邓友华;谢小强;黄建平
目的分析弓形虫主要表膜蛋白SAG1在甲醇酵母高效表达系统表达的可行性.方法在5′端和3′端引物分别引入EcoRⅠ和SpeⅠ酶切位点,PCR扩增SAG1成熟肽编码区基因,定向克隆到甲醇酵母分泌型表达质粒pMETαA中,构建不带6个组氨酸尾序列的重组质粒.重组质粒被PacⅠ酶切下表达盒,氯化锂化学法转化腺嘌呤营养缺陷型毕赤甲醇酵母株PMD11和PMD16, 通过腺嘌呤营养缺陷型选择培养基YPD筛选酵母重组子,并利用MM/MD选择培养板分析外源基因表达盒整合到重组酵母染色体中的方式.筛选甲醇利用野生型的重组酵母,用甲醇诱导表达,并分析SAG1的表达水平,从中筛选高表达转化子.结果获得了经非同源重组整合到酵母染色体上的能有效利用甲醇作为唯一碳源的PMD11和PMD16转化株.在甲醇诱导后第3天,细胞裂解液SDS-PAGE检测开始出现分子量与目的蛋白预测分子量相同的蛋白带,但PMD11重组株中的该蛋白随培养时间延长而减少,而PMD16重组株中的目的蛋白量未见减少.上清中有40kDa和27kDa的两种蛋白,后者的量大于前者,并与SAG1成熟肽的大小一致,PMD16株的表达量大于PMD11株,总蛋白量约35μg/ml.结论弓形虫SAG1基因可在甲醇酵母表达系统中表达,但PMD11宿主菌会降解外源蛋白,而缺失了蛋白酶的PMD16宿主菌能比较高效地表达、分泌SAG1成熟蛋白.
作者:胡旭初;余新炳;徐劲;吴忠道;陈守义 刊期: 2002年第04期
目的为了提高教师命题与组卷的质量,研究开发了医学寄生虫学考试智能组卷系统的应用软件.方法该系统采用结构化分析与设计技术、面向对象技术,并使用关系型数据库语言VFP实现.结果本系统含有试题库管理、试卷管理和智能组卷三大模块.题库中有10种题型,2500多道试题.试题库实行开放式管理.该系统操作简单,组卷快捷.既能自动随机组卷,又可人工逐题浏览组卷.组成的试卷图文并茂.文中对试题库建设的意义、命题原则及题型设置等进行了讨论.结论该系统适用于医学寄生虫学考试智能化组卷.
作者:段义农;胡新平;马济宏;李荣 刊期: 2002年第04期
目的克隆EBV-LMP1 cDNA,构建EBV-LMP1基因的原核表达重组质粒.方法通过RT-PCR技术从B95-8细胞中扩增EBV-LMP1 cDNA,克隆至pGEM-T easy载体上并测序;利用引物上的BamHⅠ与HindⅢ酶切位点将LMP1基因插入载体pET-32a,转化JM109菌.提取质粒,限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳鉴定.结果扩增的LMP1 cDNA长度为1158bp,测序结果与已知序列吻合,重组原核表达质粒经酶切鉴定表明获得正确重组子.结论成功克隆了EBV-LMP1 cDNA,并构建了pET-32a-LMP1原核表达载体,为研究LMP1在EBV致瘤中的作用及肿瘤疫苗奠定了基础.
作者:林勇平;吴淑华;杨英;汤郡;马桂璋 刊期: 2002年第04期
目的探讨戊型肝炎及乙+戊型肝炎病人发生肾功能损害率及其发生机理.方法随机抽取同期在我科住院的戊型肝炎病人105例,乙+戊型肝炎病人63例为研究对象,检验其肾功能及尿常规以明确其肾功能损害的发生率.结果戊型肝炎组肾功能损害发生率为40.95%,乙+戊型肝炎组肾功能损害发生率为63.4%.结论戊型肝炎或乙+戊型肝炎患者易发生肾功能损害.
作者:覃祖云 刊期: 2002年第04期
恶性疟病例来势凶险,临床表现复杂多变,易致误诊贻治.深圳市历年有输入性恶性疟病例发生,以流行区(海南省)输入的病例为主,近年出现出国人员(非洲、印度)回深圳发病的病例.现将1994~2002年的8例输入性恶性疟病例报告如下.
