学术投稿

弓形虫 SAG1基因的表达及其诱导的细胞免疫应答

黄达娜;吴少庭;袁仕善;张仁利;高世同;龙彩虹;林琦萍;雷明军;潘晖榕

关键词:弓形虫, 真核表达质粒pVAX1-SAG1, 体外表达, 细胞免疫
摘要:目的分析弓形虫 SAG1基因真核表达质粒的体外表达及其诱导小鼠的细胞免疫应答.方法重组表达质粒 pVAX1-SAG1瞬时转染 vero细胞, Western blot法检测在细胞中的表达.将重组真核表达质粒 pVAX1-SAG1及空质粒 pVAX1于 0、 4周分别经肌注免疫 BALB/c小鼠;第 8周杀鼠,取脾,分离淋巴细胞,分别经 ConA和抗原刺激,用 MTT法测定免疫鼠脾脏 T淋巴细胞转化率 ;使用直接免疫荧光法 ,用流式细胞仪对 CD4+、 CD8+ T细胞亚群进行测定;两组小鼠经弓形虫速殖子攻击感染,计算存活期.结果 Western blot法分析转染细胞,发现存在弓形虫感染血清识别的 26 000u的特异带,与理论值相符 ;抗原刺激小鼠脾 T淋巴细胞发生增殖反应 , 免疫组与空质粒对照组间差异有显著性 (P< 0.05),但 ConA刺激小鼠后,两组间差异无显著性 (P >0.05); T细胞亚群 CD4+、 CD8+动态分析 ,CD4+、 CD8+ T细胞数量均升高,免疫组与空质粒对照组差异均有显著性 (P1< 0.05, P2< 0.05).弓形虫攻击感染,免疫组鼠的平均存活时间较空质粒对照组延长.结论 真核表达质粒 pVAX1-SAG1在 vero细胞中获得表达 ,且能诱导 BALB/c小鼠产生细胞免疫应答.
热带医学杂志相关文献
  • 民航飞行员心理健康状况的调查分析

    目的本研究以 SCL-90等调查结果,分析民航飞行员的心理健康状况,并为今后进一步的相关研究奠定基础.方法采用临床症状自评量表( SCL-90)、焦虑自评量表( SAS),以某航空公司现役飞行员和非特殊工种地勤人员为调查对象,测量他们的心理健康状况.结果民航现役飞行员 SCL-90得分比地勤人员略差,其中睡眠和饮食因子分差异有统计学意义.30岁以下的飞行员焦虑因子得分高于 30岁以上的飞行员( P< 0.05);副驾驶的 SAS分和 SCL-90中敌对、偏执因子分比机长高( P< 0.05);飞行时间在 1 000~ 3 000h之间的飞行员 SCL-90总分、强迫、睡眠和饮食、躯体、抑郁、精神病性因子得分高于飞行时间 1 000h以下和 3 000h以上的飞行员( P< 0.05).结论 应重视民航飞行员在不同时期、不同阶段的心理卫生问题,开展心理咨询,加强对他们的心理卫生保健工作.

    作者:李静;凌莉;梁朝辉;杨仕云;肖毅 刊期: 2004年第04期

  • 蒿属花粉 cDNA文库的构建和初步鉴定

    目的构建蒿属花粉 cDNA表达文库.方法应用定向克隆技术将相应 dscDNA片段插入λ ExCell/Not I/EcoR I/CIP载体的 Not I和 EcoR I双酶切位点间,经包装、转染宿主菌,构建成 cDNA文库.检测文库库容量和重组效率,并采用 PCR方法对插入片段大小进行分析.结果 成功构建了一个含有 5.6× 105个重组子的 cDNA表达文库,重组率为 100%,插入片段大小平均约 1.3kb.结论 所建文库容量及插入片段大小适合对蒿属花粉特异性重组变应原的进一步研究.

    作者:刘志刚;吉坤美;高波;何毅华;黄妩姣;吴晓蔓 刊期: 2004年第04期

  • 广州市东山、越秀区居民肥胖与高血压关系分析

    目的探讨广州市东山、越秀区居民肥胖与高血压的关系.方法根据 2002年广东省居民营养与健康状况调查方案,采用多阶段随机整群抽样方法,随机抽取广州市东山、越秀区常住居民,体检获取身高、体重、腰围、血压值,并对资料进行描述性分析.结果两个区居民超重率男性为 33.3% (标化率 26.66% ),女性为 28.4% (标化率 21.91% );肥胖率男性为 6.7% (标化率 6.4% ),女性为 7.2% (标化率 5.09% );标化超重率、标化肥胖率男、女性间差异均没有统计学意义( P >0.05);男女性的平均收缩压、舒张压均随着体重指数的上升而上升( r男收缩压 =0.751,r男舒张压 =0.547, r女收缩压 =0.801,r女舒张压 =0.587,P< 0.01);男女性的高血压患病率随着体重指数的上升而上升(趋势χ 2男 =30.32,趋势χ 2女 =121.32, P< 0.01);男女性腹部肥胖组的平均收缩压、舒张压及高血压患病率均高于腰围正常组( P< 0.01).结论超重和肥胖与高血压有关联,是高血压的重要影响因素.

