王振涛;余悦;林丽珍;李书渊
目的:研究新藤黄酸(Gambogenic Acid,GNA)对黑色素瘤B16细胞的增殖抑制作用,并探讨细胞凋亡机制在其中的角色.方法:MTT法检测新藤黄酸对B16细胞生长和增殖的作用;采用acridine orange/ethidium bromide(AO/EB)荧光染色观察新藤黄酸对B16细胞的影响;采用流式细胞仪检测新藤黄酸处理B16细胞后细胞内活性氧(ROS)的产生;Western blotting法检测凋亡相关蛋白Caspase-3的变化.结果:MTT结果表明新藤黄酸在一定浓度下对黑色素瘤B16细胞的增殖有明显抑制作用,并呈一定的时效和量效关系;AO/EB染色观察表明新藤黄酸处理的细胞呈现明显的凋亡状态;新藤黄酸处理细胞后,细胞内活性氧的急剧增加,与未给药组比较有统计学意义(P<0.01),同时线粒体膜电位也随之下降;Western blotting检测发现新藤黄酸作用后cleaved-Caspase-3蛋白表达量增加.结论:新藤黄酸在一定的时间和浓度范围内能够抑制黑色素瘤B16细胞的增殖,诱导细胞发生凋亡.
作者:谈永进;张璇;程卉;李庆林 刊期: 2014年第03期
目的:探讨健脾解毒方延长脾虚肝癌模型大鼠带瘤生存及与MHC Ⅰ/MHC Ⅱ的关系.方法:105只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、肝癌模型组、脾虚模型组、脾虚肝癌模型组、胸腺五肽组及健脾解毒方低、高剂量组,进行造模和干预.实验中记录动物的体质量、生存时间、肝癌大鼠濒死状态时恶液质积分并采集标本.免疫组化与Western blot方法检测大鼠肝组织及肝癌组织MHC Ⅰ/MHC Ⅱ分子表达.结果:健脾解毒方高剂量组和胸腺五肽组累积生存率高于其余各组(P<0.05),且其恶液质评分低于其余各组(P<0.05).各造模组中,MHC Ⅰ分子在肝组织中的表达水平高于癌组织,肝组织和癌组织中均以健脾解毒方高剂量组表达强(P<0.01).MHC Ⅱ分子在癌组织表达强于肝组织,肝组织中以健脾解毒方高剂量组表达强(P<0.01),癌组织中以脾虚肝癌组表达强(P<0.01).结论:健脾解毒方能对抗移植瘤导致的恶液质的发生和进展,显著延长荷瘤鼠的生存时间,其作用可能与上调MHC Ⅰ/MHC Ⅱ有关.
作者:李玉龙;孙保国;项婷;陈泽雄;张诗军 刊期: 2014年第03期
目的:优化α-细辛脑脂质体的制备工艺.方法:以薄膜分散法制备α-细辛脑脂质体,Box-Behnken设计响应面法优化α-细辛脑脂质体的制备工艺.采用包封率(Y)及稳定性参数(Ke)为优化指标,考察磷脂浓度(X1)、磷脂/胆固醇(X2)、磷脂/药物(X3)对制备工艺的影响.结果:建立了二项式拟合方程,方程拟合度高,佳工艺条件为:磷脂浓度3.99%、磷脂与胆固醇的重量比4.94、磷脂与药物的重量比39.21.在此工艺条件下,脂质体的包封率为48.65%,稳定性常数Ke为3.80.结论:以包封率及稳定性常数Ke为指标,Box-Behnken设计有效地优化α-细辛脑脂质体的制备工艺,所得工艺稳定可靠,为α-细辛脑新剂型研究提供参考.
作者:伍善广;冯学珍;蒙华琳;陈颖 刊期: 2014年第03期
目的:研究栝楼Trichosanthes kirilowii Maxim.果皮的化学成分.方法:利用反复硅胶柱层析、聚酰胺树脂和半制备型高效液相色谱等各种色谱技术分离纯化,通过理化性质和光谱分析鉴定化合物结构.结果:从栝楼果皮中分离得到13个化合物,分别鉴定为:槲皮素-3-O-[α-L-鼠李糖-(1→2)-β-D-葡萄糖基]-5-O-β-D-葡萄糖苷(1)、槲皮素-3-O-β-芸香糖苷(2)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(3)、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷(4)、木犀草素(5)、芹菜素(6)、香叶木素(7)、软脂酸甲酯(8)、硬脂酸甲酯(9)、棕榈酸(10)、β-谷甾醇(11)、α-菠菜甾醇(12)和豆甾醇(13).结论:其中,化合物1~3、5~7为首次从该植物中分离得到.
