刘关羽；何卫阳；朱鑫；杨帆；黄小龙；印胡滨；苟欣
目的：明确18α－甘草次酸（18α－glycyrrhetinic acid，18α－GA）对晚期骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells ，BMSCs）衰老标志物和增殖能力的影响。方法：晚期BMSCs （≥14代）应用2．0 mg／L的18α－GA持续作用30 d，比较18α－GA组与DMSO组蛋白酶体活性；衰老相关β－半乳糖苷酶（ senescence－associatedβ－galactosidase，SA－β－Gal）染色和Western blot检测衰老相关蛋白p53、p21和p16的表达变化；CCK－8、BrdU掺入试验、流式细胞术和Western blot分别检测细胞增殖能力、细胞周期分布及细胞周期相关分子表达变化。结果：应用18α－GA后BMSCs蛋白酶体活性较DMSO组增高约0．2倍（P＜0．01）。18α－GA组SA－β－Gal阳性衰老细胞较DMSO组减少，且细胞着色浅淡；衰老相关蛋白p53和p21表达水平分别较对照组降低（P＜0．05）。 CCK－8实验及流式细胞术结果显示18α－GA组细胞增殖能力较DMSO组增高，S期细胞显著增多（P＜0．05），18α－GA组BrdU染色阳性细胞率较DMSO对照组增高（P＜0．05）。18α－GA组细胞周期相关蛋白cyclin D1及CDK4表达水平分别较DMSO组增高（P＜0．05）。结论：18α－GA可激活晚期BMSCs蛋白酶体活性延缓细胞衰老，并且可能通过上调细胞周期相关蛋白表达水平促进晚期BMSCs增殖。
作者：杨佳超；赵云鹤；蒋蓉；陆利 刊期： 2015年第12期
目的：探讨黄岑苷对宫颈癌细胞株HeLa的放射增敏作用及机制。方法：MTT法检测不同浓度黄岑苷对HeLa细胞的活力抑制能力，并计算IC50筛选实验药物浓度；克隆形成实验检测放射组与联合组在不同照射剂量下细胞的放射增敏作用；流式细胞术检测单药组、放射组与联合组的细胞周期变化；Western blot检测不同组细胞中Akt、p－Akt、Bad和p－Bad的蛋白水平。结果：黄岑苷呈浓度依赖性抑制HeLa细胞的活力，IC50为43．65 mg／L，采用20％IC50浓度8 mg／L进行放射增敏实验。克隆形成实验结果显示8 mg／L黄岑苷联合放射治疗可使生存曲线左移，D0、Dq值显著小于放射组（P＜0．05）。流式细胞仪检测结果显示黄岑苷阻滞HeLa细胞于G2／M期。联合组细胞中p－Akt和p－Bad的蛋白水平均显著高于其它各组（ P＜0．05）。结论：黄岑苷对HeLa细胞具有放射增敏作用，其机制可能与其阻滞细胞于G2／M期和活化PI3K／Akt信号通路有关。
作者：惠双 刊期： 2015年第12期
目的：研究真核翻译延长因子1A2（eEF1A2）在原发性肝细胞癌（HCC）组织的表达，以及eEF1A2过表达对HCC细胞生物学行为的影响。方法：应用real－time PCR法和免疫组化法分别检测62例HCC癌组织与配对癌旁组织、20例正常肝脏组织eEF1A2的mRNA和蛋白表达，应用real－time PCR法与Western blot法分别检测几种HCC细胞株eEF1A2的mRNA与蛋白表达。构建GV287－eEF1A2表达慢病毒感染低表达eEF1A2的HCC细胞，应用real－time PCR法和Western blot法分别检测细胞eEF1A2的mRNA和蛋白表达；应用MTT法、DNA倍体法和real－time PCR法分别检测细胞活力、细胞周期和白蛋白mRNA的表达。结果：HCC癌组织eEF1A2的mRNA表达水平和蛋白表达阳性率明显高于配对癌旁组织与正常肝脏组织（P＜0．01）；eEF1A2的mRNA和蛋白在HCC细胞株SMMC－7721和BEL－7402高表达，在SK－HEP－1低表达。构建的GV287－eEF1A2表达慢病毒可感染SK－HEP－1细胞使eEF1A2过表达；与阴性对照组相比，GV287－eEF1A2组SK－HEP－1细胞的活力升高，白蛋白的mRNA表达水平降低，G0／G1期的细胞比例显著减少，而S期和G2／M期的细胞比例显著升高。结论： eEF1A2在HCC癌组织存在异位高表达；eEF1 A2可能是HCC的一种潜在癌蛋白，其过表达可增强HCC细胞的增殖能力，降低HCC细胞的分化程度，并促使细胞周期通过G0／G1期，进入S期和G2／M期。
