学术投稿

小鼠过继转移致敏小肠IEL抗弓形虫感染

刘红丽;殷国荣;沈嬿琼;元海军

关键词:弓形虫, 黏膜免疫, 过继转移 IgA, 小鼠
摘要:目的研究分离自弓形虫RH株速殖子经口感染小鼠后不同时间点的小肠上皮内淋巴细胞 (intraepithelial lymphocyte, IEL)过继转移抗弓形虫感染作用,探讨其作用机制.方法 BALB/c鼠经口感染弓形虫速殖子 5× 104个 /只或未感染,作为供体提供 IEL.同品系受体鼠分为实验组 (IEL7组、 IEL9组、 IEL11组、 IEL13组和 IEL15组 )和对照组 (IEL0组 ),每组 6只小鼠.受体鼠经尾静脉分别接受分离自供体鼠经速殖子感染后第 7、 9、 11、 13、 15天的致敏 IEL或未致敏的 IEL 3× 105 /0.2 ml只.各组小鼠过继转移后第 4天,用弓形虫速殖子灌胃攻击,攻击后第 13天分离纯化脑、肺、脾组织弓形虫速殖子并计数,测定肠液 IgA含量.结果致敏 IEL过继免疫可使受体鼠脑、肺、脾组织内弓形虫速殖子数显著减少,接受感染后第 13天 IEL的小鼠组织内速殖子数减少为显著 (P< 0.01)脑、肺和脾组织内速殖子数比对照组分别减少 81.13%, 58.43%和 70.97%.致敏 IEL过继转移使肠道 IgA水平升高, IEL11组和 IEL13组显著高于 IEL0组 (P< 0.01).结论致敏 IEL过继转移能上调肠道黏膜的免疫应答,导致黏膜特异性 IgA分泌增加,诱导黏膜抗体的保护性免疫应答. IEL的这种保护作用具有致敏的时间依赖性,感染后第 13天分离的致敏 IEL对弓形虫感染具有大的保护作用.
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    目的通过调查了解旋毛虫病在云南省流行程度和分布情况,为制定防治措施和策略提供科学依据.方法根据以往人体感染和动物感染程度确定轻、中、重流行区,采用 ELISA检测法进行检测.结果共调查 10个县, 20个点的 10 109人份血清,血清阳性人数 852,阳性率 8.43%,以陇川县血清阳性率高 25.87%,文山县血清阳性率低 1.00%; 30~ 40岁中青年组阳性率较高 10.64%,血清学阳性率年龄大 79岁,小 2岁;血清学阳性与地区、年龄、居住地、生吃或半生吃猪肉和用不洗砧板切熟食等生活、行为习惯的关系具有统计学差异 (χ 2=767.64、χ 2=65.66、χ 2=9.435、χ 2=22.19, P< 0.005),男女性别与血清学阳性无统计学差异 (χ 2=0.851, P >0.005). 结论旋毛虫病为我省重要公共卫生问题,各级卫生部门加强卫生宣教,健全农村食品卫生监督制度.

    作者:汪丽波;杜尊伟;王学忠;董莹;姜进勇;李菊升;刘慧;李春富 刊期: 2005年第01期

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    目的分离纯化日本血吸虫成虫 (AWA)和未成熟虫卵 (SIEA)可溶性抗原中的单一蛋白,为血吸虫病 免疫诊断、预防提供新的抗原分子.方法柱层析分离纯化成虫和未成熟虫卵可溶性抗原, SDS- PAGE及银染色进行分析鉴定.结果得到了三种不同大小血吸虫分子抗原 AWA18 000u, SIEA42 000u, SIEA130 000u.结论实验证明柱层析法是一种快速分离纯化血吸虫单一组分抗原简单而有效的方法.

    作者:彭先楚;汪世平;周松华;姜孝新;吕志跃;徐绍锐;肖小芹;曾少华;余俊龙;戴橄;李文凯;吴仕筠 刊期: 2005年第01期

  • 广州化妆品生产车间空气尘埃粒子的特征

    目的探索化妆品生产车间空气尘埃粒子在不同时间、不同季节和不同生产车间的分布情况,对化妆品生产企业的 GMP建立提供科学依据.方法选择广州市采用空气过滤净化系统的化妆品厂 11家 (以下简称净化厂 )和非采用空气过滤净化系统的化妆品厂 13家 (以下简称非净化厂 ),分别在不同生产时间、不同季节和不同生产车间的情况下,分析车间空气中 0.3、 0.5、 1、 2、 3、 5μ m尘埃粒子数的分布情况,评价其污染水平.结果净化厂和非净化厂在生产中均产生不同程度的尘埃粒子污染 ;净化厂空气中尘埃粒子在季节上基本无统计学意义,非净化厂季节上主要以中、大颗粒粒径尘埃粒子 (1、 2、 3、 5μ m)有统计学意义,夏秋季高于冬春季;生产车间中净化厂以配制间、配料间和分装间产生的尘埃粒子浓度相对较高,非净化厂以配制、卫生通道、更衣室产生的尘埃粒子浓度相对较高.结论加强配制间、分装间和卫生通道的卫生管理,注意产品制作过程的密封工作,并改善制作和灌装设备;加强非净化厂生产过程的通风排气;制订洁净度标准,应不需考虑季节之分.

