学术投稿

大鼠聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1基因RNA干扰表达质粒构建与鉴定

高羽亭;黄明元;刘林华;梁海荣;唐焕文

关键词:聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1, 短发夹RNA, 骨髓间充质干细胞, 转染, 大鼠
摘要:目的 构建并筛选大鼠聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)基因的RNA干扰(RNAi)表达质粒,为职业性疾患的基因治疗探索新途径.方法 根据基因序列数据库中报道的PARP-1基因序列及短发夹RNA(shRNA)设计原则,设计、合成用于构建RNAi质粒的寡核苷酸,构建4种重组PARP-1 RNAi质粒,酶切及测序鉴定正确后,以脂质体Lipofectamine TM2000介导转染大鼠骨髓间充质干细胞.48 h后,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测转染细胞中PARP-1 mRNA的转录水平,筛选有效的PARP-1 RNAi质粒.结果 4种重组PARP-1 RNAi质粒经酶切及测序证明构建正确.转染后48 h,转染质粒shRNA-PARP-1-532的细胞PARP-1基因抑制效果明显,mRNA的转录水平下降了78%,可作为后续实验的有效质粒.结论 成功构建并筛选出PARP-1基因的RNAi表达质粒,为探索PARP-1基因在疾病中的作用奠定了基础.
中国职业医学杂志相关文献
  • 家具产业从业人员手外伤干预效果

    目的 探讨造成家具产业从业人员手外伤的危险因素,采取有效的干预措施,降低家具产业手外伤的发生率.方法 选取8家家具企业的工人共4 015人为干预组,干预前、后各抽取780人行问卷调查,另外选取条件相似的6家企业从业人员3 012人为对照组,抽取570人行问卷调查,比较2组人员2007-2008年、2009-2010年对工作环境的满意度和手外伤发生率.干预组采用了包括加强家具企业对手外伤的危险因素及其预防的健康宣传教育、加强岗前培训和劳动保护、增加警示标志、设备更新和技术改造等干预措施.结果 2009-2010年干预组人员对工作环境的满意度是74.5%,而对照组是48.6%;干预组手外伤的发病是125例,而对照组是244例.结论 在家具企业中实施针对手外伤的干预措施,可以有效降低家具产业从业人员手外伤的发生率.

    作者:赵根隆;刘文豪;李卫平;廖流波;李鹏;曾开 刊期: 2012年第01期

  • 《工作场所空气中有害物质监测的采样规范》若干问题探讨

    目的 探讨GBZ 159-2004《工作场所空气中有害物质监测的采样规范》(以下简称《规范》)在采样策略等方面存在的问题,并提出相应的建议.方法 结合职业接触管理和评价理论及其认识的进展,对《规范》的内容进行分析及探讨.结果 《规范》在采样策略、监测日数和样本量确定等方面存在不足之处.结论 《规范》应随着相关理论的发展不断完善.

    作者:李旭;车望军;邱泓;白云;雷钫普;张亮;高婷 刊期: 2012年第01期

  • 三氯乙烯致敏豚鼠体内转化生长因子-β、白细胞介素-10表达水平

    目的 研究抗炎性细胞因子转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL-10)在三氯乙烯(TCE)致敏豚鼠血清和皮肤中的水平,探讨TCE接触过敏性皮炎的发病机制.方法选用雌性豚鼠74只,随机分成空白对照组、溶剂对照组、TCE处理组,用豚鼠大值实验方法建立动物致敏模型,并在终末激发后把致敏豚鼠和未致敏豚鼠分别分为24h、72h、1周、2周组并在相应时间点采集血样.采用酶联免疫吸附法检测各组血清中TGF-β、IL-10水平,免疫组织化学法检测皮肤组织中TGF-β、IL-10的表达.结果 TCE处理组致敏率为68.8%.血清TGF-β水平检测,致敏72 h和1周组比致敏24h组明显升高(P<0.05),致敏72 h、1周组高于未致敏同时点组(P<0.05);血清IL-10水平检测,致敏72 h组比致敏24h组明显升高(P<0.05),致敏2周组显著下降(P<0.05),致敏72 h组高于未致敏72 h组(P<0.05).皮肤组织中TGF-β、IL-10的表达,致敏72 h组高于致敏24h组、致敏1周组显著高于致敏72 h组(P<0.05),致敏2周组降至低,致敏72 h、1周组高于未致敏同时点组(P<0.05).结论 TCE对豚鼠皮肤具有强致敏作用,TGF-β、IL-10在TCE接触过敏性皮炎发生过程中可能具有重要意义.

