学术投稿

水蛭及其近缘物种的rDNA-ITS序列分析

徐云玲;聂晶

关键词:水蛭, ITS, 序列分析, 遗传距离
摘要:目的:通过分析比较入药水蛭及近缘物种的ITS基因片段,探讨其作为分子手段应用于种类鉴定,同时应用此分子标记来分析水蛭的亲缘关系,为研究其系统发育和完善分类系统提供参考.方法:对宽体金线蛭、尖细金线蛭、光润金线蛭、日本医蛭、菲牛蛭、湖北牛蛭、棒纹牛蛭、八目石蛭进行总DNA提取,PCR扩增测序,应用软件分析ITS片段长度、(A+T)%含量、变异位点和进化关系.结果:得到总长度为948~981 bp的ITS序列片段,序列中G+C碱基比例较高,为56.0%~57.8%.整个ITS基因片段存在210个碱基变异位点和43个碱基插入/缺失,相对较为保守.石蛭科石蛭属八目石蛭与医蛭科牛蛭属棒纹牛蛭的分类地位较近,遗传距离为0.007;而黄蛭科的3个种与医蛭科的4个种在构建系统发育树时能明显地分为2大支.结论:ITS序列片段分析结果支持黄蛭科和医蛭科现在的分类地位,而八目石蛭与棒纹牛蛭似乎未达属间差异,其分类地位有待进一步探讨.
中药材杂志相关文献
  • 黄鳝藤的生药鉴定

    目的:对黄鳝藤药材(根和茎)进行生药鉴定,为进一步研究和利用黄鳝藤奠定基础.方法:采用性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱方法对黄鳝藤药材进行生药鉴定.结果:黄鳝藤根的横切面呈偏心型,次生韧皮部纤维成群分布;有2种形态石细胞分别分布于根和茎中;得到了根和茎的薄层色谱图.结论:黄鳝藤根和茎显微特征明显,可作为该药材鉴定的参考依据,槲皮素是区分根与茎的特征性成分.

    作者:严寒静;李艺骅;张宏意;何梦玲 刊期: 2013年第06期

  • 加倍体半夏与八倍体半夏中鸟苷和有机酸含量的测定

    目的:测定加倍体(十六倍体)半夏和八倍体半夏中鸟苷和有机酸的含量.方法:采用HPLC法测定加倍体半夏和八倍体半夏中鸟苷的含量,采用电位滴定法对加倍体半夏和八倍体半夏中总游离有机酸的含量进行测定.结果:加倍体半夏原球茎中鸟苷含量为0.0078%±0.0004%,有机酸含量为0.926%±0.070%(以琥珀酸计);八倍体半夏原球茎中鸟苷含量为0.0087% ±0.0002%,有机酸含量为0.749%±0.071%;加倍体半夏块茎中鸟苷含量为0.0079%±0.0002%,有机酸含量为0.786%±0.077%;八倍体半夏块茎中鸟苷含量为0.0048%±0.0003%,有机酸含量为0.593%±0.071%.结论:加倍体半夏块茎中鸟苷含量和有机酸含量明显高于八倍体半夏块茎,说明加倍体半夏在染色体加倍后,可以提高有效成分含量,加倍体半夏值得开发利用.

    作者:王冰洁;李伟平;鲁光耀;陈建真;熊明星;蒋福升 刊期: 2013年第06期

  • 康复新液对大鼠胃溃疡病理瘢痕形成的影响

    目的:观察康复新液对乙酸所致SD大鼠胃溃疡动物模型病理瘢痕影响.方法:用乙酸建立SD大鼠胃溃疡模型,观察康复新液对模型大鼠胃组织中生长激素(GH)、羟脯氨酸(Hyp)、透明质酸酶(HAase)水平的影响.结果:与模型组比较,康复新液能显著降低模型大鼠的溃疡指数、胃组织GH及Hyp水平(P<0.01或P<0.001).结论:康复新液能阻止慢性胃溃疡病理瘢痕的形成,其机制可能与抑制生长激素(GH)、羟脯氨酸(Hyp)的合成和表达,优化成纤维细胞功能有关.

