学术投稿

杜仲药材特异性PCR的鉴定方法研究

丁铃;赵丹;周涛;江维克;肖承鸿

关键词:杜仲, rDNA-ITS, 荧光检测, 分子鉴定
摘要:目的:利用杜仲药材及其混伪品的rDNA-ITS序列差异设计DNA特异引物,实现杜仲药材的快速分子标记鉴定.方法:从NCBI数据库下载杜仲药材及其混伪品的rDNA-ITS序列,比对获得差异DNA片段,设计特异性引物,优化PCR扩增条件和检测方法.结果:扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和荧光反应检测,杜仲药材能扩增400bp的鉴定条带,加入SYBR Green Ⅰ染料后在紫外光下有绿色荧光,而其混伪品不具特异条带和绿色荧光.结论:特异性PCR能有效鉴别杜仲药材及其混伪品,通过条件优化显著缩短PCR扩增时间,荧光染料检测能更直观显示鉴定结果,为杜仲药材的快速鉴定提供了新的思路和方法.
中药材杂志相关文献
  • 两个产地石菖蒲挥发油质量比较研究

    目的:比较广西和四川两个产地的石菖蒲挥发油质量.方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,GC-MS技术对挥发油化学成分进行分析鉴定,峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量.并以主要成分甲基丁香酚、顺式甲基异丁香酚、γ-细辛醚、β-细辛醚、α-细辛醚的相对百分含量之和为指标进行聚类分析.结果:广西和四川两产地各10批石菖蒲挥发油的平均提取率为1.61%、1.72%;5个主要成分的相对百分含量合计分别为78.19%和88.84%;经t检验,两者无统计学差异.广西产10批石菖蒲样品聚类可分为4小类,四川产10批石菖蒲样品聚类可分为5小类,而两产地均数与两产地20批样品进行聚类均在同一小类里;广西产10批石菖蒲样品的相关系数中有8批在0.9以上,2批在0.9以下,其中1批的相关系数只有0.466,四川产10批石菖蒲样品的相关系数中有7批在0.9以上,3批在0.9以下,其中1批的相关系数只有0.069,而两产地均数之间的相关系数为0.996.结论:不同批次的石菖蒲挥发油质量差异较大,但与两产地所属省份没有相关性.

    作者:陈小露;袁德俊;吴雪茹;吴启端 刊期: 2015年第04期

  • Box-Behnken设计-效应面法优化酸枣仁皂苷的大孔树脂纯化工艺

    目的:比较不同型号大孔吸附树脂对酸枣仁皂苷的纯化效果,并优选其纯化工艺.方法:通过静态吸附法优选大孔树脂型号,采用单因素试验和Box-Behnken设计-效应面法优选酸枣仁皂苷的佳纯化工艺条件.结果:AB-8型大孔吸附树脂纯化工艺为:树脂柱高径比为5∶1,上样液中酸枣仁皂苷浓度为2.52 mg/mL,树脂大吸附量以生药计为8.915 mg/g,水洗脱除杂用水量3 BV,上柱流速、洗脱流速均为2 BV/h,乙醇洗脱浓度75%,洗脱液乙醇用量5 BV.结论:AB-8型大孔树脂对酸枣仁皂苷有较好的纯化效果,优化后的工艺稳定可行.

    作者:赵惠茹;任早;刘春叶 刊期: 2015年第04期

  • 白楸化学成分研究(Ⅱ)

    目的:研究白楸Mallotus paniculatus(Lam.)Muell.Arg.的化学成分.方法:采用柱色谱技术对白楸化学成分进行分离纯化,通过光谱和波谱学手段鉴定化合物的结构.结果:从白楸的正丁醇萃取部位中分离得到7个化合物,分别鉴定为:东莨菪内酯(1)、异东莨菪内酯(2)、高根二醇(3)、芹菜素(4)、对甲氧基苯甲酸(5)、油酮酸(6)、β-胡萝卜苷(7).结论:其中,化合物2~6为首次从该植物中分离得到.