    作者:钟嶷;马林;郭重山;李小晖 刊期: 2005年第01期

  • Sysmex XE-2100全自动血液分析仪分析有核红细胞的临床应用评价

    目的探讨 Sysmex XE-2100全自动血液分析仪有核红细胞计数的准确性并作评价.方法准确性测定:分别用仪器法和显微镜目测法计数 38例抗凝静脉血的有核红细胞数( NRBC%),并将两者的结果进行比较.精密度测定:选择 3份有核红细胞数值不同的抗凝静脉血分别用仪器法和目测法测定,每份标本重复计数 10次,各自计算出 CV值进行比较.结果 38份抗凝静脉血仪器法计数的有核红细胞结果与显微镜目测法计数结果之间无显著性差异,经 t检验, P >0.05,相关系数 r为 0.9893, P< 0.01.仪器法和显微镜目测法对 3份有核红细胞数值不同的标本重复计数的平均 CV值分别为 7.9%和 15.1%,显示出仪器法的精密度明显高于目测法.结论 Sysmex XE-2100全自动血液分析仪计数有核红细胞是一种较准确、快速、精密的方法,可满足临床诊断、治疗及疗效观察的需要.

    作者:陈梅;方伟祯;傅玉如;林琼珠;许常珍 刊期: 2005年第01期

  • 生物可降解吻合环在结肠吻合中的应用

    目的探讨应用生物可降解环 (BAR)进行结肠吻合的手术技巧. 方法应用 BAR 27例行结肠切除术的患者行结肠吻合, 46例手工吻合, 观察手术时间, 手术并发症,术后恢复情况. 结果吻合环吻合组患者全部成功吻合, 手工吻合组出现 1例吻合口漏, 2例吻合口狭窄.两组间并发症的发生无统计学意义 (P >0.05).两组间手术时间、术后肛门排气时间、腹涨改善时间均有统计学意义 (P< 0.05). 结论用 BAR行结肠吻合, 操作简单方便、吻合可靠, 明显缩短手术时间, 术后恢复快.

    作者:李旺林;曹杰;唐伟镖 刊期: 2005年第01期

  • 幽门螺杆菌cag致病岛的研究现状

    细菌致病岛是指病原菌染色体上编码许多毒力相关基因的分子量较大 (通常为 20~ 100kb)的外源性 DNA片段,其两侧往往含有重复序列或插入序列.幽门螺杆菌的致病岛 cag,可能是由水平转移的方式来自于质粒或噬菌体. cagA基因是 cag致病岛的标志,具有多态性.表达细胞相关抗原 CagA的 HP菌株感染与消化性溃疡和胃炎、胃癌等疾病发生有密切关系.

    作者:陈文超;陈红庆;郭英;陈瑛 刊期: 2005年第01期

  • 内镜下粘膜内注射联合奥曲肽序贯治疗dieulafoy病

    目的观察内镜下粘膜内注射联合奥曲肽序贯治疗 dieulafoy病的疗效.方法 15例患者均经内镜确诊 dieulafoy病,先以高渗盐水、肾上腺素 (HSE)液行病灶粘膜内注射,再以 50μ g/h的剂量持续静滴 7d.结果 14例经该方法治疗止血成功,止血成功率为 93.3%, 1例再发出血,再出血率为 6.7%.结论内镜下粘膜内注射联合奥曲肽的序贯疗法能有效永久性地控制 dieulafoy病,并明显降低再出血率.

    作者:李明;黄仕洲;甘少光;严衍伟 刊期: 2005年第01期

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    目的利用杆状病毒-昆虫细胞系统构建日本血吸虫 (Schistosoma japonicum, Sj)Sj16基因重组杆状 病毒.方法从日本血吸虫尾蚴提取总 RNA,通过 RT- PCR扩增出 Sj16基因全编码区序列,将其克隆到载体 pET30a(+ )中,通过 PCR将 Sj16基因连同 pET30a(+ )多克隆位点下游的 6× His· Tag一起扩增出来,插入 donor载体 pFastBacHTa中,构建重组杆状病毒 donor载体 pFastBacHTa- Sj16- His,转化大肠杆菌 DH10Bac- GFP进行转座,提取重组 Bacmid,用 Lipofectin法转染昆虫细胞 Sf9使其包装成有感染性的重组杆状病毒.结果构建了含日本血吸虫 Sj16基因的重组 Bacmid- GFP- Sj16- His,转染 Sf9细胞后,获得了有感染力的重组杆状病毒. 结论成功构建了日本血吸虫 Sj16基因重组杆状病毒,为下一步重组 Sj16蛋白表达和 Sj16基因功能研究打下了基础.

