杨真；罗海吉；卢晓翠；邓红；孔亮
目的通过将发生点突变的两个大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因进行改造,获得具有正确序列的OSCP基因,在大肠杆菌中表达并进行活性鉴定.方法通过限制性核酸内切酶和T4DNA连接酶将发生错义突变的两个OSCP基因的DNA克隆进行改造,获得具有正确核苷酸序列的OSCP基因;然后将该片段连接进原核表达载体pET-28c(+),构建成重组质粒PET-28c(+)-OSCP;用该重组质粒转化E.coli,转化子在37℃诱导表达相应的融合蛋白,通过Western-blot鉴定.结果酶切及测序显示对OSCP基因错义突变的纠正获得成功.酶切结果显示成功构建了原核表达载体pET-28c(+)-OSCP.IPTG诱导表达4 h后,SDS-PAGE及Western-blot显示诱导表达出分子量约23 000的大鼠寡霉素敏感相关蛋白,且该蛋白具有免疫活性.结论在国内初次表达出大鼠OSCP,表达产物具有免疫反应性,为OSCP的结构及功能研究奠定了基础.
作者：王海龙；王春芳；赵嘉惠；殷国荣；乔中东 刊期： 2006年第03期
目的探讨黄胸鼠体表革螨的雌雄性比及生活史各期年龄构成.方法现场随机抽样调查及常规分类鉴定,以从小型哺乳动物黄胸鼠体表分离鉴定出数量较多的革螨作为重点研究对象.结果从1990年至2004年在云南省境内共调查了25个县(市),捕获黄胸鼠3 765只,从3 765只黄胸鼠体表采集革螨18 250只,经分类鉴定隶属于9科17属40种.其中有7种革螨采集数量较大,分别是纳氏厉螨10 667只、毒厉螨5 124只、柏氏禽刺螨1 286只、鼠颚毛厉螨218只、鼠拟脂刺螨215只、矮肛厉螨162只、鼩鼱赫刺螨131只,其他33种革螨采集数量均小于100只.7种主要革螨的雌性比例(78.61%～100%)明显超过其雄性比例(0～21.39%),有些革螨还采集到幼虫,前若虫及后若虫(但数量均较少),只有柏氏禽刺螨的幼期比例较高(72.01%).结论在多数革螨的自然种群中,雄性个体明显少于雌性个体,可能与革螨的孤雌生殖有关;专性吸血的柏氏禽刺螨生活史各期都可寄生在黄胸鼠体表.
作者：罗礼溥；郭宪国 刊期： 2006年第03期
目的构建表达人基质金属蛋白酶-11(MMP-11)N-端肽段的重组原核表达载体pGEX-5X-3/MMP-11,获得人源性MMP-11融合蛋白.方法应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从正常人子宫内膜组织扩增目的基因片段,利用体外基因重组技术将目的基因片段连接到原核表达载体pGEX-5X-3上构成重组的原核表达载体pGEX-5X-3/MMP-11,并通过酶切和测序进行鉴定.将重组质粒转化人大肠杆菌DH5a后挑选阳性克隆,用异丙基硫代半乳糖苷诱导其融合蛋白的表达并进行纯化.结果RT-PCR获得预期大小的特异性DNA片段,经双酶切鉴定及测序证实已将人基质金属蛋白酶-11N-端肽段的cDNA片段正确插入原核表达载体中.融合表达产物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,证实相对分子量大小为4 550.结论成功构建了表达人MMP-11N-端肽段的重组原核表达载体pGEX-5X-3/MMP-11,获得相对分子量为4 550的GST-MMP-11融合蛋白,为进一步制备抗人MMP-11抗体及其在临床中进一步推广应用于恶性肿瘤的快速诊断及临床疗效的评价奠定了基础.
作者：郑晶；陆惠玲；刘加军；陈森；吕德坚；孙宏钰 刊期： 2006年第03期
目的分析疟疾防治后期流行病学特征及监测结果,为制订防治策略提供依据.方法收集1980～2004年湖南省各县、市疟疾疫情资料、发热病人血检、荧光抗体检测以及媒介资料进行回顾性研究.结果全省疟疾发病率由1980年的89.27/10万至2004年下降为0.19/10万,发热病人血检阳性率由1980年的2.73%至2004年下降为0.06%;近3年本地居民未查见带虫者;1990年以来湖南省感染病例逐年减少,输入疟疾为主,分别占病例总数的6.51%和93.49%;中华按蚊为唯一的传疟媒介.结论当前湖南省疟疾以输入病例为主,年发病率已连续9年控制在1/10万以下,疟疾疫情相对稳定.
