曾少华;吕志跃;汪世平;张加祥;陈晓光;周松华;刘雪琴;李文凯;姜孝新;肖小芹;徐绍锐;彭先楚
目的探讨淋球菌mtrR启动子区域回文序列基因突变与多重耐药之间的关系.方法采用纸片扩散法检测56株淋球菌对五种抗生素的敏感性.以PCR扩增mtrR启动子区域中包含有13个碱基回文序列在内的157个碱基,并进行SSCP(单链构象多态性)分析.根据SSCP的结果,选取12株标本进行测序分析,将其核苷酸序列与标准敏感株ATCC19424进行比较.结果56株细菌中有5株对五种抗生素都敏感,对一种抗生素耐药的有22株,对两种抗生素耐药的有19株,其中有2株mtrR启动子区域中回文序列基因发生了突变;对三种抗生素、四种抗生素和五种抗生素耐药的株菌分别是7株、2株和1株,它们的mtrR启动子区域中回文序列基因均发生了突变.并且这12株标本突变的类型一致,在13个碱基的回文序列中发生了单个A/T碱基的缺失.结论mtrR启动子区域中回文序列基因突变介导淋球菌的多重耐药,回文序列单个A/T碱基的缺失与淋球菌多重耐药有密切的关系.
作者:彭运生;袁建辉;徐立中;潘春燕;钟素霞;汪小娟 刊期: 2006年第03期
目的探讨结核性脑膜炎(结脑)早期诊断中存在的问题,提高结脑的早期诊断率.方法回顾分析临床确诊为结脑110例病人,按病程分为早期、中期和晚期3组,并对3组病人的临床症状、体征、脑脊液(CSF)各项指标,影像学结果,以及误诊情况进行分析比较.结果本组38.2%(42/110)的病例临床表现不典型,早期临床表现不典型的比例高,达62.5%(15/24),中期有26.7%(8/30),晚期有33.9%(19/56);早期与中、晚期比较,P<0.01.腰穿CSF检查有40.0%(44/110)病例的CSF改变不典型,早期的比例高,为50.0%(12/24),中期有20.0%(6/30),晚期有46.4%(26/56);早期分别与中期、晚期组比较,结果分别为P<0.05、P>0.05.CT总的阳性率为78.2%(68/87),但早期的阳性率仅为45.0%(9/20),中晚期的阳性率可达88.0%(59/67);早期与中晚期比较,P<0.01.110例中误诊44例,误诊率为40.0%,早、中、晚期误诊率分别为62.5%(15/24)、36.7%(11/30)、32.1%(18/56),早期误诊率与中晚期比较,P<0.01.结论结脑早期临床表现不典型,各种辅助检查的特异性和敏感性亦不高,把临床和各种辅助检查结合起来,综合判断,才能减少或避免误诊.
作者:彭忠兴;黄帆;张慧;黄艺洪 刊期: 2006年第03期
目的了解住院肿瘤患者健康教育需求情况,更好地开展患者健康教育.方法采用随机整群抽样的方法,对住院肿瘤患者进行无记名的问卷调查.问卷包括4大项40小项,用EXCEL8.0建立数据库,用Spss10.0 forWindows软件进行统计学处理,采用非参数Kruskal-Wall's检验及x3检验进行分析.结果收到有效问卷193张,欢迎开展健康教育者占93.8%.对健康教育的内容以提高生活质量知识的需求为多,男性较偏重康复训练知识的需求,女性较偏重了解有关疾病的知识;患者住院期间对有关疾病的知识较关心,出院后对继续用药相关知识、饮食指导、康复训练等较关心,出院后咨询以返院咨询受欢迎,不同年龄、职业、文化程度、病种和科室的患者所需求的健康教育内容无差异.结论住院肿瘤患者渴望健康教育.健康教育的方式应因人而异,健康教育应贯穿于医疗、护理和康复过程中,有效提高患者的治疗质量和生存质量.
