学术投稿

EB病毒LMP1 CCT蛋白特异性结合短肽的筛选

余琳;张雪雁;杨英;马桂璋

关键词:EBV, LMP1, C端胞浆区(CCT), 噬菌体随机展示肽库
摘要:目的筛选能与EBV LMP1 CCT蛋白高效结合的短肽.方法利用亲和层析和酶切的方法纯化CCT蛋白,并用CGT蛋白筛选噬菌体12肽库.通过夹心ELISA方法分析噬菌体克隆与CCT蛋白的亲和力.通过硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定.并对阳性克隆进行测序分析.结果对肽库进行3轮筛选后,噬菌体克隆具有良好的富集效果.ELISA方法提示筛选出来的噬菌体克隆能与CCT蛋白高效结合.硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到100%,测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列:IQMPPKWPWPAA.结论从噬菌体肽库中筛选到的噬菌体短肽IQMPPKWPWPAA为探讨LMP1致瘤机理、开发抗鼻咽癌短肽药物及基因疫苗奠定了实验基础.
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  • 住院肿瘤患者健康教育需求的调查

    目的了解住院肿瘤患者健康教育需求情况,更好地开展患者健康教育.方法采用随机整群抽样的方法,对住院肿瘤患者进行无记名的问卷调查.问卷包括4大项40小项,用EXCEL8.0建立数据库,用Spss10.0 forWindows软件进行统计学处理,采用非参数Kruskal-Wall's检验及x3检验进行分析.结果收到有效问卷193张,欢迎开展健康教育者占93.8%.对健康教育的内容以提高生活质量知识的需求为多,男性较偏重康复训练知识的需求,女性较偏重了解有关疾病的知识;患者住院期间对有关疾病的知识较关心,出院后对继续用药相关知识、饮食指导、康复训练等较关心,出院后咨询以返院咨询受欢迎,不同年龄、职业、文化程度、病种和科室的患者所需求的健康教育内容无差异.结论住院肿瘤患者渴望健康教育.健康教育的方式应因人而异,健康教育应贯穿于医疗、护理和康复过程中,有效提高患者的治疗质量和生存质量.

    作者:邱卫黎;黄华兰;蔡秀英;丘德林;辛丽华;江敏霞 刊期: 2006年第03期

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    作者:杨海燕;宁云山;董文其 刊期: 2006年第03期

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    作者:李凯;梁振波;沈秋逢;卢惠溪 刊期: 2006年第03期

  • 外源性端粒酶催化亚单位对人视网膜血管内皮细胞的影响

    目的探讨外源性人端粒酶催化亚单位(hTERT)对人视网膜血管内皮细胞(hRCEC)端粒酶活性、相关基因表达和体外生存时间的影响.方法阳离子脂质体介导hRCEC转染;RT-PCR法检测人类端粒酶RNA组份(hTR)、端粒酶相关蛋白1(TEP1)及hTERT基因的表达;TRAP法检测端粒酶活性;细胞计数法绘制生长曲线.结果hTR、TEP1基因在hTERT转染hRCEC前后都表达,hTERT基因在转染前不表达,转染后24 h及稳定转染克隆形成时表达,细胞停止分裂时又失去表达;转染前无端粒酶活性,转染后24h及稳定转染克隆形成时可检测到端粒酶活性,细胞停止分裂时端粒酶活性消失;稳定转染了hTERT基因后hRCEC的生存时间没有延长.结论hTERT转染可显著提高hRCEC中hTERT基因表达水平,hTERT基因表达与端粒酶活性一致,但只用hTERT转染的方法不能使hRCEC细胞生存时间延长.

    作者:杜贻鹏;陈展辉;陈淑杰;何霞;柏云;谢金卫;周俊宜 刊期: 2006年第03期

  • 顺德、番禺、清远、增城和花都五地淡水鱼华支睾吸虫感染情况的调查

    目的为了解目前顺德、番禺、清远、增城和花都五地淡水鱼华支睾吸虫的感染情况.方法使用直接压片法和消化法对从上述5地采集的各种淡水鱼进行检查,并用分离的囊蚴感染大鼠.结果上述5个地区的淡水鱼均存在华支睾吸虫囊蚴的感染,其中以来自顺德的淡水鱼感染严重.家养鱼种和一些野生鱼均有感染,其中以鲩鱼和鳙鱼以及一些野生小鱼感染率和感染度均较高.结论广东上述五地淡水鱼华支睾吸虫的感染较为普遍和严重.

