学术投稿

与大劣按蚊先天免疫相关丝氨酸蛋白酶的克隆及分析

张健;徐文岳;黄复生;段建华

关键词:抑制消减杂交, 大劣按蚊, 丝氨酸蛋白酶, 先天免疫
摘要:目的 克隆及分析与先天免疫相关的大劣按蚊差异基因.方法 利用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)方法克隆大劣按蚊差异基因,并对与先天免疫相关的差异基因(文中命名为T6基因)进行生物信息学分析及半定量实验,分析约氏疟原虫感染前后其转录的变化,探讨它与按蚊抗疟原虫感染的先天免疫反应的关系.结果 目前克隆的差异基因包含以下几类:①与先天免疫相关的酶类;②与能量代谢有关的酶:③与信号传递和调节有关的因子.对与先天免疫相关的分子进行的半定量实验表明,大劣按蚊T6基因的转录与感染疟原虫相关.结论 本研究成功地克隆了与先天免疫相关的大劣按蚊差异基因,进一步的实验分析提示该基因可能与按蚊抗约氏疟原虫感染的黑化反应相关.
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  • 兴义市和普安县麻风病联合化疗后复发调查

    目的 确定兴义市和普安县多菌型(M8)和少菌型(PB)患者完成联合化疗(MDT)后的复发率,分析MDT的远期疗效.方法 回顾分析1986~2005年间兴义市和普安县所有完成MDT者的有关资料,开展麻风病MDT后复发调查,用寿命表法计算人年平均复发率.结果 兴义市384人实施MB方案,MB方案MDT后监测10年,有4人复发,平均复发率为0.15/100人年;普安县297名MB中有1人复发,平均复发率为0.05/100人年.10年监测期后,两县/市共有5人复发,未计算在人年复发率中.两县/市124名PB监测5年,未见复发.提示MDT后复发率低,且复发较晚.复发率随MDT前BI值增加而增加.结论 MDT远期疗效好,MB患者24个月规则MDT后不需监测,高菌量患者存在高复发危险.

    作者:袁联潮;李桓英;牟鸿江;潘牛;王永红;曾秋 刊期: 2007年第10期

  • 洋葱伯克霍尔德菌耐药性和金属β-内酰胺酶的检测

    目的 探讨洋葱伯克霍尔德菌耐药情况及其多重耐药特点.方法 用微量琼脂稀释法检测2004年1月至2006年12月临床分离不重复75株洋葱伯克霍尔德菌对15种抗菌药物的抗菌活性及其产金属β内酰胺酶情况,比较产酶株与非产酶株抗药活性.结果 2004-2006年洋葱伯克霍尔德菌检出率呈上升趋势,痰标本分离率较高.感染者分布于临床各个科室,并患有各种严重基础疾病,并使用过抗菌药物.葱伯克霍尔德菌对多数抗菌药物耐药,仅对复方新喏明、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他巴唑坦敏感,敏感率分别为95%、82.8%、74.7%、70.7%;而对头孢噻肟、头孢哌酮、头孢曲松、阿米卡星、氨曲南、哌拉西林耐药率超过50%.产金属β-内酰胺酶株与非产金属β-内酰胺酶株比较,产酶株对含酶抑制剂β-内酰胺类抗生素敏感性较高.结论 洋葱伯克霍尔德菌对多数抗菌药物耐药,仅对复方新喏明、头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南、哌拉西林/他巴唑坦敏感.建议临床医生根据药敏试验合理用药,以减少耐药菌株的产生.

    作者:谭萍;张松;祝玲玲 刊期: 2007年第10期

  • 襄樊市2006年疟疾疫情分析及抗疟措施

    目的 掌握襄樊市2006年疟疾流行态势,找出防治工作重点,为制定科学的抗疟措施提供依据.方法 统计2006年各县(市)发病率,分析比较疟疾疫情及疟疾流行的三间分布.结果 襄樊市2006年疫情报告疟疾发病1 210例,发病率为22.2193/10万,与2005年的935例比较,上升28.87%,占湖北省疟疾病例数(1753例)的69.02%.其中枣阳、襄阳、老河口发病率居湖北省81个疫情报告单位的前三位.结论 襄樊市的疟疾发病近几年一直是湖北省的主体部分,虽然通过积极防治有了大幅度下降,但疫情极不稳定,是目前湖北省疟防工作的重点.