    作者:朱春玲 刊期: 2015年第04期

  • 厚朴酚与和厚朴酚在大鼠不同肠道中的吸收情况及与药物浓度关系

    目的:研究厚朴酚与和厚朴酚在大鼠肠道中不同部位的吸收情况及与药物浓度的关系.方法:取雄性健康Wistar大鼠麻醉后建立在体单向肠灌流模型,采用HPLC测定厚朴提取物中厚朴酚与和厚朴酚在大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠浓度变化,计算厚朴酚与和厚朴酚在各肠段的吸收速率常数(Ka)、表观吸收系数(Papp)和吸收百分率(AR)来研究厚朴酚与和厚朴酚的吸收动力学特征.结果:厚朴提取物中厚朴酚与和厚朴酚在大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠的Ka、Papp和AR差异具有统计学意义(P<0.01),均为十二指肠>空肠>回肠>结肠;不同浓度厚朴提取物中的厚朴酚与和厚朴酚在同一肠段的Ka、Papp和ARp差异无统计学意义(P>0.05).结论:厚朴提取物中厚朴酚与和厚朴酚在大鼠肠道上段的吸收效果更好,越往肠下端吸收越差,且与提取物浓度无直接关系,其吸收机制可能为被动转移.

    作者:牛晓晨;程林忠;李青 刊期: 2015年第04期

  • 补肾健脾化瘀安胎法治疗早期先兆流产合并绒毛膜下血肿的临床观察

    目的:观察补肾健脾化瘀安胎法治疗早期先兆流产合并绒毛膜下血肿(SCH)的疗效.方法:将符合诊断标准的患者采用随机数字表法分为3组,补肾健脾化瘀安胎组30例,采用补肾健脾化瘀安胎中药治疗;补肾健脾安胎组29例,采用补肾健脾安胎中药治疗;地屈孕酮组20例,采用地屈孕酮治疗.结果:补肾健脾化瘀安胎组总有效率为96.67%,补肾健脾安胎组总有效率93.10%,地屈孕酮组总有效率为80.00%,补肾健脾化瘀安胎组和补肾健脾安胎组总有效率均显著高于地屈孕酮组,补肾健脾化瘀安胎组和补肾健脾安胎组总有效率差异无统计学意义.补肾健脾化瘀安胎组SCH吸收及阴道流血时间显著优于补肾健脾安胎组和地屈孕酮组.结论:补肾健脾化瘀安胎法治疗早期先兆流产合并SCH安全有效,值得临床推广运用.

    作者:李莉;曾丽;张丽美 刊期: 2015年第04期

  • 姜不同炮制品的挥发油成分GC-MS分析

    目的:比较姜不同炮制品中挥发性成分的化学组成,以明确不同炮制火候对其挥发性成分的影响.方法:水蒸气蒸馏法提取姜的4种不同炮制品挥发性成分,GC-MS法对挥发油成分进行分析.结果:姜4种不同炮制品挥发油中共鉴定出43个成分,其中鲜姜、干姜及姜炭各有27种,炮姜24种.鲜姜含姜烯、α-柠檬醛及β-水芹烯较高,分别为22.59%、20.87%及11.01%.经不同程度加热炮制后,其挥发油的化学成分在数量和质量方面均产生了较大变化,其中干姜含α-柠檬醛高达40.48%,同时β-水芹烯的含量则略有降低,为10.38%;炮姜中新产生了32.73%的3,7,11-三甲基-1,6,10-十二烷三烯醛、16.38%的3,9(11)-二烯-10-过氧化物、3.36%的荜澄茄油烯,另外还产生了桉叶二烯及β-红没药醇等成分,而β-水芹烯含量低,仅为1.95%;姜炭中的姜烯和β-倍半水芹烯均高,且新产生了α-柏木烯、癸醛及y-榄香烯等成分.结论:姜不同炮制品的挥发油含量不同,化学成分数量也不同.本方法适用于姜的挥发油成分分析,本研究为姜炮制品的质量评价及临床应用提供了实验依据.

