林萍;王筱芳;苏建平;刘国江;江泽良;崔一萍;丁辉
目的探讨黄胸鼠体表革螨的雌雄性比及生活史各期年龄构成.方法现场随机抽样调查及常规分类鉴定,以从小型哺乳动物黄胸鼠体表分离鉴定出数量较多的革螨作为重点研究对象.结果从1990年至2004年在云南省境内共调查了25个县(市),捕获黄胸鼠3 765只,从3 765只黄胸鼠体表采集革螨18 250只,经分类鉴定隶属于9科17属40种.其中有7种革螨采集数量较大,分别是纳氏厉螨10 667只、毒厉螨5 124只、柏氏禽刺螨1 286只、鼠颚毛厉螨218只、鼠拟脂刺螨215只、矮肛厉螨162只、鼩鼱赫刺螨131只,其他33种革螨采集数量均小于100只.7种主要革螨的雌性比例(78.61%~100%)明显超过其雄性比例(0~21.39%),有些革螨还采集到幼虫,前若虫及后若虫(但数量均较少),只有柏氏禽刺螨的幼期比例较高(72.01%).结论在多数革螨的自然种群中,雄性个体明显少于雌性个体,可能与革螨的孤雌生殖有关;专性吸血的柏氏禽刺螨生活史各期都可寄生在黄胸鼠体表.
作者:罗礼溥;郭宪国 刊期: 2006年第03期
目的建立一种简捷、准确、快速检测食品过敏原的方法.分析花生总蛋白2-DE(2-dimensionelectrophoresis)指纹图谱与蛋白点MALDI-TOF/MS分析联用的可行性.方法新鲜生花生去皮搅碎后丙酮去脂,PBS抽提总蛋白,冻干得初提样品,试剂盒精提,双向电泳IEF选择11cm非线性胶条(pH=3-10)溶胀上样,平衡后转移胶条在电泳槽中进行第二向SDS-PAGE垂直电泳(10%),考染后扫描图像进行计算机分析处理,同时在胶上任意选择两个蛋白点切胶、脱色、消化后进行MALDI-TOF/MS分析.结果2-DE指纹谱图显示花生总蛋白的分布范围较窄,主要是一些中、小分子量的中性、弱酸和弱碱性蛋白,用PDQuest 2-D Analysis分析软件对此2-DE图谱分析可以发现其中共有178个特征性蛋白点.以花生总蛋白2-DE指纹图谱为基础,进一步对单个蛋白点进行MALDI-TOF/MS指纹图谱分析,结果显示每一个蛋白点都具有自己特征的分子量峰和图谱形状,无需进行肽片段混合物的分析、检索亦可完全区分不同的蛋白点,从而可以对食品过敏原进行更深入、更准确的指纹图谱检测.结论食品过敏原总蛋白2-DE指纹图谱与蛋白点MALDI-TOF/MS指纹图谱分析联用可以更好的进行食品过敏原指纹图谱快速检测研究.
作者:吴海强;余晓;刘志刚 刊期: 2006年第03期
目的利用蛋白质组学技术分离、鉴定日本血吸虫正常尾蚴及紫外线致弱尾蚴虫体间差异表达蛋白.方法分别收集与制备血吸虫正常尾蚴和致弱尾蚴虫体总蛋白,经固相pH梯度双向凝胶电泳分离.凝胶银染并利用ImageMaster 2D Software 5.0凝胶图像分析软件进行比较分析,选取差异表达蛋白点经基质辅助激光解析离子飞行时间质谱仪进行鉴定.结果二维凝胶电泳图像分析结果显示:正常尾蚴和致弱尾蚴各分离出至少1 277、1 173个清晰、独立的蛋白点,蛋白点匹配率为72.7%,大多数蛋白点相对分子量处于22 000~95 000范围内,理论等电点为5~8.尾蚴经紫外线致弱前后共发现18个差异表达蛋白,其中5个蛋白于致弱尾蚴中表达消失,12个表达下调,1个表达增强,未见新增表达蛋白.其中13个差异表达蛋白经MALDI-TOF-MS鉴定分析,获悉其肽指纹图谱、理论等电点、分子量及表达水平变化等相关信息.结论利用二维电泳、MALDI-TOF-MS等蛋白质组学技术,共鉴定出13个致弱尾蚴差异表达蛋白,为进一步阐明致弱尾蚴诱导宿主产生高免疫保护力的分子机制提供了实验基础.
