学术投稿

三甲散含药血清对大鼠HSC-T6细胞Rho/ROCK信号通路的影响

郑旭锐;惠毅;闫曙光;宋逍;王礼凤;晁旭

关键词:三甲散, HSC-T6, Rho/Rock信号通路
摘要:目的:观察三甲散含药血清对HSC-T6细胞增殖及对Rho/ROCK信号通路的影响.方法:以三甲散含药血清作用HSC-T6细胞,以MTT法检测其对HSC-T6细胞增殖的影响,ELISA检测其对Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响,荧光定量PCR检测其对α-SMA、TIMP-1、ROCK-Ⅰ mRNA表达的影响,Western blot检测其对α-SMA、TIMP-1、ROCK-Ⅰ蛋白表达的影响.结果:三甲散含药血清对HSC-T6细胞增殖抑制率从12 h开始升高,24 h达到峰值;三甲散组细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原含量较空白对照组显著降低(P<0.05或P<0.01);三甲散和Y-27632均能下调HSC-T6细胞α-SMA、ROCK-Ⅰ、TIMP-1 mRNA及蛋白的表达(P<0.05或P<0.01).结论:三甲散可抑制HSC-T6细胞的增殖,其机制可能与Rho/ROCK信号通路有关.
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    作者:方斌豪;施文忠 刊期: 2015年第03期

  • 气相色谱法同时测定消炎镇痛膏中4种成分的含量

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    作者:张伟;林诗玥;吴孟华 刊期: 2015年第03期

  • HPLC法同时测定矮林杜仲叶中6种成分含量

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    作者:周云雷;郭婕;王志宏;王欢;彭密军 刊期: 2015年第03期

  • 保鲜巴戟天细菌和霉菌的分离与鉴定

    目的:为了筛选对巴戟天有明显抑菌作用保鲜剂,对其表面微生物数量进行测定,并对细菌、霉菌的种类进行分离与鉴定.方法:应用细菌和霉菌分类鉴定法.结果:经10 g牛蒡低聚果糖,20 g壳聚糖和0.5g山梨酸钾的组合保鲜剂处理60d后,巴戟天表面细菌总数为3.0×104 cfu/g,霉菌总数为1.5×104 cfu/g,保鲜效果优于其他处理.结论:巴戟天表面常见的优势菌群分别为明串球菌属、气球菌属和青霉属.

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    目的:探讨五虎汤对哮喘模型大鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达及气道重塑的影响.方法:呼吸道合胞病毒(RSV)合卵清白蛋白(OVA)致敏激发建立SD大鼠慢性哮喘模型,将48只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、地塞米松组及五虎汤高、中、低剂量组,每组8只.肺组织病理标本行HE染色观察组织病理学改变,Masson染色检测上皮下胶原蛋白含量,免疫组织化学法检测α-SMA表达,并用计算机图像分析系统评价各组气道重塑,并分析胶原蛋白与α-SMA表达的相关性.结果:(1)模型组WAm/Pbm及WAi/Pbm显著高于正常对照组(P<0.01),五虎汤中、高剂量组及地塞米松组WAm/Pbm、WAi/Pbm显著低于模型组(P<0.01);模型组出现炎性细胞浸润增多、上皮细胞脱落、上皮下胶原蛋白沉积及平滑肌细胞层增厚等气道重塑的结构改变,五虎汤中、高剂量及地塞米松可有效减轻上述病理改变;(2)模型组上皮下胶原蛋白及肺组织α-SMA表达显著高于正常对照组(P<0.01),五虎汤中、高剂量组及地塞米松组上皮下胶原蛋白显著表达显著低于模型组(P<0.01),五虎汤各剂量组及地塞米松组肺组织α-SMA表达显著低于模型组(P<0.05或P<0.01);(3)各组大鼠气道上皮下胶原蛋白沉积、α-SMA的积分光密度(IOD值)呈显著正相关.结论:五虎汤中、高剂量能降低哮喘幼年SD大鼠上皮下胶原蛋白及肺组织α-SMA的表达,从而有效抑制哮喘气道重塑.

