学术投稿

2003年广州市登革1型病毒流行株的分离及NS2基因序列分析

卢业成;江振友;陈万山;任瑞文;方美玉;王少珍;程刚锋;田小东;刘建伟;尹炽标

关键词:登革病毒, 病毒分离, 逆转录-聚合酶链反应, 序列分析
摘要:目的对广州市区 2003年仲夏一批疑似登革病毒感染的患者进行确诊,并从基因水平分析流行株的可能来源.方法用免疫层析法( ICT)检测早期疑似患者的 DV- IgM和 IgG抗体;同时用逆转录-聚合酶链反应( RT- PCR)、细胞培养病毒分离分别进行病原的分离和鉴定;对所分离到的毒株进行基因克隆、测序,并与国际参考株及国内流行株相应的序列进行同源性分析, 结合患者的流行病学资料推测本次流行株的可能来源. 结果发病 5d内患者 DV- IgM抗体阳性率为 56. 5%( 13/23),发病 5~ 10d的患者 DV- IgM抗体阳性率为 66. 7%( 16/24); DV- IgG抗体无 1例阳性.从 18份发病 5d内患者的血标本中分离病毒 7份,经 RT- PCR和基因测序检测证实为 DV1感染;用 RT- PCR检测 30份早期患者血标本,患者的阳性率为 83. 3%( 25/30).基因序列分析表明, 2003年流行株与登革 1型病毒柬埔寨流行株及我国 1997、 1999年登革 1型病毒流行株的同源性高,分别为 97%、 97%、 98%.所有患者在发病前两个月均在广州市区某大院内居住,无输血史、无外出史.结论 2003年广州登革热流行为登革 1 型病毒感染所致,推测广东可能存在登革 1型病毒的疫源地.
热带医学杂志相关文献
  • 媒介蚊虫易感性遗传基础

    本文就埃及伊蚊和冈比亚按蚊的遗传图谱构建与方法,构建遗传图谱的意义与价值,媒介蚊虫对病原体易感性遗传基础的研究概况做了综述.

    作者:郑学礼;郭妍 刊期: 2004年第06期

  • 2003年广州市登革1型病毒流行株的分离及NS2基因序列分析

    目的对广州市区 2003年仲夏一批疑似登革病毒感染的患者进行确诊,并从基因水平分析流行株的可能来源.方法用免疫层析法( ICT)检测早期疑似患者的 DV- IgM和 IgG抗体;同时用逆转录-聚合酶链反应( RT- PCR)、细胞培养病毒分离分别进行病原的分离和鉴定;对所分离到的毒株进行基因克隆、测序,并与国际参考株及国内流行株相应的序列进行同源性分析, 结合患者的流行病学资料推测本次流行株的可能来源. 结果发病 5d内患者 DV- IgM抗体阳性率为 56. 5%( 13/23),发病 5~ 10d的患者 DV- IgM抗体阳性率为 66. 7%( 16/24); DV- IgG抗体无 1例阳性.从 18份发病 5d内患者的血标本中分离病毒 7份,经 RT- PCR和基因测序检测证实为 DV1感染;用 RT- PCR检测 30份早期患者血标本,患者的阳性率为 83. 3%( 25/30).基因序列分析表明, 2003年流行株与登革 1型病毒柬埔寨流行株及我国 1997、 1999年登革 1型病毒流行株的同源性高,分别为 97%、 97%、 98%.所有患者在发病前两个月均在广州市区某大院内居住,无输血史、无外出史.结论 2003年广州登革热流行为登革 1 型病毒感染所致,推测广东可能存在登革 1型病毒的疫源地.