    作者:苏金仁;陈瑾;黄秀深;沈永梅;谭瑾;增陈娟 刊期: 2013年第06期

  • 养胃散对消炎痛致大鼠胃黏膜损伤的保护作用

    目的:研究养胃散对消炎痛引起的大鼠胃黏膜损伤的预防和保护作用.方法:Wistar大鼠按体质量随机分为5组:养胃散治疗组、替普瑞酮组、模型组、养胃散预防组、正常对照组.用消炎痛损伤胃黏膜,再给予养胃散治疗消炎痛伤所致的黏膜损伤,用替普瑞酮为阳性对照.光镜下观察大鼠胃黏膜组织学改变,放射免疫法测定血清IL-1β,TNF-α和IL-10的含量.结果:肉眼观察:各组胃黏膜均没有形成溃疡,但有数量不等的针尖样黏膜糜烂;治疗组、替普瑞酮组、预防组间糜烂灶数量没有显著性差异,但治疗组、替普瑞酮组、预防组与模型组比较,差异显著(P<0.01).病理切片观察:治疗组、替普瑞酮组、预防组不论在胃黏膜层的炎性反应方面,还是在表层细胞的完整性方面均显著优于模型组,正常对照组胃黏膜上皮未见异常表现.结论:养胃散能有效减轻消炎痛引发的胃黏膜损伤和炎症反应.

    作者:周兰;谢子英;赵亚刚;黄定鹏;马艳春 刊期: 2013年第06期

  • 补肺益肾方及其拆方含药血清对烟雾和脂多糖刺激细胞分泌细胞因子的影响

    目的:研究补肺益肾方药治疗COPD分子机理和组方规律.方法:肺泡上皮细胞A549、气道上皮细胞H292、单核巨噬细胞THP-1等细胞均分为正常对照组(20%空白大鼠血清)、模型组(20%空白大鼠血清,75 pg/mL及5% CSE刺激)及全方、拆方组[益气组(1)、益肺肾组(2)、活血组(3)、化痰组(4)、益气+益肺肾组(5)、益气+活血组(6)、益气+化痰组(7)、益气+益肺肾+活血组(8)、益气+益肺肾+化痰组(9)、益气+活血+化痰组(10)、全方组(11)];20%大鼠含药血清.ELISA法检测细胞因子,应用网络工具分析细胞因子的转录因子.结果:与正常对照组比较,模型组THP-1细胞分泌MMP-9和GM-CSF、TGF-β增多,分泌TNF-α、PPAP2B、IL-3、SOD减少.A549细胞分泌TIMP-1增多,分泌MMP-9和TNF-α、TGF-β、IL-3减少.H292细胞分泌TNF-α、MMP-9和GM-CSF、CD36、TIMP-1增多,IL-8分泌减少.与模型组比较,THP-1细胞3、6、10、11方组THP-1分泌GM-CSF减少;10和11方组分泌TGF-β减少;9和5方组分泌MMP-9减少,1、2、3、4、7、8、10、11方组分泌增加;1、2、3、4、6、8、9方组分泌TNF-α增加,11方组分泌TNF-α减少;除2方组外,其他各用药组分泌IL-3显著增加;2、4、5、8、9、11方组分泌SOD增加;1、2、3、4、5、6、7方组分泌PPAP2B增加,11方分泌减少.A549细胞1、2、3、4、5方组分泌TIMP-1增加,11方组分泌TIMP-1减少;除1、4方组外其他用药分泌MMP-9升高;除11方减少外,其他药物组分泌TGF-β升高;除8方组外,其他用药组分泌TNF-α增加;1、2、4、5、11和3方组分泌IL-3增加.H292细胞5、6、7和2方组H292细胞分泌GM-CSF减少;1、2、4、6、7、8、9、10方组分泌TNF-α减少;4、8、7、9方组分泌MMP-9减少;所有用药组分泌TIMP-1无明显改变.结论:补肺益肾方及其拆方对CSE和LPS诱导的细胞因子分泌都有一定的调节作用,因不同靶细胞和靶因子有所不同.其中活血方侧重于调节炎症因子,益肺肾方侧重于脂质代谢和氧化调节,全方调节蛋白酶相关因子分泌作用为广泛,化痰、活血、益肺肾方次之.

