学术投稿

三维培养成骨细胞系统在骨康方含药血清体外干预实验中的应用研究

赵可伟;唐菊英;肖林;潘旭枫

关键词:成骨细胞, 二维细胞培养, 三维细胞培养
摘要:目的:观察骨康方含药血清对三维培养成骨细胞系统生长繁殖、矿化能力和ER-β mRNA表达的变化,探讨成骨细胞三维培养体系在体外中药干预研究中的应用.方法:体外分离成骨细胞,进行二维培养和三维培养,分别用不同浓度阴性血清培养基和药物血清培养基进行培养,使用MTT法检测成骨细胞的生长情况,茜素红染色法观察成骨细胞矿化能力,RT-PCR法检测ER-β mRNA表达的变化.结果:与二维培养体系比较,骨康含药血清对三维体系下培养的成骨细胞的促增殖作用更加明显;细胞ER-beta的mRNA转录水平显著提高;矿化能力更强.结论:三维培养系统比二维培养系统更有利于细胞功能的保持和发挥,更适合于体外中药干预研究中的作用.
中药材杂志相关文献
  • “三黄汤”对艾滋病患者CD45RA阳性淋巴细胞及CD95阳性淋巴细胞的影响

    目的:研究中药“三黄汤”对艾滋病患者CD45RA阳性淋巴细胞及CD95阳性淋巴细胞的影响.方法:30例艾滋病期患者随机分成治疗组和对照组.观察基线以及治疗3、6、9、12个月末CD45 RA+淋巴细胞数、CD95+淋巴细胞数/CD45RA+淋巴细胞数百分比.结果:治疗组和对照组各观察时间点CD45 RA+淋巴细胞计数分别较同组的基线水平显著升高,治疗组和对照组各观察时间点CD95+/CD45RA+分别较同组的基线水平显著下降.在第9个月末和第12个月末时,治疗组CD45RA+淋巴细胞数升高程度、CD95+/CD45RA+百分比下降程度与对照组比较均有显著性差异.结论:“三黄汤”能够通过增加CD45RA+淋巴细胞及降低CD95+/CD45RA+百分比改善艾滋病患者的免疫功能.

    作者:洪仲思;陈奕伸;杨璋斌;张坤水 刊期: 2013年第06期

  • 加倍体半夏与八倍体半夏中鸟苷和有机酸含量的测定

    目的:测定加倍体(十六倍体)半夏和八倍体半夏中鸟苷和有机酸的含量.方法:采用HPLC法测定加倍体半夏和八倍体半夏中鸟苷的含量,采用电位滴定法对加倍体半夏和八倍体半夏中总游离有机酸的含量进行测定.结果:加倍体半夏原球茎中鸟苷含量为0.0078%±0.0004%,有机酸含量为0.926%±0.070%(以琥珀酸计);八倍体半夏原球茎中鸟苷含量为0.0087% ±0.0002%,有机酸含量为0.749%±0.071%;加倍体半夏块茎中鸟苷含量为0.0079%±0.0002%,有机酸含量为0.786%±0.077%;八倍体半夏块茎中鸟苷含量为0.0048%±0.0003%,有机酸含量为0.593%±0.071%.结论:加倍体半夏块茎中鸟苷含量和有机酸含量明显高于八倍体半夏块茎,说明加倍体半夏在染色体加倍后,可以提高有效成分含量,加倍体半夏值得开发利用.

    作者:王冰洁;李伟平;鲁光耀;陈建真;熊明星;蒋福升 刊期: 2013年第06期

  • 红背叶根体外抑制HCV亚基因复制子RNA表达活性部位筛选研究

    目的:筛选红背叶根体外抑制丙型肝炎病毒(HCV)复制的活性部位.方法:以HCV亚基因复制子体外培养体系CBRH7919(Jneo3-5 B)为HCV复制模型,选用干扰素α联合利巴韦林为阳性对照药物,观察不同浓度红背叶根总提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位的抗HCV作用.采用荧光定量PCR检测HCV亚基因复制子RNA拷贝数,通过Western blot检测HCV功能蛋白NS3的表达,采用CCK-8法观察药物对细胞生长的影响.结果:红背叶根4种提取物中,乙酸乙酯部位对HCV RNA复制的抑制活性强,对NS3蛋白表达有明显干预作用,对HCV RNA表达表现出剂量依赖的抑制作用(P<0.05).其比活较初始总提取物提高5.71倍,对HCV RNA半数抑制浓度为14.60 mg/L,对CBRH7919 (Jneo3-5B)细胞半数细胞毒性浓度为40.30 mg/L,治疗指数为2.76.结论:红背叶根乙酸乙酯部位可抑制HCV的复制,为抗HCV RNA表达的活性部位,在抗HCV方面有着潜在的用途.