作者：黄毅；邱福南；陈敦雁；伍严安；李峰；黄肖利；吴文冰 刊期： 2015年第12期
目的：本研究旨在检测金属络合物四硫代钼酸铵（ ATTM）的硫化氢（ H2 S）释放能力并进一步观察其减轻氧化应激诱导的皮肤细胞损伤的作用。方法：反应瓶法检测ATTM在细胞培养基中释放的H2 S，二氯二氢荧光素二乙酸酯或罗丹明123染色结合荧光显微镜照相术分别检测细胞内活性氧簇（ ROS）的含量和线粒体膜电位（ΔΨm），用试剂盒检测细胞存活率和乳酸脱氢酶（LDH）的释放。结果：与H2S供体GYY4137类似，ATTM在细胞培养基中可剂量依赖性地释放H2 S。在25～400μmol／L的浓度范围内，ATTM处理对人皮肤细胞（ HaCaT细胞）的存活率无明显影响（ P＞0．05）。紫外线照射或外源性给予ROS供体（过氧化氢，H2 O2）处理均可增加HaCaT细胞内ROS的含量。400μmol／L H2O2处理可明显降低HaCaT细胞的存活率（P＜0．01），而在H2O2处理前给予ATTM预处理，细胞存活率明显提高，其中在100和200μmol／L浓度时ATTM具有好的细胞保护作用（ P＜0．01）。400μmol／L H2 O2处理还可损害细胞的ΔΨm 和细胞膜并使LDH释放增加（ P＜0．01）。而在细胞遭受损伤前给予200μmol／L ATTM预处理可明显改善ΔΨm 的水平（P＜0．05）并抑制LDH从细胞内释放（P＜0．01）。结论：ATTM具有释放H2 S的能力并可保护人皮肤细胞对抗氧化应激诱导的损伤效应。
作者：孟富慧；陈利；徐适；鲜明；张辉；李建华；董颀；杨春涛 刊期： 2015年第12期
目的：探讨小鼠异基因造血干细胞移植（ allo－HSCT）后使用粒细胞集落刺激因子（ G－CSF）对急性移植物抗宿主病（ aGVHD ）的影响及其可能的机制。方法：以雄性C57 BL／6小鼠（ H－2 b ）为异基因供鼠，雄性BALB／c小鼠（H－2d）为同基因供鼠；以接受8 Gy[60Co]γ射线全身照射（TBI）预处理雌性BALB／c小鼠为受鼠，并随机分为7组：单纯TBI组、同基因骨髓＋脾细胞移植（Syn－BMST）组、异基因骨髓移植（allo－BMT）组、异基因骨髓＋脾细胞移植（ allo－BMST）组、Syn－BMST后G－CSF给药（ Syn－BMST＋G－CSF）组、allo－BMT后G－CSF给药（ allo－BMT＋G－CSF）组和allo－BMST后G－CSF给药（allo－BMST＋G－CSF）组，各G－CSF给药组从移植后第1天（＋1 d）开始皮下注射G－CSF 2μg／d，观察至＋60 d。比较各组生存时间、aGVHD发生情况和病理改变，流式细胞术检测骨髓H2－Kb＋细胞百分率（异基因嵌合率），比较allo－BMST和allo－BMST＋G－CSF组＋10 d时血清细胞因子（ IL－2、IL－4、IFN－γ和TNF－α）水平、脾总有核细胞数（ SpTNC）和脾细胞免疫表型的差异。结果：单纯TBI组小鼠于照射后9～15 d死于造血衰竭，其余各组＋10 d时均100％获得造血重建，随机抽取2只异基因骨髓移植受鼠，＋30 d供者细胞嵌合率分别为99．8％和99．4％，表明清髓性allo－HSCT模型建立成功。 