖性地促进H9C2心肌细胞HSP90的表达.2~16 μmol/L HSP90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-allylamino-17demethoxygeldanamycin,17AAG)呈剂量依赖性地加重600 μmol/L CoCl2对H9C2细胞存活率的抑制.2 μmol/L 17AAG本身不损伤H9C2心肌细胞,但明显地加强CoCl2增加H9C2心肌细胞内ROS生成的作用,并增加CoCl2对SOD活性的抑制.结论 HSP90表达上调可能是H9C2心肌细胞对抗化学性缺氧的内在防御机制之一.
作者:李建平;杨春涛;杨战利;廖新学;谭钰嫔;黄雪;王礼春;陈培熹;冯鉴强 刊期: 2009年第08期
目的 观察胃癌胃大部切除术后生存及预后情况,分析影响患者长期生存的可能相关因素.方法 收集我院150例胃癌根治性切除病例的临床病理资料,按各因素将研究对象分组,并对各组生存率进行统计分析,从而探讨影响因素.结果 性别、病理分期及肿瘤大小是影响胃癌术后生存率的因素.男性患者术后生存率低于女性患者(P<0.05);病理分期是影响胃癌术后生存率的关键因素,不同病理分期问差异有统计学意义(P<0.01);肿瘤体积≥4 cm比肿瘤体积<4 cm的生存率低(P<0.05).而年龄、组织学类型及根治度并非影响因素(P>0.05).结论 性别、病理分期及肿瘤大小对胃癌预后有重要影响,早期诊断、早期治疗是提高胃癌术后生存率的关键.
作者:陆路;周小民;宋向晖;吴浩;阳光;陈炜 刊期: 2009年第08期
目的 探讨血浆EBV DNA检测对鼻咽癌的诊断作用.方法 将2006年12月至2007年3月在我科就诊、病理确诊的65例鼻咽癌作为治疗前组,经我院放疗科治疗后,分别于放疗结束后3、5、8个月来我科系统复查的病人作为治疗后组,将同期行健康体检的29例作为对照组,共3组.采用荧光定量PCR方法对3组的空腹血浆EBV DNA进行检测.结果 3组间血浆EBV DNA阳性率比较有统计学意义(P<0.05);治疗后组的阳性病例全部有鼻咽癌复发,阴性病例没有复发;有、无淋巴结转移组间阳性率比较差异有统计学意义(P=0.00).结论 血浆EBV DNA是鼻咽癌诊断的重要分子标记,其阳性的病例有较高淋巴结侵袭发生率.
作者:冯海燕;黄元娇;周晓莹;莫颖禧;黄光武 刊期: 2009年第08期
目的 探讨萎缩性阴道炎发病的危险因素.方法 应用1∶1配对病例对照研究方法,对52例萎缩性阴道炎患者及52例配对的绝经后妇女进行危险因素调查和统计分析.结果 筛选出与萎缩性阴道炎的发生危险因素有绝经年限>10年、高体重指数、清洗外阴方式、反复尿路感染和补充雌激素(P<0.05),进行多因素Logistic回归分析显示入选变量为绝经年限>10年(OR=10.82)、反复尿路感染(OR=3.64)、补充雌激素(OR=0.57).结论 绝经年限长和反复尿路感染是萎缩性阴道炎发生的危险因素,而补充雌激素有保护作用.
作者:雷蔚华;陈淑贤 刊期: 2009年第08期
目的 探讨妊娠糖尿病(CDM)孕妇的部分凝血、纤溶指标活性的变化及其与糖化血红蛋白(GHbA1c)的相关性.方法 对正常非孕妇女、正常妊娠妇女(各40例)和GDM孕妇(50例)的GHbA1c、血浆Ⅶc因子(FⅦc)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制物(PAI-1)、蛋白C活性依赖凝固时间(PCAT)及抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)等指标进行检测,并分析糖化血红蛋白与各指标之间的相关性.结果 与正常非孕组及正常妊娠组比较,GDM组GHbA1c、FVRc、PAI-1均显著增高(P<0.01),t-PA明显下降(P<0.01);正常妊娠组AT-Ⅲ较非孕组呈下降趋势,GDM患者AT-Ⅲ水平、PCAT与正常妊娠组无显著差异.全部GDM患者GHbA1c与t-PA呈负相关(r=-0.607,P<0.01),与PAI-1呈正相关(r=-0.493.P<0.01),与FⅦc活性正相关(r=0.421,P<0.01).结论 糖尿病孕妇存在着明显的血栓前状态,血糖通过影响纤溶凝血系统功能,导致凝血功能异常,在妊娠糖尿病的发生发展中起着重要的作用.提示应密切关注患者精化血红蛋白及凝血纤溶指标的变化,预防并发症的发生.
作者:龙燕;张斌;陈万宁 刊期: 2009年第08期