作者:汤凌全;张小岚 刊期: 2002年第04期
自上个世纪80年代以来,血吸虫特异性IgE抗体在抗血吸虫感染免疫中的作用,受到较多关注.本文从血吸虫特异性IgE抗体相关抗原角度,对其种类、诱导IgE抗体同型应答的影响因素、与过敏原的关系,以及诱导特异性IgE抗体应答在抗血吸虫感染免疫中的效应机制,进行了综述.
作者:王勇;张兆松 刊期: 2002年第04期
目的获得细粒棘球蚴Calcium-binding protein(CaBPs)基因序列资料,进行序列分析,为包虫病免疫预防研究奠定基础.方法从包囊内获取细粒棘球蚴原头蚴(protoscolices),提取RNA,逆转录成cDNA,用特异引物扩增CaBPs基因;并将其克隆到T载体后进行序列测定和分析.然后登录Gene/Bank数据库.结果以cDNA为模板获得3个核苷酸长度不同的基因,分别是CaBP1为914bp,CaBP2为1095bp,CaBP3为1039bp.同源性比较结果表明:来自新疆羊源CaBPs基因序列和巴西(Brazil)羊源基因CaBPs同源性为90%以上;从cDNA获得的3个CaBPs基因序列的比较分析说明钙结合蛋白可能存在一个家族,有不同的成员组成.结论 CaBPs在E.granulosus虫体发育过程中具有十分重要的功能,到目前为止其机理尚不完全明了,CaBPs基因的获得为进一步研究其结构和功能,以及对包虫病的防治具有重要意义.
作者:郭中敏;徐劲;陆家海;单志新;陈慧红;余新炳 刊期: 2002年第04期
目的观察施他宁治疗肝硬化上消化道出血的疗效.方法 52例肝硬化上消化道出血病人随机分成2组,施他宁组36例,垂体后叶素16例.结果施他宁组有效止血率为83.33%,72h内止血率为70%.而垂体后叶素组有效止血率为56.2%,72h内止血率为33.33%.两组间有显著性统计差异(P<0.05).结论施他宁是治疗肝硬化上消化道出血的安全有效药物.
作者:刘一三 刊期: 2002年第04期
一种新型抗疟原虫药物已经被报道,代号G25的这种药物可以阻止红内期的疟原虫构建它的细胞壁.在体外和猴(Owl monkeys)体内的实验显示它和奎宁相比有显著的活性和相对低的毒性[1].
作者:阮志燕;吴忠道 刊期: 2002年第04期
目的通过分析猪链球菌引起人猪共患病的临床特征,进一步预防和控制该病的发生.方法对22例猪链球菌引起的人猪共患病进行回顾性分析.结果 22例猪链球菌引起人猪共患病临床分为普通型5例,治愈5例;脑膜炎型10例,治愈8例,好转2例;中毒性休克综合征(TSS)型7例,全部死亡.总病死率31.8%.结论本次由猪链球菌血清Ⅱ型引起的人猪共同感染,流行广,发展快,人猪患病数量多,应在预防和治疗上采取更有效的措施.
作者:章祥友;丁俊琪;秦海蓓 刊期: 2002年第04期
解放初期,广西靖西县疟疾流行严重,1958年疟疾发病率高达259.39/万(7813/301201),是以中华按蚊为主要传疟媒介的间日疟、恶性疟、三日疟混合流行高中度疟区,经疟疾控制前期、疟疾控制期、灭疟后期三个阶段,采取落实病人根治、防蚊灭蚊、发热病人血检、病灶点处理等综合防治措施,使疟疾发病率大幅度下降,三日疟已经绝迹,90年代以来疟疾年带虫发病率均控制在1/万以下,1994~2001年未发现当地感染的恶性疟病例,防治效果显著,有效控制了疟疾传播流行.2001年11月经广西卫生厅组织专家现场考核验收,确认达到卫生部颁布的基本消灭疟疾标准[1].总结防治监测工作经验,巩固发展基本消灭疟疾成果,进一步加强基本消灭疟疾后灭疟监测和流动人口疟疾管理,是严防疟疾死灰复燃的根本措施.
