胡擎鹏；黄湘壹
目的：观察硫化氢（ H2 S）对ob／ob小鼠皮肤创面愈合的影响并探讨其作用机制。方法：将ob／ob小鼠随机分为生理盐水组、胰岛素组和NaHS（H2S供体）组，C57BL／6小鼠作为对照组，构建小鼠背部皮肤创面模型。干预后检测各组H2S释放量；用Western blot检测胱硫醚γ－裂解酶（CSE）及基质金属蛋白酶－9（MMP－9）蛋白的表达差异；用RT－qPCR检测CSE的mRNA表达变化；使用免疫组织化学法检测中性粒细胞及单核／巨噬细胞的浸润数量；使用ELISA检测肿瘤坏死因子（TNF）－α和白细胞介素（IL）－6的水平；用Masson染色检测胶原沉积情况。结果：ob／ob小鼠皮肤创面肉芽组织中 H2 S 释放及 CSE 蛋白、mRNA 的表达水平以及胶原沉积显著低于C57BL／6小鼠（P＜0．05）。外源性H2S可加速ob／ob小鼠皮肤创面愈合（P＜0．05），增加胶原沉积。 ob／ob小鼠创面中性粒细胞及单核／巨噬细胞浸润数量，TNF－α、IL－6的水平及MMP－9蛋白表达水平显著增加（P＜0．05）， NaHS组显著降低。结论：H2 S可显著改善糖尿病难愈性溃疡的愈合，作用机制可能与其抗炎作用有关。
作者：赵蕙琛；柴家超；郑杰；王媛妹；王园园；郭秀芝；管庆波；刘元涛 刊期： 2016年第07期
目的：研究蛋白基因产物9．5（PGP9．5）在宫颈癌病理标本中的表达与宫颈癌临床病理特征及预后的关系，并初步探讨利用PGP9．5－siRNA靶向治疗宫颈癌的潜在价值。方法：回顾性分析2008年1月～2015年6月在天津市第五中心医院妇科及天津市中心妇产科医院接受手术治疗并经病理确诊的180例宫颈癌患者临床资料。所有患者宫颈癌病理标本制作病理切片并进行SP法免疫组化染色。以PGP9．5染色后评分为依据将患者分为PGP9．5高表达组和PGP9．5低表达组。观察2组患者年龄、HPV感染、病理分级、肿瘤直径、淋巴结转移、浸润深度、累及脉管和临床分期等临床病理学参数的关系。采用Kaplan－Meier法和log－rank检验进行生存分析。采用PGP9．5－siRNA、NC－siRNA、PGP9．5真核表达质粒和对照空质粒按照脂质体载体试剂说明书转染SiHa细胞，设立si－PGP9．5组、NC组、PGP9．5组和vector组。同时设立SiHa细胞空白对照（ control）组。分别采用Western blot 实验、平板克隆形成实验和Transwell实验分析5组细胞PGP9．5蛋白的表达水平、克隆形成能力和侵袭能力。结果：2组患者病理分级、肿瘤直径、淋巴结转移、浸润深度、累及脉管和临床分期等临床病理参数与PGP9．5表达水平有关。 PGP9．5高表达组患者3、5年总体生存率明显低于PGP9．5低表达组患者。与control组相比，si－PGP9．5组Si－Ha细胞中PGP9．5蛋白的表达量明显降低，克隆形成数量明显减少，过膜细胞数量明显减少；PGP9．5组SiHa细胞中PGP9．5蛋白的表达量明显升高，克隆形成数量明显增多，过膜细胞数量明显增加。结论： PGP9．5蛋白高表达预示宫颈癌患者预后不良，可能成为预测宫颈癌患者预后的良好指标，对其表达进行抑制可能实现对宫颈癌的有效基因治疗。
作者：靳荣；李红芳；张立东 刊期： 2016年第07期