    作者:赵宏冰;王志辉;何芳;孟晗;彭建花;石继连 刊期: 2015年第04期

  • 洋蒲桃枝叶化学成分研究

    目的:研究桃金娘科蒲桃属植物洋蒲桃枝叶的化学成分.方法:采用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶、制备型HPLC等多种色谱技术分离纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构.结果:从洋蒲桃枝叶95%乙醇提取物的氯仿部分中分离得到14个化合物,分别鉴定为:熊果醛(1)、白桦脂醇(2)、白桦脂醛(3)、白桦脂酸(4)、羽扇豆醇(5)、β-谷甾醇(6)、5,7-二羟基-5-甲基二氢黄酮(7)、2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3'-甲基二氢查耳酮(8)、2',4'-二羟基-6 '-甲氧基-3 '-甲基查耳酮(9)、5,7-二羟基-6,8-二甲基二氢黄酮(10)、5,7-二羟基二氢黄酮(11)、2',4'-二羟基-6'-甲氧基-3',5'-二甲基二氢查耳酮(12)、2'-羟基-4',6'-二甲氧基-3'-甲基查耳酮(13)、对羟基苯甲醛(14).结论:其中,化合物1~4、14为首次从该植物中分离得到.

    作者:吴泳樟;张玉波;陈能花;王国才;李药兰 刊期: 2015年第04期

  • 水线草UPLC指纹图谱的建立及应用

    目的:建立不同产地水线草的超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,并对其混淆品白花蛇舌草进行鉴别应用.方法:采用UPLC法,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7 μm),以甲醇-1%冰醋酸梯度洗脱,柱温30℃,流速0.2 mL/min,检测波长254 nm.指纹图谱采用相似度分析和主成分分析.结果:建立了水线草药材的专属性指纹图谱,确定了15个共有峰.各产地水线草药材指纹图谱相似度均超过0.85.结论:该指纹图谱重复性好,简便可靠,可用于水线草药材的专属性鉴别,有效区别水线草及其混淆品白花蛇舌草.

    作者:李洪权;曹艺;柏玉冰;夏伯候;林丽美;廖端芳 刊期: 2015年第04期

  • 鼠妇化学成分研究

    目的:研究鼠妇的化学成分.方法:采用多种柱色谱方法分离纯化,采用光谱法确定化合物结构.结果:从鼠妇中分离得到7个化合物,分别鉴定为:vulgarine A(1)、邻羟基苯甲酸(2)、二吡咯并哌嗪-2,5-二酮(3)、1-H-喹啉-4-酮(4)、腺嘌呤(5)、对乙酰氨基酚(6)、4-甲基-5-(2-羟乙基)噻唑(7).结论:其中,化合物1为新的生物碱,化合物3~7均为首次从卷甲虫科动物中分离得到.

    作者:邓红洁;王淑美;程永现 刊期: 2015年第04期

  • 天然药物防治生物膜的研究进展

    微生物生物膜是引起临床多种慢性和顽固性感染的原因之一,具有生物活性的天然药物在生物膜感染治疗中具有极大的优势,并得到了一定的应用.该文主要综合近年来的相关医学文献报道,总结了天然药物对铜绿假单胞菌生物膜、金黄色葡萄球菌生物膜、表皮葡萄球菌生物膜、大肠埃希菌生物膜等6种生物膜的作用及相关研究进展.

    作者:董士华;曲狄;刘铭然 刊期: 2015年第04期

  • ICP-MS测定东南亚进口燕窝无机元素的主成分分析和聚类分析

    目的:研究东南亚进口燕窝中无机元素的含量分布特征.方法:采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法,对25批燕窝样品中的20个无机元素进行定量分析,并采用SPSS主成分分析和聚类分析对测定结果进行评价.结果:主成分分析提取了6个主因子,得出燕窝的特征元素为Na、K、Ca、Mn、57Fe、Co、Zn、Se、Rb;聚类分析将25批燕窝样品聚为2大类,无机元素在不同燕窝样品中存在差异,但在白、红、黄燕窝之间的差异并不明显.结论:该方法灵敏度高、准确性好,适用于燕窝中无机元素的含量测定;主成分分析和聚类分析法是燕窝中无机元素含量分析的有效方法.