    作者:江涛;许述海;于均峰;沈彤;朱启星 刊期: 2012年第01期

  • 深圳市福田区电子市场有机溶剂挥发性组分分析

    目的 了解深圳市福田区电子市场所使用有机溶剂的主要挥发性组分.方法 采用气相色谱-质谱联用技术,对电子市场专项调查抽取的54份有机溶剂样品的主要挥发性组分进行扫描定性和半定量分析.结果 共检出32种挥发性组分,检出前4位化学物质为二氯甲烷(75.9%)、四氯乙烯(66.7%)、三氯乙烯(37.0%)和正己烷(20.4%).结论 在电子行业存在的主要职业危害因素中,正己烷、三氯乙烯和甲醇的检出率依然较高,提示应加强对这些有害因素的监测力度.

    作者:郑晓钧;李汉锋;丘汾;潘瑞胤;蒋立新 刊期: 2012年第01期

  • 4家现代大型水泥厂生产工人职业噪声暴露分析

    目的 鉴别现代水泥生产企业中主要的噪声源及其分布,研究水泥厂中高噪声产生的原因及其对作业工人健康的影响.方法 对广西4家典型现代大型水泥厂进行噪声危害调查,根据GBZ/T 189.8-2007《工作场所物理因素测量第8部分:噪声》要求对噪声设备布局、噪声源和噪声强度进行调查、检测;根据GBZ 188-2007《职业健康监护技术规范》对接触噪声工人进行职业健康检查.结果 4家水泥厂在物料破碎、粉磨、回转窑等工人较长时间工作的区域噪声强度超过85 dB(A),13.2%工人存在纯音听力测试异常.水泥厂噪声源主要有:破碎机、粉磨机、风机和空气压缩机.其高噪声产生原因为:使用高噪声设备,设备设施维护欠佳,控制室、操作间和休息室缺少声学设计.结论 4家现代大型水泥企业工人暴露于高噪声工作环境,并对听力等健康产生不良影响;应切实加强现代大型水泥企业噪声污染的防范和治理,加强对接触噪声这一职业群体的健康监护.

    作者:黄世文;江世强;黎海红;欧军荣;黄翔;王萍 刊期: 2012年第01期

  • 谷胱甘肽硫转移酶T1基因拷贝数多态性与铅毒性症状关系

    目的 探讨铅作业人群谷胱甘肽硫转移酶T1(GSTT1)基因拷贝数多态性与铅引起的临床症状的关系.方法 选择广州市某蓄电池行业257名铅作业工人按铅接触水平分为高剂量组和低剂量组,采用统一调查表进行职业健康问卷调查;采用石墨炉原子吸收光谱法测定现场空气铅及工人血铅、尿铅水平;提取铅作业工人周围血DNA,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法和比较循环阈值(△Ct)法检测GSTT1基因拷贝数,分析不同铅尘作业环境下作业人员GSTT1基因拷贝数多态性与血铅、尿铅和临床症状的关系.结果 铅作业工人GSTT1基因拷贝数与铅毒性相关的临床症状有关,在高剂量组拷贝数小于2的研究对象临床症状发生率是拷贝数为2的3.1倍[比值比(OR)=3.1,95%可信区间(CI)=1.0~9.6,P =0.046],低剂量组拷贝数小于2的研究对象临床症状发生率是拷贝数为2的8.4倍(OR=8.4,95%CI=2.4 ~29.2,P≤0.001),GSTT1基因拷贝数与血铅、尿铅水平的关系尚未发现有统计学意义.结论 GSTT1基因拷贝数多态性与铅毒性相关临床症状有关,拷贝数小于2的GSTT1基因可能是铅中毒易感基因型.