作者:杨琳琳;吕志跃;胡旭初;胡斐;曹爱莲;郑焕钦;黎明涛;余新炳;冯明钊;吴忠道 刊期: 2006年第03期
目的通过将发生点突变的两个大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因进行改造,获得具有正确序列的OSCP基因,在大肠杆菌中表达并进行活性鉴定.方法通过限制性核酸内切酶和T4DNA连接酶将发生错义突变的两个OSCP基因的DNA克隆进行改造,获得具有正确核苷酸序列的OSCP基因;然后将该片段连接进原核表达载体pET-28c(+),构建成重组质粒PET-28c(+)-OSCP;用该重组质粒转化E.coli,转化子在37℃诱导表达相应的融合蛋白,通过Western-blot鉴定.结果酶切及测序显示对OSCP基因错义突变的纠正获得成功.酶切结果显示成功构建了原核表达载体pET-28c(+)-OSCP.IPTG诱导表达4 h后,SDS-PAGE及Western-blot显示诱导表达出分子量约23 000的大鼠寡霉素敏感相关蛋白,且该蛋白具有免疫活性.结论在国内初次表达出大鼠OSCP,表达产物具有免疫反应性,为OSCP的结构及功能研究奠定了基础.
作者:王海龙;王春芳;赵嘉惠;殷国荣;乔中东 刊期: 2006年第03期
目的探讨孕期应用乙型肝炎病毒免疫球蛋白对HBsAg阳性孕妇的乙肝病毒(HBV)宫内阻断作用及孕妇血清中乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)含量与胎儿宫内感染发生率的关系.方法将130例HBsAg阳性孕妇随机分为三组:治疗组A,45例,于孕20、24、28、32、36周肌肉注射乙肝病毒免疫球蛋白(HBIG)5次;治疗组B,45例,于孕28、32、36周肌肉注射乙肝病毒免疫球蛋白(HBIG)3次;对照组(C组),40例,仅随访不用药.检测孕妇血清中HBV DNA含量及新生儿血清中HBsAg、HBV DNA阳性情况.结果孕期预防性应用HBIG被动免疫组孕妇的宫内感染率分别为13.3%、15.6%,显著低于对照组的32.5%.HBIG治疗可以减低孕妇血清HBV DNA含量,但A、B两组HBV DNA降低程度无明显差异(P>0.05).根据母体HBV DNA含量分为5×103~4,5×105~6,5×107~8 copies/ml三组,各组胎儿宫内感染率为2.2%、13.7%、52.9%,三者差异有统计学意义(P<0.05).结论孕期应用HBIG能显著降低乙肝病毒宫内传播.孕妇血清中高HBV DNA含量是胎儿发生乙型肝炎病毒感染的一个重要因素.
作者:陈丽梅 刊期: 2006年第03期
目的探讨淋球菌mtrR启动子区域回文序列基因突变与多重耐药之间的关系.方法采用纸片扩散法检测56株淋球菌对五种抗生素的敏感性.以PCR扩增mtrR启动子区域中包含有13个碱基回文序列在内的157个碱基,并进行SSCP(单链构象多态性)分析.根据SSCP的结果,选取12株标本进行测序分析,将其核苷酸序列与标准敏感株ATCC19424进行比较.结果56株细菌中有5株对五种抗生素都敏感,对一种抗生素耐药的有22株,对两种抗生素耐药的有19株,其中有2株mtrR启动子区域中回文序列基因发生了突变;对三种抗生素、四种抗生素和五种抗生素耐药的株菌分别是7株、2株和1株,它们的mtrR启动子区域中回文序列基因均发生了突变.并且这12株标本突变的类型一致,在13个碱基的回文序列中发生了单个A/T碱基的缺失.结论mtrR启动子区域中回文序列基因突变介导淋球菌的多重耐药,回文序列单个A/T碱基的缺失与淋球菌多重耐药有密切的关系.