Syn－BMST、Syn－BMST＋G－CSF、allo－BMT和allo－BMT＋G－CSF组小鼠观察至＋60 d均未发生aGVHD。与allo－BMST组相比，allo－BMST＋G－CSF组受鼠出现aGVHD时间早、程度重、病理改变严重、存活时间明显缩短（P＜0．05）、＋10 d SpTNC明显增加（P＜0．05）、脾脏NK细胞显著扩增（P＜0．01）、DC1／DC2比值减低（P＜0．05），而2组血清IL－2、IL－4、IFN－γ和TNF－α水平差异无统计学意义。结论：移植后使用G－CSF对小鼠异基因单纯骨髓移植后aGVHD无明显影响，但能显著加重allo－BMST后aGVHD的严重程度并缩短受鼠生存时间，该效应可能与G－CSF诱导供鼠NK细胞扩增有关，提示临床allo－HSCT后早期使用G－CSF可能触发或加重aGVHD的风险。
作者：王亮；朱康儿；张涛；陈洁 刊期： 2015年第12期
目的：探讨p21活化激酶4（PAK4）对非小细胞肺癌（NSCLC）侵袭和迁移能力的影响及相关机制。方法：PAK4－siRNA或阴性对照转染A549和NCI－H520细胞株，实时荧光定量PCR和Western blot 分别检测细胞PAK4 mRNA和蛋白表达水平，Transwell小室法检测其对细胞侵袭和迁移能力的影响；Western blot检测其LIMK1、cofilin及其磷酸化水平；免疫共沉淀检测PAK4和LIMK1蛋白是否直接绑定；体外激酶分析实验检测LIMK1是否是PAK4的激酶底物；Western blot检测10例非小细胞肺癌组织中PAK4和磷酸化LIMK1的相关性；PAK4－siRNA和LIMK1质粒共转染A549和NCI－H520细胞后观察细胞迁移和侵袭能力变化。结果：沉默PAK4后A549和NCI－H520细胞迁移和侵袭能力明显减弱（P＜0．05）；LIMK1和cofilin蛋白水平无显著变化，而磷酸化LIMK1和磷酸化cofilin水平显著下调；免疫共沉淀结果示PAK4与LIMK1相互绑定；激酶分析实验结果显示，激酶缺陷型PAK4（K350M）使LIMK1磷酸化的作用显著低于野生型PAK4或活化型PAK4（S445N）（P＜0．05）。 Western blot检测结果示非小细胞肺癌组织中PAK4表达上调的程度与磷酸化LIMK1含量呈正相关（P＜0．05）；PAK4－siRNA和LIMK1质粒共转染A549和NCI－H520细胞后，迁移和侵袭细胞数均高于PAK4－siRNA转染组（ P＜0．05）。结论： PAK4通过直接磷酸化LIMK1而促进非小细胞肺癌的迁移及侵袭能力。
作者：李冬霞；王永玲；蔡松旺 刊期： 2015年第12期
目的：运用蛋白质组学研究方法探讨吡那地尔后处理对缺血再灌注损伤大鼠心肌的保护作用。方法：建立Langendorff大鼠离体心脏缺血再灌注损伤模型，随机分为吡那地尔后处理组（ Pina组）和缺血再灌注损伤组（I／R组），每组9只。提取心肌线粒体蛋白质行双向凝胶电泳，应用质谱鉴定差异大于2倍的蛋白质点。结果：Pina组与I／R组比较，共发现7个差异蛋白质：Pina 组NADH 脱氢酶1α亚复合体10亚基（ NDUFA10）﹑NADH脱氢酶铁硫蛋白2（NDUFS2）和NADH脱氢酶黄素蛋白2（NDUFV2）表达低于I／R组；Pina组异柠檬酸脱氢酶α亚基（IDHA）和Δ3，5－Δ2，4－二烯酰辅酶A异构酶（ECH1）表达高于I／R组；另有2个蛋白质点均被鉴定为ATP合酶δ亚基，一个蛋白质点表达升高，而另一个表达降低。结论：吡那地尔后处理可能抑制了复合体Ⅰ的亚基（NDUFA10﹑NDUFS2和NDUFV2）代偿性增加，但促进了IDHA和ECH1表达并引发了ATP合酶δ亚基发生磷酸化，这些改变可能均与吡那地尔后处理保护心肌的作用有关。
作者：魏义勇；李科；刘云；刘兴奎；王海英；喻田 刊期： 2015年第12期