    作者:刘斌;蒋琴琴;刘移民 刊期: 2012年第01期

  • 甲基叔丁基醚诱导中国仓鼠肺成纤维细胞细胞周期改变及凋亡适应性反应

    目的 研究低剂量甲基叔丁基醚(MTBE)诱导中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)的细胞周期改变及其对凋亡的适应性反应.方法 实验设6个剂量组,每组3个平行样,分别用剂量为0、0.10、0.50、2.50、10.00 g/L的MTBE预处理CHL6 h,并以等体积磷酸盐缓冲液为正常对照,用35.00 g/L的MTBE冲击染毒18 h,收集细胞,运用流式细胞仪碘丙锭(PI)单染术检测各剂量组细胞凋亡比例及细胞周期.结果 MTBE剂量高于30.00 g/L时,CHL的存活率明显下降,选取35.00 g/L的MTBE作为后续冲击染毒剂量.以0.50~10.00 g/L的MTBE预处理CHL 6 h后,可降低随后35.00g/L的MTBE导致的细胞凋亡率的增加,并使G2期阻滞减轻,细胞产生了适应性反应.结论 MTBE在0.50~10.00g/L可以诱导CHL对35.00 g/L剂量MTBE引起的凋亡产生适应性反应.

    作者:陈小玲;袁雪峰;徐聪兵;梁伟坚;吴赤蓬 刊期: 2012年第01期

  • 高本底地区剂量学研究现状及今后研究方向

    低剂量率持续电离辐射照射,尤其是累积剂量小于100mSv的照射,导致的人体健康影响特别是癌症危险估计尚存在很大不确定性.这是当前电离辐射生物效应、辐射防护以及放射流行病学等领域为关注的问题之一.慢性照射辐射致健康效应的困难包括慢性照射终生累积剂量估计的不确定性、估计小剂量所需的巨大样本量、混杂因素的影响和缺乏适当的对照.在我国阳江天然放射性高本底地区(HBRA)开展的天然放射性高本底辐射与居民健康关系的研究始于1972年[1],其目的是定量估计小剂量持续照射导致的健康危险特别是癌症危险.

    作者:朱卫国;孙全富 刊期: 2012年第01期

  • 广州市2006-2010年新诊断职业病情况分析

    目的 分析2006-2010年广州市职业病的发病情况及原因.方法 对2006年1月1日至2010年12月31日广州市首次诊断的职业病病例的病种、地区分布、行业分布、企业性质等方面进行分析.结果 2006-2010年广州市职业病发病例数为238例,包含8大类,其中以尘肺(83例)、职业中毒(85例)及噪声性耳聋(38例)为主,职业中毒又以慢性中毒为主;地区分布以番禺区多,其余各区亦有发生;企业分布主要集中在私营企业及中小型企业;企业性质以轻工、建材、化工、建设、船舶、机械等行业为主.结论广州市2006-2010年职业病发病形势严峻,主要以尘肺、职业中毒、噪声性耳聋为主,番禺区、私营企业和中小型企业等是职业病防治的重点.