    作者:吴耀松;陈玉龙;李建生;刘学芳;郝丽丽;田燕歌;李亚 刊期: 2013年第06期

  • 基于UPLC-TOF/MS的苍耳子不同部位化学成分研究

    目的:建立测定苍耳子不同部位化学成分的UPLC-TOF/MS分析方法.方法:运用UPLC-TOF/MS分析技术,进行梯度洗脱分离,洗脱液不经紫外检测器直接导入质谱系统,采用ESI离子源,进行正负离子扫描,采集两种模式下的UPLC-MS图谱,通过Masslynx V4.1数据分析软件,进行色谱峰的提取和匹配,依据元素组成分析参数确定分子式.结果:从苍耳子的水提取物中确定了33个离子峰,通过对照品比对和元素组成分析检索,对其中11个离子峰进行化学成分的归属.同时对苍耳子各离子峰进行了药材部位归属,22个来源于苍耳子刺,31个来源于去刺苍耳子,其中20个为共有的离子峰.结论:该研究建立的UPLC-MS法简便、准确、专属性强,同时对苍耳子中的各化学成分进行了药材部位归属,明确其来源,为苍耳子中的有毒化学成分以及临床安全用药提供科学依据.

    作者:刘树民;曹敏;武斌;卢芳 刊期: 2013年第06期

  • 海绵Phakellia fusca的次级代谢产物研究

    目的:研究海绵Phakellia fusca的次级代谢产物.方法:采用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备薄层、重结晶等方法进行分离和纯化,并根据其理化性质及波谱数据鉴定结构.结果:从中分离得到10个化合物,分别鉴定为:对羟基苯甲酸(1)、棕榈酸(2)、α-十八碳烷醇甘油醚(3)、α-十六碳烷醇甘油醚(4)、(E)-N-2(1,3-二羟基-4-十八烯基)-十六酰胺(5)、胸腺嘧啶(6)、环(L-酪-L-脯)二肽(7)、苯乙酰胺(8)、尿嘧啶(9)、对羟基苯甲酰胺(10).结论:其中,化合物5、7、10为首次从该种海绵中分离得到.

    作者:邓舟;唐丽丹;廖小建;徐石海 刊期: 2013年第06期

  • 产地与种源对白术药材质量的影响

    目的:探讨产地环境和种源对白术药材品质的影响,为白术药材生产的质量控制提供依据.方法:采用指标成分(白术内酯Ⅰ)含量比较和HPLC指纹图谱法结合相似度分析(夹角余弦值、Pearson相关系数)与主成分分析(PCA),以苍术为对照,分析了不同产地栽培的白术药材和同地栽培的不同种源的白术药材.结果:浙江磐安产白术的白术内酯Ⅰ含量显著高于安徽毫州产,不同产地种源的白术药材中白术内酯Ⅰ含量也存在显著差异.相似度分析和PCA结果一致,全部样品聚成3类:浙江磐安栽培的所有种源的白术、安徽毫州栽培的白术、浙江磐安栽培的苍术;前二者的相似性更接近,而苍术与前二者的差异较大;引种到磐安栽培的外地种源白术与磐安本地白术没有明显差异.结论:白术药材质量主要受产地环境的影响,种内遗传变异对整体化学相似性没有明显作用,但对白术内酯Ⅰ的含量仍有显著影响.在白术药材生产中要更加重视产地对白术药材品质的影响,尤其要避免白术与苍术的种源混淆.