    作者:卢业成;江振友;陈万山;任瑞文;方美玉;王少珍;程刚锋;田小东;刘建伟;尹炽标 刊期: 2004年第06期

  • 广州市慢性非传染性疾病预防控制的思考

    由于慢性非传染性疾病(以下简称慢性病)日渐成为严重威胁人类健康的重要公共卫生问题,所以本市慢性病的防制已迫在眉睫.本文提出搭建以社区卫生服务机构为基础、市区两级疾病预防控制中心为技术支撑的慢性病三级防治网络.通过社区诊断,明确广州市慢性病的流行情况,主要危险因素,社区疾病防治支持系统和社区卫生服务需求利用情况等.为科学制订和实施社区慢性病预防控制方案,建立慢性病信息管理平台,培训基层医疗、预防保健人员,建立评价体系提供依据.以使慢性病预防控制工作有计划、有针对性、全面系统并可持续地进行.

    作者:潘冰莹;杨智聪;罗不凡;王建华;刘伟佳;陈健 刊期: 2004年第06期

  • TSo联合IFN-γ鼻内免疫小鼠诱导的弓形虫IgA抗体特异性免疫应答

    目的研究速殖子超声裂解物( TSo)和 IFN-γ鼻内免疫小鼠经口感染弓形虫速殖子后,血清、小肠液和粪便 IgA抗体分泌的动态变化.方法将 6~ 7周龄 BALB/c小鼠 100只随机分为 4组,每组 25只,分别用 10 μ l缓冲液 PBS、 20μ g TSo、 500U IFN-γ和 20μ g TSo+ 500U IFN-γ鼻内免疫小鼠.用 RH株弓形虫速殖子 4× 104个 /只灌胃攻击,分别于攻击后第 7、 10、 13、 16、 19天处死小鼠,收集血清、小肠液及粪便, ELISA法测定 IgA含量.结果各组血清 IgA抗体水平在攻击后第 10天达到峰值, TSo+ IFN-γ组血清 IgA抗体含量高于其他各组.小肠液和粪便 IgA抗体含量在攻击后第 13天达到峰值,在实验期各时点 TSo+ IFN-γ组小肠液和粪便 IgA抗体含量高于其他组.小肠液与粪便 IgA抗体水平呈正相关.结论 TSo或 IFN-γ或 TSo联合 IFN-γ鼻内免疫小鼠可诱导黏膜免疫,产生高水平的弓形虫特异性 IgA抗体. TSo联合 IFN-γ鼻内免疫优于单独免疫,免疫小鼠肠道产生大量 SIgA,发挥抗虫作用.鼻黏膜免疫是一种安全有效的免疫接种途径.

    作者:殷国荣;元海军;杨亚波;周永安;沈嬿琼;孟晓丽 刊期: 2004年第06期

  • 介入治疗心脏病致血管迷走神经反射的预防与护理

    目的探讨介入治疗心脏病致血管迷走神经反射的预防和护理措施.方法对 92例介入治疗心脏病的病人采取预防血管迷走神经反射,预防血容量不足,做好心理护理,加强监护,密切观察病情等措施.结果 经及时快速给予静脉输液,维持了有效循环血容量,提高了心率等,无其他并发症发生.结论有效的护理措施可预防血管迷走神经反射的发生.

    作者:张建华;邓月好;陈卫军 刊期: 2004年第06期

  • 树突状细胞过继免疫的研究进展

    树突状细胞是一种专性抗原提呈细胞,其过继免疫可转移免疫反应性,增强受体的免疫功能.目前, DC过继免疫已应用于抗多种肿瘤、病毒、寄生虫感染和诱导器官移植耐受的研究.

    作者:刘成芳;刘红丽;殷国荣 刊期: 2004年第06期

  • 日本血吸虫副肌球蛋白T细胞表位的预测和鉴定

    目的鉴定日本血吸虫副肌球蛋白的 T细胞表位. 方法用 SYFPEITHI软件预测日本血吸虫(中国大陆株)副肌球蛋白的 T细胞表位,候选表位分别命名为 P20、 P21、 P22、 P23、 P24.设计并合成候选表位的编码核苷酸,定向克隆入融合表达载体 pET- 32c(+ ),经酶切及测序鉴定出重组克隆. 阳性克隆经 IPTG诱导表达,表达产物以 Ni2+- NTA柱亲和层析及透析纯化.纯化后的硫氧还蛋白( Trx)融合蛋白体外刺激 C3H/HeJ及 C57BL/6小鼠腹股沟淋巴结或脾脏单个核细胞, 3H- TdR掺入法检测其增殖.结果候选表位中 P20、 P21、 P22、 P23能有效刺激 C3H鼠致敏淋巴细胞细胞增殖, P20、 P22能刺激 C57鼠致敏淋巴细胞增殖. 结论 P20和 P22可能是日本血吸虫副肌球蛋白的通用性 T细胞表位.