    作者:江兰;林秋红;刘移民;李旭东;蓝玲 刊期: 2012年第01期

  • 唐山市噪声作业人员个人防护用品使用情况调查

    目的 了解唐山市噪声作业人员个人防护用品使用情况,提出防治职业性噪声危害的建议和对策.方法 采用现场自填问卷的方法对调查对象进行调查.所有数据用Excel建立数据库,应用SPSS 13.0软件进行统计分析.结果 该市不同学历的噪声作业人员个人防护用品使用率比较,差异有统计学意义(P<0.05).不同工厂的噪声作业人员间的使用率比较,差异有统计学意义(P<0.05),盾石机械个人防护用品使用率低(77.2%).结论 应定期加强噪声作业人员防护知识培训,同时应重视心理、认知方面的干预,提高认识,自觉使用个人防护用品,确保噪声作业工人的健康.

    作者:肖淑玉;沈福海;许春双;杨汝奔;杨秀清;孟庆迪;齐慧生;范雪云;姚三巧;艾进颖 刊期: 2012年第01期

  • 蓄电池企业铅作业工人职业卫生行为干预前后效果比较

    目的 探讨健康教育与健康促进对蓄电池企业作业工人的职业卫生行为的干预效果.方法 开展现场讲座、发放宣传资料、知识竞赛等,对2家蓄电池企业的作业工人进行职业卫生行为干预,并调查干预前后作业工人对铅的认知、态度和行为状况.结果 干预后,作业工人对铅知识的知晓率有了较大的提高,知识得分由干预前的(5.77±1.71)分提高为(8.06±1.66)分(P<0.05).铅作业工人个人防护用品的使用率及个人卫生习惯都有了较大的提高,其中防尘口罩的使用率由干预前的80.16%上升为98.13%,正确使用率也由20.43%上升为65.33% (P <0.05).结论 实施职业健康促进活动,提高铅作业工人铅知识水平,改变其态度和卫生行为习惯,是预防职业性慢性铅中毒的有效途径.

    作者:张鹏;刘弢;金玫华;宁丽丰 刊期: 2012年第01期

  • 针点电离室校准与伽玛刀焦点剂量质量控制检测

    目的 开展针点电离室刻度因子校准,并应用于伽玛刀焦点剂量检测.方法 使用0.6 cm3电离室检测得出钴-60(60Co)治疗机参考条件下吸收剂量率,并与0.015 cm3电离室读数比较求得刻度因子,根据GBZ 168-2005 《X、γ射线头部立体定向外科治疗放射卫生防护标准》开展伽玛刀焦点剂量检测.结果 得出针点电离室刻度因子,伽玛刀焦点剂量相对偏差1.0×10-3.结论 比较法求针点电离室刻度因子简便可行,需要注意电离室漏电流的修正与控制.

    作者:王进;杨春勇;杜翔 刊期: 2012年第01期

  • 靶器官肿瘤毒理学介绍

    靶器官毒理学在国内外已有介绍和研究报道[1-3],然而靶器官肿瘤毒理学却鲜为人知.靶器官肿瘤毒理学是研究一切外来致器官肿瘤因素(物理因素、化学因素及生物因素)与机体交互作用导致靶器官肿瘤(良性、恶性)损伤的基本原理、规律、发病特点和致肿瘤机制,鉴定致癌物研究方法及肿瘤防治的一门新兴学科.这无疑对当前环境污染、新化学物、新材料剧增以及全球肿瘤高发的防治有重要意义.据预测,到2030年全球肿瘤死亡人数每年将达1.2亿,成为全球第一大死因.近20年来,肿瘤发病率正以每年3% ~5%的速度快速增长,肿瘤问题将成为人类健康的头号问题,因此,当前研究靶器官肿瘤毒理学刻不容缓.