    作者:王启瑞;陶华明;邬刚;范钦;黄少慧;宏峰;吕志平 刊期: 2013年第06期

  • 四逆汤佳煎煮工艺研究

    目的:优化四逆汤佳煎煮工艺,提高四逆汤中有效成分的煎出率.方法:通过单因素试验,采用RPHPLC法以苯甲酰新乌头原碱、甘草苷、甘草酸和6-姜酚的含量及浸膏重量为指标,分别考察浸泡时间、煎煮时间、加水倍量、煎煮次数对汤剂质量的影响,并在此基础上设计L9(34)正交试验,研究四逆汤临床煎煮的佳工艺.结果:四逆汤佳煎煮工艺为:浸泡时间为60 min,煎煮时间为60 min,加水倍量为10倍,煎煮2次.结论:采用正交设计法对四逆汤佳煎煮工艺的优化合理可行,为提高汤剂质量与临床疗效提供了实验基础.

    作者:刘晓;范林乾;蔡皓;周其冈;蔡宝昌 刊期: 2013年第06期

  • 水蛭及其近缘物种的rDNA-ITS序列分析

    目的:通过分析比较入药水蛭及近缘物种的ITS基因片段,探讨其作为分子手段应用于种类鉴定,同时应用此分子标记来分析水蛭的亲缘关系,为研究其系统发育和完善分类系统提供参考.方法:对宽体金线蛭、尖细金线蛭、光润金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭、湖北牛蛭、棒纹牛蛭、八目石蛭进行总DNA提取,PCR扩增测序,应用软件分析ITS片段长度、(A+T)%含量、变异位点和进化关系.结果:得到总长度为948~981 bp的ITS序列片段,序列中G+C碱基比例较高,为56.0%~57.8%.整个ITS基因片段存在210个碱基变异位点和43个碱基插入/缺失,相对较为保守.石蛭科石蛭属八目石蛭与医蛭科牛蛭属棒纹牛蛭的分类地位较近,遗传距离为0.007;而黄蛭科的3个种与医蛭科的4个种在构建系统发育树时能明显地分为2大支.结论:ITS序列片段分析结果支持黄蛭科和医蛭科现在的分类地位,而八目石蛭与棒纹牛蛭似乎未达属间差异,其分类地位有待进一步探讨.

    作者:徐云玲;聂晶 刊期: 2013年第06期

  • 滇西乌头化学成分研究

    目的:研究滇西乌头Aconitum bulleyanum Diels.的化学成分.方法:采用现代色谱技术对滇西乌头三氯甲烷层浸膏进行分离和纯化,根据化合物光谱数据进行结构鉴定.结果:分离鉴定了7个化合物,分别为:滇乌碱(1)、crassicaudine(2)、黑乌弱碱(3)、查斯马克宁定(4)、草乌甲素(5)、大渡乌碱(6) 、β-谷甾醇(7).结论:其中,化合物2~7为首次从该植物中分离得到.