作者:彭运生;袁建辉;徐立中;潘春燕;钟素霞;汪小娟 刊期: 2006年第03期
目的筛选能与EBV LMP1 CCT蛋白高效结合的短肽.方法利用亲和层析和酶切的方法纯化CCT蛋白,并用CGT蛋白筛选噬菌体12肽库.通过夹心ELISA方法分析噬菌体克隆与CCT蛋白的亲和力.通过硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定.并对阳性克隆进行测序分析.结果对肽库进行3轮筛选后,噬菌体克隆具有良好的富集效果.ELISA方法提示筛选出来的噬菌体克隆能与CCT蛋白高效结合.硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到100%,测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列:IQMPPKWPWPAA.结论从噬菌体肽库中筛选到的噬菌体短肽IQMPPKWPWPAA为探讨LMP1致瘤机理、开发抗鼻咽癌短肽药物及基因疫苗奠定了实验基础.
作者:余琳;张雪雁;杨英;马桂璋 刊期: 2006年第03期
目的为了解目前顺德、番禺、清远、增城和花都五地淡水鱼华支睾吸虫的感染情况.方法使用直接压片法和消化法对从上述5地采集的各种淡水鱼进行检查,并用分离的囊蚴感染大鼠.结果上述5个地区的淡水鱼均存在华支睾吸虫囊蚴的感染,其中以来自顺德的淡水鱼感染严重.家养鱼种和一些野生鱼均有感染,其中以鲩鱼和鳙鱼以及一些野生小鱼感染率和感染度均较高.结论广东上述五地淡水鱼华支睾吸虫的感染较为普遍和严重.
作者:黄骥;梁耀佳;林慈宽;黄志辉;冯诗韵;陈洁静;陈代雄;李小敏;沈浩贤 刊期: 2006年第03期
目的制作网络教学课件以备教学改革.方法以<临床检验基础>教科书中的前列腺液检验为主题内容,通过应用Photoshop 6.0、Fireworks 4.0、Flash 5.0为图形和动画加工编辑工具,Microsoft Access 2000为数据库,Microsoft FrontPage 2000软件、JavaScript、Active Server Page和HTML网页设计编辑工具,制作网页,开发前列腺检查网络课件.结果完成制作前列腺液检验网络课件,课件设有主题知识、课后练习、参考资料、教学素材、教师信箱、医学检验新动态、交流园地和公告栏等模块.结论该课件将有利于深化教学改革.
作者:黄海樱;陈波 刊期: 2006年第03期
目的了解犯罪嫌疑人对HIV/AIDS知识的认知程度,为这一高危人群的AIDS健康教育与行为干预提供依据.方法采用问卷调查法对某监所376名犯罪嫌疑人进行HIV/AIDS的知识认知程度和该人群的文化程度、犯罪类型、吸毒史进行调查.结果376名犯罪嫌疑人以20~40岁占78.99%为多.对AIDS基本概念认知正确率与男女性别、文化程度有关,均有显著性差异(P<0.05),但与犯罪嫌疑人是否吸毒和犯罪类型无明显关系(P>0.05).对AIDS传播途径的认知正确率以文盲者为低,其次为小学、初中者,以高中、大专者为高;在吸毒者和非吸毒者中并无差别;犯罪类型中的涉毒卖淫者对多性伴性行为认知正确率低(62.83%).结论HIV/AIDS的预防控制,应将高危人群和具有高危行为的特殊群体犯罪嫌疑人列为监测重点,在监所哨点开展HIV/AIDS知识的宣教,以降低HIV的感染率.