作者:李爱峰;孙爱玲;柳仁民;张永清 刊期: 2014年第03期
目的:初步探讨喘可治注射液通过调节Th17/Treg平衡对哮喘模型小鼠气道炎症的影响.方法:以Balb/C小鼠为研究对象,随机分为正常对照组、模型组、喘可治组,每组20只.采用屋尘螨变应原经腹腔注射致敏加滴鼻激发复制支气管哮喘气道炎症模型,观察各组炎症指标及免疫学指标的变化.结果:①模型组肺脏中RORγt mRNA表达显著高于正常对照组(P<0.05);模型组肺泡灌洗液(BALF)中IL-17、IL-6含量高于正常对照组(P<0.05);模型组脾脏中CD4+IL-17+占CD4+的比例高于正常对照组,而FOXp3+ CD4+ CD25+占CD4+的比例低于正常对照组,二者均有统计学意义(P<0.05).②喘可治组肺泡灌洗液(BALF)中IL-6的含量少于模型组(P<0.05);喘可治组脾脏中CD4+ IL-17+占CD4+的比例低于模型组(P<0.05),FOXp3+ CD4+ CD25+占CD4+的比例高于模型组(P<0.05).结论:①在哮喘模型小鼠中存在着Th17与Treg的失衡,主要表现为CD4+ IL-17+的增多和FOXp3+ CD4+ CD25+的减少.②喘可治注射液可以通过下调RORγt mRNA的表达抑制IL-17、IL-6等炎症因子的释放,同时提高调节性T细胞(Treg)的功能,改善哮喘小鼠的免疫紊乱状态,综合改善哮喘症状,喘可治注射液可能以Th17为靶点抑制哮喘气道的炎症反应.
作者:黄东晖;吴少丽;王慧贤;黎潭辉 刊期: 2014年第03期
目的:规范茯苓产地加工各关键环节,保障GAP基地建设正常运行.方法:在完成“茯苓规范化种植研究及示范基地建设”的基础上,参考产区传统经验,进行总结整理.结果:通过试验观察和系统总结,形成了具有湖北特色的茯苓规范化产地加工技术.结论:经产区应用检验,该技术可以规范茯苓产地加工各环节,保障茯苓药材商品质量.
作者:王克勤;黄鹤;付杰;冯汉鸽;汪琦;胡晓雪 刊期: 2014年第03期
目的:调研老山何首乌品质与资源现状,为开发利用老山何首乌提供科学依据.方法:结合社会调查与实地考察,按中国药典检测何首乌的标识性化学物质含量,评价老山何首乌的质量优劣及数量.结果:老山何首乌品质优良,药用保健价值高,但目前老山生态环境脆弱,何首乌资源严重不足,不适宜按传统方式采掘、利用.结论:合理开发老山何首乌栽培产业,是促进老山地域经济发展的有效举措之一.
作者:赵庆年;张宁 刊期: 2014年第03期
目的:建立海南裸花紫珠HPLC指纹图谱,为其真伪鉴别和质量控制提供依据.方法:HPLC色谱条件:Agilent TC-C18 (250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.30%冰醋酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长254 nm,进样量为20 μL.结果:以12批裸花紫珠样品的20个共有峰为评价指标,建立了海南裸花紫珠HPLC指纹图谱测定方法,相似度均大于0.90,并指认了3个峰.结论:此方法具有良好的精密度、重复性和稳定性,可对裸花紫珠药材中的化学成分信息进行较全面的反映,适用于该药材的真伪鉴别及质量控制.
