学术投稿

冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用

张俊峰;刘加军;陈规划;刘培庆;林东军;肖若芝;李旭东;黄仁魏

关键词:冬凌草甲素, 白血病, 原代细胞, 细胞凋亡
摘要:目的研究冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用.方法以人急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的骨髓原代细胞为研究对象,以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的白血病细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪、台盼蓝染色及Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡.结果冬凌草甲素体外可明显地抑制白血病原代细胞的增殖,并能诱导细胞发生凋亡,而且呈现出明显的量-效与时-效关系.结论冬凌草甲素能有效地抑制APL细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,是一种潜在的抗白血病药物.
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  • 急诊PCI术后血栓前状态对术后并发症的预测

    目的观察急诊经皮冠状动脉介入术后血栓前状态与术后冠脉并发症的关系.方法选择2003年至2005年期间50例因急性心肌梗死(AMI)在佛山市第二人民医院行急诊经皮冠状动脉介入术(PCI)的患者,于急诊PCI术后24 h内抽取静脉血测定血栓前状态指标D-D和PAT,所有患者观察28 d,根据术后有无严重冠脉并发症将患者分为两组,并发症组(A组)和非并发症组(B组),回顾性分析A、B两组的血栓前状态指标D-D和PAT,评价急诊PCI术后血栓前状态指标D-D和PAT与术后冠脉并发症的关系.结果所有50例AMI患者的血栓前状态指标D-D和PAT均较正常值升高,其中A组术后24 h内D-D为(1.8±0.4)ng/L,B组D-D为(0.8±0.2)ng/L,B组明显低于A组(P<0.001);A组术后24h内PAT为(44±10)s,B组PAT为(16±5)s,B组明显低于A组(P<0.01).结论急诊PCI术后血栓前状态指标D-D和PAT较正常值升高,D-D和PAT升高的水平是术后严重冠脉并发症的预测指标,积极降低D-D和PAT水平有可能明显降低术后严重冠脉并发症的发生率.

    作者:梁健球;吴庆庆;余永卫;徐宁;黄永光 刊期: 2006年第03期

  • 云南省25县(市)黄胸鼠体表革螨性比及年龄构成分析

    目的探讨黄胸鼠体表革螨的雌雄性比及生活史各期年龄构成.方法现场随机抽样调查及常规分类鉴定,以从小型哺乳动物黄胸鼠体表分离鉴定出数量较多的革螨作为重点研究对象.结果从1990年至2004年在云南省境内共调查了25个县(市),捕获黄胸鼠3 765只,从3 765只黄胸鼠体表采集革螨18 250只,经分类鉴定隶属于9科17属40种.其中有7种革螨采集数量较大,分别是纳氏厉螨10 667只、毒厉螨5 124只、柏氏禽刺螨1 286只、鼠颚毛厉螨218只、鼠拟脂刺螨215只、矮肛厉螨162只、鼩鼱赫刺螨131只,其他33种革螨采集数量均小于100只.7种主要革螨的雌性比例(78.61%~100%)明显超过其雄性比例(0~21.39%),有些革螨还采集到幼虫,前若虫及后若虫(但数量均较少),只有柏氏禽刺螨的幼期比例较高(72.01%).结论在多数革螨的自然种群中,雄性个体明显少于雌性个体,可能与革螨的孤雌生殖有关;专性吸血的柏氏禽刺螨生活史各期都可寄生在黄胸鼠体表.

    作者:罗礼溥;郭宪国 刊期: 2006年第03期

  • 大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因的改造及在大肠杆菌中的表达

    目的通过将发生点突变的两个大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因进行改造,获得具有正确序列的OSCP基因,在大肠杆菌中表达并进行活性鉴定.方法通过限制性核酸内切酶和T4DNA连接酶将发生错义突变的两个OSCP基因的DNA克隆进行改造,获得具有正确核苷酸序列的OSCP基因;然后将该片段连接进原核表达载体pET-28c(+),构建成重组质粒PET-28c(+)-OSCP;用该重组质粒转化E.coli,转化子在37℃诱导表达相应的融合蛋白,通过Western-blot鉴定.结果酶切及测序显示对OSCP基因错义突变的纠正获得成功.酶切结果显示成功构建了原核表达载体pET-28c(+)-OSCP.IPTG诱导表达4 h后,SDS-PAGE及Western-blot显示诱导表达出分子量约23 000的大鼠寡霉素敏感相关蛋白,且该蛋白具有免疫活性.结论在国内初次表达出大鼠OSCP,表达产物具有免疫反应性,为OSCP的结构及功能研究奠定了基础.