目的：研究RNA干扰（ RNAi）介导的胰岛素样生长因子1受体（ IGF1R）基因沉默对肝癌细胞生长、迁移与侵袭的影响。方法：设计并筛选抑制IGF1R mRNA表达效率高的siRNA序列，构建该序列的慢病毒表达载体，转染293T细胞进行病毒包装。将包装好的慢病毒感染Huh7和Hep3B肝癌细胞，筛选沉默IGF1R基因表达的稳定细胞株。将上述稳定细胞株扩大培养，检测细胞IGF1 R mRNA表达变化，细胞生长、迁移与侵袭能力变化，以及Ki－67、p－AKT、p－ERK1、Gli1、β－catenin、cyclin D1、p21、BCL－XL的蛋白表达水平变化。结果：与空白及阴性对照组比较，感染携带IGF1R干扰序列慢病毒的Huh7和Hep3B肝癌细胞IGF1R mRNA表达水平显著下调，细胞增殖活性明显降低，细胞凋亡显著增加，细胞迁移和侵袭能力明显受到抑制，细胞中IGF1R、Ki－67、p－AKT、p－ERK1、Gli1、β－catenin、cyclin D1、p21及BCL－XL蛋白表达水平均显著降低。结论：RNAi介导的IGF1R基因沉默可明显抑制Huh7和Hep3B肝癌细胞生长及恶性生物学特征，这可能与IGF1R表达水平显著下调而引起上述调控细胞增殖、抗凋亡基因以及相关信号通路基因的蛋白表达水平显著降低有关。
作者：别彩群；黄秋燕；颜英；石珩；汤绍辉 刊期： 2015年第12期
目的：利用慢病毒构建趋化素基因缺陷性小鼠血管平滑肌细胞株，观察沉默趋化素基因后血管平滑肌细胞的增殖情况并探讨其机制。方法：将正常血管平滑肌细胞、趋化素基因干扰对照血管平滑肌细胞株和趋化素基因缺陷性血管平滑肌细胞株分成正常组、增殖组、对照组和沉默组，增殖组加入血小板源性生长因子BB促进增殖，采用细胞计数和BrdU法检测血管平滑肌细胞增殖，采用Western blot检测丝裂原激活蛋白激酶（ MAPK）信号通路的蛋白水平。结果：增殖组血管平滑肌细胞的细胞数目和BrdU的A值显著高于正常组（ P＜0．05）；与正常组相比，沉默组的血管平滑肌细胞数目和BrdU的A值显著降低（ P＜0．05）；与此同时，对照组与正常组之间的血管平滑肌细胞增殖情况无明显差异。各组血管平滑肌细胞之间的p－ERK1／2、ERK1／2、p－p38 MAPK和p38 MAPK水平无明显变化，增殖组血管平滑肌细胞的p－JNK蛋白表达增加，而沉默组血管平滑肌细胞的p－JNK水平下降。结论：趋化素具有促进小鼠血管平滑肌细胞增殖的作用，该作用可能与p－JNK表达上调相关。
作者：熊玮；董少红；张键；李江华；廖碧红；庞新利；罗林杰 刊期： 2015年第12期
目的：探讨zeste同源物增强子2（ EZH2）蛋白的表达对胃癌细胞的影响以及可能的作用机制。方法：用real－time PCR 和Western blot实验检测正常胃黏膜上皮细胞和不同胃癌细胞系中EZH2的mRNA和蛋白表达；采用细胞生长、细胞迁移以及软琼脂增殖实验测定EZH2对胃癌细胞系致癌能力的影响；利用萤光素酶报告基因和real－time PCR检测EZH2对核因子κB靶基因的调节作用；用免疫共沉淀法检测EZH2和p65的相互作用。结果：与正常胃上皮细胞相比，胃癌细胞系中的EZH2过量表达（ P＜0．05）。 EZH2特异性抑制剂腺苷类似物DZNep处理或shEZH2抑制了AGS和SNU－16细胞系的细胞活力。此外，DZNep和shEZH2抑制了AGS细胞迁移及软琼脂细胞形成的克隆数目（P＜0．05）。 shEZH2下调了核因子κB报告基因或白细胞介素8报告基因的活性以及核因子κB靶基因白细胞介素8、趋化因子配体5及趋化因子配体20的表达（P＜0．05）。此外，EZH2可以特异性与p65蛋白相互作用。结论：EZH2通过调节核因子κB靶基因介导胃癌细胞的生长。
作者：吴雪雷；蔡耀武；庄志忠；陈园静；郭仁杰；郑茂松 刊期： 2015年第12期