    作者:胡少敏;王海;阮志燕;余新炳;吴忠道 刊期: 2005年第01期

  • 梅县农村生活饮用水水源水质卫生现状调查

    目的查清梅县农村生活饮用水水源水质卫生状况,为农村改水防病工作提供科学依据.方法采用普查和随机抽样相结合方法,水源水质按<生活饮用水标准检验规范> (2001)检验,依<农村实施〈生活饮用水卫生标准〉准则>评价.结果大多数农村居民 (94.03% )饮用浅层地下水,以井水、山泉水和手摇井为主.少部份居民 (5.97% )仍饮用不卫生的库、塘、河、沟等地表水源. 75.95%水源符合农村饮用水卫生标准Ⅰ、Ⅱ级水质.结论梅县水源水质自然本底良好,但农村生活饮用水水源水质受到不同程度的自然和人为污染,水源选择、卫生防护等方面还有缺陷.建议不宜饮用库、塘、河、沟等地表水源,加强水源防护及净化消毒水质.

    作者:黄念先;肖奎光;刘思强;周志汀;巫卓英;熊杏茹 刊期: 2005年第01期

  • ICAM-1表位模拟肽的合成与鉴定

    目的对合成的 ICAM- 1模拟肽 P1(KLYLIAEGSVAA) 的抗原性及生物活性进行鉴定. 方法化学合成 ICAM- 1模拟肽 KLYLIAEGSVAA,以间接 ELISA及竞争抑制试验鉴定合成肽的抗原性,以玻片免疫组化方法鉴定合成肽的生物活性.结果合成肽能与抗 ICAM- 1单抗 15.2发生特异性结合,并且能够竞争抑制 ICAM- 1分子及相应的阳性噬菌体克隆与单抗 15.2的结合作用.玻片免疫组化显示合成肽及 ICAM- 1分子均能有效抑制相应的阳性噬菌体展示肽与白细胞的结合.结论合成的短肽具有 ICAM- 1与 15.2抗体结合的抗原性,并能有效模拟 ICAM- 1分子与白细胞结合的功能.

    作者:郝文波;徐伟文;李明;王萍 刊期: 2005年第01期

  • 霍乱弧菌毒力强弱及菌株同源性的快速检测

    目的建立一套快速检测霍乱弧菌毒力强弱及不同菌株同源性的实验方法.方法设计 4对引物进行多重 PCR检测菌株毒力基因特征;采用随机扩增多态性 DNA(RAPD)结合 SPSS软件分析不同菌株的同源性.结果通过多重 PCR同时检测菌株 CtxA、 TcpA、 Ace、 Zot 4种主要的毒力基因,并快速判定其毒力强弱; RAPD产生的指纹图谱条带清晰、数目较多、片段大小分布均匀,结合 SPSS软件分析可判断菌株间的同源性关系.结论多重 PCR和 RAPD结合 SPSS软件分析可在 4h内完成对霍乱弧菌毒力强弱及不同菌株间同源性的检测,有助于在疫情处理中判断病菌来源和及时采取适当的处理措施.

    作者:易鸿;王鸣;刘于飞;莫自耀;李孝权;范健文 刊期: 2005年第01期

  • HBV大分子表面蛋白基因真核重组载体的构建与鉴定

    目的构建包含人乙型肝炎病毒 (HBV)大分子表面蛋白基因的重组载体,以便进一步研究其基因免 疫以及对宿主细胞丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)p38等信号传导通路的影响.方法设计合成 2对寡核苷酸引物,以 adr亚型 HBV质粒 pHBV DNA为模板,采用 PCR法分别扩增 HBV 大分子表面蛋白基因 (preS1/S2/S基因 )片段;用 HindⅢ和 BamH I双酶切后,连接到质粒 pcDNA3.1(+ )相应酶切位点,转化宿主菌 DH5α,分别用上述内切酶双酶切及 DNA测序鉴定重组质粒.结果酶切鉴定示所切下的片段大小均与预计相符.测序结果与文献报道序列及预计结果一致.结论成功构建了 HBV 大分子表面蛋白基因的重组载体.