    作者:王海龙;王春芳;赵嘉惠;殷国荣;乔中东 刊期: 2006年第03期

  • 同型半胱氨酸和胱硫醚-β合成酶基因多态性与Alzheimer病的关系

    目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)和胱硫醚-β合成酶基因CBS 844ins 68基因多态性与阿尔茨海默病(alheimer disease,AD)的关系.方法运用多聚酶链反应技术和荧光偏振法(FPIA)检测66例阿尔茨海默病及143例正常人CBS 844ins 68基因多态性和血浆总Hcy水平.结果AD组CBS844ins 68 D/D、D/I、I/I基因型频率(%)分别为78.79、19.69、1.52,对照组分别为78.32、18.88、2.8,CBS844ins 68各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无显著性(P>0.05).AD病例组与对照组血浆Hcy分别为(14.72±6.2)μmol/L和(10.9±2.4)μmol/L,两者差异有显著性(P<O.05).AD患者血浆总Hcy水平显著高于正常组.结论胱硫醚-β合成酶多态性与AD无明显相关,高同型半胱氨酸血症与Alzheimer病发生有一定关系.

    作者:黄绍宽;陈盛强;王延平;柳息洪 刊期: 2006年第03期

  • 犯罪嫌疑人HIV/AIDS知识认知程度调查

    目的了解犯罪嫌疑人对HIV/AIDS知识的认知程度,为这一高危人群的AIDS健康教育与行为干预提供依据.方法采用问卷调查法对某监所376名犯罪嫌疑人进行HIV/AIDS的知识认知程度和该人群的文化程度、犯罪类型、吸毒史进行调查.结果376名犯罪嫌疑人以20~40岁占78.99%为多.对AIDS基本概念认知正确率与男女性别、文化程度有关,均有显著性差异(P<0.05),但与犯罪嫌疑人是否吸毒和犯罪类型无明显关系(P>0.05).对AIDS传播途径的认知正确率以文盲者为低,其次为小学、初中者,以高中、大专者为高;在吸毒者和非吸毒者中并无差别;犯罪类型中的涉毒卖淫者对多性伴性行为认知正确率低(62.83%).结论HIV/AIDS的预防控制,应将高危人群和具有高危行为的特殊群体犯罪嫌疑人列为监测重点,在监所哨点开展HIV/AIDS知识的宣教,以降低HIV的感染率.

    作者:杨萍;戴传文;刘华龙;徐金汉;卫勇彪;宋坦南;陈南萍 刊期: 2006年第03期

  • 嗅成鞘细胞移植治疗脑梗塞大鼠的实验研究

    目的探讨嗅成鞘细胞移植在皮层梗塞灶中的治疗价值.方法从成年SD大鼠嗅球取材,差异贴壁法纯化培养,移植时Hoechst 33342标记;按双肾双夹方法复制RHRSP模型,RHRSP术后10周,移植组和对照组制作MCAO模型,假手术组不电凝大脑中动脉.选择皮层梗塞10 d后的大鼠,在立体定向架上将Hoechst标记的嗅成鞘细胞植入皮层梗塞灶周围,对照治疗组则注入达乐伯克改良培养基,于移植前及移植术后第2周、第6周进行行为、触觉功能检查并从各组随机抽取7只大鼠处死,取大脑,制作冰冻切片用于荧光观察及生长相关蛋白-43及神经中丝免疫组化染色.结果移植后的OECs沿着胼胝体大量向梗塞灶及对侧皮层迁移;移植组和对照组大鼠均出现功能恢复,移植组大鼠运动、感觉功能恢复优于对照组(P<0.05);移植组和对照组都有神经纤维向梗塞中心区生长,移植组的神经纤维数量明显多于对照组(P<0.01);在移植后的第2周、第6周,移植组胼胝体区及梗塞灶相应的对侧皮层区出现GAP-43表达局部升高,其阳性信号值明显高于对照组(P<0.01);梗塞灶周围再生神经纤维的数量与运动功能评分之间存在正相关(r=0.93),P<0.01.结论OECs植入体内可以长时间存活,并有自我迁移能力;OECs移植具有明显促进脑梗塞后神经纤维再生和功能恢复的作用,胼胝体及梗塞灶对侧层的轴突再生也是移植组大鼠功能恢复的可能机制.