目的：探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他（即辛二酰苯胺异羟肟酸，SAHA）在惊厥性脑损伤发病中的作用及机制。方法：32只雄性SD大鼠随机分为control组、戊四唑（ pentylenetetrazole，PTZ）组、PTZ＋10 mg／kg SAHA组及PTZ＋50 mg／kg SAHA组，通过腹腔注射PTZ制作发育期大鼠惊厥模型，SAHA于PTZ诱导惊厥前2 h腹腔注射给药。本实验中PTZ造模成功率约85％，注射后约30 min到1 h后出现惊厥发作，评估惊厥发作的等级。惊厥后24 h处死大鼠，RT－qPCR及Western blot检测海马组织TLR4、MYD88、NF－κB P65和IL－1βmRNA及相应蛋白的表达；HE染色观察脑组织病理变化；TUNEL染色检测大鼠海马神经元凋亡。结果：（1） PTZ组均达到Ⅳ～V级惊厥发作，而SAHA预处理能减轻惊厥发作的等级；（2） PTZ组大鼠海马组织中TLR4、MYD88、NF－κB P65和IL－1βmRNA及相应蛋白的表达均较对照组显著增高（P＜0．05），而SAHA预处理能抑制mRNA和相应蛋白表达水平的增高；（3） HE染色可见PTZ组明显的细胞水肿及神经元凋亡，伴有较多的炎症细胞浸润，而SAHA预处理能减轻细胞水肿及神经元凋亡，同时减少炎症细胞浸润；（4）大鼠海马组织中的神经元凋亡数PTZ组较对照组显著增加（P＜0．05），而SAHA预处理能抑制海马神经元的凋亡；（5）相对于10 mg／kg SAHA治疗组，50 mg／kg SAHA治疗作用更明显（ P＜0．05）。结论：组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA能抑制惊厥后TLR4／MYD88炎症信号通路和海马神经元的凋亡，从而减少炎症反应及惊厥性脑损伤。
作者：胡擎鹏；黄湘壹 刊期： 2016年第07期
目的：建立重症急性胰腺炎大鼠模型，研究生长抑素（奥曲肽）联合大柴胡汤对急性重症胰腺炎的作用及初步机制。方法：50只大鼠随机分为假手术组、模型组、奥曲肽组、大柴胡汤组与联合组，经相应处理后记录腹水量，测定血清中淀粉酶（ amylase，AMY）、丙氨酸氨基转移酶（ alanine aminotransferase，ALT）和肌酐（ creatinine， Cr）的水平，HE染色后观察胰腺组织形态，Western blot检测胰腺细胞核中NF－κB与细胞中IκBα的蛋白表达水平， qPCR检测胰腺细胞中ICAM－1与IL－1的mRNA表达水平。结果：生长抑素联合大柴胡汤能有效降低重症急性胰腺炎大鼠的腹水量以及血清中AMY、ALT和Cr的水平；重症急性胰腺炎可导致胰腺细胞核NF－κB蛋白表达升高，IκBα蛋白表达降低，ICAM－1和IL－1 mRNA表达升高。生长抑素联合大柴胡汤可逆转这些改变。结论：生长抑素联合大柴胡汤可以减轻大鼠的急性重症胰腺炎，其机制可能与抑制NF－κB信号通路以及ICAM－1和IL－1表达有关。
作者：冯辉；吴标；赵习德；郭宝瑞 刊期： 2016年第07期
目的：探讨微小RNA－193b（miR－193b）在不同宫颈组织中的表达以及其对顺铂作用于宫颈癌细胞敏感性的影响，并初步探讨其作用机制。方法：实时荧光定量PCR（qPCR）检测不同宫颈组织中miR－193b的表达水平。采用脂质体将miR－193b－inhibitor转染至HeLa细胞，Transwell法、CCK－8法和免疫蛋白印迹法分别检测细胞迁移数、细胞对顺铂的敏感性以及细胞中PTEN、Akt、p－Akt和P－糖蛋白（ P－gp）的蛋白水平。结果： qPCR结果显示miR－193b在正常宫颈组织及宫颈糜烂组织中呈低表达，在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中的表达明显上升；转染miR－193b－inhibitor后，HeLa细胞迁移数明显减少（P＜0．05），顺铂对HeLa细胞活力的抑制作用进一步增强（P＜0．05），细胞中PTEN的蛋白表达明显上调（P＜0．05），Akt的蛋白表达无明显变化，p－Akt和P－gp的蛋白水平明显下调（ P＜0．05）。结论：miR－193b在宫颈癌组织中呈高表达，沉默miR－193b可增加HeLa细胞对顺铂的敏感性，作用机制可能与PTEN－PI3 K／Akt通路有关。