    作者:李志刚;杨林;江元森;顾琳;姚集鲁 刊期: 2005年第01期

  • 日本血吸虫精氨酸酶基因启动子序列的扩增及序列分析

    目的获取日本血吸虫(Sj)精氨酸酶(ARG)新基因的DNA编码序列及其启动子序列,实验验证ARG基因编码序列的完整性.方法 以日本血吸虫成虫 DNA做模板,PCR扩增 ARG基因编码区的DNA序列并测序;根据Sj ARG基因已扩增的 DNA序列设计2条巢式引物,用TaKaRa LA Taq PCR Cloning in vitro Kit,扩增 Sj ARG基因的启动子序列;对已扩增得到的序列进行 TATA盒的寻找以分析启动子序列的位置,实验验证我们曾获取的 Sj ARG新基因编码序列的完整性. 结果 扩增得到长约 1 000bp ARG基因 DNA序列 , Sj ARG基因 DNA序列内没有内含子,与 cDNA序列完全一致.对启动子序列扩增后,得到一略大于 250bp的序列,测序后分析发现其中有 36bp与 ARG基因 DNA序列的 5′端重叠.因此 ,将精氨酸酶基因的 DNA序列又向前延伸了 221bp,与前面得到的序列拼接后得到一条 1 486bp的总序列,将该序列在 NCBI上进行 ORF的寻找发现其长的 ORF达 1 164bp,起始密码子在第 156位,终止密码子在第 1 319位 ,该起始密码子前 32位为 TATA盒的位置.因此,确定该 Sj ARG基因全长 cDNA编码序列长应为 1 164bp.结论 成功扩增获得了日本血吸虫精氨酸酶基因编码区的 DNA序列,其不含有内含子;并扩增得到了该基因的启动子序列,从而获得了 Sj ARG基因真正的全长 cDNA序列,为进一步的功能鉴定奠定了基础.

    作者:李孜;余新炳;吴忠道 刊期: 2005年第01期

  • 南水北调中线引江济汉水利工程对血吸虫病流行的影响

    目的了解引江济汉水利工程对血吸虫病流行的影响及流行趋势,制定防治对策. 方法制定统一的现场调查方案,对工程区涉及的 8个市县试点疫区人口地理位置、自然环境、国土面积及近 4年内血吸虫病疫情及螺情资料进行收集立档建库. 结果工程区涉及 3个市、县、区,现有钉螺面积 15.81万 m2,血吸虫病人 105人.补水区涉及 5个市、县、区,现有钉螺面积 130.5万 m2,血吸虫病人 2 510人.整个工程区渠道流域路线大部分地域为血吸虫病非流行区,且疫情较轻.结论工程区仍然存在着血吸虫病流行的潜在威胁因素和地域条件,如果没有按血防措施的要求去实施,局部爆发血吸虫病流行是可以发生的.

    作者:戴裕海;黄水生;刘建兵;廖洪义;蒋勇;何汇 刊期: 2005年第01期

  • 上海市南汇区人体寄生虫感染状况调查分析

    目的了解和分析南汇地区人体寄生虫感染的现状.方法选择 5个点,以整群抽样的常住人群为调查对象,粪便检查肠道寄生虫、以血清学检测绦囊虫、特殊人群弓形虫的感染情况.结果对 424人进行绦囊虫调查,阳性率 0.24%;弓形虫血清学检测 117人,阳性率 1.71%;肠道寄生虫调查人数为 1 719人,感染人数 62人,感染率为 3.61%,其中蛔虫的感染率为 0.58%,鞭虫为 2.50%, 钩虫为 0.12%, 蓝氏贾第鞭毛虫为 0.64%,蛲虫为 0; 男女性别的感染率没有显著差别 (χ 2=1.68, P >0.05);年龄组感染率以 70岁以上年龄组的感染率为高,达 6.67%;不同职业人群感染率以农民为高;不同文化程度感染率以文盲的感染率为高,文化程度越高,感染率越低.结论经过反复防治,人体寄生虫感染率有了明显的下降,防治的重点人群已由学生转为农业人群,年龄组由低龄转向 50岁以上人群.寄生虫感染与生产方式、生活习惯、卫生条件等有关,所以要加大宣传力度,提高人们卫生意识、改变生活习惯等以控制寄生虫的感染.

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    目的了解广州开发区企业职工肝病发病情况,协助企业做好肝病防治工作,防止肝脏疾病的发生和发展. 方法对 1 638例被检者采用 ELISA法检测血清中 HBV的抗原抗体.对其中 242例办公室人员用超声诊断仪检查肝脏和胆囊.结果 HBsAg阳性率为 9.83%,男性为 10.97%,女性为 5.93%. ALT异常的发病率为 4.88%,其中不明原因的占 71.25%.超声诊断仪发现肝病的发病率为 16.94% (其中脂肪肝 12.4%、肝囊肿 0.83%、肝胆结石 1.65%、胆息肉 0.83%和胆囊炎 1.24% ),与 HBsAg阳性率相比,差异非常显著 (P< 0.001).结论企业职工各种肝病的检出率高,应做好肝病防治工作.

    作者:叶华清;陈茂招;黄莉;李莉 刊期: 2005年第01期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会