    作者:杨志华;盛文利;沈慧勇;侯清华;李锐;曾进胜;黄如训 刊期: 2006年第03期

  • 医学遗传学课程在药学教育中的思考和深化

    医学遗传学课程是医药院校开展教育培养的重要基础课程,对于21世纪药学生的基础科学素质和能力素质的培养具有重要作用.随着分子生物学等现代科学技术的发展,要求在医学遗传学课程的教育方面注入新的活力和思想,本文对医学遗传学课程在药学教育中所应发展和建设的方向进行了概括和探讨,以期在今后的教学工作中明确方向,抓住机遇,全面提高教学质量.

    作者:张咏莉;李红枝;黄清松;陈红梅;李白霓;丘淑玲 刊期: 2006年第03期

  • 抗日本血吸虫病天然分子疫苗免疫猪血清筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库结果分析

    目的通过天然分子疫苗免疫猪血清作为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,应用表达序列标签获得日本血吸虫新基因.方法制备天然分子免疫猪血清,将筛选的尾蚴cDNA文库中大肠杆菌XL1-Blue侵入大肠杆菌BM25.8后环化成质粒,筛选出已转入质粒的菌株.提取质粒DNA,进行测序,得到一个表达序列标签(EST).通过NCBI网站的BLASTx及BLASTn公共数据库,编辑分析EST序列并进行同源性比较.结果从26个克隆样品中筛选出8个阳性克隆,其中有一个新基因(GenBank登录号DQ097517),该基因全长861 bp,有完整的阅读框架,与蜜蜂(Apis mellifera)SMC3蛋白编码的mRNA基因序列同源性高.结论疫苗免疫猪血清可作为筛选日本血吸虫新基因的有效探针,新发现1个日本血吸虫相关基因.

    作者:曾少华;吕志跃;汪世平;张加祥;陈晓光;周松华;刘雪琴;李文凯;姜孝新;肖小芹;徐绍锐;彭先楚 刊期: 2006年第03期

  • 阴道毛滴虫Rab11鸟苷三磷酸酶cDNA克隆和序列分析

    目的近年研究表明Rab11鸟苷三磷酸酶在调节各种真核细胞的膜转运通道中发挥着重要作用.但是,对于原生动物毛滴虫膜转运系统的研究仍甚少.本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫Rab11鸟苷三磷酸酶基因,以便进一步探讨其功能.方法使用SMART cDNA文库构建试剂盒构建阴道毛滴虫cDNA表达文库,用生物信息学进行TvRab11同源分析,鉴定TvRab11基因,用PCR方法扩增基因组DNA,TA克隆TvRab11 cDNA、测序及序列分析.结果在分离出的cDNA克隆中发现一个Rab11鸟苷三磷酸酶同源基因.该cDNA序列长710 bp,读码框含636 bp,推测蛋白质序列具211个氨基酸.序列分析表明该基因系Rab11亚家族的同源基因,其推测肽链与拟南芥Rab11c的同源性高(一致性60%,相似性79%),与人类Rab11b次之(一致性58%,相似性78%).该氨基酸序列拥有Rab鸟苷三磷酸酶家族的所有保守结构域和特异性Rab结构域(RabF1-5).进化树分析也表明该基因系Rab11的同源基因.序列分析还显示该基因的基因组DNA序列与cDNA序列完全一致,提示该基因无内含子.结论分析表明该基因是阴道毛滴虫Rab11鸟苷三磷酸酶同源基因,其功能有待进一步研究.