作者：杜文霞；姬霞 刊期： 2016年第07期
目的：探究青蒿素对脂多糖（ lipopolysaccharide， LPS）诱导的大鼠肠上皮IEC－6细胞屏障功能损伤的影响。方法：体外培养IEC－6细胞，随机分为5组：对照组、LPS （100 mg／L ）组和LPS＋青蒿素（30、50和100μmol／L）组，MTT法检测各组细胞毒性变化，ELISA检测各组细胞分泌炎性因子TNF－α、IL－1β和IL－6水平的变化，电阻仪检测肠上皮细胞跨上皮电阻（TER），酶标仪检测单层细胞对辣根过氧化物酶（HRP）的通透性，RT－qPCR和Western blot检测各组细胞紧密连接蛋白（ ZO－1、claudin－1和occludin）以及TLR4／MyD88／NF－κB mRNA和蛋白表达的变化。结果：LPS与青蒿素在本实验浓度范围对IEC－6细胞均无毒性。与对照组相比， LPS处理下，细胞分泌TNF－α、IL－1β和IL－6水平以及TLR4／MyD88／NF－κB的mRNA和蛋白表达明显增加，ZO－1、claudin－1和occludin的mRNA和蛋白表达降低。而青蒿素干预下，细胞分泌TNF－α、IL－1β和IL－6水平以及TLR4／MyD88／NF－κB mRNA和蛋白表达明显降低，ZO－1、claudin－1和occludin的mRNA和蛋白表达升高（P＜0．05），均呈现浓度依赖性。结论：青蒿素可能通过抑制TLR4／MyD88／NF－κB通路减轻LPS诱导的肠上皮细胞屏障功能损伤。
作者：孙俊波；赵璐；史素琴；寇振媛；刘爱娟；付婷婷 刊期： 2016年第07期
目的：研究外源性硫化氢（ H2 S）能否通过调控Janus激酶／信号转导及转录激活因子（ JAK／STAT）通路对抗高糖诱导的人脐静脉内皮细胞（ HUVECs）损伤。方法：Western blot法测定JAK2、STAT3、cleaved caspase－3的蛋白水平；CCK－8法检测细胞存活率；罗丹明123染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位（ MMP）；双氯荧光素（ DCFH－DA）染色荧光显微镜照相法测定胞内活性氧（ ROS）水平；超氧化物歧化酶（ SOD）检测试剂盒检测SOD活性。结果：应用400μmol／L硫氢化钠（ NaHS，为H2 S的供体）预处理HUVECs 30 min能明显地抑制高糖（40 mmol／L葡萄糖，HG）对p－JAK2和p－STAT3蛋白水平的上调作用。400μmol／L NaHS预处理30 min或20μmol／L JAK／STAT通路抑制剂AG490预处理30 min均能抑制高糖对HUVECs引起的损伤，使细胞存活率和SOD活性升高，cleaved caspase－3蛋白水平、ROS生成量及MMP丢失均减少。结论：外源性的H2 S通过抑制JAK／STAT通路保护HUVECs对抗高糖引起的损伤。
作者：林佳琼；陈景福；廖静秋；林凯；邓海鸥；吴冬波；吴文 刊期： 2016年第07期