    作者:袁梅;马晓霞;杨树德;周志宏;杨竹雅 刊期: 2013年第06期

  • 重组水蛭素-2鼻腔给药纳米粒冻干粉制备工艺及体外渗透特性研究

    目的:优选重组水蛭素-2(rHV2)鼻腔给药纳米粒冻干粉佳制备工艺;考察rHV2纳米粒冻干粉稳定性及经家兔鼻黏膜的体外渗透特性.方法:选用不同冻干保护剂制备水蛭素纳米粒冻干粉末,以外观、再分散性及包封率作为评价指标,对冻干保护剂及制备工艺进行优选,并考察了光照、高温等因素对冻干粉的影响;采用直立式扩散池法,以家兔鼻中隔黏膜为渗透屏障,测定rHV2壳聚糖溶液、rHV2纳米粒溶液及冻干粉的渗透系数(P),并计算与rHV2生理盐水溶液的促渗比(ER).结果:rHV2鼻腔给药纳米粒冻干粉佳制备工艺为:用5%甘露醇与葡萄糖(1∶1)作为冻干保护剂,于-70℃预冻24h后,置真空冻干箱中冷冻干燥,24h后取出,该冻干粉中rHV2的含量为1.1 μg/mg.光照对rHV2纳米粒冻干粉的外观、再分散性以及包封率影响均较小,而高温对rHV2纳米粒冻干粉的影响较大;rHV2壳聚糖纳米粒具有较高的渗透系数,是生理盐水组的5倍多,冻干粉仍然保持了良好的渗透性.结论:壳聚糖鼻腔给药纳米粒冻干粉有可能成为rHV2鼻腔给药的良好给药剂型.

    作者:陈明霞;张建宝;于季萍;叶静;魏宝红;张玉杰 刊期: 2013年第06期

  • 海绵Phakellia fusca的次级代谢产物研究

    目的:研究海绵Phakellia fusca的次级代谢产物.方法:采用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备薄层、重结晶等方法进行分离和纯化,并根据其理化性质及波谱数据鉴定结构.结果:从中分离得到10个化合物,分别鉴定为:对羟基苯甲酸(1)、棕榈酸(2)、α-十八碳烷醇甘油醚(3)、α-十六碳烷醇甘油醚(4)、(E)-N-2(1,3-二羟基-4-十八烯基)-十六酰胺(5)、胸腺嘧啶(6)、环(L-酪-L-脯)二肽(7)、苯乙酰胺(8)、尿嘧啶(9)、对羟基苯甲酰胺(10).结论:其中,化合物5、7、10为首次从该种海绵中分离得到.

    作者:邓舟;唐丽丹;廖小建;徐石海 刊期: 2013年第06期

  • 基于UPLC-TOF/MS的苍耳子不同部位化学成分研究

    目的:建立测定苍耳子不同部位化学成分的UPLC-TOF/MS分析方法.方法:运用UPLC-TOF/MS分析技术,进行梯度洗脱分离,洗脱液不经紫外检测器直接导入质谱系统,采用ESI离子源,进行正负离子扫描,采集两种模式下的UPLC-MS图谱,通过Masslynx V4.1数据分析软件,进行色谱峰的提取和匹配,依据元素组成分析参数确定分子式.结果:从苍耳子的水提取物中确定了33个离子峰,通过对照品比对和元素组成分析检索,对其中11个离子峰进行化学成分的归属.同时对苍耳子各离子峰进行了药材部位归属,22个来源于苍耳子刺,31个来源于去刺苍耳子,其中20个为共有的离子峰.结论:该研究建立的UPLC-MS法简便、准确、专属性强,同时对苍耳子中的各化学成分进行了药材部位归属,明确其来源,为苍耳子中的有毒化学成分以及临床安全用药提供科学依据.

    作者:刘树民;曹敏;武斌;卢芳 刊期: 2013年第06期

  • HPLC测定血脂灵片中8种蒽醌类成分的含量

    目的:建立高效液相色谱测定血脂灵片中橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄酸、黄决明素、决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量的方法.方法:采用Agilent TC-C18(4.6 mm × 250 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速:1.0 mL/min,柱温:30℃,检测波长:284 nm.结果:橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄酸、黄决明素、决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚在相应的浓度范围内与色谱峰面积呈良好线性关系;平均回收率在99.1% ~ 101.2%之间,RSD均小于2.2%.结论:该方法可更好的对血脂灵片进行质量控制.

    作者:郑艳超;李先宽;米宝丽;蔡珊珊;张振秋 刊期: 2013年第06期

  • 传统炮制与现代加工方法对罗仙子抑菌及抗炎作用影响的比较

    目的:比较传统炮制与现代加工方法对罗仙子抑菌及抗炎活性的影响.方法:以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7为实验对象,比较传统炮制及现代加工制品的抑菌及抗炎作用.结果:现代加工制品的抑菌抗炎作用优于传统炮制品.结论:现代加工工艺能够有效的保护罗仙子中抑菌及抗炎物质的活性.