    作者:杨舒婷;龚华栋;赵云鹏;陈斌龙;傅承新 刊期: 2013年第06期

  • 一种新的人工结香沉香挥发油成分GC-MS分析

    目的:针对“白木香通体造香技术”所结沉香中挥发油的化学成分进行研究.方法:采用挥发油提取法提取不同批次沉香药材中的挥发性成分,并采用GC-MS联用技术进行成分分析.结果:从沉香样品中共检测出56个化学成分,其中有36个化学成分是前人没有报道的;三批沉香样品化学成分构成略有差异,但都以倍半萜、芳香族类成分为主,且都含有沉香特征性有效成分沉香螺旋醇、苄基丙酮,并随着结香时间的延长其含量有增加趋势.结论:通过对沉香挥发油化学成分的分析,说明新方法所结沉香化学成分与天然沉香相似,且在较短时间内即可产生相对含量较高的沉香特征性有效成分.

    作者:赵艳艳;房志坚 刊期: 2013年第06期

  • 红背叶根体外抑制HCV亚基因复制子RNA表达活性部位筛选研究

    目的:筛选红背叶根体外抑制丙型肝炎病毒(HCV)复制的活性部位.方法:以HCV亚基因复制子体外培养体系CBRH7919(Jneo3-5 B)为HCV复制模型,选用干扰素α联合利巴韦林为阳性对照药物,观察不同浓度红背叶根总提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位的抗HCV作用.采用荧光定量PCR检测HCV亚基因复制子RNA拷贝数,通过Western blot检测HCV功能蛋白NS3的表达,采用CCK-8法观察药物对细胞生长的影响.结果:红背叶根4种提取物中,乙酸乙酯部位对HCV RNA复制的抑制活性强,对NS3蛋白表达有明显干预作用,对HCV RNA表达表现出剂量依赖的抑制作用(P<0.05).其比活较初始总提取物提高5.71倍,对HCV RNA半数抑制浓度为14.60 mg/L,对CBRH7919 (Jneo3-5B)细胞半数细胞毒性浓度为40.30 mg/L,治疗指数为2.76.结论:红背叶根乙酸乙酯部位可抑制HCV的复制,为抗HCV RNA表达的活性部位,在抗HCV方面有着潜在的用途.

    作者:王启瑞;陶华明;邬刚;范钦;黄少慧;宏峰;吕志平 刊期: 2013年第06期

  • 重组水蛭素-2鼻腔给药纳米粒冻干粉制备工艺及体外渗透特性研究

    目的:优选重组水蛭素-2(rHV2)鼻腔给药纳米粒冻干粉佳制备工艺;考察rHV2纳米粒冻干粉稳定性及经家兔鼻黏膜的体外渗透特性.方法:选用不同冻干保护剂制备水蛭素纳米粒冻干粉末,以外观、再分散性及包封率作为评价指标,对冻干保护剂及制备工艺进行优选,并考察了光照、高温等因素对冻干粉的影响;采用直立式扩散池法,以家兔鼻中隔黏膜为渗透屏障,测定rHV2壳聚糖溶液、rHV2纳米粒溶液及冻干粉的渗透系数(P),并计算与rHV2生理盐水溶液的促渗比(ER).结果:rHV2鼻腔给药纳米粒冻干粉佳制备工艺为:用5%甘露醇与葡萄糖(1∶1)作为冻干保护剂,于-70℃预冻24h后,置真空冻干箱中冷冻干燥,24h后取出,该冻干粉中rHV2的含量为1.1 μg/mg.光照对rHV2纳米粒冻干粉的外观、再分散性以及包封率影响均较小,而高温对rHV2纳米粒冻干粉的影响较大;rHV2壳聚糖纳米粒具有较高的渗透系数,是生理盐水组的5倍多,冻干粉仍然保持了良好的渗透性.结论:壳聚糖鼻腔给药纳米粒冻干粉有可能成为rHV2鼻腔给药的良好给药剂型.

