黄珊;赖仁发;钟丽珍
目的: 观察正常牙龈组织中幽门螺杆菌(Hp)的感染情况及其对人牙龈组织细胞凋亡的影响.方法: 采用聚合酶链式反应(PCR)检测30例健康牙龈组织中Hp感染情况,应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记(TUNEL)法检测牙龈组织中的细胞凋亡指数,分析Hp对牙龈组织的毒性作用.结果: PCR检测的30名患者,Hp阳性率为40%.在TUNEL结果中,可见Hp阳性组有大量棕色凋亡细胞,部分细胞核固缩成团或核膜周围边集成环状.而正常对照组中阳性凋亡细胞较Hp感染组明显偏低,2组细胞凋亡指数差异有统计学意义.结论: Hp感染可能是引起牙龈组织细胞凋亡的因素之一.
作者:黄珊;赖仁发;钟丽珍 刊期: 2017年第07期
目的: 探讨蜂胶黄酮短叶松素-3-乙酸酯(pinobanksin-3-acetate,PB3A)对结肠癌SW480细胞微小RNA(microRNA, miRNA)表达谱的影响,为结肠癌的治疗及靶向药物研发提供理论依据.方法: 使用miRNA芯片技术分析检测蜂胶黄酮PB3A处理人类结肠癌SW480细胞后miRNA表达谱的变化.通过实时荧光定量PCR方法检测miRNA-198和miRNA-296-5p的表达水平,以此来验证miRNA芯片结果的准确性和可靠性.利用miRWalk、MicroT、miRanda等12个网上数据库预测这2条miRNAs的靶基因并进行靶基因功能富集分析.结果: miRNA芯片分析结果显示,蜂胶黄酮PB3A干预24 h后结肠癌SW480细胞中差异表达倍数在2倍及以上的miRNA有267条,其中差异表达倍数达10倍及以上的miRNA有30条,28条为上调表达,2条下调表达;RT-qPCR实验结果显示miRNA-198和miRNA-296-5p的表达量趋势跟miRNA芯片结果一致,表达差异有统计学意义(P<0.05).miRNA靶基因预测发现miRNA-198有859个靶基因,miRNA-296-5p有906个靶基因;对这些可能被调控的靶基因进行Gene Class分析,结果显示miRNA-198和miRNA-296-5p的靶基因功能主要为转录因子、拷贝数变异、细胞分化、癌基因、蛋白激酶、组蛋白、转移癌基因、肿瘤抑制基因等(P<0.05).信号通路富集分析结果显示,miRNA-198靶基因显著富集于肿瘤通路、Wnt信号通路、胞吞通路、ErbB信号通路、黏着斑通路、黑素生成通路等信号通路,而miRNA-296-5p靶基因在MAPK信号通路、胞吞通路、轴突导向通路、Wnt信号通路、胰岛素信号通路、钙离子信号通路等信号通路中出现聚集(P<0.05).结论: 蜂胶黄酮PB3A 影响结肠癌SW480细胞的miRNA表达谱.PB3A作用下miRNA-198和miRNA-296-5p的异常表达可能参与PB3A抗结肠癌的过程.
作者:胡尼其古丽·阿巴克;玛依努尔·达吾提;依米提·热合曼;阿依努尔·玉苏普;吾热娅提古丽·克维尔;买日江古丽·阿布力提甫 刊期: 2017年第07期
目的: 筛选能显著抑制原代培养的自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR) 阴茎海绵体平滑肌细胞内1-磷酸鞘氨醇受体2(sphingosine-1-phosphate receptor 2,S1P2)基因表达的siRNA慢病毒载体.方法: SHR及SD大鼠各5只用于原代培养阴茎海绵体平滑肌细胞并分成6组,每组5个样本,每个样本约1.0×105个细胞,分别为携带靶向S1P2基因的siRNA-1~3号靶点的SHR慢病毒转染组(SHR siRNA-1、SHR siRNA-2和SHR siRNA-3组)、 携带慢病毒空载体的SHR转染组(SHR GFP组)、SHR未转染对照组(SHR control组)和SD大鼠对照组(SD control组).将靶向S1P2的siRNA片段的慢病毒载体,以感染复数(MOI)=60转染各组SHR阴茎海绵体平滑肌细胞,于转染72 h后荧光显微镜下观察细胞荧光表达情况,用Western blot分析各组S1P2、ROCK1、ROCK2和eNOS在阴茎海绵体平滑肌细胞内的表达变化,RT-PCR检测各组阴茎海绵体平滑肌细胞S1P2、ROCK1和ROCK2的mRNA 的表达.结果: 荧光显微镜下观察SHR siRNA-1、SHR siRNA-2、SHR siRNA-3和SHR GFP组细胞转染效率均>80%;SHR GFP组与SHR control组相比,S1P2、ROCK1和ROCK2的mRNA和蛋白表达无明显差异, SHR siRNA-1、SHR siRNA-2、SHR siRNA-3和SD control组均显著低于SHR control组(P<0.05).而SHR siRNA-1、SHR siRNA-2、SHR siRNA-3和SHR GFP组eNOS蛋白表达与SHR control组相比均无显著差别,但SD control组显著高于SHR control组(P<0.05).结论: 3组针对S1P2的siRNA慢病毒载体均能显著抑制SHR阴茎海绵体平滑肌细胞内S1P2的表达,下调ROCK1和ROCK2表达,其中靶向S1P2的siRNA-1抑制效率高.
作者:晏萧;夏纪毅;程波;朱永生;姜睿 刊期: 2017年第07期
目的: 观察穿心莲内酯对卵巢癌细胞株SKOV-3侵袭与凋亡的影响并探讨初步的作用机制.方法: CCK-8法检测不同浓度(0、5、10、20和40 μmol/L)的穿心莲内酯对SKOV-3细胞作用不同时间(12、24、36和48 h)后,SKOV-3细胞存活率的变化;Transwell法与TUNEL法分别检测SKOV-3细胞侵袭能力与凋亡能力的变化;Western blot法检测p-PI3K、p-Akt与p-mTOR蛋白水平的变化.结果: CCK-8法检测结果显示,随着浓度增加与培养时间延长,穿心莲内酯对SKOV-3细胞存活率的抑制程度增强;采用20 μmol/L穿心莲内酯培养SKOV-3细胞36 h后,SKOV-3细胞的侵袭数明显降低,凋亡数明显增加(P<0.05),p-PI3K、p-Akt与p-mTOR的蛋白水平明显降低(P<0.05).结论: 穿心莲内酯能够抑制卵巢癌细胞SKOV-3的活力与侵袭能力,增强凋亡能力,这可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关.
作者:苏芳静;张斌;田林燕 刊期: 2017年第07期
基因的失调控(异常表达)是肿瘤发生发展的重要原因(诱因)业已被学术界所公认,而在这一过程中非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)起到了极为重要的调控作用[1-2].小RNA(small RNA;包括微小RNA,microRNA,miRNA,miR)和长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)均属于ncRNA[3-4].大量研究已证实miRNA对基因表达的调控与诸多生理病理过程有着密切的联系,并且miRNA的异常表达参与了肿瘤的发生发展[5-7].而对于另一重要分支lncRNA的研究目前尚处于萌芽阶段.
作者:姜兴明;王志东;李景林;郑汪洋;李正龙;李鑫恒;崔云甫 刊期: 2017年第07期