学术投稿

弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫免疫检测中的应用

杨培梁;李华;周晓红;彭鸿娟;吴焜;陈晓光

关键词:弓形虫, 多表位基因, 重组抗原, 免疫诊断, ELISA试剂盒
摘要:目的 评价弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫感染诊断中的效果,探索多表位抗原在弓形虫免疫检测中的应用前景.方法 以Ni-NTA Agarose和割胶电渗两步纯化法,获取弓彤虫多表位基因的原核表达纯化产物rMAG,以适宜浓度的rMAG包被ELISA微孔板,分别检测弓形虫急性和慢性感染血清,评价试剂盒检测的敏感性和特异性.结果 经Ni-NTA Agarose和割胶纯化,得到了纯度为95.86%的弓形虫多表位重组可溶性抗原.以3 μg/ml的抗原浓度包被ELISA微孔板,对兔和小鼠的急慢性弓形虫感染血清进行了检测.结果 检测小鼠血清141份.其中慢性感染弓形虫小鼠血清117份、正常小鼠血清24份,检测体系的敏感性为88.88%,特异性为91.67%,一致性为89.36%.检测兔血清24份,其中急性感染弓形虫兔血清18份,正常兔血清6份,阳性血清检出率为94.4%.总一致性为91.5%.结论 以弓形虫多表位重组抗原构建的ELISA试剂盒既可以检测弓形虫急性感染血清,又可以检测弓形虫慢性感染血清,具有一定的应用前景.
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    作者:曹文苓;黎小东;李平;梁燕华;叶兴东;宋卫忠;吴德标;林路洋 刊期: 2007年第09期

  • 2006年广州市某地下仓库蚊类密度消长观察

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    作者:吴军;阴伟雄;潘波 刊期: 2007年第09期

  • 弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫免疫检测中的应用

    目的 评价弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫感染诊断中的效果,探索多表位抗原在弓形虫免疫检测中的应用前景.方法 以Ni-NTA Agarose和割胶电渗两步纯化法,获取弓彤虫多表位基因的原核表达纯化产物rMAG,以适宜浓度的rMAG包被ELISA微孔板,分别检测弓形虫急性和慢性感染血清,评价试剂盒检测的敏感性和特异性.结果 经Ni-NTA Agarose和割胶纯化,得到了纯度为95.86%的弓形虫多表位重组可溶性抗原.以3 μg/ml的抗原浓度包被ELISA微孔板,对兔和小鼠的急慢性弓形虫感染血清进行了检测.结果 检测小鼠血清141份.其中慢性感染弓形虫小鼠血清117份、正常小鼠血清24份,检测体系的敏感性为88.88%,特异性为91.67%,一致性为89.36%.检测兔血清24份,其中急性感染弓形虫兔血清18份,正常兔血清6份,阳性血清检出率为94.4%.总一致性为91.5%.结论 以弓形虫多表位重组抗原构建的ELISA试剂盒既可以检测弓形虫急性感染血清,又可以检测弓形虫慢性感染血清,具有一定的应用前景.

    作者:杨培梁;李华;周晓红;彭鸿娟;吴焜;陈晓光 刊期: 2007年第09期

  • 与昆虫免疫相关的TEP家族分子研究进展

    含硫酯键蛋白(thioester-containing proteins,TEPs)在线虫和人类等许多后生动物中均有发现.这类蛋白质作为补体系统的一部分和通用蛋白酶抑制剂在免疫反应中起着重要的作用.本综述就TEP蛋白在两种双翅类昆虫免疫反应的作用进行总结.

    作者:张健;黄复生;徐文岳;段建华 刊期: 2007年第09期

  • 经多酚氧化酶处理的德国小蠊低致敏变应原疫苗免疫治疗小鼠过敏性气道炎症的研究

    目的 研究经多酚氧化酶(PPO)处理的德国小蠊低致敏变应原疫苗对小鼠过敏性气道炎症的治疗效果及其治疗机理.方法 提取新鲜马铃薯多酚氧化酶,将德国小蠊变应原粗浸液与PPO溶液按1:2混合制备低致敏变应原疫苗.动物实验取20只BALB/c小鼠随机分为A组(模型组)、B组(低致敏变应原疫苗治疗组)、C组(PPO治疗对照组)和D组(正常对照组).D组给予生理盐水.各组经腹部皮下注射致敏、治疗和滴鼻激发.激发结束后第2天进行气道高反应检测.第3天剖杀,进行支气管肺泡灌洗(BAL)、细胞总数计数、嗜酸粒细胞计数和肺组织炎症、支气管黏液分泌HE染色观察.结果 气道高反应检测中A组Penh值随雾化乙酰甲胆碱(Mch)浓度增加变化明显,B组Penh值曲线增幅相对平坦,两者差异有统计学意义(P<0.05).D组Penh值随Mch浓度增加变化小.A组支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞总数比D组明显增多,分类细胞以中性和嗜酸粒细胞为主.B组较A组细胞总数和嗜酸粒细胞均明显减少,差异有统计学意义(P<0.05).A、C组肺部组织呈明显的变态反应性炎症,B组低致敏变应原疫苗治疗的肺部嗜酸粒细胞浸润和黏液分泌比A、C组明显减少.结论 德国小蠊变应原粗浸液与PPO共同作用后变应原性降低.该方法制备的低致敏变应原疫苗治疗可抑制小鼠肺部过敏炎症.