    作者:王新军;张兆松;王勇;吴海玮;张蕾;李光富;季旻珺;朱翔;蔡晓萍;刘丰;苏川;吴观陵 刊期: 2004年第06期

  • 江门市1999~2003年梅毒流行病学分析

    目的了解江门市 1999~ 2003年梅毒流行特征,为制定防治策略提供科学依据.方法对江门市 1999~ 2003年性病资料及人口数据进行统计分析. 结果目前江门市梅毒疫情仍处在较高的发病水平;发病年龄以 20~ 39岁为多,占 70.86%;一、二期梅毒占 87.57%. 结论应进一步加强梅毒的防治工作,规范梅毒的诊治,全面实施健康教育、行为干预等综合防治措施.

    作者:程文海;黄丽卿;黄艳 刊期: 2004年第06期

  • 静脉滴注低温液体对烧伤高热降温效果的研究与护理

    目的探讨静脉滴注低温液体对烧伤高热患者的降温效果.方法对 60例烧伤高热患者进行静脉滴注低温液体 ,观察体温和生命体征变化.结果 静脉滴注低温液体对 60例烧伤高热有差异 ,体温均下降至 38.5℃ ,滴注前后体温变化有显著性 (P《 0.05),有效率为 100%.结论 静脉滴注低温液体对烧伤高热患者有效、安全,是烧伤高热首选的降温方法.

    作者:张向群;何红梅;林雪虹 刊期: 2004年第06期

  • 梅县人群弓形虫感染情况调查

    目的了解梅县人群弓形虫感染情况,为预防控制提供科学依据.方法选择重点人群,采用 ELISA进行弓形虫抗体 IgM、 IgG检测. 结果共调查 504人, 人群弓形虫抗体阳性率 10.12%,其中 IgM阳性率 4.56%, IgG阳性率 5.56%.男性阳性率 11.50%,女性阳性率 9.21%,两者间无显著性差异.屠宰员阳性率 26.67%;婚前妇女、孕妇、妇科病人阳性率 10.23%;招工体检人员阳性率 7.77%;医护人员阳性率 5.88%.养猫、狗等宠物的人群阳性率 16.33%,不养者阳性率 8.62%,两者间有显著差异. 结论 梅县存在人类弓形虫感染,阳性率高于全国平均阳性率水平.以屠宰员阳性率高,其次为婚前妇女、孕妇和妇科病人.养猫、狗等宠物的人群阳性率明显高于不养者.应加强弓形虫病防治知识的宣传,并引起有关部门的重视.

    作者:谢小强;邓友华;肖奎光;黄惠强;黄建平;卢建伟;古旭珍;李彩琼 刊期: 2004年第06期

  • 成人医学教育《临床寄生虫学和寄生虫检验》教学改革初探

    目的探讨成人教育《临床寄生虫学和寄生虫检验》教学改革,培养实际应用型医学人才.方法 对本院成人班《临床寄生虫学和寄生虫检验》教学进行改革,优化教学内容,改革教学方法和教学结果的评价.结果 通过征求意见,成人学生普遍反映改革后的教学既重视理论教学,又重视实验技能训练,符合成人教学特点,真正学到了所需知识.结论 成人教育《临床寄生虫学和寄生虫检验》教学改革取得了一定效果.