作者:邱卫黎;黄华兰;蔡秀英;丘德林;辛丽华;江敏霞 刊期: 2006年第03期
目的了解广州市东山、荔湾、越秀、海珠区公务员、医务人员及银行等职业人群的华支睾吸虫病分布状况及流行特点,为今后制定防治策略提供依据.方法用改良加藤氏厚涂片法粪检华支睾吸虫虫卵.结果4个区共粪检1 204人,华支睾吸虫感染150人,感染率为12.46%.远高于全国感染率(0.40%)和1998~2003广州市平均感染率(6.59%).结论这4个区部分职业人群华支睾吸虫感染率较高,应加强宣教工作,改变人们的不良饮食习惯,提高个人防护意识;采取综合防制措施,阻断华支睾吸虫传播流行.
作者:冯月菊;周端华;刘小宁;潘志明;任文锋;高雨藩;郭荣同 刊期: 2006年第03期
由双链RNA介导的RNA干涉(RNA interference,RNAi)又称为转录后基因沉默(post transcriptional silencing,PTGS),其实质是在生物体中导人双链RNA,特异性地降解相应序列的mRNA,从而阻断相应基因表达,即引起生物体内同源基因沉默(gene silencing).RNAi已被证明是破译各种生物中的基因功能的强大工具,并将为新型高效药物开发和基因治疗的发展开辟新的领域.
作者:杨海燕;宁云山;董文其 刊期: 2006年第03期
目的调查江门市新会区某些机关、事业单位人群的血脂和血糖状况.方法随机抽取团体体检并有血脂和血糖检测项目的3个机关与事业单位职工作为调查对象,并设1个正常对照组,在组间比较其血脂和血糖水平.结果医务组的TC、TG、TC+TG和Glu,工商组的TC、TG和Glu,财政组的TG和TC+TG,其增高检出率均高于对照组(P<0.01或P<0.05);医务组、工商组和财政组的TC等多项指标的检测均数均高于对照组(P<0.01或P<0.05);这些血脂和血糖水平在3个调查组之间亦有不同程度的差别.结论新会区机关和事业单位人群的高血脂和高血糖检出率比较高.
作者:郭爱群;唐荣德;吴女俭;刘社炎;华关民 刊期: 2006年第03期
目的了解犯罪嫌疑人对HIV/AIDS知识的认知程度,为这一高危人群的AIDS健康教育与行为干预提供依据.方法采用问卷调查法对某监所376名犯罪嫌疑人进行HIV/AIDS的知识认知程度和该人群的文化程度、犯罪类型、吸毒史进行调查.结果376名犯罪嫌疑人以20~40岁占78.99%为多.对AIDS基本概念认知正确率与男女性别、文化程度有关,均有显著性差异(P<0.05),但与犯罪嫌疑人是否吸毒和犯罪类型无明显关系(P>0.05).对AIDS传播途径的认知正确率以文盲者为低,其次为小学、初中者,以高中、大专者为高;在吸毒者和非吸毒者中并无差别;犯罪类型中的涉毒卖淫者对多性伴性行为认知正确率低(62.83%).结论HIV/AIDS的预防控制,应将高危人群和具有高危行为的特殊群体犯罪嫌疑人列为监测重点,在监所哨点开展HIV/AIDS知识的宣教,以降低HIV的感染率.
作者:杨萍;戴传文;刘华龙;徐金汉;卫勇彪;宋坦南;陈南萍 刊期: 2006年第03期
目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)和胱硫醚-β合成酶基因CBS 844ins 68基因多态性与阿尔茨海默病(alheimer disease,AD)的关系.方法运用多聚酶链反应技术和荧光偏振法(FPIA)检测66例阿尔茨海默病及143例正常人CBS 844ins 68基因多态性和血浆总Hcy水平.结果AD组CBS844ins 68 D/D、D/I、I/I基因型频率(%)分别为78.79、19.69、1.52,对照组分别为78.32、18.88、2.8,CBS844ins 68各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无显著性(P>0.05).AD病例组与对照组血浆Hcy分别为(14.72±6.2)μmol/L和(10.9±2.4)μmol/L,两者差异有显著性(P<O.05).AD患者血浆总Hcy水平显著高于正常组.结论胱硫醚-β合成酶多态性与AD无明显相关,高同型半胱氨酸血症与Alzheimer病发生有一定关系.