    作者:黄骥;梁耀佳;林慈宽;黄志辉;冯诗韵;陈洁静;陈代雄;李小敏;沈浩贤 刊期: 2006年第03期

  • EB病毒LMP1 CCT蛋白特异性结合短肽的筛选

    目的筛选能与EBV LMP1 CCT蛋白高效结合的短肽.方法利用亲和层析和酶切的方法纯化CCT蛋白,并用CGT蛋白筛选噬菌体12肽库.通过夹心ELISA方法分析噬菌体克隆与CCT蛋白的亲和力.通过硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定.并对阳性克隆进行测序分析.结果对肽库进行3轮筛选后,噬菌体克隆具有良好的富集效果.ELISA方法提示筛选出来的噬菌体克隆能与CCT蛋白高效结合.硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到100%,测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列:IQMPPKWPWPAA.结论从噬菌体肽库中筛选到的噬菌体短肽IQMPPKWPWPAA为探讨LMP1致瘤机理、开发抗鼻咽癌短肽药物及基因疫苗奠定了实验基础.

    作者:余琳;张雪雁;杨英;马桂璋 刊期: 2006年第03期

  • 氯消毒剂对冷却塔军团菌的现场杀灭效果评价

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    作者:冯文如;钟嶷;刘世强;江思力;周明辉;宋宏 刊期: 2006年第03期

  • 大蒜素对卡氏肺孢子虫肺炎预防作用的实验研究

    目的观察大蒜素对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的预防效果.方法地塞米松连续肌肉注射Wistar大鼠,建立大鼠肺孢子虫肺炎动物模型.于模型诱导第3周起给予大蒜素治疗,剂量10 mg/(kg·d),连续5 d,后腿肌肉深部注射,以后每隔2周重复治疗一次,第10周末剖杀,同时设复方新诺明预防对照组和PCP模型对照组.以各组大鼠肺重、肺重/体重比值、Pc感染率、肺印片中每100个油镜视野肺孢子虫包囊均数等指标考核疗效.结果大蒜素预防组大鼠肺重(1.89±0.28)、肺重/体重比值(0.94±0.12)、Pc感染率(73.33%)、肺印片中每100个油镜视野肺孢子虫包囊均数(15.39±10.46)均明显低于PCP模型对照组(P<0.05或P<0.01),而与复方新诺明预防对照组无显著性差异(P>0.05).结论大蒜素对实验大鼠卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)有一定的预防和保护作用,预防效果与复方新诺明接近.

    作者:张振明;卢致民;张进顺;唐宏炜;刘金花 刊期: 2006年第03期

  • 110例结核性脑膜炎早期诊断若干问题的探讨

    目的探讨结核性脑膜炎(结脑)早期诊断中存在的问题,提高结脑的早期诊断率.方法回顾分析临床确诊为结脑110例病人,按病程分为早期、中期和晚期3组,并对3组病人的临床症状、体征、脑脊液(CSF)各项指标,影像学结果,以及误诊情况进行分析比较.结果本组38.2%(42/110)的病例临床表现不典型,早期临床表现不典型的比例高,达62.5%(15/24),中期有26.7%(8/30),晚期有33.9%(19/56);早期与中、晚期比较,P<0.01.腰穿CSF检查有40.0%(44/110)病例的CSF改变不典型,早期的比例高,为50.0%(12/24),中期有20.0%(6/30),晚期有46.4%(26/56);早期分别与中期、晚期组比较,结果分别为P<0.05、P>0.05.CT总的阳性率为78.2%(68/87),但早期的阳性率仅为45.0%(9/20),中晚期的阳性率可达88.0%(59/67);早期与中晚期比较,P<0.01.110例中误诊44例,误诊率为40.0%,早、中、晚期误诊率分别为62.5%(15/24)、36.7%(11/30)、32.1%(18/56),早期误诊率与中晚期比较,P<0.01.结论结脑早期临床表现不典型,各种辅助检查的特异性和敏感性亦不高,把临床和各种辅助检查结合起来,综合判断,才能减少或避免误诊.

