刘春；周泽梅；郑文搏；计蕾；张健儒；彭献代
目的了解肾动脉狭窄(RAS)所致恶性高血压(MHT)的发病情况、临床特点和预后.方法回顾性分析北京大学第一医院23年间所有经肾动脉造影证实为RAS的病例,将其中合并MHT的23例列为研究对象,收集其临床及实验室资料,并与同时期收治的46例肾实质性MHT以及23例原发性MHT患者进行比较.结果 23例RAS合并MHT患者占同期MHT患者的25.8%、RAS患者的19.5%,其中动脉粥样硬化性肾动脉狭窄(ARAS)在1990年前仅占20.0%,而1990年后已成为首位病因.RAS合并MHT组有别于其他两组的特点包括双侧肾脏大小不一致(52.2%)、血管杂音(17.4%)以及应用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)后Scr升高超过30%(8.7%).此外RAS合并MHT组较肾实质性MHT者尿蛋白量低[(1.6±1.5)g/d比(4.0±3.1)g/d],血尿也少见.血压控制满意后RAS合并MHT组尿蛋白转为阴性或降至1.0 g/d以下,而肾实质性MHT组尿蛋白无显著下降.RAS合并MHT组行血管重建治疗的11例患者中6例高血压得到完全控制(54.5%).在3～12个月的随访中RAS合并MHT组中有2例进入维持性透析治疗(均为入院时即存在肾功能不全的患者),少于其他原因引起的MHT患者.结论RAS是继发性MHT常见的病因.对于尿液中有形成分不多、蛋白尿定量＜3.5 g/d的MHT患者应积极进行RAS的相关筛检.在不同病因导致的MHT中,RAS组肾脏预后相对较好,但应强调在出现肾功能不全前要及时确诊并治疗.
作者：张路霞；王梅；王海燕 刊期： 2004年第05期
近年来肾结石发病率呈增高趋势,亚洲正常成年人为1%～5%,较欧洲(5%～9%)和北美洲(加拿大12%,美国13%)相对低,多见于30～60岁,男女之比为2～3:1.原发性结石起因不明,继发性结石常与代谢异常、内分泌紊乱、泌尿系统畸形等有关,结石与感染常互为因果.肾结石一向多被认为属于外科疾患,但排石疗法、超声碎石甚至手术取石并没有彻底解决结石的发生.随着人们对结石发病机制的不断认识,结石的预防及病因治疗已愈来愈受到重视.
作者：陈楠 刊期： 2004年第05期
糖尿病肾病(DN)致肾功能衰竭是糖尿病(DM)患者重要死因之一.洛沙坦(Los)或苯那普利(Ben)单独使用降低肾性蛋白尿报道较多,但两者联合治疗(Com)降低合并高血压的DN尿蛋白的情况,报道较少.我们观察了Los和Ben单独和联合治疗合并高血压的DN 59例,现将其对蛋白尿的作用报道如下.
作者：窦连军；吴岩；吴庆强 刊期： 2004年第05期
目的研究高糖作用下人近端肾小管上皮细胞(HKC)和系膜细胞(HMC)中血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶1(SGK1)的表达,并初步探讨SGK1在介导高糖致肾细胞(HKC和HMC)过度合成细胞外基质(ECM)中的作用.方法将HKC和HMC细胞分别分为正常对照组(NG组,5.5mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(HG组,25 mmol/L D-葡萄糖)和渗透浓度对照组(MG组,19.5mmol/L甘露醇和5.5 mmol/L D-葡萄糖).SGK1 mRNA水平及蛋白水平的检测分别采用RT-PCR方法和Western印迹方法.培养液中纤连蛋白(FN)水平检测采用ELISA方法.结果 HKC和HMC中均存在SGK1基因和蛋白的表达.HMC中SGK1的表达明显高于HKC(P＜0.01).高糖刺激8 h后,两种细胞SGK1表达均明显升高(P＜0.01);同时,甘露醇也上调HKC和HMC SGK1的表达(P＜0.01),但其作用明显弱于高糖(P＜0.05).FN在高糖环境下表达上调,且高峰出现时间滞后于SGK1.结论高糖能促进近端肾小管上皮细胞和系膜细胞SGK1的表达,并可能通过SGK1介导的信号转导途径在糖尿病肾病ECM积聚中发挥重要作用.
作者：张晓丽；王全胜；王玉梅；朱忠华；邓安国；冯玉锡 刊期： 2004年第05期
特发性膜性肾病(idiopathic membranousnephropathy,IMN)是成人肾病综合征的常见病因,其病理特点是肾小球上皮细胞下免疫复合物沉积导致毛细血管基底膜弥漫性增厚,大多数患者出现肾性蛋白尿,部分为无症状性蛋白尿,血尿少见.由于本病进展缓慢,存在肾功能逐渐恶化和自发缓解两种倾向,且药物治疗时间长、敏感度不一、副作用多,因此临床治疗方案存在较大争议.现就近几年国内外对IMN的治疗和转归问题作一简要评价.