目的：研究小白菊内酯（PN）对球囊损伤（balloon injury，BI）后新生内膜的影响及机制。方法：将30只雄性新西兰兔2．0～2．3 kg在高脂适应性喂养1周后随机分为6组：假手术＋生理盐水（ sham＋NS）组；假手术＋二甲基亚砜（ sham＋DMSO）组；球囊损伤＋生理盐水（ BI＋NS）组；球囊损伤＋DMSO（ BI＋DMSO）组；球囊损伤＋PN低剂量（ BI＋PN low）组；球囊损伤＋PN高剂量（ BI＋PN high）组。 PN溶解于DMSO，术后立即按分组腹腔注射同体积药物治疗，每日1次。继续高脂喂养4周后取血清及髂总动脉，分析比较血管内－中膜厚度、半胱氨酰天冬氨酸蛋白酶（caspase）－1、白细胞介素（IL）－1β和IL－8的表达量以及血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）的含量。结果： BI＋DMSO组较sham＋DMSO组内膜厚度、caspase－1、IL－1β和IL－8的表达量增加（P＜0．05）；与BI＋DMSO组比较，上述指标在PN高、低剂量组有不同程度降低，但仅PN高剂量组与其差异有统计学意义（ P＜0．05）；各组血脂指标差异不明显。结论： PN能抑制球囊损伤后的内膜增殖，其机制可能与抗炎作用有关。
作者：毛霞；高丽华；邓昌明 刊期： 2015年第12期
目的：观察肺炎支原体（ Mycoplasma pneunoniae，Mp）促进NLRP3炎性体的活化及下游促炎性细胞因子白细胞介素－1β（ IL－1β）的表达是否与活性氧簇（ ROS）有关。方法：预先用5 mmol／L ROS清除剂N－乙酰半胱氨酸（ NAC）预处理RAW264．7细胞30 min，用10 MOI Mp分别感染RAW264．7细胞4、8、16和24 h。流式细胞术检测细胞内ROS水平；real－time PCR法检测细胞NLRP3、ASC和caspase－1 mRNA的表达；Western blot 法检测NL－RP3、ASC和caspase－1 p20的蛋白水平；ELISA法检测细胞上清液IL－1β的分泌水平。结果：与正常组比较，感染后4、8、16和24 h模型组ROS生成显著增加（ P＜0．01）；感染后8、16和24 h模型组NLRP3、ASC和caspase－1 mRNA的表达显著增加（P＜0．01），感染后16和24 h NLRP3、ASC和caspase－1 p20的蛋白水平上调（P＜0．01），感染后24 h 细胞上清液IL－1β含量显著增加（P＜0．01）；与模型组比较，NAC组在上述相应时点ROS生成降低，NLRP3、ASC和caspase－1 mRNA的表达下调，蛋白水平下降，细胞上清液IL－1β的含量减少。结论： Mp可能通过刺激RAW264．7细胞生成ROS而激活NLRP3炎性体。
作者：张涵；马晶；张云凌；张树明；许庆瑞；王伟明 刊期： 2015年第12期
目的：观察血清型A肉毒杆菌神经毒素重链（ botulinum neurotoxin serotype A heavy chain ，BoNT／A HC）对Neuro－2a细胞的促神经突起再生作用并探讨与其相关的细胞内信号机制。方法：采用体外细胞培养技术，在培养液中加入不同浓度的BoNT／A HC（0．01 nmol／L、0．1 nmol／L、1 nmol／L和10 nmol／L）进行干预，于24 h、48 h和72 h时收集细胞进行免疫荧光染色，再计算细胞突起长度及有突起细胞的百分比；在此基础上，选择有效的BoNT／A HC浓度作为处理剂量加入细胞培养液，于BoNT／A HC作用后不同时点收集全细胞蛋白，采用Western blot检测p－ERK1／2及p－Akt的蛋白水平。结果：当BoNT／A HC浓度为0．