    作者:彭忠兴;黄帆;张慧;黄艺洪 刊期: 2006年第03期

  • 医学遗传学课程在药学教育中的思考和深化

    医学遗传学课程是医药院校开展教育培养的重要基础课程,对于21世纪药学生的基础科学素质和能力素质的培养具有重要作用.随着分子生物学等现代科学技术的发展,要求在医学遗传学课程的教育方面注入新的活力和思想,本文对医学遗传学课程在药学教育中所应发展和建设的方向进行了概括和探讨,以期在今后的教学工作中明确方向,抓住机遇,全面提高教学质量.

    作者:张咏莉;李红枝;黄清松;陈红梅;李白霓;丘淑玲 刊期: 2006年第03期

  • 前列腺液检验网络课件的的制作

    目的制作网络教学课件以备教学改革.方法以<临床检验基础>教科书中的前列腺液检验为主题内容,通过应用Photoshop 6.0、Fireworks 4.0、Flash 5.0为图形和动画加工编辑工具,Microsoft Access 2000为数据库,Microsoft FrontPage 2000软件、JavaScript、Active Server Page和HTML网页设计编辑工具,制作网页,开发前列腺检查网络课件.结果完成制作前列腺液检验网络课件,课件设有主题知识、课后练习、参考资料、教学素材、教师信箱、医学检验新动态、交流园地和公告栏等模块.结论该课件将有利于深化教学改革.

    作者:黄海樱;陈波 刊期: 2006年第03期

  • 急诊PCI术后血栓前状态对术后并发症的预测

    目的观察急诊经皮冠状动脉介入术后血栓前状态与术后冠脉并发症的关系.方法选择2003年至2005年期间50例因急性心肌梗死(AMI)在佛山市第二人民医院行急诊经皮冠状动脉介入术(PCI)的患者,于急诊PCI术后24 h内抽取静脉血测定血栓前状态指标D-D和PAT,所有患者观察28 d,根据术后有无严重冠脉并发症将患者分为两组,并发症组(A组)和非并发症组(B组),回顾性分析A、B两组的血栓前状态指标D-D和PAT,评价急诊PCI术后血栓前状态指标D-D和PAT与术后冠脉并发症的关系.结果所有50例AMI患者的血栓前状态指标D-D和PAT均较正常值升高,其中A组术后24 h内D-D为(1.8±0.4)ng/L,B组D-D为(0.8±0.2)ng/L,B组明显低于A组(P<0.001);A组术后24h内PAT为(44±10)s,B组PAT为(16±5)s,B组明显低于A组(P<0.01).结论急诊PCI术后血栓前状态指标D-D和PAT较正常值升高,D-D和PAT升高的水平是术后严重冠脉并发症的预测指标,积极降低D-D和PAT水平有可能明显降低术后严重冠脉并发症的发生率.

    作者:梁健球;吴庆庆;余永卫;徐宁;黄永光 刊期: 2006年第03期

  • 冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用

    目的研究冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用.方法以人急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的骨髓原代细胞为研究对象,以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的白血病细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪、台盼蓝染色及Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡.结果冬凌草甲素体外可明显地抑制白血病原代细胞的增殖,并能诱导细胞发生凋亡,而且呈现出明显的量-效与时-效关系.结论冬凌草甲素能有效地抑制APL细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,是一种潜在的抗白血病药物.

    作者:张俊峰;刘加军;陈规划;刘培庆;林东军;肖若芝;李旭东;黄仁魏 刊期: 2006年第03期

  • 淋球菌mtrR启动子区域回文序列基因突变与多重耐药关系的研究

    目的探讨淋球菌mtrR启动子区域回文序列基因突变与多重耐药之间的关系.方法采用纸片扩散法检测56株淋球菌对五种抗生素的敏感性.以PCR扩增mtrR启动子区域中包含有13个碱基回文序列在内的157个碱基,并进行SSCP(单链构象多态性)分析.根据SSCP的结果,选取12株标本进行测序分析,将其核苷酸序列与标准敏感株ATCC19424进行比较.结果56株细菌中有5株对五种抗生素都敏感,对一种抗生素耐药的有22株,对两种抗生素耐药的有19株,其中有2株mtrR启动子区域中回文序列基因发生了突变;对三种抗生素、四种抗生素和五种抗生素耐药的株菌分别是7株、2株和1株,它们的mtrR启动子区域中回文序列基因均发生了突变.并且这12株标本突变的类型一致,在13个碱基的回文序列中发生了单个A/T碱基的缺失.结论mtrR启动子区域中回文序列基因突变介导淋球菌的多重耐药,回文序列单个A/T碱基的缺失与淋球菌多重耐药有密切的关系.