    作者:刘伟佳;邱小玲;方芳;马文军;罗不凡;潘冰莹 刊期: 2004年第04期

  • 兴宁市1999~ 2003年新生儿破伤风流行病学分析

    目的分析广东省兴宁市 1999~ 2003年新生儿破伤风( NNT)发病情况,探讨有效的防治措施.方法对 1999~ 2003年兴宁市新生儿破伤风疫情资料进行分析.结果 5年共报告 NNT 10例,其中本地人口病例 4例,流动人口 4例,外地前来就医 2例, 病死率 20%.本地发生病例 8例分布于本市 7个镇.7月病例多,占 40%.发病日龄集中在出生后 5~ 7d.结论 今后应继续推广住院分娩,普及新法接生,加强流动人口育龄妇女的妇幼保健工作,宣传新生儿破伤风防治知识,革除产妇野外分娩的陋俗,有计划开展育龄妇女破伤风类毒素免疫接种工作,继续做好 NNT疫情监测工作,巩固兴宁市消除新生儿破伤风目标成果.

    作者:赖利玲;傅浩忠 刊期: 2004年第04期

  • 体外诱导蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的成囊和脱囊

    目的在体外诱导蓝氏贾第鞭毛虫 C2株完成其生活周期.方法通过提高改良 TY-S-33培养基中的胆汁浓度至 10mg/ml、 pH至 7.8来诱导成囊;体外诱导的包囊先经酸刺激,再用胰蛋白酶处理而诱导其脱囊.结果体外成功诱导了蓝氏贾第鞭毛虫的成囊和脱囊.体外诱导的包囊呈椭圆形,光镜下观察有折光性,经诱导后,部分脱囊或完全脱囊成滋养体,形成的滋养体接近于梨形.结论 通过诱导,蓝贾第鞭毛虫 C2株可在体外完成其生活史.

    作者:朱艳红;牛安欧;卢思奇 刊期: 2004年第04期

  • 肥胖症及 2型糖尿病合并肥胖症患者皮下脂肪组织resistin mRNA的表达

    目的探讨肥胖症、 2型糖尿病合并肥胖症患者及正常对照者皮下脂肪组织中 resistin mRNA表达情况.方法应用半定量逆转录聚合酶链反应检测 17例肥胖症、 12例 2型糖尿病合并肥胖症患者及 10例正常对照者皮下脂肪组织 resistin mRNA表达,同时逆转录 resistin基因特异片段和内参照片段 GAPDH,以二者的积分吸光度比值作为 resistin mRNA的相对表达量.结果肥胖症、 2型糖尿病合并肥胖症及正常对照组三者间 resistin mRNA的相对表达量.肥胖症、 2型糖尿病合并肥胖症及正常对照组三者间 resistin mRNA表达量无明显差异( 3组积分吸光度比值 I/r分别为 1.36± 0.43 、 1.39± 0.51、 1.31± 0.45,两两比较 P >0.05).结论 Resistin mRNA表达可能与肥胖症、 2型糖尿病关系不密切.

    作者:李小庆;马中富;廖晓星;李玉洁;何祥梁;何东华 刊期: 2004年第04期

  • 19例多发性硬化患者的临床护理体会

    目的通过对多发性硬化( multiple sclerosis, MS)患者的护理,提高患者的生命质量,延长其生命力.方法回顾本科从 1985~ 2002年收治 19例 MS患者病例的资料,对其护理要点进行归纳、总结.结果对 MS患者提供精心、细致的临床观察及护理,在 19例患者中,除 2例由于病情反复、衰竭死亡外,其余都有不同程度的稳定、好转.结论由于 MS是一种以中枢神经系统炎性脱髓鞘为主要病理改变的神经系统疾病,主要症状累及神经,采用有效的护理措施,可以减轻神经功能障碍带来的痛苦和护理不当引起的并发症.