    作者:蔡冬青;装速建;陈辉 刊期: 2007年第10期

  • 体外反搏对减轻高脂饲养猪产生动脉粥样硬化的实验研究

    目的 探讨体外反搏对减轻高脂饲养猪产生动脉粥样硬化的效果及机制.方法 选雄性乳猪16头,用高脂喂养建立动脉粥样硬化模型,对模型猪进行36 h体外反搏治疗.对腹主动脉作苏丹Ⅲ染色,分析脂质浸润阳性率;用基因芯片分析猪的动脉血管内皮细胞基因的表达.结果 腹主动脉苏丹Ⅲ染色图像定量分析阳性率,高脂组为6.49%±0.84%,高脂加反搏组为2.29%±0.46%,两组差异有统计学意义(P<0.05).发现改变的基因:芯片1(反搏组Cy3/高脂组Cy5):整合素β1 0.06、CTGF 0.28;芯片2(反搏组Cy3/高脂组Cy5):整合素β10.62、CTGF 0.39.结论 体外反搏可以下调内皮细胞整合素β1、CTGF基因的表达,降低血管内皮细胞对脂质的摄取,起到抗动脉粥样硬化的作用.

    作者:何小洪;伍贵富;张焰;陈小林;郑振声;詹澄扬;柳俊;何建桂;熊艳;方典秋;梁陆光;钱月桃;凌桂芳;戴刚;冯铭喆;王奎健;朱振宇;马虹 刊期: 2007年第10期

  • ZT胶作为门静脉栓塞材料的实验研究

    目的 探讨ZT胶行兔选择性门静脉栓塞(SPVE)的安全性及有效性.方法 新西兰白兔24只,随机分为3组,A组为ZT胶:碘油(1:1)混合物组,B组为ZT胶:碘油(1:2)混合物组,对照组C组为碘油组.对各组门静脉左支进行SPVE,术后检测门静脉压力、肝转氨酶(ALT、AST)的变化,术后30 d右肝重/全肝重、全肝重/体重.结果 SPVE后门静脉压力、肝转氨酶呈-过性升高;栓塞后肝左叶萎缩、纤维化,肝右叶代偿性增生肥大,右肝重/全肝重B组为69.41%,而C组为39.00%.统计学分析显示,B组栓塞效果明显优于其他组(P<0.05).结论 ZT胶:碘油(1:2)混合物是一种安全、有效的门静脉栓塞材料.

    作者:庄树彤;陈斌;倪勇;周汝明;高海斌 刊期: 2007年第10期

  • 短穗鱼尾葵及长穗鱼尾葵花粉过敏原的分析、鉴定与纯化

    目的 对长穗鱼尾葵和短穗鱼尾葵花粉变应原蛋白进行分析、鉴定与纯化.方法 提取这两种花粉的粗提液,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离粗提液蛋白质组分并测定其分子量.收集过敏病人血清,采用免疫印迹(Western-blotting)法鉴定其变应原成分,通过离子交换层析对花粉变应原进行初步纯化和免疫印迹鉴定.结果 长穗鱼尾葵花粉有30余条蛋白带,其中主要条带有18条,12 000和14 000 Mr为长穗鱼尾葵花粉特异性变应原;短穗鱼尾葵花粉有30余条蛋白带,其中主要条带有9条,26 000、12 000和14 000 Mr为短穗鱼尾葵花粉特异性变应原,其中14 000 Mr为主要变应原;通过离子交换层析方法 纯化出长穗鱼尾葵花粉相对分子质量为12 000和14 000的变应原主要分布在Ⅱ峰中,短穗鱼尾葵花粉相对分子质量为14 000的主要变应原分布在Ⅴ峰和Ⅵ峰中.结论 对长穗和短穗鱼尾葵花粉变应原进行了初步的分离、鉴定和纯化,为临床鱼尾葵花粉变态反应疾病的诊断和治疗奠定了基础.