    作者:张仁利;许铭炎;许锦阶;高世同;黄达娜;耿艺介;傅玉才 刊期: 2006年第03期

  • 超声诊断华支睾吸虫病的临床意义探讨

    目的探讨超声诊断华支睾吸虫病的临床意义.方法通过对华支睾吸虫病超声声像图诊断分析与粪便查虫卵作对照.结果61例华支睾吸虫病患者,有53例(占86.9%)超声检查肝胆系统有特异性改变.肝内中、小胆管弥漫性轻度扩张,管壁不均匀性增厚,回声增强,不同切面呈现小点状、小等号状、斑状、条索状等形态各异的强回声,后方无声影.结论超声检查可作为华支睾吸虫病的快捷而准确的影像学首选诊断方法,具有重要的临床实用价值.

    作者:林萍;王筱芳;苏建平;刘国江;江泽良;崔一萍;丁辉 刊期: 2006年第03期

  • 博罗县2000~2004年法定传染病疫情分析

    目的分析博罗县近5年法定传染病的发生、发展及其变化趋势,为制订今后疾病预防控制策略提供科学依据.方法对博罗县2000~2004年法定传染病疫情报告资料进行统计分析.结果博罗县5年法定传染病总发病数3 953例,年平均年发病率106.32/10万;无甲类传染病报告;乙类传染病5年共报告3 735例,年平均发病率100.46/10万,丙类传染病5年共报告218例,年平均发病率为5.86/10万;5年中报告的主要传染病种为肺结核、乙型肝炎、流行性腮腺炎、痢疾、淋病、麻疹、狂犬病.结论博罗县近5年中传染病发病全部为乙、丙类,且绝大部分为呼吸道传染病和血源及性传染病,导致死亡的传染病以狂犬病为主.未来传染病防治工作应以加强呼吸道传染病、血液及性传染病、狂犬病、艾滋病等的预防控制为重点.

    作者:邓寿平;杨科明;游良珍 刊期: 2006年第03期

  • EB病毒LMP1 CCT蛋白特异性结合短肽的筛选

    目的筛选能与EBV LMP1 CCT蛋白高效结合的短肽.方法利用亲和层析和酶切的方法纯化CCT蛋白,并用CGT蛋白筛选噬菌体12肽库.通过夹心ELISA方法分析噬菌体克隆与CCT蛋白的亲和力.通过硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定.并对阳性克隆进行测序分析.结果对肽库进行3轮筛选后,噬菌体克隆具有良好的富集效果.ELISA方法提示筛选出来的噬菌体克隆能与CCT蛋白高效结合.硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到100%,测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列:IQMPPKWPWPAA.结论从噬菌体肽库中筛选到的噬菌体短肽IQMPPKWPWPAA为探讨LMP1致瘤机理、开发抗鼻咽癌短肽药物及基因疫苗奠定了实验基础.

    作者:余琳;张雪雁;杨英;马桂璋 刊期: 2006年第03期

  • 猕猴自体骨髓干细胞移植治疗急性肝损伤的实验研究

    目的探讨自体骨髓干细胞肝门静脉移植对猕猴急性肝损伤的治疗作用和为人类肝损伤治疗提供依据和方法.方法猕猴10只,随机分为实验组和对照组,每日皮下注射40%CCL4 0.8 ml/kg,连续注射4 d,经肝功能生化指标检测及肝穿组织病理学观察确认肝损伤后,分离实验组猴的自体骨髓单个核细胞,按3×108细胞/kg将骨髓细胞植入肝门静脉,植入后60 d进行肝功能相关指标检测及组织病理学观察.结果连续注射CCL4 4 d后,血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、球蛋白(GLOB)(P<0.001),而总蛋白(TP)和白蛋白含量无变化(P>0.05),肝组织结构紊乱,大量肝细胞坏死,部分细胞变性,水肿,汇管区及周围有大量炎性细胞浸润.骨髓细胞肝门静脉移植后60 d,血清AST、ALT活性和GLOB、BIL含量显著低于对照组(P<0.05),而TP、ALB、LDL含量高于对照组(P<0.05),病理组织学观察结构清楚,而对照组有纤维增生和肝细胞有脂肪变性.结论自体骨髓细胞肝门静脉移植能对猕猴急性肝损伤有明显治疗作用,可改善急性肝损伤猕猴的肝功能及组织结构,提示该方法可能对人类急性肝损伤有一定治疗意义.