作者:马思遥;盛琳;关薇薇;刘明生 刊期: 2014年第03期
目的:为钟乳石炮制机理的初步探讨奠定基础.方法:对10批主产地的钟乳石生品、炮制品进行电感耦合等离子体发射光谱分析,比较钟乳石炮制前后微量元素的变化情况.结果:找出钟乳石生品及炮制品中特征共有无机元素,并作为它们成分分析的主要研究对象.结论:钟乳石经炮制后,其所含元素的数目和比例均发生了改变,这些可能是导致钟乳石生品和炮制品药理药效及生物活性不同的重要因素;同时,在钟乳石炮制品中Pb、Cd、Hg、Cu、As均符合限量规定,这也说明炮制有减毒作用.
作者:房方;李祥;刘圣金;徐飞;马瑜璐;李珍 刊期: 2014年第03期
目的:建立系统分离制备独一味中9种环烯醚萜苷类化合物单体的色谱方法,并结合PDA与质谱法对目标化合物进行定性鉴定.方法:采用甲醇-水梯度洗脱方式进行系统分离分析,根据色谱图收集流出液,流出液氮气吹干得到目标化合物,采用RP-HPLC测定相应化合物的质量分数,PDA、MS定性鉴定.结果:经RP-HPLC分析,部分目标化合物质量分数高于90%,PDA、MS终确定9种环烯醚萜苷类化合物分别为:Phlorigidoside C(1)、Schismoside(2)、Sesamoside(3)、Shanzhiside methylester(4)、6-O-Acetyl shanzhiside methylester(5)、PhloyosideⅡ(6)、Penstemoside(7)、Loganin(8)、8-O-Acetyl shanzhiside methylester(9).结论:该方法对各组分分离分析效果好,简单易行,可用于独一味中9种环烯醚萜苷类化合物的定性分析和制备.
作者:陶锐;李茂星;张泉龙;邱建国;张娟红;贾正平 刊期: 2014年第03期
目的:观察辣椒素对尿酸钠晶体诱导大鼠急性痛风性关节炎的作用.方法:通过关节局部注射尿酸钠晶体建立大鼠急性痛风性关节炎模型,观察不同剂量辣椒素对大鼠关节炎模型的影响.结果:辣椒素能显著抑制急性痛风性关节炎模型大鼠距小腿关节肿胀度,并呈剂量相关性,能减轻尿酸钠结晶诱导的炎症因子1L-1β、TNF-α水平,作用与别嘌醇相当.结论:辣椒素能通过减轻炎症反应治疗急性痛风性关节炎.
作者:符涛;付玉梅;江庆萍;吴波 刊期: 2014年第03期
目的:研究超微粉碎的粉碎度、提取时间、乙醇体积分数、提取温度等因素对参须中人参总皂苷溶出的影响,并探讨不同因素之间的交互作用.方法:通过单因素试验探讨粉碎度、提取时间、乙醇体积分数、提取温度等因素对参须中人参总皂苷溶出率的影响,在单因素试验基础上,利用响应曲面法对影响人参总皂苷溶出率的3个主要因素即超微粉碎时间、提取时间和乙醇体积分数进行优化.结果:人参总皂苷的含量与所考察的3个因素之间关系符合二次模型.确定佳溶出工艺参数为:参须超微粉碎时间为9 min,70%乙醇为溶剂,提取温度50℃,提取时间70 min.实验结果显示,此条件下人参总皂苷平均溶出率为94.81%,与模型预测值非常接近,说明该模型比较可靠.结论:该优化工艺溶出快速、高效、简单、稳定.
作者:赵亚;赖小平;姚海燕;赵冉;吴依娜;李耿 刊期: 2014年第03期
目的:建立HPLC测定芎菊上清颗粒中绿原酸、栀子苷、盐酸小檗碱和黄芩苷4种成分含量的方法.方法:色谱柱为DIKMA Platisil ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液,采用梯度洗脱,检测波长为240 nm,流速为1.0 mL/min.结果:绿原酸、栀子苷、盐酸小檗碱和黄芩苷的线性范围分别为0.01 ~0.2μg(r1=0.9998)、0.1~2 μg(r2 =0.9997)、0.02 ~ 0.4 μg(r3=0.9998)、0.017 ~0.34 μg(r4=0.9999),平均回收率为98.51%~99.13%.结论:该法检测效率高、专属性强、重复性好,可用于芎菊上清颗粒中绿原酸、栀子苷、盐酸小檗碱和黄芩苷的定量测定.