    作者:李海霞;帅云飞;王孟清 刊期: 2015年第03期

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    目的:观察β-七叶皂苷钠对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤后诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及Caspase-2表达的影响,探讨其对缺血-再灌注视网膜保护作用可能的机制.方法:SD大鼠随机分为正常对照组、缺血-再灌注模型组、β-七叶皂苷钠组.通过前房灌注法建立视网膜缺血-再灌注损伤模型.分别于术后12、24 h行免疫组化、实时荧光定量RT-PCR检测iNOS的表达,免疫组化检测Caspase-2的表达.结果:免疫组化、RT-PCR均显示与相同时间点模型组比较,β-七叶皂苷钠组iNOS表达显著降低(P<0.01),免疫组化显示与相同时间点模型组比较,β-七叶皂苷钠组Caspase-2表达显著降低(P<0.01).结论:β-七叶皂苷钠可能通过抑制iNOS的表达,减少视网膜神经细胞的凋亡,对视网膜缺血-再灌注损伤发挥保护作用.

    作者:董仲富;刘洪菊;魏光美;闫秀敏;康凤英 刊期: 2015年第03期

  • 亳菊HPLC特征指纹图谱研究

    目的:建立亳菊的HPLC特征指纹图谱,为毫菊的质量控制提供依据.方法:采用Spursil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,流速1.0 mL/min,进行梯度洗脱;检测波长325 nm,柱温30℃.结果:建立了亳菊HPLC指纹图谱的共有模式,标定16个共有峰,利用对照品指认5个峰,10批亳菊样品的HPLC图谱相似度均大于0.900.结论:所建立的HPLC指纹图谱分析方法简单、重现性良好,可为亳菊的品种鉴别及质量评价提供依据.

    作者:俞年军;于娇;张伟;曹勇;郑太华;王韵琴 刊期: 2015年第03期

  • Plackett-Burman和Central Composite Design试验设计法优化石榴皮中熊果酸的SFE-CO2萃取工艺

    目的:探讨应用SFE-CO2萃取石榴皮中熊果酸的佳工艺.方法:以熊果酸得率为考察指标,通过Plackett-Burman (PB)试验设计筛选影响熊果酸得率的显著性因素,陡爬坡试验逼近熊果酸得率大区域,CentralComposite Design(CCD)试验设计对显著性因素进行响应面优化得到影响熊果酸得率的二阶数学模型,进而得出佳工艺条件.结果:SFE-CO2萃取石榴皮中熊果酸的佳工艺条件为:萃取温度46.29℃,萃取时间91.6 min,萃取压力34.49 MPa,在此条件下,验证试验测得熊果酸得率为12.508 mg/g,与模型预测值12.645 mg/g接近.结论:将PB试验和CCD试验设计联合应用于优化石榴皮中熊果酸SFE-CO2萃取工艺,筛选结果具有统计学意义,工艺操作具有可行性.

    作者:王占一;金美花;王玉海;张立华;毕海丹;李卓瓦 刊期: 2015年第03期

  • UHPLC法同时测定不同产地葛根中5种活性成分的含量

    目的:建立同时测定不同产地葛根中3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、大豆苷和大豆苷元5个成分含量的UHPLC法.方法:采用Agela Venusil MP C18(100 mm ×2.1 mm,3μm)色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸梯度洗脱,检测波长250 nm.结果:3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、大豆苷和大豆苷元分别在12.41~248.24ng(r =0.9999)、58.82~1 176.47 ng(r =0.9997)、12.65~252.94 ng(r =0.9999)、12.14 ~242.82 ng(r =0.9998)、1.82~36.30 ng(r =0.9997)进样量范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率为99.03%~100.32%,RSD值为0.26%~ 1.37%.结论:本方法简便可靠、快速,可有效控制葛根的质量.