作者:王福春;隆森 刊期: 2002年第04期
目的探讨IgG及IgG4在抗囊尾蚴感染中的作用.方法用分子筛分离提纯猪囊尾蚴囊液粗抗原,用ELISA法检测未经治疗和经1~3,4~6和7~9疗程治疗的4组确诊脑囊虫病患者血清中的总IgG和IgG4.结果总IgG抗体在治疗前组和疗后组之间没有显著性差异(P>0.05),而IgG4在2组间有显著性差异(P<0.01).总IgG在疗后3组之间没有明显差异(P>0.05),IgG4抗体在疗后3组间则有显著性差异(P<0.01).IgG4的特异性为98.4%,高于总IgG的94.0%.结论 IgG4不仅可用于囊虫病诊断,而且有望成为判定疗效的参考指标.
作者:张唯哲;刘爱芹;许丹枫;李雅杰 刊期: 2002年第04期
目的探讨急性脑梗塞急性期患者血浆P-选择素和血栓烷B2(TXB2)含量变化及相互关系的意义.方法用ELISA法和放射免疫分析法分别检测了50例急性脑梗塞急性期患者和20例正常对照血浆P-选择素和TXB2的含量.结果患者血浆P-选择素含量明显高于正常对照组(36.85±8.76ng/L vs 25.73±6.44ng/L,P<0.01),患者血浆TXB2含量亦明显高于正常对照组(119.64±20.57ng/L vs 76.92±13.47ng/L,P<0.01),且血浆P-选择素含量和TXB2含量之间成明显的正相关性(r=0.683,P<0.01).结论急性脑梗塞患者在急性期血小板功能处于活跃状态,可能与P-选择素和TXB2升高有关,两者一起可能参与了ACI急性期的发病过程.这提示在ACI急性期的治疗中同时使用抗血小板的药物有重要意义.
作者:陈庆深;马中富;黄帆;刘秀琴 刊期: 2002年第04期
目的探讨拉米呋啶联合α-干扰素(IFN-α)治疗慢性乙型肝炎(CHB)抗病毒的协同作用.方法 68例HBVDNA及HBeAg阳性的CHB患者随机分成甲、乙两组.甲组采用拉米呋啶和IFN-α联合治疗,乙组单用拉米呋啶.治疗24w和48w时观察两组肝功能和乙型肝炎病毒标志(HBVM及HBVDNA)的变化情况.结果治疗24w时,甲、乙两组ALT复常率分别为85%和83%,HBVDNA转阴率分别为90%和89%,抗-HBe阳性率分别为15%和6.2%,以上指标两组相比无显著性差异(P>0.05),HBeAg阴转率分别为50%和20%,两组相比差异显著(P<0.05).治疗48w时甲乙两组相比ALT复常率分别为95%和94%,HBVDNA阴转率分别为95%和93%,两组无显著性差异(P>0.05),HBeAg阴转率分别为60%和25%,两组相比差异非常显著(P<0.01),抗-HBe阳转率分别为35%及8.3%,两组差异显著(P<0.05).结论拉米呋啶联合IFN-α治疗CHB具有明显的协同作用,对于HBeAg阴转及HBeAg/抗-HBe血清转换联合治疗组明显优于单用拉米呋啶组.
作者:张全荣;邹莉萍 刊期: 2002年第04期
应用可乐必妥治疗由淋球菌、衣原体和支原体所致的泌尿生殖道感染45例,男性37例,女性8例.其中单纯淋球菌感染12例,衣原体感染18例,支原体感染10例,衣原体和支原体混合感染5例.45例患者中,治愈29例,其中男性25例,女性4例,治愈率为64.4%.显效11例,有效2例,无效3例,总有效率为88.8%.四种病原体阴转率分别为100%、83.3%、70%、60%.用可乐必妥治疗泌尿生殖道感染具有疗效好、副作用少等优点,值得临床推广应用.