    作者:莫玉芬;潘小兰;杨桃;莫子婵;欧秀梅 刊期: 2004年第04期

  • 婴儿急性上消化道出血75例临床研究

    目的为探讨引起婴儿急性上消化道出血的常见原因、出血程度与临床表现,以研究防治方法.方法对 75例婴儿进行生命体征评估及行相应实验室检查,并进行相关影像学检查.结果维生素 K缺乏症 25例,占 33.33%;应激性溃疡 23例,占 30.67%;反流性食管炎 7例,占 9.33%;感染性腹泻 5例,占 6.67%;坏死性小肠炎 5例,占 6.67%;肠套叠 3例,占 4%;多脏器功能损害 3例,占 4%;白血病 2例,占 2.67%;十二指肠憩室 1例,占 1.33%.伴面色苍白 62例,占 82.67%;全身软弱,哭声无力 60例,占 80%;四肢冷 55例,占 73.33%;少尿 49例,占 65.33%;神志不清 28例,占 37.33%;血压下降 53例,占 70.66%.治愈 69例( 84%),未愈 3例( 4%),死亡 3例( 4%).结论婴儿急性上消化道出血病因以维生素 K缺乏和应激性溃疡为主,极易出现失血性贫血和失血性休克;应采取积极治疗原发性疾病、注意喂养和及早使用维生素 K为主的综合防治方法.

    作者:张小玲 刊期: 2004年第04期

  • 静脉药物配置中心的建立在临床中的应用

    静脉输液药物集中配置、管理是我国医院管理的一项新举措.长期以来,临床静脉输液中的加药工作一直是由护士在治疗室独立完成,这种方式存在着很多不足之处.在这种环境污染下,职业健康安全管理越来越受到各国政府的重视.为了提高服务质量,预防和控制可能存在的环境污染及职业健康安全风险,国家颁布 GB/T24001~ 1996<环境管理体系规范和使用指南>, GB/T28001-2001<职业健康安全管理体系规范>标准,引进国外的先进管理模式,此项工作由药师和护士共同完成,以期达到合理用药减少药物的流失和浪费,科学配置、降低输液反应.静脉药物配置中心把静脉药物配置从普通环境的治疗室转为在具有洁净条件的配置中心进行集中管理配置,保证配置出来的药品安全无菌、有效.需要输液的患者在舒适、整洁和安静的环境下进行输液,减少临床护理工作量的目的,把更多的时间还给病人.这为顺利实施静脉配置中心的项目提供了保障,确保了输液中心正常运行.

    作者:林丽珍;莫灶娣;黄小茜;朱影;李海燕;梁瑞花 刊期: 2004年第04期

  • 一种新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因

    目的铁氧还蛋白系铁硫蛋白,在多种反应体系中起着传递电子的作用,也参与抗滴虫药物甲硝咪唑杀虫作用的激活.本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因,以便进一步探讨其生理功能.方法 构建阴道毛滴虫 cDNA表达文库,分离 cDNA进行克隆、测序及序列分析.结果在分离出的 cDNA克隆中发现一个新的铁氧还蛋白基因.该基因读码框全长 312 bp,相应蛋白质序列具 103个氨基酸;在该蛋白质前体的 N端带有 10个氨基酸残基的氢酶体靶片段 (MLSQCSPLRF).序列分析显示该铁氧还蛋白 (TvFd2)与已报道的阴道毛滴虫铁氧还蛋白 (TvFd)有高度同源性 (69% ); TvFd2与铁氧还蛋白 (2Fe-2S)的两大亚类 (氧化酶铁氧还蛋白和光合铁氧还蛋白 )均具较低的同源性;可与 (2Fe-2S)结合的 4个半胱氨酸排列成典型的铁氧还蛋白保守序列 (-C-X5-C-X2-C-Xn-C-).结论分析表明 TvFd2是一新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白,其功能有待进一步研究.

    作者:傅玉才;徐虹;章家新;张可浩;刘红;林晖榕;郑晓虹 刊期: 2004年第04期

  • 顺德区人体肠道寄生虫感染现状及防治效果分析

    目的了解和分析顺德区人群肠道寄生虫感染现状,评价多年来的防治效果.方法采取改良加藤氏厚涂片法检查肠道寄生虫卵,并对检查结果进行分析讨论.结果 共调查 1 561人,查出肠道寄生虫 4种,感染总人数 880人,感染率为 56.37% ,其中感染肝吸虫、蛔虫、鞭虫、钩虫人数分别为 792、 36、 37、 80人,感染率分别是 50.74%、 2.31%、 2.37%和 5.12%.男女感染率分别为 58.89%和 53.78% ,差异有统计学意义(χ 2=4.14, P< 0.05).未成年组( 0~、 10~岁组)与成人组( 20~岁)感染率分别为 39.57%和 60.81% ,差异有统计学意义(χ 2=47.31, P< 0.01);不同镇的感染率有显著性差异(χ 2=6.04, P< 0.05).结论 肠道寄生虫感染与生产方式、生活习惯、卫生条件等因素相关.加大宣传力度,提高人们卫生意识、改变生活、饮食习惯是控制肠道寄生虫感染的有效措施.

