刘腾飞；谢卫兵；刘莉；姚开泰
目的 构建人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10荧光蛋白真核表达载体,并转染肝癌细胞,筛选建立稳定转染细胞株.方法 从构建好的pMD19-T/ubcH10载体中PCR扩增UbcH10基因,PCR产物双酶切后克隆入pEGFP-N1真核表达载体中,构建真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10,进行双酶切和测序鉴定.将构建好的真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10和空载体pEGFP-N1利用脂质体Lip2000TM分别转染进入肝癌细胞SMMC7721中,建立肝癌细胞SMMC7721的G418细胞死亡曲线,选择G418的筛选浓度,经G418结合荧光显微镜观察筛选稳定转染细胞.将筛选获得的肝癌细胞进行有限稀释法单克隆化,收集单个细胞克隆扩大培养备用.结果 经双酶切和测序鉴定,带有荧光蛋白标记的真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10构建成功,经脂质体介导真核表达载体pEGFP-N1/UbcH10和空载体pEGFP-N1成功转入肝癌细胞SMMC7721中,经800μg/mL G418筛选并进行单克隆化获得稳定转染的细胞株SMMC7721-pEGFP-N1和SMMC7721-pEGFP-N1/UbcH10,阳性转化率达到94%以上.结论 人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10稳定高表达肝癌细胞株的建立,为该蛋白在肝癌发生发展过程中的具体作用机制的研究奠定了基础.
作者：杜红延；马慧娟；杨学习；姚小艳；吴英松；李明 刊期： 2009年第08期
目的 研究慢性乙型肝炎重叠戊肝感染的临床及免疫指标的变化特点与临床转归.方法 选择慢性乙肝重叠戊型肝炎患者及同期单纯慢性乙肝患者各30例,分为重叠感染组和对照组,采用ELISA法检测戊型肝炎病毒以及乙肝病毒e系统状态,PCR法检测HBV-DNA,对慢性乙型肝炎重叠戊肝感染患者进行肝功能、免疫指标IL-4、TNF-α、IFN-γ、Th1/Th2的检测,并与单纯慢性乙型肝炎进行对照分析,观察两组在治疗8周时的肝功能恢复情况.结果 重叠感染戊肝患者发生重症肝炎的人数多(9例vs 6例,P＜0.05),e抗原转阴比例高(2例vs 1例),ALT、TBIL恢复较差,免疫指标提示与对照组相比,重叠感染组IL-4水平降低(P＜0.05)、TNF-α、IFN-γ变化不大(P＞0.05),Th1/Th2水平明显增高(P＜0.05).结论 慢性乙型肝炎重叠HEV感染后病情趋向重症化,可能是由于抗炎性细胞因子IL-4表达减少,细胞免疫增强导致肝细胞大量损害所致.
作者：杨克志；徐良玉；刘国栋；喻东海；张健波 刊期： 2009年第08期
目的 观察动物感染广州管圆线虫后肺组织病理改变,以及应用抗广州管圆线虫成虫单克隆抗体进行感染鼠肺免疫组织化学研究.方法 20只大鼠实验室人工感染广州管圆线虫,组织学方法观察肺组织的形态学变化,免疫组织化学方法应用实验事制备的抗广州管圆线虫成虫可溶性抗原单克隆抗体IgG和IgM进行肺组织切片的免疫反应性研究.结果 受感染的大鼠肺组织肿胀实变,表面及切面质硬粗糙,有灰白色虫卵结节,病变范围广泛.HE染色镜下观察可见肺组织中有多个圆形、椭圆形的虫卵结节,结节周围组织细胞反应及纤维化,肺泡隔增厚,肺泡轮廓消失.结节内虫卵发育形成桑葚期、仔虫期及一期幼虫.用抗广州管圆线虫成虫单克隆抗体IgG和IgM分别行免疫组化,结果显示桑葚期虫卵表达IgG,而IgM则在桑葚期、仔虫期及一期幼虫等部位均有显著阳性表达.结论 广州管圆线虫感染所致大鼠肺脏病理改变,主要表现在肺内形成多个虫卵结节,并可致肺呈纤维化改变;抗广州管圆线虫成虫单克隆抗体IgG和IgM在肺组织虫卵结节内的阳性表达有显著差别.