    作者:赵斌;邓仙梅;王羚郦;刘敬;赖小平 刊期: 2015年第04期

  • 天山雪莲乙醇提取物对缺氧小鼠肝脏线粒体的保护作用研究

    目的:研究天山雪莲乙醇提取物对缺氧小鼠肝脏线粒体的保护作用.方法:将BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组、缺氧模型组、乙酰唑胺阳性对照组、天山雪莲提取物组,给药后将小鼠放入低压氧舱,减压至模拟海拔8000m高度,小鼠保持在此高度下缺氧12 h后处死小鼠,提取肝脏线粒体.测定线粒体膜电位、线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和苹果酸脱氢酶、顺乌头酸酶、α-酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶的活性.结果:与缺氧模型组比较,天山雪莲提取物能够保护线粒体膜电位,提高顺乌头酸酶、α-酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶和线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ的活性.结论:天山雪莲乙醇提取物能够保护缺氧小鼠肝脏线粒体功能.

    作者:蒋炜;樊鹏程;何蕾;吴金华;马慧萍;景临林;贾正平 刊期: 2015年第04期

  • 痹祺胶囊联合托珠单抗治疗类风湿性关节炎的临床疗效观察

    目的:观察采用痹祺胶囊联合托珠单抗治疗类风湿性关节炎的临床效果.方法:按照就诊顺序将唐山市工人医院2011年5月~ 2013年7月收治的97例类风湿性关节炎患者分为观察组(49例)和对照组(48例),对照组采用托珠单抗治疗,观察组在对照组基础上加用痹祺胶囊,观察两组患者治疗前与治疗后第12周的ESR、CRP、IgG、IgA、IgM及关节肿胀等指标的变化情况.结果:治疗前两组患者晨僵时间、关节肿胀数目、关节压痛数、握力等指标差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组上述指标较治疗前均显著改善(P<0.05),观察组改善显著优于对照组(P<0.05).治疗前两组患者ESR、CRP、CD3+、CD4+、CD4 +/CD8+差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组ESR、CRP、CD3+、CD4+、CD4 +/CD8+均较治疗前显著改善(P<0.05),且观察组ESR、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+改善优于对照组(P<0.05).治疗前后两组患者血清IgG、IgA、IgM差异均无统计学意义(P<0.05).治疗后观察组的疗效分布显著优于对照组(P<0.05),但两组总有效率差异无统计学意义(P>0.05).结论:痹祺胶囊联合托珠单抗治疗类风湿性关节炎对于改善患者的临床症状、实验室指标、提高疗效均有显著的作用.

    作者:饶莉;石哲群;杨静 刊期: 2015年第04期

  • 芪归糖痛宁颗粒对糖尿病的临床有效性评价

    目的:观察并探讨芪归糖痛宁颗粒对糖尿病治疗的价值.方法:选择自2012年4月至2014年6月在本医院治疗的糖尿病患者96例,按照随机分组法将96例患者分为两组,观察组和对照组各48例,对照组采用常规西医治疗,观察组在对照组基础上加用中成药芪归糖痛宁颗粒治疗.治疗前后监测两组患者的空腹血糖(FPG)、餐后2小时血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)等指标,并在治疗后评价两组中医证候疗效.结果:两组治疗前血糖、血脂水平差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组各指标改善程度及中医证候疗效显著优于对照组(P<0.05).结论:芪归糖痛宁颗粒联合西医常规治疗能显著降低糖尿病患者的血糖水平,调节脂代谢,疗效显著,是糖尿病安全有效的疗法.

    作者:严威忠;李惠萍;胡剑利 刊期: 2015年第04期

  • 柱前衍生化HPLC法测定不同基原珍珠粉及贝壳粉中7种氨基酸的含量

    目的:建立柱前衍生化HPLC检测不同基原珍珠粉及贝壳粉中7种主要氨基酸的方法.方法:以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,流动相A:0.1 mol/L醋酸钠溶液(用醋酸调pH值至6.5),流动相B:乙腈,梯度洗脱,检测波长254 nm.结果:氨基酸衍生溶液在24h内保持稳定,7种氨基酸线性相关系数均大于0.9995,加样回收率在93.16%~103.31%之间.结论:本方法分离效果好,精密度和重复性良好,可用于珍珠粉及贝壳粉中7种水解氨基酸含量的测定.