    作者:谭覃;曾碧强;马健强;曹富鹏;吴艳霞 刊期: 2004年第04期

  • 继发性棘球蚴病小鼠体内细胞因子改变的研究

    目的通过利用钙拮抗剂维拉帕米和阿苯哒唑单独及联合用药治疗小鼠继发性棘球蚴病的疗效观察,探讨小鼠体内细胞因子的变化趋势.方法小鼠被随机分成 7组(维拉帕米、阿苯哒唑的单用组、维拉帕米和阿苯哒唑的联合用药组、对照组).给予药物治疗 90d后,小鼠眼球取血,检测血清 IL-2、 IL-10和 IgE的含量.结果治疗 90d后,小鼠血清 IL-2、 IgE含量与对照组相比有显著性差异( P< 0.05), IL-10的含量与对照组比无明显差异.结论 IgE、 IL-2和 IL-10可以作为判断治疗棘球蚴病疗效的指标.

    作者:曹得萍 刊期: 2004年第04期

  • 小儿手足口病46例临床分析

    目的了解小儿手足口病的发病特点及流行病学规律,以提高对该病的认识,减少误诊,防止本病爆发流行.方法对 46例小儿手足口病临床及流行病学资料进行回顾性分析.结果手足口病好发于 3岁左右学龄前儿童,易发生集体感染;误诊 8例,误诊率为 17.3%;有 2例并发心肌损害.46例均治愈.结论 对该病认识不足是导致误诊的主要原因.小儿手足口病预后良好,但易并发心肌损害.加强疫情报告,控制疫情扩散,是预防爆发流行的重要措施.

    作者:吴时光 刊期: 2004年第04期

  • 江滩型地区不同季节人畜血吸虫感染规律的研究

    目的了解在当前农村社会、经济状况下江滩型地区人畜血吸虫感染规律,为制定符合该类地区特点的血吸虫病防治对策提供依据.方法分别在 2002年 6、 9月下旬和 12月上旬用单纯随机抽样的方法在三联村 5周岁以上常住沿江居民中随机抽取 500人,利用 Kato-Katz法进行 1粪 3检,阳性者计算虫卵数,对该村所有耕牛用棉析孵化法检查是否感染,以判断春、夏、秋不同季节人畜血吸虫感染情况.结果总体看来,人群感染率夏季为 12.93%,显著高于春( 4.23%)、秋 (2.69% )季,春季略高于秋季,但差异无显著性.不同性别、职业、文化程度人群夏季感染率均显著地高于春秋季,除农民春季明显高于秋季外,其余春秋季之间差异均无显著性.病人感染度秋季 (178.14± 147.44)高,夏季 (127.03± 186.52)次之,春季 (18.96± 13.54)低.耕牛感染率夏季 (42.62% )显著高于春 (7.41% )、秋 (1.75% )季,春季略高于秋季,但差异无显著性.结论江滩型地区人畜感染血吸虫的主要季节在夏季,秋季感染率低.

    作者:何家昶;夏长根;但新民;王恩木;姚振琦;俞宗国;蔡伟;吴维铎;聂明保 刊期: 2004年第04期

  • p38 MAPK 信号转导通路研究进展

    丝裂原活化蛋白激酶( mitogen activated protein kinase, MAPK)是细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,它存在于大多数细胞内,是真核细胞转导细胞外信号到细胞内引起细胞反应的一类重要信号系统.它通过影响基因的转录和调控,进而影响细胞的生物学行为,如细胞增殖、分化、转化及凋亡等 [1].研究发现,其中的 p38 MAPK信号通路参与了细胞的生长发育及细胞间功能同步等多种生理过程,并与炎症、应激反应的调控密切相关,被认为是细胞信息传递的交汇点和共同通路.

    作者:唐皓;马中富 刊期: 2004年第04期

  • 中式肉干生产过程中HACCP系统的应用探讨

    目的探讨 HACCP体系在中式肉干等熟肉制品加工生产过程中的运用.方法参照卫生部食品企业 HACCP实施指南,选择广州某区肉类制品公司,通过对产品描述,生产加工过程的危害分析,确定危害性显著的控制措施.结果 初步确定冻肉验收、烘烤、探测金属碎屑三个环节为关键控制点.针对关键控制点提出相关干预措施.结论该系统是适合中式肉干类熟肉制品食品安全卫生质量管理系统.