    作者:赵路;关琴笑;路丽;郭先帅;刘国红;王淑美 刊期: 2015年第03期

  • 山茱萸对附子“温通心阳”作用的增效减毒作用研究

    目的:观察附子与山茱萸配伍后增强“温通心阳”及降低心脏毒性的作用.方法:以腹主动脉缩窄法制作慢性充血性心力衰竭大鼠模型,以药物(附子、山茱萸、山茱萸配伍附子)治疗6 w后,测定各组大鼠心脏舒缩功能和神经体液因子水平,并检测小鼠给予附子(8 g/kg)及山茱萸+附子(1∶1,16 g/kg)后所出现的各型心律失常,观察配伍山茱萸对附子心脏毒性的影响.结果:附子或山茱萸单用,能改善慢性充血性心力衰竭大鼠心脏舒缩功能,表现为不同程度升高心衰大鼠LVSP和+dp/dtmax,降低LVEDP和-dp/dtmax;同时降低心衰大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、BNP水平并改善心肌组织病理学变化.而山茱萸配伍附子后,以上作用均优于附子或山茱萸单用.此外,配伍山茱萸可显著降低附子所致小鼠心率失常及死亡比例.结论:配伍山茱萸能增强附子“温通心阳”的功效,并降低其心脏毒性,表现为减毒增效的作用.

    作者:金钊;秦凯华;叶俏波;宋健平 刊期: 2015年第03期

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    目的:探讨不同石灰添加量对苍术产量、质量的影响,为苍术的生长立地土壤改良和自毒缓解提供参考.方法:添加不同梯度的生石灰,然后测量其生长指标、产量和茅术醇、苍术酮、β-桉叶醇、苍术素4种挥发性有效成分的含量,计算单株挥发性有效成分产量.结果:添加160 g/m2的生石灰对苍术的各项生长和产量产生了显著地促进作用.添加80 g/m2的生石灰对苍术的挥发性有效成分的生成产生了促进作用,并且苍术酮和苍术素含量比例降低、茅术醇和β-桉叶醇含量比例升高;添加160 g/m2的生石灰对苍术的挥发性有效成分产量有促进作用.结论:添加石灰能起到中和土壤酸碱度、抑菌和防治根结线虫的作用,对苍术的自毒和连作障碍起到一定程度的缓解,进而对苍术产量和挥发性有效成分的生成起到了显著地促进作用.

    作者:张燕;樱井美希;陈美兰;武田修己;赵东岳;康利平;郭兰萍 刊期: 2015年第03期

  • 姜黄素羟丙基-β-环糊精磷脂复合物在大鼠体内药代动力学研究

    目的:比较姜黄素羟丙基-β-环糊精磷脂复合物、姜黄素羟丙基-β-环糊精包合物、姜黄素磷脂复合物、姜黄素原料药在大鼠体内的药动学特征,探讨姜黄素羟丙基-β-环糊精磷脂复合物作为药物载体的优势.方法:SD大鼠口服灌胃给予姜黄素药物制剂及游离药物后,不同时间点于大鼠眼底静脉丛取血.采用HPLC法测定血浆中姜黄素的浓度.结果:姜黄素羟丙基-β-环糊精磷脂复合物的AUC0-∞为(1 126.20 ±323.24) μg/(L·h),较原料药姜黄素(191.08 ±43.27) μg/(L·h)、姜黄素磷脂复合物(754.93 ±55.33)μg/(L·h)、姜黄素羟丙基-β-环糊精包合物(961.21 ±253.65) μg/(L·h)均有所提高,分别为其5.89、1.49、1.17倍.结论:姜黄素羟丙基-β-环糊精磷脂复合物较单一的磷脂复合物或羟丙基-β-环糊精包合物更能促进药物的吸收,有利于提高药物的生物利用度.

    作者:罗见春;胡雪原;吴建勇;赵德璋;张景勍 刊期: 2015年第03期

  • 偏瘫复原丸中挥发性成分的GC-MS分析

    目的:分析偏瘫复原丸中的挥发性成分.方法:以丙酮超声提取偏瘫复原丸中的挥发性成分,然后采用气相色谱-质谱法对其进行分离鉴定,并确定其各成分的相对百分含量.结果:从偏瘫复原丸中鉴定了15种化学成分.结论:偏瘫复原丸中挥发性成分主要为补骨脂酚、安息香酸、5,7,8-三甲基二氢香豆素等芳香类化合物以及亚油酸、油酸、棕榈酸等脂肪酸类化合物.