    作者:姜允申;莫宝庆 刊期: 2012年第01期

  • X射线修复交叉互补组基因1沉默后人支气管上皮细胞生物学性状研究

    目的 探讨RNA干扰(RNAi)技术使人X射线修复交叉互补组基因1(XRCC1)沉默后人支气管上皮细胞(HBE)的生物学性状变化.方法 研究设实验组(转染重组质粒的HBE)、空载体组(转染空载体的HBE)、正常对照组(正常HBE).XRCC1干扰后的HBE的生物学性状分析运用载体介导的RNAi技术抑制XRCC1在HBE中的表达;在光学显微镜下观察实验组和正常对照组细胞的形态学特征;对实验组、空载体组及正常对照组绘制细胞生长曲线,分析细胞倍增时间,运用流式细胞技术分析细胞周期;以汉丽埃塔(HeLa)细胞作阳性对照,采用软琼脂糖恶性程度鉴定实验分析实验组细胞的恶性程度.结果 实验组细胞体积稍有增大,细胞内颗粒物明显增多;实验组、空载体组及正常对照组细胞的生长曲线均呈现相似的“S”型;实验组、空载体组及正常对照组细胞的倍增时间相近,分别为0.70、0.83、0.74 d;3组细胞的G1期、G2期和S期分布相近;实验组细胞未见在双层软琼脂糖中生长出细胞集落,而阳性对照细胞集落明显.结论 XRCC1基因缺陷对HBE生物学性状的短期影响不明显.

    作者:方道奎;刘移民;胡大林;袁建辉;庄志雄 刊期: 2012年第01期

  • 火炸药科研人员酸接触与牙齿缺失关系分析

    目的 分析火炸药科研人员作业过程中酸接触与牙齿缺失之间的关系.方法 选择火炸药科研生产过程中酸接触科研人员122人为观察组(男性56人,女性66人),另选同一单位内不接触酸的机关人员和后勤人员82人为对照组(男性40人,女性42人),通过工作场所二氧化氨( NO2)水平现场监测和科研人员职业健康检查,明确工作场所NO2水平和科研人员的牙齿损伤情况.结果 ①NO2现场检测的时间加权平均浓度为0.05 mg/m3,短时间接触浓度为0.09 mg/m3,符合相关标准要求;②观察组和对照组人员牙齿缺失率分别为18.0%和0.0%,差异有统计学意义(P<0.01);③观察组人员中男性和女性的牙齿缺失率分别为7.1%和27.3%,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 火炸药科研人员作业过程中长期酸接触会造成牙齿缺失,而且酸接触对女性造成的危害更大,应加强科研人员在酸接触过程中的牙齿保护.

    作者:考希宾;万红;武海明;王延琦;柴渭莉;岳红;夏宝清;陈亚妮;杨巧丽;孔巍 刊期: 2012年第01期

  • 苯乙烯遗传损伤研究进展

    苯乙烯常温下为无色透明、具有芳香气味的液体,是合成橡胶和塑料的重要单体之一.因其主要中间代谢产物苯乙烯-7,8-氧化物(Styrene-7,8 -oxide,SO)为直接致癌物,国际癌症研究机构(IARC)将其列为G2B组.苯乙烯进入人体后,在肝混合氧化酶的作用下主要被氧化为SO,SO主要代谢过程为:①经P450酶系作用,在谷胱甘肽-S-转移酶的作用下,形成谷胱甘肽结合物,随后在肾脏及胰腺中γ-谷氨酰转肽酶作用下,断裂其谷氨酰基,继而在肝脏及肾脏中的半胱氨酰甘氨酸酶及氨肽酶的共同催化下,成为半胱氨酸结合物,随后在N-乙酰转移酶的催化下,生成苯乙烯巯基尿酸从尿中排出;②经P450酶系作用,在环氧化物水解酶作用下转变为苯乙烯乙二醇,并继续氧化为苯乙醇酸(Mandelic acid,MA)和苯乙醛酸,随尿排出,当接触高浓度苯乙烯时,部分MA还会转化成非特异性马尿酸,随尿排出;③经P488酶系作用,与DNA发生反应,生成DNA加合物或引起DNA链断裂,从而引发生物学效应[1].