作者：段绩辉；庄世锋；邓胜平；张湘君；李正祥；郑军；龙浩宇；王郭清 刊期： 2006年第03期
目的探讨淋球菌mtrR启动子区域回文序列基因突变与多重耐药之间的关系.方法采用纸片扩散法检测56株淋球菌对五种抗生素的敏感性.以PCR扩增mtrR启动子区域中包含有13个碱基回文序列在内的157个碱基,并进行SSCP(单链构象多态性)分析.根据SSCP的结果,选取12株标本进行测序分析,将其核苷酸序列与标准敏感株ATCC19424进行比较.结果56株细菌中有5株对五种抗生素都敏感,对一种抗生素耐药的有22株,对两种抗生素耐药的有19株,其中有2株mtrR启动子区域中回文序列基因发生了突变;对三种抗生素、四种抗生素和五种抗生素耐药的株菌分别是7株、2株和1株,它们的mtrR启动子区域中回文序列基因均发生了突变.并且这12株标本突变的类型一致,在13个碱基的回文序列中发生了单个A/T碱基的缺失.结论mtrR启动子区域中回文序列基因突变介导淋球菌的多重耐药,回文序列单个A/T碱基的缺失与淋球菌多重耐药有密切的关系.
作者：彭运生；袁建辉；徐立中；潘春燕；钟素霞；汪小娟 刊期： 2006年第03期
目的为了解目前顺德、番禺、清远、增城和花都五地淡水鱼华支睾吸虫的感染情况.方法使用直接压片法和消化法对从上述5地采集的各种淡水鱼进行检查,并用分离的囊蚴感染大鼠.结果上述5个地区的淡水鱼均存在华支睾吸虫囊蚴的感染,其中以来自顺德的淡水鱼感染严重.家养鱼种和一些野生鱼均有感染,其中以鲩鱼和鳙鱼以及一些野生小鱼感染率和感染度均较高.结论广东上述五地淡水鱼华支睾吸虫的感染较为普遍和严重.
作者：黄骥；梁耀佳；林慈宽；黄志辉；冯诗韵；陈洁静；陈代雄；李小敏；沈浩贤 刊期： 2006年第03期
目的于真核细胞系CHO细胞中表达人源性抗-D基因工程抗体,为人源性抗-D基因工程抗体在临床上的应用打下坚实的基础.方法脂质体法将真核表达载体pAH4604/VH和pAG4622/VL共转染体外培养的CHO细胞,经霉酚酸及组氨醇筛选阳性克隆细胞.通过ELISA法检测培养上清中人IgG的表达量.应用化学发光Western Blotting法对真核表达载体pAH4604/VH和pAG4622/VL在CHO细胞中的表达进行鉴定.结果pAH4604/VH和pAG4622/VL共转染体外培养的CHO细胞,经霉酚酸及组氨醇筛选12～14 d后有阳性克隆长出,未转染细胞则全部死亡.筛选出的各阳性细胞克隆经扩大培养及ELISA定量检测其上清人IgG含量高为4.05 ng/nl.Western Blotting显示上清和细胞内均有人IgG重链和轻链的表达.结论所构建的真核表达载体pAH4604/VH和pAG4622/VL在CHO真核细胞系表达成功,可产生人源化的IgG重链和轻链.
作者：曹开源；徐霖；付涌水；袁广卿；黄小荣 刊期： 2006年第03期
目的建立一种简捷、准确、快速检测食品过敏原的方法.分析花生总蛋白2-DE(2-dimensionelectrophoresis)指纹图谱与蛋白点MALDI-TOF/MS分析联用的可行性.方法新鲜生花生去皮搅碎后丙酮去脂,PBS抽提总蛋白,冻干得初提样品,试剂盒精提,双向电泳IEF选择11cm非线性胶条(pH=3-10)溶胀上样,平衡后转移胶条在电泳槽中进行第二向SDS-PAGE垂直电泳(10%),考染后扫描图像进行计算机分析处理,同时在胶上任意选择两个蛋白点切胶、脱色、消化后进行MALDI-TOF/MS分析.结果2-DE指纹谱图显示花生总蛋白的分布范围较窄,主要是一些中、小分子量的中性、弱酸和弱碱性蛋白,用PDQuest 2-D Analysis分析软件对此2-DE图谱分析可以发现其中共有178个特征性蛋白点.以花生总蛋白2-DE指纹图谱为基础,进一步对单个蛋白点进行MALDI-TOF/MS指纹图谱分析,结果显示每一个蛋白点都具有自己特征的分子量峰和图谱形状,无需进行肽片段混合物的分析、检索亦可完全区分不同的蛋白点,从而可以对食品过敏原进行更深入、更准确的指纹图谱检测.结论食品过敏原总蛋白2-DE指纹图谱与蛋白点MALDI-TOF/MS指纹图谱分析联用可以更好的进行食品过敏原指纹图谱快速检测研究.