    作者:陈佳;魏锋;程显隆;刘薇;马双成 刊期: 2015年第04期

  • 半枝莲配方颗粒特征图谱研究

    目的:建立半枝莲配方颗粒的HPLC特征图谱.方法:采用菲罗门Gemini C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.05%甲酸溶液,梯度洗脱;流速为0.8 mL/min;柱温为30℃;检测波长为270 nm.结果:初步建立了半枝莲配方颗粒的HPLC特征图谱,共确定5个特征峰,并对不同厂家的12批半枝莲配方颗粒进行了相似度比较,相似度大于0.89,表明其生产工艺较稳定.结论:该HPLC特征图谱为半枝莲配方颗粒的质量控制提供了一种准确、可靠的方法.

    作者:魏梅;李慧;陈向东;杜兰哲;官永河 刊期: 2015年第04期

  • 胡颓子属植物化学成分与药理活性研究进展

    胡颓子是我国优良的林果药兼用型常绿灌木,具有很好的绿化观赏、食用药用经济价值,并且其果实、根和叶含有丰富的药用成分.该文对胡颓子属植物化学成分及药理活性进行综述,其主要化学成分包括黄酮、挥发油、生物碱、萜类、甾体及鞣质等,主要具有止咳平喘、抗菌、抗肿瘤等药理活性,旨在为胡颓子的深加工利用提供参考依据.

    作者:陆俊;王珺;成策;程萌;雷小林 刊期: 2015年第04期

  • 一测多评法测定茵陈中4种酚酸类成分含量

    目的:建立一测多评法测定茵陈中4种酚酸类成分的含量,并验证其准确性.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Agilent Zorbax Eclipse Plus C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B),梯度洗脱;柱温30C;检测波长324 nm.以绿原酸为内参物,建立绿原酸与香草酸、咖啡酸和阿魏酸的相对校正因子,计算其他3种成分的含量,实现一测多评;同时采用外标法测定这4种酚酸类成分的含量,比较两者的差异.结果:采用校正因子计算含量和外标法测定含量之间无显著差异,误差小于5.0%,实验所得的校正因子可信.结论:以绿原酸为内标,采用一测多评法可用于茵陈中酚酸类成分的质量控制.

    作者:宋丽萍 刊期: 2015年第04期

  • 白桐树枝干化学成分研究

    目的:对白桐树枝干的化学成分进行研究.方法:采用各种提取分离纯化技术进行成分分离,通过波谱技术结合理化性质进行结构鉴定.结果:从白桐树枝干的乙醇提取物中分离鉴定了7个化合物,分别为:齐墩果酸(1)、β-香树脂醇(2)、7-ketositosterol(3)、东茛菪内酯(4)、β-谷甾醇-β-葡萄糖苷(5)、L-焦谷氨酸(6) 、β-谷甾醇(7).结论:其中,化合物1~6均为首次从该植物中分离得到.

    作者:陈勇;左坚;陈建伟;李祥 刊期: 2015年第04期

  • 滇桂艾纳香组培快繁技术体系的研究

    目的:探索滇桂艾纳香组培快繁技术体系的佳培养条件.方法:以滇桂艾纳香的嫩茎段为外植体,采用正交试验设计方法优化增殖培养基,建立组培快繁体系.结果:0.1% HgCl2溶液灭菌10 min效果佳;茎段丛生芽诱导培养基以MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ KT 1.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L佳,诱导率达90%;6-BA是影响增殖的主要因素,达显著水平,NAA与KT效应不显著;芽增殖的适培养基为MS+ 6-BA 2.5 mg/L+ KT 1.5 mg/L+ NAA0.2 mg/L,增殖系数为7.12;生根培养基用1/2MS+ NAA 0.5 mg/L好,生根率100%,移栽成活率93.33%.结论:该试验得到的组培快繁技术体系可在短时间内提供大量种苗,并为规模化生产种苗提供技术指导.

    作者:姚绍嫦;谭文明;蓝祖栽;利荣欢;凌征柱 刊期: 2015年第04期

中药材杂志

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主管:国家食品药品监督管理局

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