作者:杨萍;戴传文;刘华龙;徐金汉;卫勇彪;宋坦南;陈南萍 刊期: 2006年第03期
目的探讨东菱克栓酶(DF-521)对慢性肺源性心脏病急性加重期的疗效.方法245例慢性肺源性心脏病急性加重期的患者随机分为治疗组和常规组.两组患者均给以常规抗感染、祛痰、解痉、纠正水电解质紊乱、低流量吸氧抗心衰等综合治疗.治疗组再加用东菱克栓酶,观察治疗前后的临床疗效及实验室检查、并发症,并随后观察治疗后12周内患者的心、脑血管事件发生情况,再次入院次数等.结果治疗组总有效率(93%)大于对照组(75%),(P<0.05);实验室检查治疗前后常规组无统计学差异,而治疗组明显好转(P<0.05).常规组并发脑梗塞(7/124)明显高于治疗组(1/124)(P<0.05).结论东菱克栓酶对慢性肺心病急性发作期患者的临床症状、实验室检查及血气分析改善均有良好的效果,可作为慢性肺源性心脏病急性加重期的常规治疗方法之一.
作者:詹红;马中富;关开泮;梁艳冰;叶海宁;唐浩;荆小莉;李玉杰;廖晓星 刊期: 2006年第03期
目的比较犬、猫常见蛔虫的线粒体DNA(mtDNA)中烟酰胺脱氢酶亚基Ⅳ基因(nad4)部分序列(pnad4),以期找出它们之间的序列差异和种群遗传关系.方法抽提61个弓首属蛔虫(包括犬弓首蛔虫、猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫和犊弓首蛔虫)和狮弓蛔虫虫体的总DNA,用PCR方法扩增mtDNA pnad4,然后用SSCP技术和DNA测序对序列进行分析研究.结果犬弓首蛔虫种群内pnad4的序列差异为1.17%,与猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫和狮弓蛔虫种间的平均序列差异分别为13.92%、16.48%、15.12%和20.32%.猫弓首蛔虫种群内pnad4的序列差异为1.00%,与马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫、狮弓蛔虫平均序列差异分别是17.90%、13.55%和18.50%.马来西亚弓首蛔虫种群内pnad4序列差异为0.13%,与牛弓首蛔虫、狮弓蛔虫序列差异分别为13.50%和20.60%.结论犬弓首蛔虫不同地方虫株的pnad4有一定差异,猫弓首蛔虫种群内差异较小,马来西亚弓首蛔虫种群内差异很小.弓首属各虫种之间的差异以及与狮弓蛔虫的差异都较大.马来西亚弓首蛔虫pnad4序列与其它虫种差异都较大,证明它确为一独立种.pnad4序列是弓首蛔虫和狮弓蛔虫理想的种特异的遗传标记.
作者:李明伟;林瑞庆;曹湛;魏冬霞;邹丰才;宋慧群;朱兴全 刊期: 2006年第03期
目的研究冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用.方法以人急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的骨髓原代细胞为研究对象,以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的白血病细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪、台盼蓝染色及Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡.结果冬凌草甲素体外可明显地抑制白血病原代细胞的增殖,并能诱导细胞发生凋亡,而且呈现出明显的量-效与时-效关系.结论冬凌草甲素能有效地抑制APL细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,是一种潜在的抗白血病药物.