作者：李晓恒；张仁利；陈木新；耿艺介；高世同；黄达娜 刊期： 2009年第08期
目的 回顾综合治疗法治疗12～15岁青少年弱视的疗效.方法 回顾性分析2004-2006年我院门诊确诊为弱视且年龄为12～15岁的患儿117例(172眼)应用个性化综合疗法进行治疗的疗效,并对不同类型及不同程度的弱视的疗效进行比较.结果 屈光不正性弱视组治愈率为60.82%,屈光参差性弱视组治愈率为36%,轻度、中度、重度弱视治愈率分别是56.52%、68%、0.结论 严格的、个性化的综合治疗法能有效治疗青少年弱视.
作者：陈晓凯；邹飞娥；宁静静 刊期： 2009年第08期
目的 探讨热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)在对抗氯化钻(cobalt chloride,CoCl2)诱导H9C2心肌细胞损伤中的作用.方法 应用不同浓度的CoCl2处理H9C2心肌细胞,建立化学性缺氧诱导心肌细胞损伤的实验模型.应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Western-blot法检测HSP90的表达:双氯荧光素染色荧光显微镜照相检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)检测试剂盒分析SOD活性抑制率.结果 在400～1000 μmol/L浓度范围内,CoCl2处理H9C2心肌细胞36 h,呈剂量依赖性地抑制细胞存活率.在0.5～36 h时间范围内,600μmol/L CoCl2呈时间依赖性地促进H9C2心肌细胞HSP90的表达.2～16 μmol/L HSP90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-allylamino-17demethoxygeldanamycin,17AAG)呈剂量依赖性地加重600 μmol/L CoCl2对H9C2细胞存活率的抑制.2 μmol/L 17AAG本身不损伤H9C2心肌细胞,但明显地加强CoCl2增加H9C2心肌细胞内ROS生成的作用,并增加CoCl2对SOD活性的抑制.结论 HSP90表达上调可能是H9C2心肌细胞对抗化学性缺氧的内在防御机制之一.
作者：李建平；杨春涛；杨战利；廖新学；谭钰嫔；黄雪；王礼春；陈培熹；冯鉴强 刊期： 2009年第08期
目的 利用pEGFP-N1质粒转染鼻咽癌细胞株,建立稳定表达绿色荧光蛋白的鼻咽癌细胞株CNE2-EGFP,为整体鼻咽癌可视化研究提供良好的试验材料.方法 利用脂质体转染法,将pEGFP-N1质粒转染鼻咽癌细胞株,通过G418抗性筛选、亚克隆扩增获得GFP稳定表达的人鼻咽癌细胞株CNE2-EGFP.结果 成功获得多个稳定表达GFP的人鼻咽癌细胞CNE2-EGFP细胞株,比较CNE2和CNE2-EGFP发现,两者生长曲线、细胞周期分布、裸鼠成瘤能力等均无显著性差异.结论 建立了非G418依赖、稳定表达GFP且保持母株细胞特性的人鼻咽癌细胞株CNE2-EGFP,为鼻咽癌整体可视化研究打下了坚实的基础.
作者：刘腾飞；谢卫兵；刘莉；姚开泰 刊期： 2009年第08期
目的 研究住院肿瘤患者感染的细菌分布及耐药情况.方法 对198例住院肿瘤患者感染的病原菌进行分析,并统计其检测结果和药敏结果.结果 病原菌总检出率为75.4%,革兰阴性菌占60.8%,革兰阳性菌占28.9%,真菌占10.3%,主要致病菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌等,对大多数抗菌药物耐药.结论 肿瘤患者院内感染的致病菌以阴性杆菌为主,细菌耐药性明显增强;临床应严格控制抗生素的应用以降低细菌耐药性,合理、适当选用抗菌药物对降低肿瘤患者感染非常重要.