    作者:褚夫江;金小宝;许银叶;吴玉萍;刘文彬;朱家勇 刊期: 2013年第06期

  • 康复新液对大鼠胃溃疡病理瘢痕形成的影响

    目的:观察康复新液对乙酸所致SD大鼠胃溃疡动物模型病理瘢痕影响.方法:用乙酸建立SD大鼠胃溃疡模型,观察康复新液对模型大鼠胃组织中生长激素(GH)、羟脯氨酸(Hyp)、透明质酸酶(HAase)水平的影响.结果:与模型组比较,康复新液能显著降低模型大鼠的溃疡指数、胃组织GH及Hyp水平(P<0.01或P<0.001).结论:康复新液能阻止慢性胃溃疡病理瘢痕的形成,其机制可能与抑制生长激素(GH)、羟脯氨酸(Hyp)的合成和表达,优化成纤维细胞功能有关.

    作者:苏金仁;陈瑾;黄秀深;沈永梅;谭瑾;增陈娟 刊期: 2013年第06期

  • 维药菟丝草的生药鉴别

    目的:对维药菟丝草进行生药鉴别,为进一步研究开发利用该资源提供依据.方法:进行药材性状、组织切片、粉末制片及薄层色谱鉴别研究.结果:发现菟丝草粉末鉴别中非腺毛众多,花粉粒散在,呈球形,萌发孔3个;纤维束呈梭形或条形,木化;茎横切面类圆形,表皮细胞排列紧密;皮层较宽,细胞大而疏松,韧皮部较窄,细胞呈不规则多角形;木质部宽广,髓部可见;TLC鉴别特征明显.结论:上述特征可作为菟丝草真伪鉴别及制订药材标准的参考依据.

    作者:毛艳;顾政一;王桂玲;贺金华;杨伟俊;何江;徐磊;陈燕 刊期: 2013年第06期

  • 重庆后山栀子的性状与显微鉴别

    目的:为重庆后山所产栀子的资源利用提供理论依据.方法:从原植物形态、生药性状、横切面与粉末显微特征等方面对重庆后山栀子进行鉴别研究.结果:重庆后山栀子与中国药典所载栀子显微特征没有区别,仅在性状大小方面有一定差异.结论:建议新版中国药典对栀子性状大小的规定适当调整.

    作者:陈绍成 刊期: 2013年第06期

  • 产地与种源对白术药材质量的影响

    目的:探讨产地环境和种源对白术药材品质的影响,为白术药材生产的质量控制提供依据.方法:采用指标成分(白术内酯Ⅰ)含量比较和HPLC指纹图谱法结合相似度分析(夹角余弦值、Pearson相关系数)与主成分分析(PCA),以苍术为对照,分析了不同产地栽培的白术药材和同地栽培的不同种源的白术药材.结果:浙江磐安产白术的白术内酯Ⅰ含量显著高于安徽毫州产,不同产地种源的白术药材中白术内酯Ⅰ含量也存在显著差异.相似度分析和PCA结果一致,全部样品聚成3类:浙江磐安栽培的所有种源的白术、安徽毫州栽培的白术、浙江磐安栽培的苍术;前二者的相似性更接近,而苍术与前二者的差异较大;引种到磐安栽培的外地种源白术与磐安本地白术没有明显差异.结论:白术药材质量主要受产地环境的影响,种内遗传变异对整体化学相似性没有明显作用,但对白术内酯Ⅰ的含量仍有显著影响.在白术药材生产中要更加重视产地对白术药材品质的影响,尤其要避免白术与苍术的种源混淆.