    作者:潘兴华;庞荣清;陈系古;刘建昆;何占龙;王惠萱;张步振;王鹤桦;杨勇琴;屈璐 刊期: 2006年第03期

  • 人MMP-11原核表达载体pGEX-5X-3/MMP-11的构建及其融合蛋白的表达和纯化

    目的构建表达人基质金属蛋白酶-11(MMP-11)N-端肽段的重组原核表达载体pGEX-5X-3/MMP-11,获得人源性MMP-11融合蛋白.方法应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从正常人子宫内膜组织扩增目的基因片段,利用体外基因重组技术将目的基因片段连接到原核表达载体pGEX-5X-3上构成重组的原核表达载体pGEX-5X-3/MMP-11,并通过酶切和测序进行鉴定.将重组质粒转化人大肠杆菌DH5a后挑选阳性克隆,用异丙基硫代半乳糖苷诱导其融合蛋白的表达并进行纯化.结果RT-PCR获得预期大小的特异性DNA片段,经双酶切鉴定及测序证实已将人基质金属蛋白酶-11N-端肽段的cDNA片段正确插入原核表达载体中.融合表达产物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,证实相对分子量大小为4 550.结论成功构建了表达人MMP-11N-端肽段的重组原核表达载体pGEX-5X-3/MMP-11,获得相对分子量为4 550的GST-MMP-11融合蛋白,为进一步制备抗人MMP-11抗体及其在临床中进一步推广应用于恶性肿瘤的快速诊断及临床疗效的评价奠定了基础.

    作者:郑晶;陆惠玲;刘加军;陈森;吕德坚;孙宏钰 刊期: 2006年第03期

  • 食品过敏原指纹图谱快速检测研究(三)--花生总蛋白2-DE指纹图谱和蛋白点MALDI-TOF/MS分析

    目的建立一种简捷、准确、快速检测食品过敏原的方法.分析花生总蛋白2-DE(2-dimensionelectrophoresis)指纹图谱与蛋白点MALDI-TOF/MS分析联用的可行性.方法新鲜生花生去皮搅碎后丙酮去脂,PBS抽提总蛋白,冻干得初提样品,试剂盒精提,双向电泳IEF选择11cm非线性胶条(pH=3-10)溶胀上样,平衡后转移胶条在电泳槽中进行第二向SDS-PAGE垂直电泳(10%),考染后扫描图像进行计算机分析处理,同时在胶上任意选择两个蛋白点切胶、脱色、消化后进行MALDI-TOF/MS分析.结果2-DE指纹谱图显示花生总蛋白的分布范围较窄,主要是一些中、小分子量的中性、弱酸和弱碱性蛋白,用PDQuest 2-D Analysis分析软件对此2-DE图谱分析可以发现其中共有178个特征性蛋白点.以花生总蛋白2-DE指纹图谱为基础,进一步对单个蛋白点进行MALDI-TOF/MS指纹图谱分析,结果显示每一个蛋白点都具有自己特征的分子量峰和图谱形状,无需进行肽片段混合物的分析、检索亦可完全区分不同的蛋白点,从而可以对食品过敏原进行更深入、更准确的指纹图谱检测.结论食品过敏原总蛋白2-DE指纹图谱与蛋白点MALDI-TOF/MS指纹图谱分析联用可以更好的进行食品过敏原指纹图谱快速检测研究.

    作者:吴海强;余晓;刘志刚 刊期: 2006年第03期

  • RNA干涉技术及其在病毒方面的应用

    由双链RNA介导的RNA干涉(RNA interference,RNAi)又称为转录后基因沉默(post transcriptional silencing,PTGS),其实质是在生物体中导人双链RNA,特异性地降解相应序列的mRNA,从而阻断相应基因表达,即引起生物体内同源基因沉默(gene silencing).RNAi已被证明是破译各种生物中的基因功能的强大工具,并将为新型高效药物开发和基因治疗的发展开辟新的领域.