目的：探讨肾活检组织冰冻切片储存温度对免疫荧光结果的影响。方法：选择2015年1月～2015年6月浙江省人民医院肾脏病科肾脏活检标本100例，将同一肾穿组织同时切两套切片分别储存于－70℃低温冰箱和－12℃冷冻切片机内，其中储存于－70℃低温冰箱的切片作为实验组，储存于－12℃冷冻切片机内的切片作为对照组，次日用直接免疫荧光法检测免疫球蛋白（ IgG、IgA和IgM）、补体（ C3、C4和C1q）及纤维蛋白原，间接免疫荧光法检测Ⅳ型胶原a3和a5链，荧光显微镜下观察定性及半定量结果。结果：实验组3＋～4＋IgG 16例，对应的对照组IgG均为1＋～2＋，阳性强度明显弱于实验组，差异有统计学显著性（ P＜0．05）；实验组3＋～4＋a399例，对照组1＋～2＋a392例，阴性8例；实验组3＋～4＋a599例，对照组1＋～2＋a592例，阴性8例，对照组阳性强度减弱，差异有统计学显著性（P＜0．05）。实验组4＋IgA 15例，3＋IgA 19例，3＋IgM 15例，2＋IgM 11例，4＋C313例，3＋C312例，相对应的对照组阳性强度没有明显减弱，差异无统计学显著性。结论：肾活检冰冻切片免疫荧光结果受切片储存温度影响大，其中对IgG和Ⅳ型胶原免疫荧光阳性强度影响更大，建议肾脏活检组织冰冻切片置于－70℃低温冰箱储存。
作者：赵黎；朱萌华；金娟；龚建光；李一文；何强 刊期： 2016年第07期
自人类微生物组计划启动以来，研究发现人体肠道内存在有1000多种共生菌，主要包括 Bacte－roidetes、Firmicutes、Proteobacteria等菌门［1］，它们寄居在肠道的不同部位，通过特有的菌群结构、菌群活动、代谢产物等来影响机体的新陈代谢，维持机体内环境稳态［2］。它们相对稳定，却又受到年龄、遗传背景及生活环境的影响，在数量、结构、菌群丰度及生理状态方面表现出明显的差异。近年来，肠道菌群的差异受到国内外研究者的广泛关注，相关研究证明［1－3］，肠道菌群与肥胖、免疫相关疾病、癌症等疾病密切相关，不同个体之间肠道菌群的差异不仅造成宿主不同的生理状态，而且还会通过影响5－HT的产生来影响宿主的精神状态。同时，这种差异也提示了在疾病治疗、康复等方面，应存在个性化的营养和药物治疗策略。本文就近年来肠道菌群差异相关的影响因素及其对机体的影响做一综述。
作者：罗再；曾巨丹；冯琛卓 刊期： 2016年第07期
目的：观察蛋白酶体抑制剂MG132诱导SH－SY5Y细胞凋亡及调节β－淀粉样蛋白（ beta－amyloid protein，Aβ）生成的作用，并对其机制进行探讨。方法：培养SH－SY5Y细胞，MG132对细胞进行处理，浓度分别为2．5μmol／L、5μmol／L和10μmol／L，24 h后检测各项指标。 MTT法检测细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡；ELISA法检测细胞Aβ1－40和Aβ1－42水平；Western blot检测淀粉样蛋白前体蛋白（ amyloid precursor protein，APP）、β－分泌酶（BACE1）、早老蛋白1（presenilins 1，PS1）、早老蛋白2（presenilins 2，PS2）、nicastrin（NCT）和α－分泌酶（ADAM10）蛋白表达。结果：经MG132处理后，细胞活力明显下降，诱导细胞凋亡，随剂量增加凋亡率分别为36．97％、46．20％、50．50％；细胞Aβ1－42和Aβ1－40蛋白水平明显上升； APP及Aβ代谢相关蛋白PS1、PS2和BACE1表达均出现剂量依赖性的增加，而ADAM10表达呈剂量依赖性降低；NCT水平变化不明显。结论： MG132能诱导神经细胞凋亡，通过影响Aβ生成途径关键蛋白而促进Aβ的产生，说明蛋白酶体活性下降可通过调节Aβ途径参与阿尔茨海默病的发生。
作者：王浩；孙利利；于杨；杨艳茹；马健；陈伟；张继国；秦树存 刊期： 2016年第07期