    作者:彭运生;袁建辉;徐立中;潘春燕;钟素霞;汪小娟 刊期: 2006年第03期

  • 犯罪嫌疑人HIV/AIDS知识认知程度调查

    目的了解犯罪嫌疑人对HIV/AIDS知识的认知程度,为这一高危人群的AIDS健康教育与行为干预提供依据.方法采用问卷调查法对某监所376名犯罪嫌疑人进行HIV/AIDS的知识认知程度和该人群的文化程度、犯罪类型、吸毒史进行调查.结果376名犯罪嫌疑人以20~40岁占78.99%为多.对AIDS基本概念认知正确率与男女性别、文化程度有关,均有显著性差异(P<0.05),但与犯罪嫌疑人是否吸毒和犯罪类型无明显关系(P>0.05).对AIDS传播途径的认知正确率以文盲者为低,其次为小学、初中者,以高中、大专者为高;在吸毒者和非吸毒者中并无差别;犯罪类型中的涉毒卖淫者对多性伴性行为认知正确率低(62.83%).结论HIV/AIDS的预防控制,应将高危人群和具有高危行为的特殊群体犯罪嫌疑人列为监测重点,在监所哨点开展HIV/AIDS知识的宣教,以降低HIV的感染率.

    作者:杨萍;戴传文;刘华龙;徐金汉;卫勇彪;宋坦南;陈南萍 刊期: 2006年第03期

  • 博罗县2000~2004年法定传染病疫情分析

    目的分析博罗县近5年法定传染病的发生、发展及其变化趋势,为制订今后疾病预防控制策略提供科学依据.方法对博罗县2000~2004年法定传染病疫情报告资料进行统计分析.结果博罗县5年法定传染病总发病数3 953例,年平均年发病率106.32/10万;无甲类传染病报告;乙类传染病5年共报告3 735例,年平均发病率100.46/10万,丙类传染病5年共报告218例,年平均发病率为5.86/10万;5年中报告的主要传染病种为肺结核、乙型肝炎、流行性腮腺炎、痢疾、淋病、麻疹、狂犬病.结论博罗县近5年中传染病发病全部为乙、丙类,且绝大部分为呼吸道传染病和血源及性传染病,导致死亡的传染病以狂犬病为主.未来传染病防治工作应以加强呼吸道传染病、血液及性传染病、狂犬病、艾滋病等的预防控制为重点.

    作者:邓寿平;杨科明;游良珍 刊期: 2006年第03期

  • 男性吸毒人群HBV、HCV重叠感染状况及其影响因素的研究

    目的了解男性吸毒人群中HBV、HCV重叠感染影响因素,为预防HBV、HGV提供科学依据.方法采用现况调查的方法,通过整群抽样,以问卷调查方式,随机抽取男性吸毒人员452名,收集有关资料并采集血标本452份.以ELISA方法检测血清中的HBV表面抗原与HCV抗体,用SPSS1.0进行数据统计分析.结果男性吸毒者HBV、HCV重叠感染率为29.46%,单因素分析:吸毒方式、注射频率、戒毒次数的HBV与HCV重叠感染有具有显著性差异(P<0.05),而不同职业、地区、吸毒年限、性行为等的HBV与HCV重叠感染率无显著性差异(P>0.05).多因素分析:职业、吸毒年限、每天吸毒次数、戒毒次数、性行为是否用安全套、性伙伴是否患有肝炎、曾是否接受血液制品、接受血液制品次数等8个因素的HBV与HCV重叠感染率差异有显著性.结论男性吸毒人群是HBV与HCV感染的高危人群,并与吸毒方式、吸毒年限、性行为等因素有关.