    作者:王勤;刘志刚;马慧;李静 刊期: 2007年第09期

  • 广州市白云区2006年登革热流行特征分析

    目的 分析白云区2006年登革热流行病学特征,为制定登革热预防控制措施提供科学依据.方法 应用流行病学方法调查分析白云区登革热流行病学特点,应用ELISA法对疑似登革热病例血清进行IgM/IgG抗体检测.结果 2006年白云区登革热由I型登革热病毒引起,流行历时83 d,共发生病例70例,发病全部集中在8~11月,病例主要集中在人口流动大的城乡结合部.全部病例中男性发病25例,女性发病45例;发病年龄小6岁,大81岁.职业分布以家务、农民、学生发病率较高.结论 2006年白云区登革热流行形势严峻,在实践中不断探索和完善登革热预防控制技术和管理模式能有效地预防控制其发生和流行.

    作者:叶浩风;陈志强;周勇;罗鉴波;叶双岚;虞华珍;李小向 刊期: 2007年第09期

  • 2006年广州市职业人群禽流感监测分析

    目的 了解2006年广州市职业人群禽流感H5和H9亚型的接触感染情况,为防治人禽流感提供科学依据.方法 采集广州市12个区从事饲养、销售和屠宰家禽的职业人群的静脉血831份,一般人群血液样品735份,通过血凝抑制实验进行抗体检测.结果 职业人群中H9亚型抗体阳性率为10.7%,一般人群H9亚型抗体阳性率为2.2%,未检出H5亚型抗体.结论 H9亚型在职业人群存在的隐性感染远高于一般人群,提示加强家禽接触人群的监测对于禽流感的预警和防制有非常重要的意义.

    作者:鲁恩洁;刘远;陈艺韵;周颖;蒋力云;狄飚;何丽娟;吴新伟;李向忠;张伟 刊期: 2007年第09期

  • 液体空气微生物采样法与固体采样法效果初步分析

    目的 通过模拟现场采样检测评价液体空气微生物采样器的采样效能.方法 使用液体微生物样器和固体撞击式微生物采样器对模拟现场空气微生物进行采样检测,分析不同污染状态和采样时间等因素对采样效果及稳定度的影响.结果 不同污染状态和不同采样时间,SAS-pcr液体采样器法的采样效率及稳定度均较MAS-100固体撞击式空气微生物采样器法佳.结论 液体空气微生物采样器法值得进一步推广.

    作者:冯文如;徐巧兰;刘世强;龚玉姣 刊期: 2007年第09期

  • EXCEL中IF及FREQUENCY函数在血吸虫病资料处理中的应用

    目的 对血吸虫病流行村按人群感染率进行分类,统计各类频数.方法 采用EXCEL中IF及FREQUENCY函数,对453个村分类并统计各类频数.结果 按感染率高低用IF嵌套函数对每个疫区村分类;用FREQUENCY函数分别计算各类村的频数;用FREQUENCY函数,按感染率高低分组,直接计算各组频数.结论 采用EXCEL中的IF和FREQUENCY甬数,能高效、便捷的对血吸虫病疫情资料进行分类、并统计各类频数.

    作者:袁梅枝;王加松;董娟;彭孝武 刊期: 2007年第09期

  • 涂阴肺结核诊断记分系统的研究

    目的 建立涂阴肺结核诊断记分系统,并研究其诊断性能.方法 利用建模样本筛选出对诊断涂阴肺结核有意义的单项参数指标,再对单因素分析有意义的指标进行多因素非条件Logistic回归分析,用多因素Logistic回归模型中独立预告因素的β系数建立诊断记分系统.然后通过测试样本做诊断记分系统的诊断性能评价.结果 体重下降、盗汗、乏力、胸闷、胸片异常表现的部位及胸膜粘连等6个变量终进入多因素Logistic回归模型,根据β系数研制的记分系统得分范围为-3至13.得分小于4的患者,为涂阴肺结核的可能性小;得分大于等于4是涂阴肺结核的可能性大.建模样本和测试样本诊断的正确率、灵敏度及特异度分别为88.4%和86.6%,91.3%和84.8%,86.4%和89.1%,ROC曲线下面积分别为0.888±0.017和0.870±0.037.结论 记分系统可作为涂阴肺结核的诊断预测工具,有良好的诊断预测性能,值得进一步探讨.

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  • 不同血清型汉坦病毒基因重排的研究

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    作者:康文臻;黄长形;白雪帆;杨为松;李光玉;李谨革;谢玉梅;张岩 刊期: 2007年第09期

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    作者:武文斌;邵圣文;于建国;戚中田 刊期: 2007年第09期

  • 慢性乙型肝炎患者血清MMP-1及TIMP-1与肝组织病理的关系

    目的 观察慢性乙型肝炎患者血清基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)水平与肝脏炎症活动度及纤维化程度的相关性.寻找新的判断肝纤维化程度的血清学指标.方法 慢性乙肝患者64例,均行肝穿刺活检,病理组织进行炎症活动度分级(G)及纤维化程度分期(S),用双抗体夹芯酶联免疫吸附方法检测血清MMP-1及TIMP-1水平,用放射免疫法检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(C-ⅣV)的水平.结果 随着肝脏炎症活动度及纤维化程度加重,血清MMP-1水平逐渐降低,而TIMP-1水平逐渐升高,除G1与G2、S1与S2比较差异无统计学意义外,其余各组之间两两比较均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);血清TIMP-1与纤维化分期呈正相关(r=0.496,P=0.003),与炎症活动度分级呈正相关(r=0.460,P=0.005);血清MMP-1与纤维化分期呈负相关(r=-0.443,P=0.004),与炎症活动度分级呈负相关(r=-0.419,P=0.007),且血清MMP-1及TIMP-1与HA、PⅢNP具有良好相关性.结论 血清TIMP-1和MMP-1水平可作为评估肝纤维化发展或减轻的指标.

    作者:张健珍;龙英姿;李穗芬;易俊卿;陈厚志;张春兰;杨湛 刊期: 2007年第09期

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