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耶尔森菌HPI毒力岛全岛缺失突变载体的构建

胡静;俞守义;阚飙;刘志华

关键词:强毒力岛, 耶尔森菌, 自杀质粒
摘要:目的构建耶尔森菌 HPI毒力岛全岛缺失突变载体, 为进一步构建 HPI全岛缺失株打下基础. 方法根据已知小肠结肠炎耶尔森菌 HPI毒力岛基因序列设计 PCR引物,扩增并克隆 irp8结构基因,作为同源重组的一侧序列, 以 irp5的部分序列作为同源重组的一侧序列, 并将之克隆入同一载体, 中间插入有卡那霉素( Km)基因( kan)抗性标记. 以自杀质粒 pCVD442为载体, 构建了含有 irp8基因和 irp5部分序列的缺失突变载体 pCO85.结果构建的突变载体经酶切及 PCR鉴定克隆片段大小与预期一致.结论成功构建了致耶尔森菌 HPI毒力岛全岛缺失突变载体,这个以小肠结肠炎耶尔森菌为靶序列构建的重组自杀质粒可应用于肠杆菌科及其他菌属 HPI毒力岛全岛缺失株的构建.
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  • p53、CD34与nm23在肝癌诊断及临床预后中的作用

    目的探讨 p53、 CD34和 nm23基因蛋白表达在肝癌诊断及临床预后中的意义. 方法用免疫组化 SP法检测 50例肝癌组织和 55例肝非癌性增生结节 p53、 nm23、 CD34的表达,分析它们与肝癌临床病理特征的相关性.结果 p53、 CD34在肝癌组织的表达比非癌组明显增高,且在肝癌组中伴有与不伴门脉瘤栓的两组间有统计学差别( P< 0.05). Nm23则在非癌组中表达率高,而且 nm23在癌组织中的表达与显著的瘤周淋巴细胞浸润有关( P< 0.05).不同蛋白组合联合分析生存情况发现: P53(+)、 CD34(+)、 nm23(-)组同其他组相比,生存时间明显为短( P< 0.05).结论 p53、 nm23、 CD34的综合表达对肝癌有重要的辅助诊断价值 ,并且 p53突变、 CD34的高表达似乎可作为肝癌预后不良的可行性指标.

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  • 2004年广州首例输入性登革热的临床分析

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