作者:郝乘仪;朱鹤云;冯波;刘哲 刊期: 2014年第03期
目的:研究正常大鼠与血瘀模型大鼠灌胃给予淫藤骨痹康方后,血浆中丹参酮ⅡA的浓度变化及丙二醛浓度变化的药动学-药效学(PK-PD)相关性.方法:以氯雷他定为内标,采用HPLC-UV法测定不同时间血浆中丹参酮ⅡA的浓度;采用TBA法测定不同时间血浆中MDA水平;采用梯形面积法计算血药浓度-时间曲线下面积(AUC)与抗氧化效应-时间曲线下面积(AUE);以AUE为Y,lgAUC为X,进行相关与回归分析.结果:在2种不同生理模型下,淫藤骨痹康方在所测的各个时间点均能显著降低血浆中MDA水平.AUE-lgAUC的散点图均呈上升趋势;相关回归分析结果为:正常对照组回归方程为Y=53.367X-30.780,相关系数r=0.822,P=0.007;血瘀模型组回归方程为Y=61.091X-39.863,相关系数r=0.777,P=0.003.结论:淫藤骨痹康方降低体内MDA水平的抗氧化作用与体内丹参酮ⅡA的量呈正相关,丹参酮ⅡA可能为其抗氧化作用的药效物质.
作者:王元清;严建业;李顺祥;罗堃;彭买娇;谢瑜;徐菲 刊期: 2014年第03期
目的:考察盾叶薯蓣同源四倍体的遗传稳定性.方法:利用显微方法进行根尖染色体鉴定;于生长稳定期观测田间苗的农艺性状;测定蛋白质含量并进行蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳;测定和比较薯蓣皂苷元含量.结果:盾叶薯蓣四倍体株系的染色体数日仍为40,农艺性状保持了器官巨型性的多倍体特征,各株系蛋白质电泳谱带基本相似,薯蓣皂苷元及蛋白质含量均高于二倍体对照株系.结论:本实验证实人工诱导的盾叶薯蓣同源四倍体具有较好的遗传稳定性,为后续的多倍体优良品种选育工作奠定了基础.
作者:黄和平;高山林;黄璐琦;汪电雷;黄鹏 刊期: 2014年第03期
目的:采用热熔挤出技术制备布渣叶总黄酮固体分散体,以体外溶出度、红外光谱、X-射线衍射、扫描电镜等方法筛选辅料.方法:分别以PEG4000、PEG6000、poloxamer407和poloxamer188为载体制备固体分散体,考察药物与载体比例为1∶1、1∶8时,牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的体外溶出度,并采用X-射线衍射、红外光谱、扫描电镜对其进行表征.结果:PEG4000、PEG6000、poloxamer407、poloxamer188均能增加布渣叶总黄酮中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的体外溶出度,且以PEG6000为载体制备的固体分散体溶出度好;红外光谱结果显示,布渣叶总黄酮与各载体均以氢键的形式结合;X-射线衍射和扫描电镜结果显示,布渣叶总黄酮与各载体的固体分散体均未形成新的物相.结论:固体分散体技术是提高布渣叶总黄酮溶出性质的一种有效可行的方法.
作者:涂瑶生;朱颖;孙冬梅;王洛临;徐文杰 刊期: 2014年第03期
目的:研究磷霉素联合5种中药单、复方对产KPC肠杆菌科细菌体外药敏实验的抑菌效果.方法:2012年7月~ 2013年6月从杭州市中医院分离到的20株碳青霉烯不敏感的肠杆菌科细菌,其中有11株肺炎克雷伯菌,7株大肠埃氏菌,2株摩根摩根菌.改良Hodge实验及特异性PCR扩增和序列分析细菌KPC碳青霉烯酶的产生情况.琼脂稀释法分别测定亚胺培南、厄他培南、磷霉素、大黄、黄芪、黄连、金银花、鱼腥草及磷霉素联合中药单复方对待检菌的小抑菌浓度(MIC).结果:20株对碳青霉烯不敏感的肠杆菌科细菌均产KPC-2型碳青霉烯酶.体外药敏试验显示敏感率,亚胺培南为5% (1/20)、厄他培南为10%(2/20)、磷霉素为65%(13/20)(根据EUCAST标准≤32μg/mL);中药中黄芪的抑菌效果好,MIC为25 ~ 50 mg/mL,黄连其次,MIC为50~ 100 mg/mL;大黄、鱼腥草、金银花抑菌效果差,但金银花、金银花加黄连黄芪复方、鱼腥草加黄连黄芪复方对摩根摩根菌抑菌效果明显,MIC为12.5 ~25 mg/mL;磷霉素联合中药后,除高度耐药株外,大部分菌株MIC值均降低了1~3个稀释度.尤其是磷霉素抗菌活性不佳的摩根摩根菌株,联合除鱼腥草外其他中药后磷霉素的MIC下降可达6个稀释度.结论:通过琼脂稀释法测定的中药抑菌效果有限且与菌株是否产KPC酶无关.联合中药抗碳青霉烯不敏感的肠杆菌细菌感染可降低磷霉素MIC,提高药物效能.