作者:黄绍宽;陈盛强;王延平;柳息洪 刊期: 2006年第03期
目的筛选能与EBV LMP1 CCT蛋白高效结合的短肽.方法利用亲和层析和酶切的方法纯化CCT蛋白,并用CGT蛋白筛选噬菌体12肽库.通过夹心ELISA方法分析噬菌体克隆与CCT蛋白的亲和力.通过硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定.并对阳性克隆进行测序分析.结果对肽库进行3轮筛选后,噬菌体克隆具有良好的富集效果.ELISA方法提示筛选出来的噬菌体克隆能与CCT蛋白高效结合.硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到100%,测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列:IQMPPKWPWPAA.结论从噬菌体肽库中筛选到的噬菌体短肽IQMPPKWPWPAA为探讨LMP1致瘤机理、开发抗鼻咽癌短肽药物及基因疫苗奠定了实验基础.
作者:余琳;张雪雁;杨英;马桂璋 刊期: 2006年第03期
目的于真核细胞系CHO细胞中表达人源性抗-D基因工程抗体,为人源性抗-D基因工程抗体在临床上的应用打下坚实的基础.方法脂质体法将真核表达载体pAH4604/VH和pAG4622/VL共转染体外培养的CHO细胞,经霉酚酸及组氨醇筛选阳性克隆细胞.通过ELISA法检测培养上清中人IgG的表达量.应用化学发光Western Blotting法对真核表达载体pAH4604/VH和pAG4622/VL在CHO细胞中的表达进行鉴定.结果pAH4604/VH和pAG4622/VL共转染体外培养的CHO细胞,经霉酚酸及组氨醇筛选12~14 d后有阳性克隆长出,未转染细胞则全部死亡.筛选出的各阳性细胞克隆经扩大培养及ELISA定量检测其上清人IgG含量高为4.05 ng/nl.Western Blotting显示上清和细胞内均有人IgG重链和轻链的表达.结论所构建的真核表达载体pAH4604/VH和pAG4622/VL在CHO真核细胞系表达成功,可产生人源化的IgG重链和轻链.
作者:曹开源;徐霖;付涌水;袁广卿;黄小荣 刊期: 2006年第03期
目的了解年龄、健康教育对查螺质量的影响.方法采用设置标记螺点观察不同年龄组、是否接受血防健康教育的查螺人员对标记螺查出率.结果3年(2002~2004年)现场观察,健康教育人群标记钉螺的查出率明显高于对照组,分别为56.38%(10148/18000)和41.26%(7426/18000),P<0.01;两组不同年龄段人群标记钉螺查获率均以15岁以下人群高,分别为68.95%和48.67%;51岁以上的较低,为36.67%和29.45%.结论本观察结果认为查螺前血防健康教育和查螺人员的年龄对查螺质量有明显的影响作用.