目的：观察内源性一氧化氮合酶（ NOS）抑制物非对称性二甲基精氨酸（ ADMA）及其信号通路在4周运动大鼠NO水平及骨骼肌收缩功能与线粒体生物合成中的调节作用。方法：建立4周运动大鼠模型，检测离体比目鱼肌对电刺激的单次、强直和疲劳收缩的大张力；并检测骨骼肌中ATP和线粒体DNA含量以及过氧化物酶增殖体受体γ辅激活因子1α（ PGC－1α）、核呼吸因子（ NRF） mRNA的表达以反映线粒体生物合成及功能；用高效液相色谱测定血清ADMA浓度；用Western blot法检测骨骼肌中内源性ADMA生成酶PRMT1和ADMA代谢酶DDAH 2种亚型以及NOS 3种亚型蛋白的表达；用比色法测定NOS活性及一氧化氮（ NO）含量等。结果：与正常对照组相比，运动组大鼠比目鱼肌对电刺激诱导的各种收缩张力均明显增强，比目鱼肌ATP含量、线粒体DNA含量和PGC－1α、NRF mRNA增加显著（ P＜0．01）。运动组大鼠比目鱼肌中构成型NOS（ cNOS）的蛋白表达及其NOS活性明显上调（ P＜0．01），而NO含量仅小幅增加（ P＜0．05）；同时，4周运动增加大鼠血清ADMA浓度，并伴有骨骼肌DDAH2表达下调。结论：短期耐力运动增强比目鱼肌单次收缩、强直收缩和抗疲劳收缩肌功能，其机制可能与过度增加的cNOS促使ADMA水平反馈性升高，从而维持骨骼肌NO低幅度增加，促进线粒体生物合成有关。
作者：邱霓；方伟进；李聪；李晓媚；熊燕 刊期： 2016年第07期
目的：研究亚甲蓝（ methylene blue，MB）对百草枯（ paraquat，PQ）中毒大鼠胸腺T 淋巴细胞亚群免疫功能与氧化应激的影响。方法：选取Wistar雄性大鼠40只，随机分为正常组、模型组、MB低剂量（2 mg? kg－1?d－1）组和MB高剂量（4 mg? kg－1? d－1）组。72 h后HE染色法观察胸腺组织形态，比色法测定各组胸腺组织SOD活性及MDA含量，免疫组化试剂盒检测Bcl－2和Bax和CD4及CD8的表达。结果：MB组胸腺皮、髓质分界清楚，胸腺细胞MDA含量减少，SOD活性增加，抗氧化能力提高，Bcl－2和Bax表达量下调、Bcl－2／Bax的比值增加，CD4阳性表达提高。结论：MB能够改善PQ对胸腺细胞的氧化损伤，调节胸腺T 淋巴细胞亚群在皮质和髓质区的分布，从而缓解机体持续性损伤。
作者：杜斌；陈俊良；唐筛娣；陈炜；庞庆丰 刊期： 2016年第07期
神经元受刺激后产生动作电位，并将该刺激信号传递给其它的神经元，进而影响整个神经回路。这种接受去极化刺激后能够产生动作电位的特性，是判断细胞是否具有兴奋性的标准。然而亦有研究表明，神经元在接受超极化刺激后也能爆发动作电位，被称为“去极化反跳（ rebound depolariza－tion）”［1－2］。通常超极化使膜电位增大，产生抑制效应，使神经元兴奋性降低，而去极化反跳是由超极化引起的去极化反应，有的还能产生动作电位，使神经元兴奋性增高。本文结合国、内外近年来对神经元去极化反跳的基本特性及其机制以及在生理和病理状态下作用的研究进展加以综述。
作者：李凌超；朱梦叶；张达颖；柳涛 刊期： 2016年第07期
目的：探讨芥子酸对高糖诱导下大鼠血管平滑肌细胞（ vascular smooth muscle cells，VSMCs）增殖和凋亡的影响及机制。方法：将培养的A7r5细胞随机分组处理，MTT法检测细胞活力，BrdU法检测细胞DNA合成，流式细胞术检测细胞周期进程和细胞凋亡，ELISA检测细胞活性氧簇（ reactive oxygen species，ROS）生成，West－ern blot检测cyclin D1、P21和P27等蛋白的表达，以及蛋白激酶C（ PKC）和P38的磷酸化水平。结果：与正常组比较，高糖组细胞活力显著升高，DNA合成加快，细胞周期加快，P21和P27表达降低，cyclin D1表达增加，ROS水平增加，细胞凋亡率降低，p－PKC和p－P38蛋白水平增加（ P＜0．