    作者:杨舒婷;龚华栋;赵云鹏;陈斌龙;傅承新 刊期: 2013年第06期

  • 脑心清对自发性高血压大鼠血压、血小板聚集及颈动脉重构的影响

    目的:观察脑心清对自发性高血压大鼠(SHR)血压、血小板聚集和颈动脉重构的影响.方法:60只SHR随机分成模型组、卡托普利阳性对照组、阿司匹林阳性对照组及脑心清高、中、低剂量组,10只Wistar大鼠为正常对照组.分别给予相应剂量的脑心清浸膏液、卡托普利片、阿司匹林(实验结束前7d给药)、蒸馏水.每2 w测量1次鼠尾动脉收缩压;3个月后,观察每组凝血时间、血小板聚集率、血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及左颈总动脉内-中膜厚度(IMT)、腔径、IMT/腔径.结果:给药3个月后,与模型组比较,脑心清高、中剂量能显著降低SHR血压水平,显著延长凝血时间,并能抑制SHR左颈总动脉形态学改变及大鼠血小板聚集作用,不同程度所降低PRA和AngⅡ水平.结论:脑心清能够改善SHR动脉重构,减轻高血压靶器官损害的同时兼有抗血小板聚集及抗凝作用.

    作者:吴玉玲;王严春;张锐;黄美兰 刊期: 2013年第06期

  • 双柏膏防治粉碎性Colles骨折手法整复术后早期手部肿胀的疗效研究

    目的:观察双柏膏外敷防治粉碎性Colles骨折手法复位夹板固定后早期手部肿胀的临床疗效.方法:64例Colles粉碎性骨折患者经手法复位夹板外固定术后随机分为治疗组和对照组.治疗组患者每天应用双柏膏外敷患肢手部8小时,持续7天.肿胀疗效评定:分别于骨折复位固定后的前7天按局部肿胀分级标准进行评级.结果:复位后第1、2天两组患手肿胀无差异,第3天至第7天治疗组比对照组的手部肿胀程度有显著改善.治疗组未见有皮肤过敏者.结论:双柏膏有助于防治粉碎性Colles骨折后早期患手肿胀,不影响骨折固定效果,有利于手指关节的功能早期锻炼.

    作者:陈民;高彦平;王寰;李腾辉;李嘉;刘向前;黄广平 刊期: 2013年第06期

  • 知母皂苷BⅡ的提取及大孔树脂纯化工艺研究

    目的:优选知母药材中知母皂苷BⅡ的提取纯化工艺.方法:以知母皂苷BⅡ提取率为考察指标,采用L9(34)正交试验,对知母皂苷BⅡ回流提取工艺进行优化;并考察8种大孔树脂对知母皂苷BⅡ的吸附和解析性能,选出优树脂,确定佳纯化工艺条件.结果:正交试验表明,知母皂苷BⅡ的佳提取工艺为:50%乙醇加热回流提取2次,每次2h,溶剂用量分别为8.5倍、6倍、6倍.通过对树脂的考察,优选出对知母皂苷BⅡ吸附率和解析率都很高的HPD100树脂,上样浓度为0.23 g/mL,大上样量为4/5 BV,以3 BV水和6 BV的20%乙醇洗脱杂质后,用5BV的50%乙醇洗脱得到质量分数为50%左右的知母皂苷BⅡ.结论:优选得到的提取工艺稳定可行,适合知母皂苷BⅡ的工业化提取生产.

    作者:刘艳平;丁越;张彤;王冰;蔡贞贞;陶建生 刊期: 2013年第06期

  • 阿魏酸透皮吸收研究综述

    基于阿魏酸药理作用的不断发现及其化学结构显示的良好的皮肤透过性,本文通过查阅近年来的国内外相关资料,对其进行归纳、分析,总结从透皮给药的选择、透皮吸收促进剂、缓控释透皮吸收等方面内容,对阿魏酸透皮吸收的研究状况进行综述,为进一步研究其透皮制剂提供参考.

    作者:毕建云;刘善新;靳光乾;王平 刊期: 2013年第06期

  • ICP-MS法测定广升麻中18种元素

    目的:建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定广升麻药材中铍、铝、铬、锰、镍、铜、砷、硒、钼、银、镉、锡、锑、钡、镝、汞、铊和铅18种元素的方法.方法:样品经微波消解后,采用电感耦合等离子质谱仪测定18种元素的含量,并进行方法学研究.结果:18种元素校正曲线线性关系良好,回收率符合痕量分析要求.结论:所建立的方法准确、可靠,为广升麻药材的研究提供了依据.

    作者:肖浩;严小红;江英桥;侯惠婵 刊期: 2013年第06期

中药材杂志

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