作者:骆雄才;黄少玉;张启明;林荣幸 刊期: 2006年第03期
目的利用蛋白质组学技术分离、鉴定日本血吸虫正常尾蚴及紫外线致弱尾蚴虫体间差异表达蛋白.方法分别收集与制备血吸虫正常尾蚴和致弱尾蚴虫体总蛋白,经固相pH梯度双向凝胶电泳分离.凝胶银染并利用ImageMaster 2D Software 5.0凝胶图像分析软件进行比较分析,选取差异表达蛋白点经基质辅助激光解析离子飞行时间质谱仪进行鉴定.结果二维凝胶电泳图像分析结果显示:正常尾蚴和致弱尾蚴各分离出至少1 277、1 173个清晰、独立的蛋白点,蛋白点匹配率为72.7%,大多数蛋白点相对分子量处于22 000~95 000范围内,理论等电点为5~8.尾蚴经紫外线致弱前后共发现18个差异表达蛋白,其中5个蛋白于致弱尾蚴中表达消失,12个表达下调,1个表达增强,未见新增表达蛋白.其中13个差异表达蛋白经MALDI-TOF-MS鉴定分析,获悉其肽指纹图谱、理论等电点、分子量及表达水平变化等相关信息.结论利用二维电泳、MALDI-TOF-MS等蛋白质组学技术,共鉴定出13个致弱尾蚴差异表达蛋白,为进一步阐明致弱尾蚴诱导宿主产生高免疫保护力的分子机制提供了实验基础.
作者:杨琳琳;吕志跃;胡旭初;胡斐;曹爱莲;郑焕钦;黎明涛;余新炳;冯明钊;吴忠道 刊期: 2006年第03期
目的比较犬、猫常见蛔虫的线粒体DNA(mtDNA)中烟酰胺脱氢酶亚基Ⅳ基因(nad4)部分序列(pnad4),以期找出它们之间的序列差异和种群遗传关系.方法抽提61个弓首属蛔虫(包括犬弓首蛔虫、猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫和犊弓首蛔虫)和狮弓蛔虫虫体的总DNA,用PCR方法扩增mtDNA pnad4,然后用SSCP技术和DNA测序对序列进行分析研究.结果犬弓首蛔虫种群内pnad4的序列差异为1.17%,与猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫和狮弓蛔虫种间的平均序列差异分别为13.92%、16.48%、15.12%和20.32%.猫弓首蛔虫种群内pnad4的序列差异为1.00%,与马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫、狮弓蛔虫平均序列差异分别是17.90%、13.55%和18.50%.马来西亚弓首蛔虫种群内pnad4序列差异为0.13%,与牛弓首蛔虫、狮弓蛔虫序列差异分别为13.50%和20.60%.结论犬弓首蛔虫不同地方虫株的pnad4有一定差异,猫弓首蛔虫种群内差异较小,马来西亚弓首蛔虫种群内差异很小.弓首属各虫种之间的差异以及与狮弓蛔虫的差异都较大.马来西亚弓首蛔虫pnad4序列与其它虫种差异都较大,证明它确为一独立种.pnad4序列是弓首蛔虫和狮弓蛔虫理想的种特异的遗传标记.
作者:李明伟;林瑞庆;曹湛;魏冬霞;邹丰才;宋慧群;朱兴全 刊期: 2006年第03期
目的探讨嗅成鞘细胞移植在皮层梗塞灶中的治疗价值.方法从成年SD大鼠嗅球取材,差异贴壁法纯化培养,移植时Hoechst 33342标记;按双肾双夹方法复制RHRSP模型,RHRSP术后10周,移植组和对照组制作MCAO模型,假手术组不电凝大脑中动脉.选择皮层梗塞10 d后的大鼠,在立体定向架上将Hoechst标记的嗅成鞘细胞植入皮层梗塞灶周围,对照治疗组则注入达乐伯克改良培养基,于移植前及移植术后第2周、第6周进行行为、触觉功能检查并从各组随机抽取7只大鼠处死,取大脑,制作冰冻切片用于荧光观察及生长相关蛋白-43及神经中丝免疫组化染色.结果移植后的OECs沿着胼胝体大量向梗塞灶及对侧皮层迁移;移植组和对照组大鼠均出现功能恢复,移植组大鼠运动、感觉功能恢复优于对照组(P<0.05);移植组和对照组都有神经纤维向梗塞中心区生长,移植组的神经纤维数量明显多于对照组(P<0.01);在移植后的第2周、第6周,移植组胼胝体区及梗塞灶相应的对侧皮层区出现GAP-43表达局部升高,其阳性信号值明显高于对照组(P<0.01);梗塞灶周围再生神经纤维的数量与运动功能评分之间存在正相关(r=0.93),P<0.01.结论OECs植入体内可以长时间存活,并有自我迁移能力;OECs移植具有明显促进脑梗塞后神经纤维再生和功能恢复的作用,胼胝体及梗塞灶对侧层的轴突再生也是移植组大鼠功能恢复的可能机制.