作者：吴海强；余晓；刘志刚 刊期： 2006年第03期
目的了解住院肿瘤患者健康教育需求情况,更好地开展患者健康教育.方法采用随机整群抽样的方法,对住院肿瘤患者进行无记名的问卷调查.问卷包括4大项40小项,用EXCEL8.0建立数据库,用Spss10.0 forWindows软件进行统计学处理,采用非参数Kruskal-Wall's检验及x3检验进行分析.结果收到有效问卷193张,欢迎开展健康教育者占93.8%.对健康教育的内容以提高生活质量知识的需求为多,男性较偏重康复训练知识的需求,女性较偏重了解有关疾病的知识;患者住院期间对有关疾病的知识较关心,出院后对继续用药相关知识、饮食指导、康复训练等较关心,出院后咨询以返院咨询受欢迎,不同年龄、职业、文化程度、病种和科室的患者所需求的健康教育内容无差异.结论住院肿瘤患者渴望健康教育.健康教育的方式应因人而异,健康教育应贯穿于医疗、护理和康复过程中,有效提高患者的治疗质量和生存质量.
作者：邱卫黎；黄华兰；蔡秀英；丘德林；辛丽华；江敏霞 刊期： 2006年第03期
目的探讨自体骨髓干细胞肝门静脉移植对猕猴急性肝损伤的治疗作用和为人类肝损伤治疗提供依据和方法.方法猕猴10只,随机分为实验组和对照组,每日皮下注射40%CCL4 0.8 ml/kg,连续注射4 d,经肝功能生化指标检测及肝穿组织病理学观察确认肝损伤后,分离实验组猴的自体骨髓单个核细胞,按3×108细胞/kg将骨髓细胞植入肝门静脉,植入后60 d进行肝功能相关指标检测及组织病理学观察.结果连续注射CCL4 4 d后,血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、球蛋白(GLOB)(P＜0.001),而总蛋白(TP)和白蛋白含量无变化(P＞0.05),肝组织结构紊乱,大量肝细胞坏死,部分细胞变性,水肿,汇管区及周围有大量炎性细胞浸润.骨髓细胞肝门静脉移植后60 d,血清AST、ALT活性和GLOB、BIL含量显著低于对照组(P＜0.05),而TP、ALB、LDL含量高于对照组(P＜0.05),病理组织学观察结构清楚,而对照组有纤维增生和肝细胞有脂肪变性.结论自体骨髓细胞肝门静脉移植能对猕猴急性肝损伤有明显治疗作用,可改善急性肝损伤猕猴的肝功能及组织结构,提示该方法可能对人类急性肝损伤有一定治疗意义.
作者：潘兴华；庞荣清；陈系古；刘建昆；何占龙；王惠萱；张步振；王鹤桦；杨勇琴；屈璐 刊期： 2006年第03期
目的筛选能与EBV LMP1 CCT蛋白高效结合的短肽.方法利用亲和层析和酶切的方法纯化CCT蛋白,并用CGT蛋白筛选噬菌体12肽库.通过夹心ELISA方法分析噬菌体克隆与CCT蛋白的亲和力.通过硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定.并对阳性克隆进行测序分析.结果对肽库进行3轮筛选后,噬菌体克隆具有良好的富集效果.ELISA方法提示筛选出来的噬菌体克隆能与CCT蛋白高效结合.硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到100%,测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列:IQMPPKWPWPAA.结论从噬菌体肽库中筛选到的噬菌体短肽IQMPPKWPWPAA为探讨LMP1致瘤机理、开发抗鼻咽癌短肽药物及基因疫苗奠定了实验基础.
作者：余琳；张雪雁；杨英；马桂璋 刊期： 2006年第03期
目的了解犯罪嫌疑人对HIV/AIDS知识的认知程度,为这一高危人群的AIDS健康教育与行为干预提供依据.方法采用问卷调查法对某监所376名犯罪嫌疑人进行HIV/AIDS的知识认知程度和该人群的文化程度、犯罪类型、吸毒史进行调查.结果376名犯罪嫌疑人以20～40岁占78.99%为多.对AIDS基本概念认知正确率与男女性别、文化程度有关,均有显著性差异(P＜0.05),但与犯罪嫌疑人是否吸毒和犯罪类型无明显关系(P＞0.05).对AIDS传播途径的认知正确率以文盲者为低,其次为小学、初中者,以高中、大专者为高;在吸毒者和非吸毒者中并无差别;犯罪类型中的涉毒卖淫者对多性伴性行为认知正确率低(62.83%).结论HIV/AIDS的预防控制,应将高危人群和具有高危行为的特殊群体犯罪嫌疑人列为监测重点,在监所哨点开展HIV/AIDS知识的宣教,以降低HIV的感染率.