1 nmol／L、1 nmol／L和10 nmol／L时，细胞突起的长度及有突起细胞的百分比与对照组相比皆明显增加，差异显著（ P＜0．05），其中1 nmol／L效果显著。在细胞培养液内加入1 nmol／L BoNT／A HC 后，p－ERK1／2的蛋白水平呈增加趋势，其中BoNT／A HC作用60 min后，p－ERK1／2的增加与对照组相比差异显著（P＜0．05）；与p－ERK1／2变化趋势类似，细胞培养液内加入1 nmol／L的BoNT／A HC后， p－Akt的蛋白水平也呈增加趋势，其中BoNT／A HC作用15 min和60 min 时，p－Akt增加显著（P＜0．05）。结论：一定剂量的BoNT／A HC可以促进神经细胞突起再生和生长； BoNT／A HC对Neuro－2a细胞的促神经突起再生作用机制可能通过激活与神经再生相关的信号蛋白ERK1／2和Akt的磷酸化而实现。
作者：高美玲；王红；张彩云；兰婧；李夏青 刊期： 2015年第12期
目的：观察在体外培养条件下，使用成骨诱导培养液或不同浓度钙离子诱导人肾间质成纤维细胞发生成骨分化的效果，初步探讨肾脏Randall斑形成可能的细胞机制。方法：体外培养人肾间质成纤维细胞，实验分为5组：成骨诱导组（加成骨诱导液）、CaⅠ组（加0．5 mmol／L Ca2＋液）、CaⅡ组（加1．5 mmol／L Ca2＋液）、Ca Ⅲ组（加2．5 mmol／L Ca2＋液）和对照组（加PBS）。各组细胞分别培养至第1、3、6、9天时，采用MTT法检测细胞活力；诱导至第9天时，用细胞钙茜素红染色液和钙钴法磷酸酶染色液对各组细胞进行染色，观察钙结节形成和碱性磷酸酶的表达情况。另外，分别采用real－time PCR和Western blot 检测各组细胞不同时间点Runt 相关转录因子2（ Runx2）的mRNA和蛋白表达水平。结果：在1．5 mmol／L和2．5 mmol／L Ca2＋浓度条件下细胞的活力明显受抑制。细胞染色结果证实成骨诱导液组和钙离子组均可以见到典型的红色钙结节和黑色块状的硫化钴沉淀物。成骨诱导组细胞Runx2的mRNA和蛋白相对表达量（0～9 d）逐渐升高（ P＜0．05）；诱导至第9天时，3个钙离子组细胞Runx2的mRNA和蛋白表达呈浓度依赖性升高（ P＜0．05）。结论：在体外培养环境下，人肾成纤维细胞可以在成骨诱导培养液的刺激作用下发生成骨分化；另外，在高钙离子环境，人肾成纤维细胞也发生了类似的成骨分化。肾乳头组织中的成纤维细胞在高钙离子等因素的作用下发生成骨分化，这可能是肾脏Randall斑形成的细胞学基础。
作者：严一杰；黎承杨；邓耀良；曾国华；陶芝伟；刘云龙；孙春；王扬 刊期： 2015年第12期
目的：研究白花丹醌（ plumbagin ）对转化生长因子β1（ TGF－β1）刺激的体外培养人肝星状细胞（HSC－LX2）NADPH氧化酶4（Nox4）的mRNA和蛋白表达、活性氧簇（ROS）水平及α－平滑肌肌动蛋白（α－SMA）蛋白表达的影响。方法：体外培养HSC－LX2，随机设立空白组、TGF－β1刺激的模型组、TGF－β1＋plumbagin （2μmol／L、1．5μmol／L及1μmol／L）组；细胞与各药物共同孵育72 h后，采用RT－PCR检测细胞Nox4 mRNA的表达；原位装载探针法测定细胞内ROS的水平；Western blot检测细胞内Nox4和α－SMA的蛋白含量。结果：与模型组比较，白花丹醌作用72 h后，2μmol／L和1．5μmol／L plumbagin能明显降低HSC－LX2细胞Nox4 mRNA和蛋白的表达（ P＜0．01），下调ROS水平，降低α－SMA的蛋白表达（P＜0．01）。结论：Plumbagin可能是通过下调Nox4的表达进而降低ROS生成从而发挥其抑制HSC－LX2细胞活化的作用。
作者：杨成芳；李丽；李勇文；钟毓娟；熊美丽；方舒萍 刊期： 2015年第12期