    作者:杨海燕;宁云山;董文其 刊期: 2006年第03期

  • 人源性抗-D基因工程抗体在真核细胞CHO中的表达

    目的于真核细胞系CHO细胞中表达人源性抗-D基因工程抗体,为人源性抗-D基因工程抗体在临床上的应用打下坚实的基础.方法脂质体法将真核表达载体pAH4604/VH和pAG4622/VL共转染体外培养的CHO细胞,经霉酚酸及组氨醇筛选阳性克隆细胞.通过ELISA法检测培养上清中人IgG的表达量.应用化学发光Western Blotting法对真核表达载体pAH4604/VH和pAG4622/VL在CHO细胞中的表达进行鉴定.结果pAH4604/VH和pAG4622/VL共转染体外培养的CHO细胞,经霉酚酸及组氨醇筛选12~14 d后有阳性克隆长出,未转染细胞则全部死亡.筛选出的各阳性细胞克隆经扩大培养及ELISA定量检测其上清人IgG含量高为4.05 ng/nl.Western Blotting显示上清和细胞内均有人IgG重链和轻链的表达.结论所构建的真核表达载体pAH4604/VH和pAG4622/VL在CHO真核细胞系表达成功,可产生人源化的IgG重链和轻链.

    作者:曹开源;徐霖;付涌水;袁广卿;黄小荣 刊期: 2006年第03期

  • 广州市花都区1990~2004年伤寒流行动态分析

    目的了解花都区伤寒流行趋势和规律,为制订防治对策提供依据.方法对花都区1990~2004年伤寒发病资料进行特点与趋势分析.结果年均发病率为3.18/10万;男性发病率高于女性,性别比例1.8:1;人群分布以农民发病数高,占病例总数36.69%;发病呈持续下降趋势,近3年来达历史低水平.结论通过采取综合防治措施,花都区伤寒防治取得良好效果.

    作者:李凯;梁振波;沈秋逢;卢惠溪 刊期: 2006年第03期

  • 湖南省疟疾防治后期流行病学特征及监测结果分析

    目的分析疟疾防治后期流行病学特征及监测结果,为制订防治策略提供依据.方法收集1980~2004年湖南省各县、市疟疾疫情资料、发热病人血检、荧光抗体检测以及媒介资料进行回顾性研究.结果全省疟疾发病率由1980年的89.27/10万至2004年下降为0.19/10万,发热病人血检阳性率由1980年的2.73%至2004年下降为0.06%;近3年本地居民未查见带虫者;1990年以来湖南省感染病例逐年减少,输入疟疾为主,分别占病例总数的6.51%和93.49%;中华按蚊为唯一的传疟媒介.结论当前湖南省疟疾以输入病例为主,年发病率已连续9年控制在1/10万以下,疟疾疫情相对稳定.

    作者:段绩辉;庄世锋;邓胜平;张湘君;李正祥;郑军;龙浩宇;王郭清 刊期: 2006年第03期

  • 氯消毒剂对冷却塔军团菌的现场杀灭效果评价

    目的研究含氯消毒剂对冷却塔军团菌的现场杀菌效果.方法选择一大型冷却塔,分别进行两种消毒方式:一次添加高浓度氯消毒剂后(冲击法),维持加氯和不维持加氯,并在当天和一周后检测冷却塔水中军团菌的浓度.结果持续加氯,保持游离余氯在(0.38±0.23)mg/L,军团菌浓度变化不大,未检出或保持低浓度(0.85±1.52~0.81±1.56)cfu/ml;不持续加氯,军团菌持续上升,一周后增加100~1 000倍以上(0.12±0.11~322.22±130.17)cfu/ml.结论维持加氯的消毒方法对冷却塔军团菌的消毒效果较好.

    作者:冯文如;钟嶷;刘世强;江思力;周明辉;宋宏 刊期: 2006年第03期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会