    作者:马长玲;沈浩贤 刊期: 2004年第06期

  • 急性脑梗死患者血浆NO及GMP-140水平与梗死面积的关系及其临床意义

    目的探讨梗死面积不同的急性脑梗死患者血浆一氧化氮( NO)及血小板α颗粒膜蛋白( GMP- 140)水平及其临床意义.方法 采用硝酸还原法和双抗体夹心酶联吸附法测定 116例急性脑梗死患者进行血浆 NO及 GMP- 140水平, 并分别和 41例正常对照组比较, 同时将脑梗死的血浆 NO及 GMP- 140水平作直线相关分析. 结果脑梗死组患者血浆 NO含量显著低于正常对照组( P《 0.01),血浆 NO含量与梗死灶大小明显负相关( P《 0.01);脑梗死组患者血浆 GMP- 140含量高于正常对照组 (P《 0.01),血浆 GMP- 140含量与梗死灶呈正相关.急性脑梗死患者血浆 NO和 GMP- 140之间没有直线相关性 (r=0.067,P 》0.05).结论急性脑梗死血浆 NO及 GMP- 140水平的测定,对估计梗死灶面积与病情有很重要的价值.

    作者:王丹;朱浩佳;卢岑;王小朝 刊期: 2004年第06期

  • 黏膜免疫及其在疫苗研制中的应用

    本文综述了黏膜免疫系统的组成、作用机制和黏膜免疫的佐剂应用现状以及黏膜疫苗在人体和动物传染性疾病研究中的应用与发展前景.

    作者:甘慧泉;吴忠道 刊期: 2004年第06期

  • 因院内感染引起的一起SARS聚集性发病的案例调查

    目的探讨 SARS病人在人群中的传播途径,确定其感染的可能方式.方法收集 2003年 1~ 2月该院 SARS病例资料,采用现场流行病学调查、 SARS- IgG血清学检测和回顾性调查方法. 结果无论是医务人员,还是非传染病病人和健康人群,近距离接触传染性非典型肺炎病人后都存在着被感染的机会.结论 SARS病毒具有传染性极高、传播速度极快等特点,传播因素大的可能是飞沫.

    作者:陈小霜;刘于飞;周端华;李泽荣;刘小宁 刊期: 2004年第06期

  • 广州家禽、家畜批发市场六种动物隐孢子虫感染情况的调查

    目的调查广州家禽、家畜批发市场兔、鸭 (含雏鸭 )、羊、鸡、狗、鸽 6种动物的隐孢子虫感染情况.方法取上述动物的粪便 292份,用金胺-酚-改良抗酸复染法染色,镜检卵囊. 结果检查的 6种动物均发现有隐孢子虫感染,自然感染率分别为: 64.1%, 54.3% (45.0% ), 21.7%, 20.6%, 20.0%, 14.6%.结论广州家禽、家畜批发市场 6种动物存在隐孢子虫感染.

    作者:庄君灿;谢海燕;刘文立;邓耀先;霍瑞姗;潘秀平;曾鹏程;黎演真;马长玲;沈浩贤;李小敏;陈新宇;陈代雄 刊期: 2004年第06期

  • 抗幽门螺杆菌感染治疗与中青年功能性消化不良的关系

    目的通过对幽门螺杆菌 (HP)阳性 (+ )的功能性消化不良 (FD)的抗 HP治疗,证实 HP与 FD的关系,为临床治疗功能性消化不良提供依据. 方法本文选择 87例 FD患者,予雷尼替叮(铋剂),甲硝唑、羟氨苄青霉素(四环素)进行抗 HP治疗 2周.结果 发现抗 HP治疗能改善 FD者症状及病理状况,从而提示 HP感染可能是 FD的一个致病因素.结论抗 HP感染是治疗 HP阳性 FD患者的一个重要手段.