    作者:龚文波;黄民主;关岚;刘浩;戴卫平 刊期: 2006年第03期

  • 弓首蛔虫及狮弓蛔虫线粒体基因组nad4基因多态性研究

    目的比较犬、猫常见蛔虫的线粒体DNA(mtDNA)中烟酰胺脱氢酶亚基Ⅳ基因(nad4)部分序列(pnad4),以期找出它们之间的序列差异和种群遗传关系.方法抽提61个弓首属蛔虫(包括犬弓首蛔虫、猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫和犊弓首蛔虫)和狮弓蛔虫虫体的总DNA,用PCR方法扩增mtDNA pnad4,然后用SSCP技术和DNA测序对序列进行分析研究.结果犬弓首蛔虫种群内pnad4的序列差异为1.17%,与猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫和狮弓蛔虫种间的平均序列差异分别为13.92%、16.48%、15.12%和20.32%.猫弓首蛔虫种群内pnad4的序列差异为1.00%,与马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫、狮弓蛔虫平均序列差异分别是17.90%、13.55%和18.50%.马来西亚弓首蛔虫种群内pnad4序列差异为0.13%,与牛弓首蛔虫、狮弓蛔虫序列差异分别为13.50%和20.60%.结论犬弓首蛔虫不同地方虫株的pnad4有一定差异,猫弓首蛔虫种群内差异较小,马来西亚弓首蛔虫种群内差异很小.弓首属各虫种之间的差异以及与狮弓蛔虫的差异都较大.马来西亚弓首蛔虫pnad4序列与其它虫种差异都较大,证明它确为一独立种.pnad4序列是弓首蛔虫和狮弓蛔虫理想的种特异的遗传标记.

    作者:李明伟;林瑞庆;曹湛;魏冬霞;邹丰才;宋慧群;朱兴全 刊期: 2006年第03期

  • 云南省25县(市)黄胸鼠体表革螨性比及年龄构成分析

    目的探讨黄胸鼠体表革螨的雌雄性比及生活史各期年龄构成.方法现场随机抽样调查及常规分类鉴定,以从小型哺乳动物黄胸鼠体表分离鉴定出数量较多的革螨作为重点研究对象.结果从1990年至2004年在云南省境内共调查了25个县(市),捕获黄胸鼠3 765只,从3 765只黄胸鼠体表采集革螨18 250只,经分类鉴定隶属于9科17属40种.其中有7种革螨采集数量较大,分别是纳氏厉螨10 667只、毒厉螨5 124只、柏氏禽刺螨1 286只、鼠颚毛厉螨218只、鼠拟脂刺螨215只、矮肛厉螨162只、鼩鼱赫刺螨131只,其他33种革螨采集数量均小于100只.7种主要革螨的雌性比例(78.61%~100%)明显超过其雄性比例(0~21.39%),有些革螨还采集到幼虫,前若虫及后若虫(但数量均较少),只有柏氏禽刺螨的幼期比例较高(72.01%).结论在多数革螨的自然种群中,雄性个体明显少于雌性个体,可能与革螨的孤雌生殖有关;专性吸血的柏氏禽刺螨生活史各期都可寄生在黄胸鼠体表.

    作者:罗礼溥;郭宪国 刊期: 2006年第03期

  • 前S1蛋白在乙型肝炎的诊断和治疗中价值探讨

    目的通过几种模式的乙型肝炎患者的前S1蛋白及HBV-NDA的情况分析,了解前S1蛋白对乙肝的诊断和预后的价值.方法收集几种不同HBVM模式的乙肝患者共201例,检测其前S1蛋白及HBV-DAN.结果HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)患者共87例,前S1和HBV-DNA的阳性率分别是87.4%和94.2%.HBsAg(+)、HBeAg(+)患者共11例,前S1和HBV-DNA阳性率均为81.8%,这两组患者存在着病毒复制.HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)患者85例,前S1和HBV-DNA的阳性率分别为35.3%和40%.HBsAg(+)、抗-HBe患者18例,前S1和HBV-DNA阳性率分别为33.3%和44.4%.结论前S1蛋白与HBV-DNA的阳性率较为一致,在作为HBV病毒复制指标方面比HBeAg能更敏感.

    作者:司徒瑞儒 刊期: 2006年第03期

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