作者:杨玮;齐艳;钱香;闫涛;楼正青 刊期: 2014年第03期
目的:制备白藜芦醇固体分散体,对其溶解度和体外溶出特性进行考察并对物象进行鉴定.方法:采用溶剂法制备白藜芦醇-PVP固体分散体,确定制备的佳药物载体比例;利用正交试验设计,以白藜芦醇溶解度、溶出度和收率为综合考察指标,优化制备工艺;采用扫描电镜分析.结果:以PVP为载体,制成白藜芦醇(1∶7)固体分散体;与原料药相比,其溶解度和溶出度显著提高,溶解度提高了近15倍;扫描电镜下固体分散体中药物以非晶形式存在于载体中.结论:白藜芦醇-PVP固体分散体显著提高了白藜芦醇的溶解度和溶出速率.
作者:焦艳;任红暖;袁堂娟;高振砷;李文丽 刊期: 2014年第03期
目的:解决单一的饲料容易造成东亚钳蝎营养不良,生命周期延长,成活率低的问题.方法:以肉泥(猪肉、鸡肉、兔肉)、麸皮(炒黄)、食糖、牛奶、青菜泥、复合维生素为原料,用Minitab(R) 15.1.1.0.0.设计配制出7种不同的复合饲料.结果:以黄粉虫为主,添加不同复合饲料对东亚钳蝎的体重增长、死亡率、产仔量影响显著.复合饲料5在降低青年蝎死亡率效果显著;但复合饲料4在提高幼蝎、青年蝎体重增重和母蝎产仔量效果好,其他各项指标也比较理想,饲料中肉泥(猪肉、鸡肉、兔肉)、麸皮(炒黄)、食糖、牛奶、青菜泥、复合维生素比例分别为30.00% 、25.00%、20.08%、15.58%、8.08%和1.25%.结论:东亚钳蝎的生长受饲料种类影响显著,在生产中,黄粉虫+复合饲料4可推广使用.
作者:徐世才;沈雪健;王强;韩秀昆 刊期: 2014年第03期
目的:探讨绿原酸(CGA)对过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠髓核细胞凋亡的作用机制.方法:采用体外培养大鼠髓核细胞,传代后取第3代细胞进行实验.随机分成5组:正常对照组、H2O2处理组、CGA +H2O2组、CGA组和CGA+ PI3K/Akt抑制剂(LY294002)干预组.流式细胞术检测各组的细胞凋亡率及细胞内活性氧水平;Westem blot检测各组髓核细胞中Akt,p-Akt,BCL-2的表达.结果:与正常对照组比较,H2O2组诱导的髓核细胞凋亡数显著增高,细胞内ROS含量显著增高;CGA预处理后显著抑制了髓核细胞凋亡和ROS产生,增加了细胞内p-Akt和BCL-2的表达,但LY294002抑制剂显著抑制了CGA对氧化应激后髓核细胞的上述功能.结论:绿原酸可通过激活PI3K-Akt信号途径抑制细胞内活性氧的产生、上调抗凋亡BCL-2蛋白水平的表达来保护髓核细胞免受氧化应激引起的损伤.
作者:谢荣辉;殷明;殷嫦嫦;程细高;徐祖文;曹雪琴;陈伟才 刊期: 2014年第03期