    作者:刘华龙 刊期: 2004年第06期

  • 广州市43例SARS死亡病例流行病学特征分析

    目的对 43例 SARS死亡病例进行流行病学特征分析,初步探讨 SARS死亡的影响因素.方法对 SARS患者死亡报告资料汇总并进行描述性流行病学分析.结果广州市自 2003年 1月 2日发生首例 SARS病例,至 5月 17日末例止,与 SARS相关的死亡病例 43例,病死率为 4.04%( 43/1065).其中离退休人员病死率高,为 15.15%( 20/132);医护人员病死率较低,为 2.48%( 7/282).死者年龄在 5岁至 89岁之间,以 60岁以上为主,占 50%.以 1月份发病的病死率高,为 12.86%.死亡病例中合并有其他疾患,如高血压、糖尿病、心脏病、肺气肿、肿瘤等的占 53.48%.结论 SARS是可防可治的,广州市在疾病流行过程中探索出的治疗措施可有效降低病死率. SARS患者死亡的危险因数是年龄 60岁以上,有基础疾病,有明确接触史.

    作者:胡文穗;王鸣;徐慧芳;刘小宁;李泽荣;刘维斯;秦鹏哲 刊期: 2004年第06期

  • 恶性疟原虫MESA基因的克隆和测序

    目的克隆、测定恶性疟原虫海南株 (FCC1/HN)成熟疟原虫感染红细胞表面抗原( MESA)基因序列,并进行序列分析.方法根据恶性疟原虫 Palo- alto株 MESA 基因已知序列 ,设计合成四对引物 ,用 PCR技术从 FCC1/HN株基因组 DNA中扩增出 4个部分序列重叠的 MESA 基因片段,分别克隆入 pMD- 18T测序载体.用双脱氧链末端终止法测定这 4个基因片段的序列,拼接得到全长 MESA 基因序列.应用 DNAstar、 AnthProt软件辅助进行序列同源性比较和抗原表位区预测.结果 PCR扩增得到特异的恶性疟原虫 FCC1/HN株 MESA基因片段,酶切及 PCR鉴定获得了包含 MESA基因片段的重组质粒.测序结果表明, FCC1/HN株 MESA全基因编码区长 4 102 bp, A+ T含量为 72. 11%, G+ C含量为 27. 89%,有 1个内含子;编码 1 323个氨基酸残基,分子量为 154 470u.序列分析表明, FCC1/HN株与 Palo- alto、 D10株 MESA蛋白在长度和序列组成上呈多态性,序列差异较大区域位于 MESA蛋白的氨基酸重复区 1、 3、 4、 5和 7.经多参数综合分析,有 7个潜在的抗原表位区. 结论测定、分析了恶性疟原虫 FCC1/HN株 MESA 基因序列. FCC1/HN株 MESA 基因与其它分离株的 MESA基因编码的氨基酸序列存在一定差异.

    作者:单志新;余新炳;马长玲;徐劲;吴忠道;陈守义;胡旭初 刊期: 2004年第06期

  • 药学专业医学寄生虫学教学的实践与思考

    21世纪需要高素质人才,素质教育是关键.从一定意义上说素质教育就是因材施教,高等医学院校基础医学教育同样需要因材施教.本文从优化教学内容、优化教学方法等方面论述了因材施教开展药学专业医学寄生虫学教学的体会.

    作者:张冬梅;朱淮民;潘卫庆 刊期: 2004年第06期

  • 两种试剂盒快速检测疟原虫的比较

    目的寻找更适合基层和贫困疟区的敏感、特异、快速、廉价的检测疟原虫的方法,比较两种恶性疟金标免疫层析试剂盒的敏感性和特异性.方法采用 ACON试剂盒和 Paracheck试剂盒对镜检确认的 134例疟疾病人血样进行平行检验.结果 ACON试剂盒和 Paracheck试剂盒分别检测恶性疟 84例,阳性均为 84例,符合率均为 100%;检测间日疟 30例,均为阴性,特异性均为 100%;检测恶性疟和间日疟混合感染 20例,阳性分别为 19例, 18例,敏感性分别为 95%和 90%.结论 ACON试剂盒胶体金法具有与 Paracheck试剂盒 ICT法相同的敏感性和特异性,具有操作快速、简便、直观的特点,并且价格便宜,更适合在基层和疟疾贫困地区推广应用.

    作者:张海超;陈沛泉;欧凤珍;宋建平 刊期: 2004年第06期

热带医学杂志

热带医学杂志

主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会