目的：观察处于性成熟期和去卵巢ICR小鼠的动情周期特点。方法：ICR雌性小鼠分为正常对照组、假手术组和去卵巢组，术后第8天开始，连续12 d，每日9：00和16：00分别做2次阴道涂片，记录并观察各组小鼠外阴和阴道涂片细胞特征，规律动情周期发生率，动情周期天数和动情周期各期持续时间。结果：正常对照组与假手术组动情周期特点表现相似，85％处于性成熟期的ICR小鼠呈规律动情周期，多数为6 d周期（83％），少数为5 d动情周期（17％）；与5 d相比，6 d的动情期持续时间明显增加（P＜0．05）。5 d和6 d动情周期阴道涂片细胞特征在数量和种类略有所不同。去卵巢组小鼠约76％呈动情周期紊乱，表现为连续动情间期。结论： ICR雌性小鼠具有自身品系的动情周期特点。
作者：杜纳纳；许丹丹；黄莉莉 刊期： 2015年第12期
目的：探讨褐藻糖胶对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞血管生成的影响及可能的作用机制。方法：体外培养多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞及人血管内皮细胞EA．hy 926细胞，采用MTT法检测褐藻糖胶对RPMI 8226细胞活力的影响；流式细胞术检测细胞周期及凋亡率；ELISA法检测褐藻糖胶处理RPMI 8226细胞后的培养液上清中VEGF的含量；小管形成实验观察褐藻糖胶处理RPMI 8226细胞后的培养液上清对EA．hy 926细胞诱导小管形成能力的影响；Western blot检测HIF－1α、VEGF、p－AKT和p－ERK1／2的蛋白水平。结果：褐藻糖胶对RPMI 8226细胞活力的抑制作用呈浓度及时间依赖性；褐藻糖胶作用RPMI 8226细胞72 h后，细胞周期被阻滞于G1期，细胞凋亡率呈浓度依赖性明显增高，各组均高于对照组（ P＜0．05）；ELISA法结果显示褐藻糖胶处理72 h后的细胞培养液上清中VEGF的含量明显减少，与对照组相比，处理组上清中VEGF的含量下降（ P＜0．05）；内皮细胞形成小管数目与面积随着褐藻糖胶的浓度升高而减小，100 mg／L组差异显著（ P＜0．05）；Western blot结果显示HIF－1α、VEGF、p－AKT和p－ERK1／2的蛋白水平与褐藻糖胶浓度呈负相关（P＜0．05）。结论：褐藻糖胶减少骨髓瘤细胞自分泌VEGF，减弱血管内皮细胞形成小管的能力，降低 HIF－1α和VEGF 的蛋白水平，这可能与抑制 AKT 和ERK1／2的磷酸化有关。
作者：刘芬；肖青；汤为学；吕敬龙 刊期： 2015年第12期
目的：采用定量磁共振（ MR）灌注成像测定直肠癌的各灌注参数，以探究MR灌注成像在评价肿瘤局部微血管灌注量及渗透性方面的应用价值。方法：回顾性分析行直肠动态对比增强磁共振（ DCE－MRI）扫描的直肠癌患者38例。计算肿瘤和正常肠壁感兴趣区（ROI）灌注参数[对比剂容积转换常数（Ktrans）、血浆与血管外细胞外间隙（EES）间的速率常数（Kep）、单位体积组织的EES 容量（Ve）及初始强化曲线下面积（iAUC）]的平均值，并对肿瘤与正常肠壁、黏液腺癌与非黏液腺癌、不同分化程度及是否伴淋巴结转移的患者各灌注参数值进行比较分析。结果：直肠癌的各灌注参数均较正常肠壁高，差异具有统计学意义（P＜0．01）。直肠黏液腺癌较非黏液腺癌的Ktrans值低（P＜0．05）。不同分化程度、伴有或不伴有淋巴结转移直肠癌患者的Ktrans、Kep及Ve 差异无统计学意义，伴有淋巴结转移的直肠癌iAUC较不伴者低。结论：定量MR灌注成像验证了直肠癌较正常肠壁局部微血管灌注及渗透性的改变，并可用于鉴别黏液腺癌与非黏液腺癌的组织学分型，具有一定的诊断应用价值。但是仅根据肿瘤的灌注值来判断肿瘤的分化程度及淋巴结转移尚不可靠。