作者：廖致红；刘志华；徐秋红；马丽梅；潘柳吟 刊期： 2009年第08期
目的 观察抗小鼠TLR2胞外段单表位(mTLR2ECD)抗体(TSP-2)对OVA诱导的小鼠过敏性哮喘气道炎症的影响.方法 用肺泡灌洗、组织切片及特异染色、免疫组化、ELISA法检测TSP-2对小鼠哮喘模型的气道炎症和炎症细胞的浸润以及肺组织中肺泡及支气管结构的影响.结果 发现静脉给予抗体TSP-2能有效抑制气道炎症和炎症细胞的浸润.主要表现在肺泡灌洗液中的白细胞浸润减少、减轻血清中OVA特异性IgE抗体的降低以及抑制OVA诱导的小鼠肺泡毛细血管充血水肿等病理变化.结论 抗体TSP-2对过敏性哮喘的病理变化有一定的抑制作用.
作者：杨翠兰；赵文忠；黄恩平；赵莉；罗深秋 刊期： 2009年第08期
目的 探讨妊娠糖尿病(CDM)孕妇的部分凝血、纤溶指标活性的变化及其与糖化血红蛋白(GHbA1c)的相关性.方法 对正常非孕妇女、正常妊娠妇女(各40例)和GDM孕妇(50例)的GHbA1c、血浆Ⅶc因子(FⅦc)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制物(PAI-1)、蛋白C活性依赖凝固时间(PCAT)及抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)等指标进行检测,并分析糖化血红蛋白与各指标之间的相关性.结果 与正常非孕组及正常妊娠组比较,GDM组GHbA1c、FVRc、PAI-1均显著增高(P＜0.01),t-PA明显下降(P＜0.01);正常妊娠组AT-Ⅲ较非孕组呈下降趋势,GDM患者AT-Ⅲ水平、PCAT与正常妊娠组无显著差异.全部GDM患者GHbA1c与t-PA呈负相关(r=-0.607,P＜0.01),与PAI-1呈正相关(r=-0.493.P＜0.01),与FⅦc活性正相关(r=0.421,P＜0.01).结论 糖尿病孕妇存在着明显的血栓前状态,血糖通过影响纤溶凝血系统功能,导致凝血功能异常,在妊娠糖尿病的发生发展中起着重要的作用.提示应密切关注患者精化血红蛋白及凝血纤溶指标的变化,预防并发症的发生.
作者：龙燕；张斌；陈万宁 刊期： 2009年第08期
目的 了解骨科病人感染菌及耐药性,为药物的合理使用提供参考依据.方法 对骨科病房病人细菌感染的412份送检分泌物标本进行细菌培养,并对检出的病原菌按K-B法做体外药敏试验.结果 374份阳性标本共分离出病原菌392株,其中革兰氏阳性菌155株(39.54%),革兰氏阴性菌227株(57.91%);革兰阳性菌对常用抗生素药物敏感性高的抗生素是万古霉素,低的是青霉素类.革兰阴性菌对常用抗生素药物敏感性高的抗生素是亚胺培南,低的是青霉素类.结论 细菌谱发生改变且对大部分常用抗菌药物已产生耐药性,合理应用抗生素,才能降低骨科感染率.