05）。而芥子酸（0．1、1和10μmol／L）处理引起细胞增殖活性降低，DNA合成减弱，细胞周期受阻，P21和P27表达增加，cyclin D1表达降低，ROS水平降低，细胞凋亡率升高，p－PKC和p－P38蛋白水平降低，且呈一定浓度依赖性（ P＜0．05）。 P38抑制剂SB203580和PKC抑制剂chelerythrine均显著抑制高糖诱导的PKC／P38活化和细胞活力（ P＜0．05）。结论：芥子酸可通过抑制PKC／P38激活降低高糖诱导的VSMCs增殖，并促进细胞凋亡。
作者：裴星；韩勇；张占华；李娜；施遥；张园园；樊一钢；田红燕 刊期： 2016年第07期
目的：研究银杏叶提取物（ Ginkgo biloba extract，GBE）对大鼠糖尿病视网膜病变（ diabetic retinopa－thy，DR）的影响及初步机制。方法：实验共分为5组，以普通Wistar大鼠作为正常对照组（ control组）、Goto－Kakiza－ki（ GK）大鼠作为糖尿病视网膜病变模型组（ DR组），给予GK大鼠不同剂量的银杏叶提取物，分为低剂量组（ GBE－L组），中剂量组（ GBE－M组）和高剂量组（ GBE－H组）；检测各组大鼠的血糖与血－视网膜屏障损伤情况；TUNEL染色法和Western blot法分别检测视网膜组织的神经节细胞凋亡情况，核子因子E2相关因子2（ nuclear factor E2－re－lated factor 2，Nrf2）、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（phosphorylation－extracellular regulated protein kinase， p－ERK）、细胞外调节蛋白激酶总蛋白（total extracellular regulated protein kinase， t－ERK）、B淋巴细胞瘤－2（B－cell lymphoma－2， Bcl－2）和P53的蛋白水平变化。结果：银杏叶提取物能够降低糖尿病视网膜病变大鼠的血糖，减轻血－视网膜屏障的损伤，并降低视网膜神经节细胞凋亡数，上调细胞内的Nrf2、p－ERK与Bcl－2的蛋白水平，下调P53的蛋白表达，而对t－ERK蛋白的表达水平无显著影响。结论：在糖尿病视网膜病变中，银杏叶提取物能有效地保护视网膜神经节细胞，可能与Nrf2／ERK通路的激活以及Bcl－2与P53蛋白表达有关。
作者：杜倩；田秋霞；付莉萍；李剑波 刊期： 2016年第07期
目的：探讨自噬是否参与肾大部切除（ SNx）大鼠肾小管上皮细胞的过度死亡，及其与程序性坏死的关系。方法：48只雄性SD大鼠随机分为control组（6只）和SNx组（42只），分别行假手术和SNx。将24只SNx大鼠分为0、4、8和12周组；其余SNx大鼠分为SNx＋vehicle组、SNx＋necrostatin－1（ Nec－1）组和SNx＋3－甲基腺嘌呤（3－MA）组，每组6只。检测0、4、8和12周组大鼠肾组织RIP1、RIP3、LC3和beclin－1的mRNA和蛋白表达水平；用Nec－1和3－MA干预SNx大鼠，Western blot法检测LC3－Ⅰ、LC3－Ⅱ和beclin－1的蛋白水平，透射电镜和TUNEL染色判定Nec－1和3－MA对SNx大鼠肾小管上皮细胞死亡的影响，并观察Nec－1和3－MA对SNx大鼠肾组织的病理变化、活性氧簇（ROS）、血尿素氮（BUN）和血肌酐（SCr）含量的影响。结果： SNx术后8周大鼠肾组织RIP1、RIP3、LC3和beclin－1的mRNA和蛋白水平达高值（ P＜0．01）；Nec－1和3－MA干预SNx大鼠的LC3－Ⅱ／Ⅰ和beclin－1蛋白水平、发生程序性坏死的肾小管上皮细胞及TUNEL阳性细胞数量均显著降低（P＜0．01）。另外，Nec－1减低SNx大鼠肾组织的ROS含量，但3－MA无此作用。结论：自噬参与了SNx大鼠肾小管上皮细胞过度死亡；抑制自噬可减轻SNx大鼠肾小管上皮细胞程序性坏死及其肾损伤。