作者：杨萍；戴传文；刘华龙；徐金汉；卫勇彪；宋坦南；陈南萍 刊期： 2006年第03期
目的探讨给大鼠喂以低铁饲料辅以少量放血,快速建立缺铁性贫血的动物模型并观察动物营养状况及几种微量元素在脏器中的变化.方法将雌雄各半的SD大鼠随机分为两组(正常对照组:喂以正常饲料,饮用自来水;缺铁组:于塑料不锈钢笼内饲养,喂以低铁饲料,铁含量为8.01 mg/kg,饮用去离子水).每周测定血红蛋白浓度,当血红蛋白降低,确定模型建立后,每组随机取出8只大鼠,取其脏器,测定脏器系数(与体重比)及微量元素含量变化.结果缺铁性贫血大鼠的一般体态发生变化,体重明显下降.一个月后,缺铁性贫血大鼠组的血红蛋白浓度低至86.9 g/L,其红细胞及全血铁指标也有显著的下降.活杀其中的8只大鼠,取出其心脏、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏等器官测量脏器重量,计算出脏器系数值.缺铁组大鼠心脏和脾脏系数与正常组比较显著增高,差异明显,肝脏、肺脏、肾脏无明显差异.测定肝脏及大脑组织中微量元素铁、锌、硒、锰、镉、铅、铜等的含量.发现缺铁组大鼠肝脏及脑组织总铁含量明显低于正常组,锰的含量高于正常组,缺铁组肝脏铜高于正常组,脑锌含量低于正常组,其它几种元素变化不明显.结论给大鼠喂以低铁饲料辅以少量放血,可以成功建立缺铁性贫血的动物模型.其各项指标有明显的变化,尤其缺铁对脏器中微量元素含量有一定的影响.
作者：杨真；罗海吉；卢晓翠；邓红；孔亮 刊期： 2006年第03期
目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)和胱硫醚-β合成酶基因CBS 844ins 68基因多态性与阿尔茨海默病(alheimer disease,AD)的关系.方法运用多聚酶链反应技术和荧光偏振法(FPIA)检测66例阿尔茨海默病及143例正常人CBS 844ins 68基因多态性和血浆总Hcy水平.结果AD组CBS844ins 68 D/D、D/I、I/I基因型频率(%)分别为78.79、19.69、1.52,对照组分别为78.32、18.88、2.8,CBS844ins 68各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无显著性(P＞0.05).AD病例组与对照组血浆Hcy分别为(14.72±6.2)μmol/L和(10.9±2.4)μmol/L,两者差异有显著性(P＜O.05).AD患者血浆总Hcy水平显著高于正常组.结论胱硫醚-β合成酶多态性与AD无明显相关,高同型半胱氨酸血症与Alzheimer病发生有一定关系.
作者：黄绍宽；陈盛强；王延平；柳息洪 刊期： 2006年第03期
目的研究冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用.方法以人急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的骨髓原代细胞为研究对象,以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的白血病细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪、台盼蓝染色及Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡.结果冬凌草甲素体外可明显地抑制白血病原代细胞的增殖,并能诱导细胞发生凋亡,而且呈现出明显的量-效与时-效关系.结论冬凌草甲素能有效地抑制APL细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,是一种潜在的抗白血病药物.
作者：张俊峰；刘加军；陈规划；刘培庆；林东军；肖若芝；李旭东；黄仁魏 刊期： 2006年第03期
由双链RNA介导的RNA干涉(RNA interference,RNAi)又称为转录后基因沉默(post transcriptional silencing,PTGS),其实质是在生物体中导人双链RNA,特异性地降解相应序列的mRNA,从而阻断相应基因表达,即引起生物体内同源基因沉默(gene silencing).RNAi已被证明是破译各种生物中的基因功能的强大工具,并将为新型高效药物开发和基因治疗的发展开辟新的领域.