作者:杨志华;盛文利;沈慧勇;侯清华;李锐;曾进胜;黄如训 刊期: 2006年第03期
目的通过天然分子疫苗免疫猪血清作为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,应用表达序列标签获得日本血吸虫新基因.方法制备天然分子免疫猪血清,将筛选的尾蚴cDNA文库中大肠杆菌XL1-Blue侵入大肠杆菌BM25.8后环化成质粒,筛选出已转入质粒的菌株.提取质粒DNA,进行测序,得到一个表达序列标签(EST).通过NCBI网站的BLASTx及BLASTn公共数据库,编辑分析EST序列并进行同源性比较.结果从26个克隆样品中筛选出8个阳性克隆,其中有一个新基因(GenBank登录号DQ097517),该基因全长861 bp,有完整的阅读框架,与蜜蜂(Apis mellifera)SMC3蛋白编码的mRNA基因序列同源性高.结论疫苗免疫猪血清可作为筛选日本血吸虫新基因的有效探针,新发现1个日本血吸虫相关基因.
作者:曾少华;吕志跃;汪世平;张加祥;陈晓光;周松华;刘雪琴;李文凯;姜孝新;肖小芹;徐绍锐;彭先楚 刊期: 2006年第03期
目的探讨孕期应用乙型肝炎病毒免疫球蛋白对HBsAg阳性孕妇的乙肝病毒(HBV)宫内阻断作用及孕妇血清中乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)含量与胎儿宫内感染发生率的关系.方法将130例HBsAg阳性孕妇随机分为三组:治疗组A,45例,于孕20、24、28、32、36周肌肉注射乙肝病毒免疫球蛋白(HBIG)5次;治疗组B,45例,于孕28、32、36周肌肉注射乙肝病毒免疫球蛋白(HBIG)3次;对照组(C组),40例,仅随访不用药.检测孕妇血清中HBV DNA含量及新生儿血清中HBsAg、HBV DNA阳性情况.结果孕期预防性应用HBIG被动免疫组孕妇的宫内感染率分别为13.3%、15.6%,显著低于对照组的32.5%.HBIG治疗可以减低孕妇血清HBV DNA含量,但A、B两组HBV DNA降低程度无明显差异(P>0.05).根据母体HBV DNA含量分为5×103~4,5×105~6,5×107~8 copies/ml三组,各组胎儿宫内感染率为2.2%、13.7%、52.9%,三者差异有统计学意义(P<0.05).结论孕期应用HBIG能显著降低乙肝病毒宫内传播.孕妇血清中高HBV DNA含量是胎儿发生乙型肝炎病毒感染的一个重要因素.
作者:陈丽梅 刊期: 2006年第03期
目的探讨自体骨髓干细胞肝门静脉移植对猕猴急性肝损伤的治疗作用和为人类肝损伤治疗提供依据和方法.方法猕猴10只,随机分为实验组和对照组,每日皮下注射40%CCL4 0.8 ml/kg,连续注射4 d,经肝功能生化指标检测及肝穿组织病理学观察确认肝损伤后,分离实验组猴的自体骨髓单个核细胞,按3×108细胞/kg将骨髓细胞植入肝门静脉,植入后60 d进行肝功能相关指标检测及组织病理学观察.结果连续注射CCL4 4 d后,血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、球蛋白(GLOB)(P<0.001),而总蛋白(TP)和白蛋白含量无变化(P>0.05),肝组织结构紊乱,大量肝细胞坏死,部分细胞变性,水肿,汇管区及周围有大量炎性细胞浸润.骨髓细胞肝门静脉移植后60 d,血清AST、ALT活性和GLOB、BIL含量显著低于对照组(P<0.05),而TP、ALB、LDL含量高于对照组(P<0.05),病理组织学观察结构清楚,而对照组有纤维增生和肝细胞有脂肪变性.结论自体骨髓细胞肝门静脉移植能对猕猴急性肝损伤有明显治疗作用,可改善急性肝损伤猕猴的肝功能及组织结构,提示该方法可能对人类急性肝损伤有一定治疗意义.