作者：莫茅 刊期： 2009年第08期
目的 观察胃癌胃大部切除术后生存及预后情况,分析影响患者长期生存的可能相关因素.方法 收集我院150例胃癌根治性切除病例的临床病理资料,按各因素将研究对象分组,并对各组生存率进行统计分析,从而探讨影响因素.结果 性别、病理分期及肿瘤大小是影响胃癌术后生存率的因素.男性患者术后生存率低于女性患者(P＜0.05);病理分期是影响胃癌术后生存率的关键因素,不同病理分期问差异有统计学意义(P＜0.01);肿瘤体积≥4 cm比肿瘤体积＜4 cm的生存率低(P＜0.05).而年龄、组织学类型及根治度并非影响因素(P＞0.05).结论 性别、病理分期及肿瘤大小对胃癌预后有重要影响,早期诊断、早期治疗是提高胃癌术后生存率的关键.
作者：陆路；周小民；宋向晖；吴浩；阳光；陈炜 刊期： 2009年第08期
目的 预防和减少医院手术感染的发生.方法 2008年对本市60家省级、市级及厂企医院手术室空气,用直径9厘米普通琼脂平板和血琼脂平板,采用静态自然沉降暴露法进行菌落总数、致病菌监测.结果 采集的103份样品中有28份菌落总数项目超标,全部样品未检出致病菌,总合格率为72.8%.洁净手术室合格率为71.4%,普通手术室合格率为75.0%,两者合格率无统计学差异.上半年检测合格率为83.7%,下半年检测合格率为62.9%.两者相比差异有统计学意义.结论 我市部分医院洁净手术室需要加强管理及制定相关的洁净手术室和非洁净手术室日常维护和检测规范,提高手术室空气卫生质量以减少医院感染的发生.
作者：区继军；贺征；龚玉娇；陈建东；林耀坤 刊期： 2009年第08期
目的 探讨CHROMagar显色培养基检测侵袭性真菌感染的应用价值.方法 将2007年7月至2008年6月湖南省肿瘤医院肿瘤病人的呼吸道标本采用CHROMagar显色培养基及沙保罗培养基进行真菌检测,CHROMagar显色培养基上生长的真菌根据菌落的颜色及形态进行鉴别,在沙保罗培养基上生长的真菌经VITEK2-Compact全自动细菌鉴定仪进行鉴定.结果 660份标本在沙保罗培养基上分离出383株真菌,经鉴定其中白色假丝酵母菌为262株、热带假丝酵母菌为51株、克柔假丝酵母菌15株、光滑假丝酵母菌34株,其他真菌21株.CHROMagar显色培养基上检出360株真菌,检出率与前者的符合率为93.99%.结论 科玛嘉显色培养基能作为临床快速鉴定酵母样真菌感染的方法,对侵袭性真菌感染的早期诊断有意义;但鉴定菌种有限,有一定的局限性.
作者：肖平；何德良；郑运智 刊期： 2009年第08期
目的 探讨卵巢早衰(premature ovary failure,POF)发病的可能危险因素,旨在找出卵巢早衰发病的高危因素,为卵巢早衰的预防提供科学依据,为进一步病因研究提供线索.方法 采用1∶1配比的病例对照研究方法.抽取POF组150例,健康对照组150例,资料收集后,对每一变量进行定义、赋值,使用Excel建立数据库,采用单因素和多因素的条件Logistic回归分析性研究.结果 单因素Logistic回归分析显示,婚姻状况,人工流产次数,心情,饮酒,吸烟等12个变量与POF的发生有关,经多因素Logistic回归分析后显示,婚姻状况(OR=5.753),人工流产次数(OR=2.076),吸烟(OR=3.002),心情(OR=0.164),蔬菜摄入频率(OR=0.341),腮腺炎(OR=11.460)7个变量与POF仍有关联.结论 POF的发病与生活方式,行为习惯,环境,医源性和感染有关.其中婚姻状况,人工流产次数,心情,饮酒,腮腺炎病史,蔬菜摄入频率是POF发生的主要影响因素.