    作者:刘晓宇;肖淑英;刘志刚;姚敏;孟光 刊期: 2007年第10期

  • 强直性脊柱炎易感基因IL-1RN和TNF-α的单核苷酸多态性的研究

    目的 检测中国深圳地区汉族强直性脊柱炎(As)患者IL-1RN和TNF-α基因的单核苷酸多态性(SNPs).方法 在54名AS患者和42名健康对照者中,采用基因芯片技术对IL-1外显子6上SNPs(31017C/G、30735T/C)、TNF-α启动子上的SNPs(-857C/T)进行基因分型,分析单个位点的等位基因频率和基因型频率是否与AS相关,采用SAS软件分析数据.结果 AS患者中.IL-1RN的31017C/G的等位基因G频率和30735T/C的等位基因C频率(分别是60.42% vs 36.36%,32% vs 17.19%)和IL-1RN的31017C/G的基因型GG频率和30735T/C的基因型CT频率(分别是43.75% vs 12.12%,64% vs 39.39%)显著性高于健康对照者,差异具有统计学意义(P<0.01).TNF-α的-857C/T的等位基因T频率(25% vs 9.52%)和基因型CT频率(42.59% vs 19.05%)也显著高于健康对照者(P<0.01).在健康人中31017CG/857CC基因型组合要显著高于AS患者(P<0.01),在AS患者中31017GG/30735CT/857CT基因型组合要显著高于健康对照者(P<0.05),其差异均具有统计学意义.结论 IL-IRN基因的31017C/G和30735T/C的两个SNPs及其基因型频率与中国深圳汉族AS之间存在显著相关性,31017CG/857CC基因组合可能是保护性的基因组合,而31017GG/30735CT/857CT组合可能增加AS患病的易感性.

    作者:杨宇;苏卓娃;马文松;蔡安季;赵丹;杜冀辉 刊期: 2007年第10期

  • 医院感染病人中段尿和血液中病原菌的种类及耐药性分析

    目的 了解医院感染病人中段尿和血液中分离细菌和念珠菌的种类及耐药性,为合理使用抗生素提供依据.方法 大多数分离细菌的鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工和K-B法鉴定.念珠菌利用显色平板分离和鉴定,K-B法药敏.结果 分离于中段尿的1 063株病原菌中常见的是大肠埃希菌(39.6%)、粪肠球菌(9.2%)、肺炎型肺炎克雷伯菌(8.2%)、念珠菌属(11.6%);G-杆菌中耐药率低于30%的为美洛培南、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、头孢他啶和哌拉西林/他唑巴坦;G+球菌中万古霉素和替考拉宁的敏感率均为100%;念珠菌中两性霉素B和制菌霉素的耐药率均为0,对其他药物也均低于10%.分离于血液的543株病原菌中常见的是大肠埃希菌(16.6%)、凝固酶阴性葡萄球菌(16.4%)、铜绿假单胞菌(11.6%)、肺炎型肺炎克雷伯菌(8.3%)和金黄色葡萄球菌(7.6%);G-杆菌中耐药率低于30%的为美洛培南、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶和氨曲南;G+球菌中万古霉素和替考拉宁的敏感率均为100%.结论 应重视对怀疑泌尿系感染和败血症的病人进行细菌真菌培养鉴定及药敏试验,以合理使用抗生素.

    作者:魏东;耿穗娜;王前;裘宇容;芮勇宇 刊期: 2007年第10期

  • 湖南省日本血吸虫线粒体cox1基因部分序列多态性的研究

    目的 研究湖南省日本血吸虫不同自然隔离群的线粒体细胞色素c氧化酶亚基1基因(cox1)部分序列(pcox1)的变异,为阐明我国日本血吸虫的种群遗传结构奠定基础.方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术对湖南省岳阳君山、泪罗的日本血吸虫的pcox1片段进行扩增、克隆及序列分析.结果 获得480 bp的pcox1序列.经DNAstar软件分析,pcox1序列有一定的种内差异(0~1.2%).结论 本研究为阐明我国日本血吸虫的种群遗传结构提供了数据.