作者:潘兴华;庞荣清;陈系古;刘建昆;何占龙;王惠萱;张步振;王鹤桦;杨勇琴;屈璐 刊期: 2006年第03期
目的通过将发生点突变的两个大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因进行改造,获得具有正确序列的OSCP基因,在大肠杆菌中表达并进行活性鉴定.方法通过限制性核酸内切酶和T4DNA连接酶将发生错义突变的两个OSCP基因的DNA克隆进行改造,获得具有正确核苷酸序列的OSCP基因;然后将该片段连接进原核表达载体pET-28c(+),构建成重组质粒PET-28c(+)-OSCP;用该重组质粒转化E.coli,转化子在37℃诱导表达相应的融合蛋白,通过Western-blot鉴定.结果酶切及测序显示对OSCP基因错义突变的纠正获得成功.酶切结果显示成功构建了原核表达载体pET-28c(+)-OSCP.IPTG诱导表达4 h后,SDS-PAGE及Western-blot显示诱导表达出分子量约23 000的大鼠寡霉素敏感相关蛋白,且该蛋白具有免疫活性.结论在国内初次表达出大鼠OSCP,表达产物具有免疫反应性,为OSCP的结构及功能研究奠定了基础.
作者:王海龙;王春芳;赵嘉惠;殷国荣;乔中东 刊期: 2006年第03期
目的探讨超声诊断华支睾吸虫病的临床意义.方法通过对华支睾吸虫病超声声像图诊断分析与粪便查虫卵作对照.结果61例华支睾吸虫病患者,有53例(占86.9%)超声检查肝胆系统有特异性改变.肝内中、小胆管弥漫性轻度扩张,管壁不均匀性增厚,回声增强,不同切面呈现小点状、小等号状、斑状、条索状等形态各异的强回声,后方无声影.结论超声检查可作为华支睾吸虫病的快捷而准确的影像学首选诊断方法,具有重要的临床实用价值.
作者:林萍;王筱芳;苏建平;刘国江;江泽良;崔一萍;丁辉 刊期: 2006年第03期
目的观察急诊经皮冠状动脉介入术后血栓前状态与术后冠脉并发症的关系.方法选择2003年至2005年期间50例因急性心肌梗死(AMI)在佛山市第二人民医院行急诊经皮冠状动脉介入术(PCI)的患者,于急诊PCI术后24 h内抽取静脉血测定血栓前状态指标D-D和PAT,所有患者观察28 d,根据术后有无严重冠脉并发症将患者分为两组,并发症组(A组)和非并发症组(B组),回顾性分析A、B两组的血栓前状态指标D-D和PAT,评价急诊PCI术后血栓前状态指标D-D和PAT与术后冠脉并发症的关系.结果所有50例AMI患者的血栓前状态指标D-D和PAT均较正常值升高,其中A组术后24 h内D-D为(1.8±0.4)ng/L,B组D-D为(0.8±0.2)ng/L,B组明显低于A组(P<0.001);A组术后24h内PAT为(44±10)s,B组PAT为(16±5)s,B组明显低于A组(P<0.01).结论急诊PCI术后血栓前状态指标D-D和PAT较正常值升高,D-D和PAT升高的水平是术后严重冠脉并发症的预测指标,积极降低D-D和PAT水平有可能明显降低术后严重冠脉并发症的发生率.
作者:梁健球;吴庆庆;余永卫;徐宁;黄永光 刊期: 2006年第03期