作者：李玉华；何小红；王颖娴；朱国平 刊期： 2009年第08期
目的 通过对尖锐湿疣(CA)患者皮损及外周血CD4+和CD8+细胞免疫功能检测的分析,探讨尖锐湿疣患者细胞免疫功能的变化及其对CA的影响.方法 通过流式细胞仪(FCM)对40例CA患者及20名正常人外周血进行反映细胞免疫功能的T淋巴细胞亚群的检测,实验采用免疫组化的方法对40例CA皮损样本中CD4+和CD8+细胞的数目进行检测.结果 CA患者外周血及皮损较正常对照组中的CD8+细胞百分率增加,CD4+细胞百分率及CD4+/CD8+比值降低.结论 CA患者存在全身和局部的细胞免疫功能低下,而且局部皮损细胞免疫功能低下可能在CA的发病中具有重要作用.
作者：王亚美；卞苏环；郑锦芬；余光银；聂李平 刊期： 2009年第08期
目的 探讨肿瘤组织巾过度表达的一种天冬酰胺肽链内切酶Legumain在肿瘤细胞侵润性生长和血管内皮导管形成中的作用及相关机制.方法 采用体外细胞培养的方法,观察在缺氧条件下人乳腺癌细胞MDA MB231和人静脉血管内皮细胞HUVEC中Legumain的蛋白表达量;观察Legumain对MDA MB231细胞的侵润能力的影响以及人工合成的Legumain抑制物(asparaginly endopepidase inhibitor,AEPI)对人静脉血管内皮细胞HUVEC小管腔形成能力的影响;用免疫组织化学的方法观察Legumain与整合素(Integrin)β1的结合情况.结果 Western-blot的结果表明,在缺氧条件下,体外培养的人乳腺癌细胞MDA MB231和人静脉血管内皮细胞HUVEC的Legumain蛋白表达量增加.应用免疫荧光双染色法对缺氧条件下培养的MDA MB231细胞进行染色,与正常条件下培养的细胞相比,缺氧条件下培养的MDA MB231细胞体积增大,胞浆内含有大量绿色的Legumain,成点状分布,并有部分Legumain分布在迁移中的细胞表面前缘,与红色的整合素β1重叠,呈现为黄色.在血管内皮细胞小管腔形成试验中,加入AEPI的实验组,HUVEC细胞的小管形成数量明显减少,分别为(13.2±0.85),(5.33±0.35),(0.57±0.23),与对照组(21.3±1.73)相比差异均具有统计学意义(P＜0.001).细胞的侵润能力试验结果表明.加入激活的Legumain后,实验组中的MDA MB231细胞的侵袭能力增高,分别为(170.90±59.27和(321.22±22.39),与对照组(67.56±7.58)相比差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 缺氧条件下,MDA MB231细胞株和HUVEC细胞株的Legumain表达增加,能促进肿瘤细胞的迁移和血管内皮细胞的小管形成.其分子机理之一可能是通过与整合素β1结合.
作者：吴文苑；余涟；刘春；罗金刚；段朝晖 刊期： 2009年第08期
目的 观察莫沙必利联合帕罗西汀治疗功能性消化不良的临床疗效.方法 将112例功能性消化不良患者随机分为治疗组和对照组(各56例).两组均给予莫沙必利5 mg,每日3次口服;治疗组在此基础上加用帕罗西汀20 mg/d,晨服,疗程均为4周.结果 治疗组的显效率(67.9%)和总有效率(89.3%)均优于对照组(分别为41.1%和69.6%,P＜0.01和P＜0.05).治疗组治疗后的HAMA和HAMD评分均显著低于对照组(P均＜0.01).治疗组在治疗后3月的复发率(12.5%)也明显低于对照组(30.4%,P＜0.05).结论 莫沙必利联合帕罗西汀治疗功能性消化不良疗效好,不良反应少.