作者：朱永俊；夏云峰；钟良宝；梁海琴；王善智；林欣然；甘华 刊期： 2016年第07期
目的：研究唑来膦酸（ ZOL）对人类急性髓系白血病细胞U937的增殖抑制及促凋亡作用。方法：CCK－8法检测不同时间ZOL对U937细胞的生长抑制率；流式细胞术检测ZOL对 U937细胞周期的影响；Annexin V－PI法及Hoechst 33342法检测ZOL作用前后细胞凋亡情况变化， JC－1检测ZOL对U937细胞线粒体膜电位变化的影响；克隆形成实验检测U937细胞克隆形成能力；Western blot法检测ZOL对U937细胞周期和凋亡相关蛋白的变化。结果：CCK－8结果显示ZOL可以抑制U937细胞的活力，并呈时间－剂量依赖性；Annexin V－PI 及Hoechst 33342结果显示ZOL可以促进U937细胞凋亡，且呈时间－剂量依赖性；JC－1结果显示ZOL可以明显降低U937细胞线粒体膜电位；PI法证实ZOL将U937细胞周期阻滞在S期，克隆形成实验证实0．2 mmol／L ZOL可以完全抑制U937细胞的克隆形成能力；Western blot结果显示ZOL作用于U937细胞48 h后细胞周期相关蛋白p21表达显著增强，促凋亡蛋白Bax表达增强，抑凋亡蛋白Bcl－2表达明显减弱。结论： ZOL抑制U937细胞的增殖和克隆形成主要是由于抑制了细胞周期相关蛋白表达，同时ZOL可以促进U937细胞凋亡，这种作用主要是通过调节线粒体凋亡途径相关蛋白来实现的。
作者：范蕊芳；刘玲玲；张玲；郭小燕；王晓珍；林东军 刊期： 2016年第07期
目的：研究原花青素单一活性成分B2（PC－B2）对高糖环境下人内皮祖细胞（EPCs）的保护作用及其作用机制。方法：从健康人外周血中分离诱导培养人EPCs，并进行鉴定。将EPCs分为control组（ PBS处理）、高渗对照组（25 mmol／L甘露醇处理）、高浓度30 mmol／L葡萄糖作用组以及不同浓度（2、10和50 mg／L） PC－B2与30 mmol／L葡萄糖共处理组。使用CCK－8法检测各组中EPCs 活力的变化；同时检测各组EPCs 中乳酸脱氢酶（ LDH）、丙二醛（ MDA）、超氧化物歧化酶（ SOD）和还原型谷胱甘肽（ GSH）水平；ELISA方法检测各组EPCs上清中一氧化氮（NO）、内皮素－1（ET－1）、细胞间黏附分子－1（ICAM－1）和血管细胞黏附分子－1（VCAM－1）的含量变化；流式细胞术检测各组中EPCs活性氧簇（ ROS）生成和凋亡率变化；Western blot检测血管内皮生长因子（ VEGF）和血管内皮生长因子受体－2（ VEGFR－2）的表达情况。结果：与control组相比，高糖作用组中人EPCs的活力显著下降（ P＜0．05）；LDH漏出量以及MDA、ET－1、ICAM－1和VCAM－1含量均显著升高（P＜0．05）；而SOD和GSH活性以及NO含量显著降低（ P＜0．05）；细胞中ROS含量和凋亡率显著上升（ P＜0．05）；EPCs中VEGF和VEGFR－2表达量显著降低（P＜0．05）。与高糖作用组相比，不同浓度PC－B2作用组EPCs活力均明显回升（P＜0．05）；LDH漏出量以及MDA、ET－1、ICAM－1和VCAM－1含量均逐渐下降（ P＜0．05）；SOD和GSH活性以及NO含量均显著上升（ P＜0．05）；细胞中ROS生成和凋亡率逐渐下降（ P＜0．05）；而EPCs中VEGF和VEGFR－2表达量也随之逐渐上升，并具有浓度依赖性（ P＜0．05）。结论： PC－B2能够提升高糖作用下人EPCs活力，减少高糖引起的氧化损伤，恢复EPCs正常功能，降低高糖诱导的炎症因子和细胞凋亡，从而对人EPCs发挥保护作用，并可通过诱导VEGFR－2和VEGF表达发挥作用。