    作者:刘伟;戴荣四;林瑞庆;宋慧群;程天印;刘毅;朱兴全 刊期: 2007年第10期

  • 广东省19例粪类圆线虫感染者的检查结果分析

    目的 对来自广东省不同地区的19例粪类圆线虫患者的粪便等标本进行检查,并随访观察.方法 取所有患者的粪便,部分患者的尿液、痰液、呕吐物和眼部分泌物,采用生理盐水直接涂片法、培养法、离心沉淀法等制作玻片标本后置显微镜下观察.结果 查到粪类圆线虫杆状蚴、丝状蚴,在呕吐物中还查到虫卵;其中7例患者合并华支睾吸虫感染;1例患者合并蛔虫、鞭虫和蛲虫感染.患者口服噻苯达唑、阿苯达唑和吡喹酮等药物进行治疗.结论 该虫在本省有散在分布;免疫功能正常者口服以上药物效果显著,复查未发现病原体.

    作者:张瑞琳;梁炽;曹爱莲;郑小英 刊期: 2007年第10期

  • A群流脑多糖疫苗免疫效果观察

    目的 比较A群流脑多糖疫苗接种前后人群的特异性抗体水平情况,评价免疫效果.方法 以广州大学城某工地工人和某学院在校学生为研究对象,采用酶联免疫吸附试验对工地工人32人,学生147人在A群流脑多糖疫苗接种前以及接种20 d后采集的血清抗体进行检测.结果 接种A群多糖疫苗20 d后,工地工人抗体阳性率由接种前的18.75%提高到87.50%,GMT由2.65提高到21.60;学生抗体阳性率由接种前的41.50%提高到80.95%,GMT由4.21提高到15.85,统计分析显示接种前后抗体阳性率、GMT之间差异有显著性意义(P<0.001).结论 发生流脑疫情时对特定区域人群进行疫苗接种能迅速提高人群的整体抗体水平,有利于保护易感人群,防止疫情进一步蔓延.

    作者:张欣强;邓志爱;周秀珍;李孝权;李钏华 刊期: 2007年第10期

  • 实时RT-PCR基因表达相对定量REST(C)软件分析与2(-△△CT)法比较

    目的 利用实时RT-PCR技术建立一种简便、准确的基因表达相对定量方法.方法 以正常的人支气管上皮细胞株(16HBE)cDNA为模板5倍系列稀释,分别作DNA聚合酶K(POLK)和磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因标准曲线.以不同剂量反式二羟环氧笨并芘(anti-BPDE)诱导的16HBE、anti-BPDE转化的16HBE及肺癌细胞株(H1299)cDNA为模板,进行实时定量RT-PCR.以GAPDH基因作为内参照.进行POLK基因表达相对定量.实验数据分别采用2(-△△CT)法及REST(C)软件分析.结果 5倍系列稀释法制作的标准曲线,呈现较好的线型关系(Rsq 0.997).POLK及GAPDH基因扩增效率分别为117.5%和103.5%.采用2(-△△CT)法计算出的表达比值均比REST(C)软件分析高.结论 实时RT-PCR技术结合REST(C)软件分析是一种简便、准确的基因表达相对定量分析手段.