作者:杜晓红;房思宁;李放娟 刊期: 2002年第04期
目的观察思美泰(Transmetil)治疗老年性戊型肝炎的疗效.方法思美泰1000mg加入5%葡萄糖注射液250ml内静脉点滴,1次/d,疗程为4w.结果 34例患者经思美泰治疗后,显效、有效及无效例数分别为24例、5例和5例,总有效率(显效+有效例数)为85.29%.其中,对急性黄疸型,疗效佳,治疗前后相比,肝功能指标均有明显的改善(P<0.01);但对重型戊型肝炎,疗效不明显;对重叠感染的戊型肝炎,部分病例有效.结论思美泰治疗老年性戊型肝炎(急性黄疸型)能有效地改善临床症状和生化指标,防止向重型肝炎发展.
作者:黄砚青;龚作炯 刊期: 2002年第04期
目的分析广州地区艾滋病的临床流行病学特征.方法对1995年1月~2002年6月间108例AIDS住院患者的流行病学和临床资料进行分析.结果男女比例约为3∶1,20~39岁年龄段占73.2%,静脉吸毒和异性性接触为主要传播途径.临床表现以发热(68.5%)、肺炎(62%)、口腔病变(56.4%)、贫血(51.8%)、消瘦(42.6%)及腹泻(32.4%)等为主.卡氏肺孢子虫肺炎(4.6%)等发生率较低.HIV混合HCV感染35.1%.结论 AIDS发病已进入快速增长期.早期诊断、及时防治并发症是控制AIDS的重要措施.
作者:张复春;唐小平 刊期: 2002年第04期
目的了解β地中海贫血合并G6PD缺乏症患儿的异常β珠蛋白基因突变情况.方法采用血液学及反向点杂交技术对患儿进行β珠蛋白基因突变类型分析.结果 29例患儿共查出10种不同的基因突变,突变频率为3.4%~37.9%,其中以CD41-42(-CTTT)、IVS-2nt654(C→T)、TATA box-28nt(A→G)出现的频率高,1例患者未能分型.结论婚前与产前检查对减少β地贫/G6PD缺乏症患儿的出生具有十分重要的意义.
作者:王添章;张利红;庞艳;陈汝雪;余宙耀 刊期: 2002年第04期
目的探讨强力宁合用丹参抗慢性乙型肝炎肝纤维化的效应.方法选择住院和门诊临床诊断为慢性乙型肝炎肝纤维化200例.随机分为强力宁合用丹参组、强力宁组、丹参组和对照组,各50例.各治疗组和对照组一般护肝基础药物相同,各治疗组加用强力宁100ml掺入10%GS 150ml静脉点滴,1次/d.丹参注射液250ml(含丹参16g)静脉点滴,1次/d.1个月后改为口服丹参片,每次4片,3次/d,疗程2个月.结果治疗后各组患者临床症状均有明显好转,肝功能也较治疗前有明显改善或复常,尤其是强力宁合用丹参组肝功能复常时间明显短于对照组(P<0.05);各治疗组肝纤维化指标(HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN)均较治疗前有不同程度改善,且治疗前后比较有显著性差异(P<0.01),各治疗组均优于对照组(P<0.05);强力宁合用丹参组也优于单用强力宁组和单用丹参组(P<0.05).结论强力宁和丹参均有抗肝纤维化效应,两药合用可起协同作用.
作者:吴秋叶;陈银石 刊期: 2002年第04期
目的构建以HBV HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因真核表达质粒,以探讨HBV基因免疫的新途径.方法 PCR扩增HBc第1~72aa及93~183aa编码序列并定向克隆至pcDNA3.1的NheⅠ/XhoⅠ位点,构建真核表达载体pHBcdM.合成HBV多表位基因并插入HBc原脊区基因位点,构建HBc-Mep融合基因真核表达质粒.经PCR、酶切及序列测定等方法筛选阳性质粒.结果双酶切及测序结果证实阳性质粒正确克隆了约885bp、编码HBc与HBV多表位的复合基因.结论成功构建了以HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因真核表达载体pHBc-Mep,为研究pHBc-Mep作为DNA疫苗的免疫活性奠定基础.
作者:田泽维;董文其;李明;王萍;黄建生 刊期: 2002年第04期