作者：王丽萍；李莉；姚计文；李博 刊期： 2016年第07期
目的：探讨adipolin／CTRP12对LPS致ARDS小鼠的作用及肺泡上皮钠离子通道（ ENaC）的调节。方法：40只C57BL／6J小鼠按随机数字表分为对照组、LPS组、adipolin组和wortmannin（PI3K抑制剂）组，每组10只。苏木精－伊红（HE）染色观察肺组织病理改变；伊文氏蓝标记蛋白检测肺水清除率（AFC），BCA法测支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量，评估肺组织通透性改变；ELISA检测BALF中白细胞介素（IL）－1β和肿瘤坏死因子（ TNF）－α含量，髓过氧化物酶（ MPO）试剂盒检测MPO活性，吉姆萨染色计数BALF总细胞数和多形核白细胞数， Western blot法检测肺组织α－ENaC蛋白表达和Akt磷酸化水平，实时荧光定量PCR检测肺组织α－ENaC的mRNA转录水平。结果：与control组相比，LPS组表现出典型的ARDS病理改变，肺损伤明显（P＜0．05），湿干重比（W／D）和BALF蛋白含量明显增高而AFC明显减弱（P＜0．05），BALF细胞计数、MPO活性、IL－1β含量和TNF－α含量明显升高（P＜0．05），而肺α－ENaC表达和Akt磷酸化水平显著下调（P＜0．05）。与LPS组相比，adipolin组肺损伤明显减轻（P＜0．05），W／D和BALF蛋白含量明显降低而AFC明显增强（P＜0．05），且BALF细胞计数、MPO活性、IL－1β含量和TNF－α含量均较LPS组显著降低（P＜0．05），伴α－ENaC表达和Akt磷酸化水平显著上调（P＜0．05）。而PI3K抑制剂wortmannin组与adipolin组相比，其肺损伤明显加重（P＜0．05），W／D和BALF蛋白含量明显增高， AFC明显减弱（P＜0．05），BALF细胞计数、MPO活性、IL－1β含量和TNF－α含量明显升高（P＜0．05），同时伴α－ENaC表达和Akt磷酸化水平显著下调（P＜0．05）。结论： Adipolin／CTRP12可通过PI3K／Akt信号通路介导的α－ENaC上调机制，增强肺水肿液清除能力，从而对LPS所致ARDS小鼠发挥保护性调控作用。
作者：唐旭毛；戚迪；王导新 刊期： 2016年第07期
目的：探讨Lowe综合征的临床、影像特点及基因特征。方法：分析1例10月大Lowe综合征患儿的临床资料，头颅核磁共振（ MRI）特征及其致病基因OCRL突变检测结果。结果：患儿有先天性白内障、眼球震颤、精神运动发育落后、肌张力低下、蛋白尿及血尿等临床表现。头颅MRI提示患者脑白质髓鞘发育落后，双侧额颞叶发育不良，蛛网膜下腔增宽。 OCRL 基因检测发现一新发缺失突变 NM＿000276．3： c．1280－1281delTT （ p． Cys428Hisfs*2），该突变未见文献报道。结论：Lowe综合征的诊断主要通过临床表现和OCRL基因检测，本研究发现的OCRL基因新突变丰富了该基因的致病突变谱。
作者：李冰肖；张占会；周庆华；杨晶；吴瑕；柳国胜 刊期： 2016年第07期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