    作者:马林;谭铭雄;贾煦;彭志丽;何洁仪 刊期: 2004年第04期

  • 异尖线虫病概述

    异尖线虫病是由异尖线虫科某些种的活的第三期幼虫感染而引起的疾病,可引起人的急腹症、过敏性症状等.异尖线虫病呈世界性分布,已成为重要的食源性人兽共患寄生虫病,严重威胁人类的健康,是我国禁止入境的二类寄生虫病.本文综述了该病的病原学、流行病学、病理变化、症状、诊断及其治疗和预防.

    作者:曹湛;刘劲松;何芳;林瑞庆;朱兴全 刊期: 2004年第04期

  • 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征合并高血压患者肾功能及尿微量白蛋白水平变化及意义

    目的观察单纯阻塞性睡眠呼吸暂停综合征( obstructive sleep apnea syndrome, OSAS)和 OSAS合并高血压患者肾功能及尿微量白蛋白水平的变化,探讨其临床意义.方法研究分两组,单纯 OSAS组 30例, OSAS+高血压组 48例.采用多导睡眠呼吸监测仪和全自动生化仪检测观察指标及肾功能指标.结果 OSAS+高血压组病人的血氧饱和度、血氧低于 90%的时间、低血氧饱和度、长呼吸障碍时间和呼吸紊乱指数与单纯 OSAS组比较,无显著差异.OSAS+高血压组病人的血压明显高于单纯 OSAS组( P< 0.01).单纯 OSAS组病人肾功能 (BUN, Cr, Ccr、 MAU)未发现异常,但 OSAS+高血压组病人 BUN、 Cr, Ccr和 MAU均有异常,并且 MAU改变更为明显,与单纯 OSAS组比较,有显著差异.结论 OSAS合并高血压时已出现肾功能损害, MAU评估 OSAS患者肾小球损害灵敏度高于常规肾功能检测指标.

    作者:李磊;粟俊;张海钢 刊期: 2004年第04期

  • Sysmex XE-2100全自动血液分析仪分析血小板性能评价

    目的探讨 Sysmex XE-2100全自动血液分析仪分析血小板的性能并作评价.方法对 Sysmex XE-2100分析血小板的精密度、线性范围和携带污染率进行测定,再对 Sysmex XE-2100测定的 120例住院病人血标本的血小板结果与显微镜计数结果进行相关性分析.结果 XE-2100全自动血细胞分析仪分析血小板的精密度、线性范围和携带污染率均在允许范围内; Sysmex XE-2100分析血小板结果与显微镜计数结果相关性良好.激光法相关系数 r为 0.9937, P< 0.01;电阻抗法 r为 0.9854、 P< 0.01.结论 Sysmex XE-2100血细胞分析仪分析血小板的性能良好,具有准确度高、重复性好、检测速度快和简便快捷等优点,是常规实验室测定血小板(尤其是低值血小板)的较理想仪器.

    作者:陈梅;方伟祯;傅玉如;鲍蕴文;肖旺贤 刊期: 2004年第04期

  • 日本血吸虫线粒体 DNA的遗传变异

    目的对中国不同自然隔离群的日本血吸虫线粒体 DNA进行遗传变异的研究,为中国日本血吸虫地域株的划分提供依据.方法采用聚合酶链反应( PCR)技术对中国 7省 11地日本血吸虫的线粒体 NADH脱氢酶 1( ND1)和细胞色素 C氧化酶 1( CO1)基因片段进行扩增,将扩增产物测序,计算序列遗传距离( D).用 SAS统计分析软件绘制聚类图.结果两片段 PCR扩增产物分子量分别为 450与 470左右;其中中国大陆与中国台湾日本血吸虫之间的 D为 0.1710~ 0.5003;中国大陆各地域株之间 D为 0~ 0.4179;中国大陆山区型日本血吸虫之间 D为 0;中国大陆湖沼洲滩型日本血吸虫株之间 D为 0.0451~ 0.1481;湖北省境内 5个不同地域株之间 D为 0~ 0.0112.结论中国日本血吸虫在线粒体 DNA水平上至少可分为不同层次的 5类:①中国台湾;②云南洱源、四川天全;③湖北 5地; ④安徽贵池、湖南岳阳、江西新建.其中①与其它余几类在总体上可分为两大类.

    作者:郭凯文;牛安欧 刊期: 2004年第04期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会