    作者:陈学磊;邵华 刊期: 2012年第01期

  • 湖南省2006-2010年职业病防治机构人员现状分析

    目的 了解湖南省职业病防治机构人员现状,为有关部门职业病防治人才管理提供决策依据.方法 在已建立的全省职业病防治机构基本信息管理系统中抽取有关人员资料,对人员数量、学历、专业、职称等指标采用趋势x2检验进行统计分析.结果 湖南省2006-2010年职业病防治机构人员年均数(1 231人)较2001-2005年年均数(1381人)有所减少.职业病防治机构人员的学历以专科和中专居多;专业构成以公共卫生和临床医疗为主;职称以初级和中级居多.结论 湖南省职业病防治机构人员的学历、专业、职称结构有了一定的改善,但为适应职业病防治工作发展,仍需进一步优化.

    作者:肖云龙;蒋然子;刘蔼成;曾碧霞;余丹;李祈;李蕾 刊期: 2012年第01期

  • 呋喃树脂砂铸造工艺职业危害特征流行病学研究

    目的 探讨呋喃树脂砂铸造工艺可能存在的职业病危害因素的种类及分布特征、接触水平及其对接触人群健康的影响.方法 采用回顾性队列研究方法,收集观察期内现场流行病学调查资料、危害检测资料和人群健康资料,比较接触组与对照组之间观察指标变化的差异.结果 工作场所总粉尘质量浓度均值21.34 mg/m3,样本超标率69.37%;沉降尘游离二氧化硅水平均值22.67%;空气中主要化学物质质量浓度符合国家职业接触限值;临床体格检查结果显示:神经衰弱症状、呼吸道刺激症状、接触性皮炎、胸片肺纹理与不规则阴影增多等,接触组均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);肺通气功能损伤接触组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 粉尘危害仍是树脂砂铸造职业危害控制的重点,工作场所多种物质的联合作用以及低剂量长期接触对人体健康效应的研究应引起关注.

    作者:张建中;陈发明;叶青;彭言群 刊期: 2012年第01期

  • 电感耦合等离子体质谱法测定尿中砷分析质量控制

    目的 了解实验室砷检测能力和质量控制水平,提高实验室检测结果的准确性和可比性.方法 参照水质分析质量控制程序,用电感耦合等离子体质谱法对尿中砷的测定进行分析误差预测.结果 各种溶液测定的总标准差(st)均小于其水平的5%(W),总平均回收率可信限(R/d =0.97)在允许范围内,质量控制考核结果为满意.结论 用电感耦合等离子体质谱法测定尿中砷,实验室分析误差可控制在容许值内.

    作者:殷忠;霍学义 刊期: 2012年第01期

  • 2个工作场所职业紧张干预效果研究

    目的 探讨工作场所职业紧张的干预方法,评估工作环境与职业紧张管理训练(SMT)对改变紧张特征以及心理健康问题的效果.方法 采用准实验设计方法,选取上海某企业和研究所作为干预现场.干预前、后分别进行基线调查和效果评估调查,调查内容包括社会人口特征因素、职业紧张认知、职业紧张状况评估、抑郁、焦虑、工作耗竭以及工作满意度、工作效能感、血压以及肌肉骨骼症状等.干预方法为环境组织改变和SMT的认知行为训练和放松技术训练,采取每次90 min,共3次的培训课程.结果 SMT干预可改善工作要求、工作控制、同事支持,提高职业紧张认知水平、工作满意度和自我效能感,改善焦虑、躯体化症状评分.而环境组织改变结合SMT干预除能取得SMT干预效果之外,还改善工作回报、领导支持和内在驱动,改善工作耗竭症状评分.观察期内2种干预方法均未发现对血压和肌肉骨骼症状产生影响.结论 SMT对提高工作紧张相关应对知识、改善职业紧张特征和心理症状有一定效果,结合工作环境改变的干预效果更为明显.

    作者:吴金贵;庄祖嘉;钮春瑾;卢国良;唐传喜 刊期: 2012年第01期

中国职业医学杂志

中国职业医学杂志

主管:中华人民共和国卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会 华南区域劳动卫生职业病防治中心