    作者:庾蕾;刘建平;庄志雄;杨淋清;张仁利;叶小明;程锦泉 刊期: 2007年第10期

  • 某矿区人群接种重组酵母乙肝疫苗免疫效果分析

    目的 了解重组酵母乙肝疫苗(recombinant yeast-derived hepatitis B Vaccine,YDV)在不同年龄组人群中的免疫学效果和安全性.方法 选择兖矿集团某矿区0~62岁的903名乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)和乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)三项指标均为阴性者,采用0-1-6的免疫程序接种YDV,分别于全程接种后1、12、24、36个月时检测血清HBsAg和抗-HBs.结果 研究对象接种后3 d内未发现中重度的局部和全身不良反应.全程免疫后第1、12、24、36个月,抗-HBs阳转率分别为86.71%、71.85%、50.23%、41.25%(χ2=477.27,P<0.01),呈逐年下降趋势(P<0.01);经年龄标准化后,女性抗-HBs阳转率在各阶段均高于男性,但无统计学意义(P>0.05);人群抗-HBs阳转率与年龄有着密切关系,随年龄升高而逐渐降低(P<0.05).结论 YDV具有良好的免疫源性和安全性.

    作者:王文军;张璟;刘琥;姜宝法;韩洋丽 刊期: 2007年第10期

  • 蓝氏贾第鞭毛虫表面变异抗原的研究进展

    贾第虫病被认为是一种再现的传染性疾病,特别是贾第虫在艾滋病患者中造成致死性腹泻已引起艾滋病工作者的重视.近年来的研究表明,贾第虫表面抗原的变异与致病作用有关,现就贾第虫表面抗原的特性、变异抗原基因结构与功能及变异机制方面的研究现状作一综述.

    作者:张永轻;李雅杰 刊期: 2007年第10期

  • 急性心肌梗死猝死者心肌细胞hsfl和HSP70改变的意义

    目的 探讨急性心肌梗死猝死者梗死区心肌细胞内热休克转录因子1(hsfl)和热休克蛋白70(HSP70)改变的临床意义.方法 分别用RT-PCR和免疫组化法检测(IHC)18例急性心肌梗死猝死者(研究组)和15例心脏正常因车祸快速死亡者(对照组)心肌细胞中hsfl和HSP70基因的mRNA和蛋白表达量.结果 急性心肌梗死猝死者心肌细胞hsfl和HSP70的mRNA表达量都显著高于正常对照组(P<0.01),且hsfl和HSP70mRNA的表达量之间呈显著的正相关关系(P<0.001).急性心肌梗死猝死者心肌细胞hsfl和HSP70蛋白在细胞浆和细胞核表达较对照组显著增强(P<0.01),其中hsfl蛋白主要在心肌细胞核内表达,HSP70蛋白主要在心肌细胞浆内表达.结论 急性心肌梗死猝死者心肌细胞内hsfl和HSP70可能共同参与了急性心肌梗死的病理生理过程,这一过程可能是热休克反应的另一调节途径.

    作者:左立平;梁艳冰;唐皓;詹红;陈志斌;马中富 刊期: 2007年第10期

  • 胃肠道肿瘤诊断中彩色多普勒超声的应用价值

    目的 了解彩色多普勒超声在诊断胃肠道肿瘤中的应用价值,提高术前正确诊断率.方法 临床彩色多普勒超声所见腹腔或盆腔占位,后经手术或超声引导下活检病理诊断进一步证实.结果 临床彩超所见腹腔或盆腔占位,后经手术或超声引导下活检病理证实来源为胃、小肠或结肠良恶性肿瘤27例,其中小肠及胃平滑肌肉瘤各3例,空结肠恶性间质瘤5例,胃及结肠腺癌14例,胃淋巴瘤2例.27例病人中26例行纤维内窥镜检查,15例病理活检为恶性肿瘤(15/27),1例病理回报炎症(1/27),10例未见明显占位(10/27).结论 临床彩超在诊断腹腔或盆腔占位中的价值应得到临床医师的重视,在某些病例中甚至优于经典的纤维内窥镜和钡餐及气钡剂双重造影.