作者:张俊峰;刘加军;陈规划;刘培庆;林东军;肖若芝;李旭东;黄仁魏 刊期: 2006年第03期
目的探讨嗅成鞘细胞移植在皮层梗塞灶中的治疗价值.方法从成年SD大鼠嗅球取材,差异贴壁法纯化培养,移植时Hoechst 33342标记;按双肾双夹方法复制RHRSP模型,RHRSP术后10周,移植组和对照组制作MCAO模型,假手术组不电凝大脑中动脉.选择皮层梗塞10 d后的大鼠,在立体定向架上将Hoechst标记的嗅成鞘细胞植入皮层梗塞灶周围,对照治疗组则注入达乐伯克改良培养基,于移植前及移植术后第2周、第6周进行行为、触觉功能检查并从各组随机抽取7只大鼠处死,取大脑,制作冰冻切片用于荧光观察及生长相关蛋白-43及神经中丝免疫组化染色.结果移植后的OECs沿着胼胝体大量向梗塞灶及对侧皮层迁移;移植组和对照组大鼠均出现功能恢复,移植组大鼠运动、感觉功能恢复优于对照组(P<0.05);移植组和对照组都有神经纤维向梗塞中心区生长,移植组的神经纤维数量明显多于对照组(P<0.01);在移植后的第2周、第6周,移植组胼胝体区及梗塞灶相应的对侧皮层区出现GAP-43表达局部升高,其阳性信号值明显高于对照组(P<0.01);梗塞灶周围再生神经纤维的数量与运动功能评分之间存在正相关(r=0.93),P<0.01.结论OECs植入体内可以长时间存活,并有自我迁移能力;OECs移植具有明显促进脑梗塞后神经纤维再生和功能恢复的作用,胼胝体及梗塞灶对侧层的轴突再生也是移植组大鼠功能恢复的可能机制.
作者:杨志华;盛文利;沈慧勇;侯清华;李锐;曾进胜;黄如训 刊期: 2006年第03期
目的探讨给大鼠喂以低铁饲料辅以少量放血,快速建立缺铁性贫血的动物模型并观察动物营养状况及几种微量元素在脏器中的变化.方法将雌雄各半的SD大鼠随机分为两组(正常对照组:喂以正常饲料,饮用自来水;缺铁组:于塑料不锈钢笼内饲养,喂以低铁饲料,铁含量为8.01 mg/kg,饮用去离子水).每周测定血红蛋白浓度,当血红蛋白降低,确定模型建立后,每组随机取出8只大鼠,取其脏器,测定脏器系数(与体重比)及微量元素含量变化.结果缺铁性贫血大鼠的一般体态发生变化,体重明显下降.一个月后,缺铁性贫血大鼠组的血红蛋白浓度低至86.9 g/L,其红细胞及全血铁指标也有显著的下降.活杀其中的8只大鼠,取出其心脏、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏等器官测量脏器重量,计算出脏器系数值.缺铁组大鼠心脏和脾脏系数与正常组比较显著增高,差异明显,肝脏、肺脏、肾脏无明显差异.测定肝脏及大脑组织中微量元素铁、锌、硒、锰、镉、铅、铜等的含量.发现缺铁组大鼠肝脏及脑组织总铁含量明显低于正常组,锰的含量高于正常组,缺铁组肝脏铜高于正常组,脑锌含量低于正常组,其它几种元素变化不明显.结论给大鼠喂以低铁饲料辅以少量放血,可以成功建立缺铁性贫血的动物模型.其各项指标有明显的变化,尤其缺铁对脏器中微量元素含量有一定的影响.
作者:杨真;罗海吉;卢晓翠;邓红;孔亮 刊期: 2006年第03期
目的近年研究表明Rab11鸟苷三磷酸酶在调节各种真核细胞的膜转运通道中发挥着重要作用.但是,对于原生动物毛滴虫膜转运系统的研究仍甚少.本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫Rab11鸟苷三磷酸酶基因,以便进一步探讨其功能.方法使用SMART cDNA文库构建试剂盒构建阴道毛滴虫cDNA表达文库,用生物信息学进行TvRab11同源分析,鉴定TvRab11基因,用PCR方法扩增基因组DNA,TA克隆TvRab11 cDNA、测序及序列分析.结果在分离出的cDNA克隆中发现一个Rab11鸟苷三磷酸酶同源基因.该cDNA序列长710 bp,读码框含636 bp,推测蛋白质序列具211个氨基酸.序列分析表明该基因系Rab11亚家族的同源基因,其推测肽链与拟南芥Rab11c的同源性高(一致性60%,相似性79%),与人类Rab11b次之(一致性58%,相似性78%).该氨基酸序列拥有Rab鸟苷三磷酸酶家族的所有保守结构域和特异性Rab结构域(RabF1-5).进化树分析也表明该基因系Rab11的同源基因.序列分析还显示该基因的基因组DNA序列与cDNA序列完全一致,提示该基因无内含子.结论分析表明该基因是阴道毛滴虫Rab11鸟苷三磷酸酶同源基因,其功能有待进一步研究.