    作者:陈明霞;张建宝;于季萍;叶静;魏宝红;张玉杰 刊期: 2013年第06期

  • 中药青皮本草考证

    青皮是临床常用理气药,具有抗病毒、抗肿瘤及抗氧化等药理活性.查阅历代本草著作发现,历代本草学家均认为陈皮、青皮两种药材属同一品种来源,由于成熟度不同而具有不同的药效.本文通过查阅历代本草古籍,结合现代研究进展,分别从青皮品种、青皮炮制及经方配伍等方面加以考证,对青皮品种来源进行脉络疏理,对古籍中炮制方法进行考查,并通过经方配伍考证对其药效进一步开发提供理论基础及现实依据.

    作者:许茹;钟凤林;吴德峰 刊期: 2013年第06期

  • HPLC测定血脂灵片中8种蒽醌类成分的含量

    目的:建立高效液相色谱测定血脂灵片中橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄酸、黄决明素、决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量的方法.方法:采用Agilent TC-C18(4.6 mm × 250 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速:1.0 mL/min,柱温:30℃,检测波长:284 nm.结果:橙黄决明素、芦荟大黄素、大黄酸、黄决明素、决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚在相应的浓度范围内与色谱峰面积呈良好线性关系;平均回收率在99.1% ~ 101.2%之间,RSD均小于2.2%.结论:该方法可更好的对血脂灵片进行质量控制.

    作者:郑艳超;李先宽;米宝丽;蔡珊珊;张振秋 刊期: 2013年第06期

  • 壮药扁担藤的性状及显微鉴别

    目的:对扁担藤进行生药学研究.方法:采用性状鉴别和显微鉴别的方法.结果:扁担藤的显微特征明显,根有10余层木栓细胞,排列整齐,皮部薄壁细胞内含有众多淀粉粒及草酸钙簇晶.茎的皮层有黏液细胞散在.叶主脉有8个外韧型维管束.结论:以上特征可为壮药扁担藤的鉴别和开发利用提供依据.

    作者:甄汉深;梁晓乐;丘琴;陈露;韦家福;蒋兰兰 刊期: 2013年第06期

  • 安徽5种野生菊属药用植物花序各组成部分显微特征研究

    目的:探明安徽5种野生菊属药用植物花序各组成部分显微特征的差异,并探索与植物的分布和生态环境的相关性.方法:对5种植物花序柄横切面进行切片观察;对总苞、舌状花和管状花表面毛茸进行比较研究;对花粉粒超微形态比较观察.结果:5种植物花序柄结构有显著差异,且与生态相关.外总苞片上非腺毛的形态差异显著;但总苞片从外层至内层,非腺毛形态逐渐趋于一致,花序各部分表面毛茸形态从外至内有趋同的现象.不同种间腺毛差异在大小上;每种内从总苞至舌状花、管状花腺毛逐渐增大,总苞外层至内层密度降低,而舌状花、管状花上的腺毛密度增加.花粉粒的超微形态显示紫花野菊与其他种有显著差异;菊花脑与野菊间花粉粒形态有差异.结论:花序柄组织结构、外总苞片表面的非腺毛形态差异可以作为菊属植物花序鉴别的重要依据;支持菊花脑独立成种的分类方式.

    作者:杨俊;镇兰萍 刊期: 2013年第06期

  • 滇西乌头化学成分研究

    目的:研究滇西乌头Aconitum bulleyanum Diels.的化学成分.方法:采用现代色谱技术对滇西乌头三氯甲烷层浸膏进行分离和纯化,根据化合物光谱数据进行结构鉴定.结果:分离鉴定了7个化合物,分别为:滇乌碱(1)、crassicaudine(2)、黑乌弱碱(3)、查斯马克宁定(4)、草乌甲素(5)、大渡乌碱(6) 、β-谷甾醇(7).结论:其中,化合物2~7为首次从该植物中分离得到.