    作者:李彦娟;刘冀龙;钱林学 刊期: 2007年第10期

  • 与大劣按蚊先天免疫相关丝氨酸蛋白酶的克隆及分析

    目的 克隆及分析与先天免疫相关的大劣按蚊差异基因.方法 利用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)方法克隆大劣按蚊差异基因,并对与先天免疫相关的差异基因(文中命名为T6基因)进行生物信息学分析及半定量实验,分析约氏疟原虫感染前后其转录的变化,探讨它与按蚊抗疟原虫感染的先天免疫反应的关系.结果 目前克隆的差异基因包含以下几类:①与先天免疫相关的酶类;②与能量代谢有关的酶:③与信号传递和调节有关的因子.对与先天免疫相关的分子进行的半定量实验表明,大劣按蚊T6基因的转录与感染疟原虫相关.结论 本研究成功地克隆了与先天免疫相关的大劣按蚊差异基因,进一步的实验分析提示该基因可能与按蚊抗约氏疟原虫感染的黑化反应相关.

    作者:张健;徐文岳;黄复生;段建华 刊期: 2007年第10期

  • 急性脑梗死患者外周血单个核细胞中细胞因子信号转导抑制因子-3的变化

    目的 探讨急性脑梗死患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)mRNA和蛋白质表达的变化.方法 实时荧光定量PCR法检测60例脑梗死患者和40例健康对照者的PBMC中SOCS-3 mRNA表达,Western-blot法检测其蛋白质水平的表达.结果 脑梗死患者发病后1~6 d PBMC中SOCS-3 mRNA表达明显高于正常对照组,其表达随时间延长呈下降趋势,至第7、14天时与正常对照组无显著差异.其蛋白质的表达在发病后第2~3天升高并达到高峰,之后表达逐渐减少,至第7天仍高于正常水平,第14天降至正常水平.结论 急性脑梗死患者PBMC中SOCS-3可能参与了脑梗死后炎症反应的病理生理过程.

    作者:杨静;黄帆;马中富 刊期: 2007年第10期

  • 广东省血吸虫病巩固监测情况分析及防治对策探讨

    目的 了解广东省血吸虫病传播阻断后的疫情动态,探讨新形势下的防治措施.方法 建立血吸虫病监测系统,在原疫区对钉螺和传染源进行同步监测.结果 1996-2006年共查螺7 120.29万平方米,未发现活的钉螺.复查历史病人14 893人,复治2 747人,复治率为18.44%(2 747/14 893);外来人口调查:皮试检查2 353人,阳性率为2.42%(57/2 353),血清学检查7 749人,阳性率为0.70%(54/7 749);低年龄组人群调查:皮试检查9073人,阳性率为3.84%(348/9 073),血清学检查11 498人,阳性率为5.00%(575/11 498),阳性者经粪检复查未发现血吸虫感染者.解剖野鼠1 753只,检查耕牛18 266头,均未发现血吸虫虫卵阳性.通过被动监测,2004年,2005和2006年分别报告输入性病例46例、8例和36例,以珠江三角洲地区报告病例数多,占94.44%(82/90);年龄以15~55岁人群为主,占78.89%(71/90);职业以工人为主,占30.00%(27/90);其中急性感染病例2004年和2005年分别有1例和3例.结论 目前广东省血吸虫病防治成果巩固,但必须加强监测,重点是输入性传染源及钉螺的监测.

    作者:邓卓晖;黄少玉;骆雄才;张贤昌;张启明;林荣幸 刊期: 2007年第10期

  • 云南省齐氏姬鼠体表吸虱性比分析

    目的 对云南省捕获的1 204只齐氏姬鼠体表采集的5 323只吸虱进行性比分析.方法 应用统计学方法卡方检验及单样本t检验,对数据进行整理.结果 优势虱种为锯多板虱(Polyplax serrata)、相关甲胁虱(Hoplopleura affinis)和红姬甲胁虱(Hoplopleura akanezumi),雌/雄吸虱性比均大于1.有吸虱寄生的齐氏姬鼠588只,雌:雄>1及只有雌虱寄生的齐氏姬鼠共412只,占有虱寄生齐氏姬鼠数量的70.07%.在不同生境齐氏姬鼠体表吸虱性比分布,均呈偏-雌分布.结论 齐氏姬鼠体表吸虱性比偏雌分布,是一种普遍现象,其产生机制尚不清楚,有待研究.

    作者:孟艳芬;郭宪国;门兴元;吴滇 刊期: 2007年第10期

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