作者:张仁利;许铭炎;许锦阶;高世同;黄达娜;耿艺介;傅玉才 刊期: 2006年第03期
目的了解花都区伤寒流行趋势和规律,为制订防治对策提供依据.方法对花都区1990~2004年伤寒发病资料进行特点与趋势分析.结果年均发病率为3.18/10万;男性发病率高于女性,性别比例1.8:1;人群分布以农民发病数高,占病例总数36.69%;发病呈持续下降趋势,近3年来达历史低水平.结论通过采取综合防治措施,花都区伤寒防治取得良好效果.
作者:李凯;梁振波;沈秋逢;卢惠溪 刊期: 2006年第03期
目的了解住院肿瘤患者健康教育需求情况,更好地开展患者健康教育.方法采用随机整群抽样的方法,对住院肿瘤患者进行无记名的问卷调查.问卷包括4大项40小项,用EXCEL8.0建立数据库,用Spss10.0 forWindows软件进行统计学处理,采用非参数Kruskal-Wall's检验及x3检验进行分析.结果收到有效问卷193张,欢迎开展健康教育者占93.8%.对健康教育的内容以提高生活质量知识的需求为多,男性较偏重康复训练知识的需求,女性较偏重了解有关疾病的知识;患者住院期间对有关疾病的知识较关心,出院后对继续用药相关知识、饮食指导、康复训练等较关心,出院后咨询以返院咨询受欢迎,不同年龄、职业、文化程度、病种和科室的患者所需求的健康教育内容无差异.结论住院肿瘤患者渴望健康教育.健康教育的方式应因人而异,健康教育应贯穿于医疗、护理和康复过程中,有效提高患者的治疗质量和生存质量.
作者:邱卫黎;黄华兰;蔡秀英;丘德林;辛丽华;江敏霞 刊期: 2006年第03期
目的了解广州市东山、荔湾、越秀、海珠区公务员、医务人员及银行等职业人群的华支睾吸虫病分布状况及流行特点,为今后制定防治策略提供依据.方法用改良加藤氏厚涂片法粪检华支睾吸虫虫卵.结果4个区共粪检1 204人,华支睾吸虫感染150人,感染率为12.46%.远高于全国感染率(0.40%)和1998~2003广州市平均感染率(6.59%).结论这4个区部分职业人群华支睾吸虫感染率较高,应加强宣教工作,改变人们的不良饮食习惯,提高个人防护意识;采取综合防制措施,阻断华支睾吸虫传播流行.
作者:冯月菊;周端华;刘小宁;潘志明;任文锋;高雨藩;郭荣同 刊期: 2006年第03期
目的克隆A型流感病毒株Swine/Henan/703/2001(H3N2)的核蛋白(NP)基因序列并构建重组质粒.方法采用逆转录聚合酶链式反应技术从病毒株基因组中扩增出编码核蛋白的基因序列,克隆至pGEM-T Easy载体,经蓝白筛选、菌落PCR及酶切鉴定挑取阳性克隆并测序.结果利用RT-PCR扩增到目的基因片段,并将其克隆至T载体.结论成功构建重组质粒pGEM-T Easy-NP,为NP相关功能及流感疫苗的进一步研究奠定实验基础.
作者:马一君;藏文巧;王红炜;胡军;杜献堂 刊期: 2006年第03期