作者：肖晓娟；卢宝兰；杨心悦；王影；刘旭斌；翟凤仪；余深平 刊期： 2015年第12期
目的：观察蛇床子素对磷酸三钙（ tricalcium phosphate ，TCP）颗粒诱导小鼠颅骨溶解的影响。方法：采用TCP颗粒诱导小鼠颅骨溶解模型，于术后第2天颅顶局部注射蛇床子素（osthole）20 mg／kg，每周3次，持续干预2周。干预结束后处死动物取材，应用HE染色和抗酒石酸酸性磷酸酶（ tartrate resistant acid phosphatase ， TRACP）染色观察假体周围破骨细胞生成和骨溶解程度；ELISA法检测血清和骨组织中骨转换标志物骨钙素（ os－teocalcin）水平、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）和TRACP活性以及骨膜中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor－α，TNF－α）、白细胞介素6（ interleukin－6，IL－6）和白细胞介素1β（ interleukin－1β，IL－1β）水平。 Western blot法检测颅骨组织葡萄糖调节蛋白78（glucose－regulated protein 78，GRP78）和CAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（CAAT／enhancer binding protein homologous protein ，CHOP）的表达变化。结果：蛇床子素可明显抑制TCP颗粒诱导的破骨细胞生成，减少骨溶解面积，显著增加ALP和osteoclacin水平，降低TRAP活性并阻断炎症因子TNF－α、IL－6和IL－1β释放。此外，蛇床子素干预能明显减弱TCP颗粒激活的内质网应激反应。结论：蛇床子素可抑制TCP颗粒诱导的小鼠颅骨溶解，其机制可能与抑制TCP颗粒诱导的内质网应激反应有关。
作者：王青；张云；毛红娇；王金萍；贾如如；金丽芳；戴智睿 刊期： 2015年第12期
目的：探讨JAK2抑制剂AG490对人红白血病（ HEL）细胞迁移及对VEGF和HIF－1α表达的影响。方法：用不同浓度的AG490处理HEL细胞，CCK－8法检测细胞活力，Hoechst 33342荧光染色检测细胞凋亡，流式细胞术检测细胞凋亡及周期，Transwell小室检测细胞迁移能力，RT－PCR检测JAK2的mRNA水平，Western blot 检测p－JAK2、VEGF和HIF－1α的蛋白水平。结果： AG490能够抑制HEL细胞的活力，不同浓度（20、40、60、80和100μmol／L） AG490作用HEL细胞48 h后，细胞活力分别为88％、75％、48％、10％和0．12％（ P＜0．05）；Hoechst 33342凋亡细胞染色显示80μmol／L AG490处理细胞48 h后，亮蓝色凋亡细胞较对照组明显增多（ P＜0．05）；流式结果显示80μmol／L AG490作用细胞48 h后，凋亡率上升；细胞迁移实验结果显示20μmol／L AG490处理细胞24 h后漏出细胞明显低于对照组（ P＜0．05）；RT－PCR结果显示不同浓度AG490处理HEL细胞48 h后JAK2 mRNA呈剂量依赖性减低；Western blot结果显示实验组细胞的p－JAK2、VEGF和HIF－1α蛋白水平较对照组明显减低（ P＜0．05）。结论：AG490可通过抑制JAK2信号通路，抑制HEL细胞血管新生因子VEGF和HIF－1α的表达。
作者：徐倩；赵亚玲；付建珠；谷蕾；刘贵敏；梁文同；成志勇 刊期： 2015年第12期
中国病理生理杂志
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主办：中国病理生理学会