    作者:袁梅;马晓霞;杨树德;周志宏;杨竹雅 刊期: 2013年第06期

  • 脑心清对自发性高血压大鼠血压、血小板聚集及颈动脉重构的影响

    目的:观察脑心清对自发性高血压大鼠(SHR)血压、血小板聚集和颈动脉重构的影响.方法:60只SHR随机分成模型组、卡托普利阳性对照组、阿司匹林阳性对照组及脑心清高、中、低剂量组,10只Wistar大鼠为正常对照组.分别给予相应剂量的脑心清浸膏液、卡托普利片、阿司匹林(实验结束前7d给药)、蒸馏水.每2 w测量1次鼠尾动脉收缩压;3个月后,观察每组凝血时间、血小板聚集率、血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及左颈总动脉内-中膜厚度(IMT)、腔径、IMT/腔径.结果:给药3个月后,与模型组比较,脑心清高、中剂量能显著降低SHR血压水平,显著延长凝血时间,并能抑制SHR左颈总动脉形态学改变及大鼠血小板聚集作用,不同程度所降低PRA和AngⅡ水平.结论:脑心清能够改善SHR动脉重构,减轻高血压靶器官损害的同时兼有抗血小板聚集及抗凝作用.

    作者:吴玉玲;王严春;张锐;黄美兰 刊期: 2013年第06期

  • 四逆汤佳煎煮工艺研究

    目的:优化四逆汤佳煎煮工艺,提高四逆汤中有效成分的煎出率.方法:通过单因素试验,采用RPHPLC法以苯甲酰新乌头原碱、甘草苷、甘草酸和6-姜酚的含量及浸膏重量为指标,分别考察浸泡时间、煎煮时间、加水倍量、煎煮次数对汤剂质量的影响,并在此基础上设计L9(34)正交试验,研究四逆汤临床煎煮的佳工艺.结果:四逆汤佳煎煮工艺为:浸泡时间为60 min,煎煮时间为60 min,加水倍量为10倍,煎煮2次.结论:采用正交设计法对四逆汤佳煎煮工艺的优化合理可行,为提高汤剂质量与临床疗效提供了实验基础.

    作者:刘晓;范林乾;蔡皓;周其冈;蔡宝昌 刊期: 2013年第06期

  • 地肤的化学成分研究

    目的:研究地肤Kochia scoparia(L)Schrad.的化学成分.方法:采用硅胶柱色谱分离化学成分,根据波谱数据确定化学结构.结果:分离鉴定了12个化合物,分别为:鸢尾苷元(1)、红车轴草素(2)、5,2’-二羟基-6,7-亚甲二氧基异黄酮(3)、iriflogenin (4)、5-羟基-6,7-二甲氧基黄酮(5)、阿魏酸(6)、N-trans-feruloylmethoxytyramine(7)、N-trans-feruloyltyramine(8)、豆甾醇(9)、齐墩果酸(10)、β-谷甾醇(11)、胡萝卜苷(12).结论:其中,化合物1~9为首次从该植物中分离得到.

    作者:张卫;张晓霞;刘昌发;宋瑞丽;王晶晶 刊期: 2013年第06期

  • 广藿香地上部分化学成分研究

    目的:研究广藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.地上部分的化学成分.方法:采用硅胶、Sephadex LH-20及反相C18柱色谱等分离,运用波谱数据鉴定化合物的结构.结果:从广藿香地上部分中分离鉴定了13个化合物,分别为:百秋李醇(1)、广藿香酮(2)、木栓酮(3)、表木栓醇(4)、齐墩果酸(5)、齐墩果酸甲酯(6)、5α-豆甾-3,6-二酮(7)、豆甾-4-烯-3-酮(8)、β-谷甾醇(9)、藿香黄酮醇(10)、5-羟基-3,3’,4’,7-四甲氧基黄酮(11)、(-)-愈创木基丙三醇(12)和邻苯二甲酸二丁酯(13).结论:其中,化合物6、7、8、12和13为首次从该属植物中分离得到.

    作者:周勤梅;彭成;李小红;郭力;熊亮;林大胜 刊期: 2013年第06期

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