作者：方和金 刊期： 2009年第08期
目的 通过黑木耳多糖对血管平滑肌细胞表型转化及bFGF和PDGF表达变化的影响,探讨黑木耳多糖降血脂和抗氧化以外的抗动脉粥样硬化形成作用.方法 将30只新西兰白兔随机分为正常对照组、模型组和实验组3组,分别给予普通饲料(正常组)、高胆固醇饲料(模型组)以及高胆固醇加黑木耳多糖饲料(实验组)喂养.第12周末处死动物,取主动脉行组织形态学观察及用透射电镜和免疫组织化学方法分析平滑肌细胞表型转化及bFGF和PDGF表达变化.结果 实验组主动脉斑块面积明显小于模型组,模型组和实验组分别为(0.44±0.10)和(0.30±0.83),两组比较差异有统计学意义(P＜0.01);透射电镜和免疫组化结果显示:模型组动脉粥样硬化斑块的平滑肌细胞内内质网、线粒体增多,主要为合成表型;而实验组平滑肌细胞内内质网、线粒体少,主要为收缩表型,并且斑块内bFGF和PDGF的表达减少.结论 黑木耳多糖可抑制动脉粥样硬化过程中血管平滑细胞从收缩表型向合成表型的转化,从而抑制平滑肌细胞合成和分泌bFGF、PDGF和其他细胞外基质的能力,从而减少动脉粥样硬化形成中血管平滑肌细胞参与的过程.
作者：郭素芬；成永霞；孙平 刊期： 2009年第08期
目的 了解广州市5岁以下儿童4种主要腹泻病毒的流行病学特征.方法 收集广州市2008年哨点医院门诊腹泻患儿粪便686份,采用ELISA法检测轮状病毒、腺病毒和星状病毒抗原,用RIDASCREENELISA试剂盒进行诺如病毒抗原检测,并对以上腹泻患儿的临床资料进行分析.结果 686份标本中.4种病毒的阳性率:轮状病毒为34.0%、诺如病毒为20.7%、腺病毒为6.0%、星状病毒为1.2%,其中有混合感染的病例数占5.1%,以轮状病毒混合其他病毒感染为主,占85.7%04种病毒阳性率男女差异无统计学意义,不同年龄组间阳性率差异有统计学意义(P＜0.05),与年龄有关,均以2岁以下患儿为主,分别占阳性总数的93.1%、92.3%、87.8%和100%.轮状病毒有明显的季节特征,10～12月份为发病高峰,诺如病毒等常年均有发病,无特殊的时间分布.混合感染的患儿腹泻症状较重(P＜0.05).结论 4种病毒均有检出,以轮状病毒和诺如病毒为主,秋冬季为发病高峰,2岁以下为发病高危人群,同时混合感染现象值得关注.
作者：魏跃红；杨智聪；罗雷；王玉林；康燕；李美霞 刊期： 2009年第08期
目的 探讨环氧化酶-2(cyclooxygenenase-2,COX-2)的表达与宫颈癌发生的关系以及COX-2与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的关系.方法 采用免疫组化(S-P)法检测20例正常宫颈、26例低度宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN;CIN Ⅰ)、28例高度CIN(CIN Ⅱ/Ⅲ)、25例宫颈癌组织中COX-2、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,并分析COX-2与VEGF及高危HPV感染的关系.结果 在正常宫颈、低度CIN、高度CIN、宫颈癌中COX-2的表达率分别为0、23.08%、57.14%、84%,VEGF的表达率分别为5%、30.77%、60.71%、88%,两者均随着病变的加重表达率明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.001).COX-2表达与VEGF呈显著正相关(P=0.001).人乳头瘤病毒(HPV)在低度CIN、高度CIN及宫颈癌的感染率分别为30.77%、71.43%、100%,在宫颈癌及其癌前病变中,COX-2与高危HPV感染率呈正相关(P=0.021).结论 COX-2与宫颈癌的发生、发展有关,并可能与肿瘤的血管生成有密切的关系.COX-2可能成为宫颈癌早期防治的靶点.
作者：阮晓红；钟开运；练晓勤；周伟；茹景顺；黎红 刊期： 2009年第08期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