作者：杨海燕；宁云山；董文其 刊期： 2006年第03期
目的探讨嗅成鞘细胞移植在皮层梗塞灶中的治疗价值.方法从成年SD大鼠嗅球取材,差异贴壁法纯化培养,移植时Hoechst 33342标记;按双肾双夹方法复制RHRSP模型,RHRSP术后10周,移植组和对照组制作MCAO模型,假手术组不电凝大脑中动脉.选择皮层梗塞10 d后的大鼠,在立体定向架上将Hoechst标记的嗅成鞘细胞植入皮层梗塞灶周围,对照治疗组则注入达乐伯克改良培养基,于移植前及移植术后第2周、第6周进行行为、触觉功能检查并从各组随机抽取7只大鼠处死,取大脑,制作冰冻切片用于荧光观察及生长相关蛋白-43及神经中丝免疫组化染色.结果移植后的OECs沿着胼胝体大量向梗塞灶及对侧皮层迁移;移植组和对照组大鼠均出现功能恢复,移植组大鼠运动、感觉功能恢复优于对照组(P＜0.05);移植组和对照组都有神经纤维向梗塞中心区生长,移植组的神经纤维数量明显多于对照组(P＜0.01);在移植后的第2周、第6周,移植组胼胝体区及梗塞灶相应的对侧皮层区出现GAP-43表达局部升高,其阳性信号值明显高于对照组(P＜0.01);梗塞灶周围再生神经纤维的数量与运动功能评分之间存在正相关(r=0.93),P＜0.01.结论OECs植入体内可以长时间存活,并有自我迁移能力;OECs移植具有明显促进脑梗塞后神经纤维再生和功能恢复的作用,胼胝体及梗塞灶对侧层的轴突再生也是移植组大鼠功能恢复的可能机制.
作者：杨志华；盛文利；沈慧勇；侯清华；李锐；曾进胜；黄如训 刊期： 2006年第03期
目的了解花都区伤寒流行趋势和规律,为制订防治对策提供依据.方法对花都区1990～2004年伤寒发病资料进行特点与趋势分析.结果年均发病率为3.18/10万;男性发病率高于女性,性别比例1.8:1;人群分布以农民发病数高,占病例总数36.69%;发病呈持续下降趋势,近3年来达历史低水平.结论通过采取综合防治措施,花都区伤寒防治取得良好效果.
作者：李凯；梁振波；沈秋逢；卢惠溪 刊期： 2006年第03期
目的了解男性吸毒人群中HBV、HCV重叠感染影响因素,为预防HBV、HGV提供科学依据.方法采用现况调查的方法,通过整群抽样,以问卷调查方式,随机抽取男性吸毒人员452名,收集有关资料并采集血标本452份.以ELISA方法检测血清中的HBV表面抗原与HCV抗体,用SPSS1.0进行数据统计分析.结果男性吸毒者HBV、HCV重叠感染率为29.46%,单因素分析:吸毒方式、注射频率、戒毒次数的HBV与HCV重叠感染有具有显著性差异(P＜0.05),而不同职业、地区、吸毒年限、性行为等的HBV与HCV重叠感染率无显著性差异(P＞0.05).多因素分析:职业、吸毒年限、每天吸毒次数、戒毒次数、性行为是否用安全套、性伙伴是否患有肝炎、曾是否接受血液制品、接受血液制品次数等8个因素的HBV与HCV重叠感染率差异有显著性.结论男性吸毒人群是HBV与HCV感染的高危人群,并与吸毒方式、吸毒年限、性行为等因素有关.
作者：龚文波；黄民主；关岚；刘浩；戴卫平 刊期： 2006年第03期
目的观察大蒜素对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的预防效果.方法地塞米松连续肌肉注射Wistar大鼠,建立大鼠肺孢子虫肺炎动物模型.于模型诱导第3周起给予大蒜素治疗,剂量10 mg/(kg·d),连续5 d,后腿肌肉深部注射,以后每隔2周重复治疗一次,第10周末剖杀,同时设复方新诺明预防对照组和PCP模型对照组.以各组大鼠肺重、肺重/体重比值、Pc感染率、肺印片中每100个油镜视野肺孢子虫包囊均数等指标考核疗效.结果大蒜素预防组大鼠肺重(1.89±0.28)、肺重/体重比值(0.94±0.12)、Pc感染率(73.33%)、肺印片中每100个油镜视野肺孢子虫包囊均数(15.39±10.46)均明显低于PCP模型对照组(P＜0.05或P＜0.01),而与复方新诺明预防对照组无显著性差异(P＞0.05).结论大蒜素对实验大鼠卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)有一定的预防和保护作用,预防效果与复方新诺明接近.
作者：张振明；卢致民；张进顺；唐宏炜；刘金花 刊期： 2006年第03期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