    作者:李永利;李杰;于瑞祥;许卓妮;陈鹰 刊期: 2015年第03期

  • 丹归通络颗粒动态逆流提取工艺优选

    目的:优选丹归通络颗粒动态逆流提取工艺.方法:用动态逆流提取的方法,选用单因素和L9(34)正交试验结合,以芍药苷转移率为指标,经多指标综合评分法加权干膏率,考察药材粒度、提取组数、料液比、提取时间及提取温度等因素,确定丹归通络颗粒动态逆流提取的佳工艺,并对新旧工艺进行对比.结果:佳工艺为:药材粉碎成细粉、2级逆流提取、料液比1∶12、提取时间为20 min、提取温度为60℃,有效成分转移率达到89.81%.结论:优选的动态逆流提取工艺稳定、高效、节能,可为丹归通络颗制剂工艺技术提升提供研究基础.

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    目的:研究药用动物褐翅鸦鹃在广西的种群生存现状.方法:采用样线法对广西18个调查区进行调查,记录在野外观察到的褐翅鸦鹃种群数量、生境等生物学信息.结果:褐翅鸦鹃可见于全部调查区,种群密度呈自桂南向桂北减少的趋势.在7种生境类型中,褐翅鸦鹃偏好在林区-农田群落交错区分布和活动,而较少出现于阔叶林、人工林等生境中.结论:广西常见的林区-农田交错区生境需求有利于褐翅鸦鹃种群的恢复,但捕猎压力减缓了恢复速度,应加大宣传和保护力度.

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  • 三甲散含药血清对大鼠HSC-T6细胞Rho/ROCK信号通路的影响

    目的:观察三甲散含药血清对HSC-T6细胞增殖及对Rho/ROCK信号通路的影响.方法:以三甲散含药血清作用HSC-T6细胞,以MTT法检测其对HSC-T6细胞增殖的影响,ELISA检测其对Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响,荧光定量PCR检测其对α-SMA、TIMP-1、ROCK-Ⅰ mRNA表达的影响,Western blot检测其对α-SMA、TIMP-1、ROCK-Ⅰ蛋白表达的影响.结果:三甲散含药血清对HSC-T6细胞增殖抑制率从12 h开始升高,24 h达到峰值;三甲散组细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原含量较空白对照组显著降低(P<0.05或P<0.01);三甲散和Y-27632均能下调HSC-T6细胞α-SMA、ROCK-Ⅰ、TIMP-1 mRNA及蛋白的表达(P<0.05或P<0.01).结论:三甲散可抑制HSC-T6细胞的增殖,其机制可能与Rho/ROCK信号通路有关.

    作者:郑旭锐;惠毅;闫曙光;宋逍;王礼凤;晁旭 刊期: 2015年第03期

  • 老鼠簕叶化学成分及其抗流感病毒活性

    目的:研究老鼠簕叶的化学成分.方法:采用硅胶和凝胶柱色谱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构.采用检测流感病毒神经氨酸酶活性测定所分离得到化合物的抗流感病毒活性.结果:从老鼠筋叶中分离得到5个化合物,分别鉴定为:blepharin(1)、麦角甾苷(2)、异类叶升麻苷(3)、胡萝卜苷(4)、豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(5).结论:以上化合物均为首次从该植物叶中分离得到,化合物1~3具有一定的抗流感病毒活性.

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    目的:以马尿泡、山莨菪、天仙子的野生种子为材料,建立这三种茄科植物种子无菌苗繁殖体系,为开展生物实验研究及其野生种质资源的保存提供了技术参考.方法:将野生种子经过不同因子(预处理赤霉素浓度、消毒试剂、消毒时间、培养温度)的组合处理后点播在MS培养基上,以种子发芽率、污染率和成苗率为观测指标,探讨不同因子对建立3种植物种子无菌苗繁殖体系的影响.结果:将野生种子用400 ppm赤霉素预处理24 h后,75%酒精消毒l min,50% NaClO消毒20 min,22℃暗培养待种子发芽后转入光照培养箱培养,能够有效地获得马尿泡、山莨菪、天仙子的种子无菌苗.结论:初步建立马尿泡、山莨菪、天仙子种子无菌苗繁殖体系.

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