作者：梅长林 刊期： 2004年第05期
目的研究足细胞分子podocin、nephrin和α-actinin之间的相互作用和联系.方法将针对podocin分子设计的特异RNA干扰(RNAi)质粒导入体外培养的小鼠足细胞系(MPC5);应用免疫荧光染色及双标记在共聚焦显微镜下观察nephrin、podocin和α-actinin的分布方式;半定量RT-PCR和免疫蛋白印迹检测podocin、nephrin,α-actinin-4及内参照GAPDH/β-actin在mRNA水平和蛋白水平的表达量.结果(1)干扰组podocin的荧光强度显著低于对照组,其mRNA和蛋白的表达量分别下降了65%和89%.免疫双标记显示podocin的分布发生了明显变化:对照组podocin不但分布在胞核的周围,而且在胞浆呈放射性沿着细胞骨架分布,以及主要在胞膜上呈连续性的线状分布;干扰组podocin呈点状分布在胞核周围.(2)干扰组nephrin的荧光强度亦明显减低,其mRNA及蛋白的表达量分别减少了70%和78%.免疫双标记显示nephrin的分布也发生了显著变化:干扰组nephrin亦呈点状分布在胞核周围;在对照组,nephrin和podocin的分布方式相同.(3)干扰组和对照组α-actinin的分布及在mRNA和蛋白水平上的表达量无明显差异,呈细丝状均匀分布于胞质内,亦呈放射性分布于足细胞伸出的突起中.结论通过RNAi成功地使MPC5的podocin表达下调.Podocin和nephrin分子关系紧密,可能存在着直接的分子间反应;podocin与α-actinin无直接的作用和联系.
作者：范青锋；丁洁；张敬京；管娜；邓江红 刊期： 2004年第05期
目的研究游离脂肪酸(FFAs)对人类近曲肾小管上皮细胞株(HK-2)表型转化的作用.方法应用流式细胞技术和免疫组织化学方法检测不同剂量的FFAs在不同时间点上对HK-2细胞形态学及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.结果 FFAs呈剂量和时间依赖性促进HK-2细胞表达α-SMA;在高浓度的FFAs作用下,HK-2细胞呈梭形成纤维细胞样改变.结论在FFAs作用下,体外培养的正常人近曲肾小管上皮细胞发生上皮向间叶的表型转化.
作者：莫湛宇；冯明亮；刘华锋；陈孝文；唐德燊；梁东；李晓东 刊期： 2004年第05期
目的验证脂氧素A4(LXA4)是否诱导肾间质成纤维细胞凋亡,并探讨其作用机制是否与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caapase)第2个线粒体激活因子(Smac)表达上调有关.方法将大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)培养于含5%胎牛血清的培养液中,用较高浓度的LXA4刺激后,应用吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色观察细胞凋亡形态,应用碘化丙锭/Annexin双染色及流式细胞仪计数凋亡的细胞,应用对硝基苯胺法测定caspase-3酶活性.应用Western印迹方法测定Smac表达,对NRK-49F细胞用脂质体转染Smac反义寡核苷酸,再观察LXA4处理后Smac表达、细胞凋亡的改变.结果 LXA4在100 nmol/L、1 μmol/L的高浓度时,分别引起9.83%、33.82%的NRK-49F细胞发生凋亡、caspase-3活性升高、Smac表达上调.应用Smac反义寡核苷酸处理细胞后,可抑制LXA4所致的Smac表达与细胞凋亡.结论较高浓度的LXA4能够引起大鼠肾间质成纤维细胞发生凋亡,其机制与上调Smac表达有关.
作者：吴升华；陆超；董玲；姜新猷 刊期： 2004年第05期
糖尿病肾病(DN)肾内单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达上调,单核/巨噬细胞浸润等炎症机制越来越受到重视[1].本研究探讨霉酚酸酯(MMF)对糖尿病(DM)肾组织MCP-1、ED-1、ICAM-1表达的影响,旨在为DN的抗炎治疗提供实验依据.
作者：钱浩；吴永贵；林辉；赵珉；周典；郝丽；张伯科 刊期： 2004年第05期
目的通过共培养观察被马兜铃酸钠盐(AA-Na)活化后的肾小管上皮细胞株(HK-2)对肾间质成纤维细胞(hRIFs)的作用.方法用AA-Na刺激HK-2,16 h后用此活化的HK-2与hRIFs共培养(培养液中加或不加抗TGF-β1抗体),48 h后检测hPIFs细胞层中Ⅰ型胶原(ColⅠ)含量.结果 (1)AA-Na(20μg/ml)对HK-2无刺激增殖、转分化及细胞毒作用.(2)用此浓度AA-Na刺激HK-216 h,能使HK-2分泌TGF-β1显著增加(P＜0.05).(3)用此活化后的HK-2与hRIFs共培养48h,能使后者合成Col I显著增多(P＜0.05);而抗TGF-β1抗体(1.0或2.0μg/ml)能部分抑制此反应(P＜0.05).结论被AA-Na刺激活化的HK-2能分泌TGF-β1促进hRIFs合成ColⅠ.
作者：方静；谌贻璞；张媺 刊期： 2004年第05期
目的观察腺相关病毒(rAAV)介导的Smad 6和Smad 7基因治疗对单侧输尿管梗阻性(UUO)肾小管间质纤维化进程的影响.方法构建产生表达Smad 6和Smad 7基因的无辅毒腺相关病毒载体,再将此病毒颗粒通过肾动脉途径转移到UUO模型.30只Wistar大鼠随机分为假手术组、梗阻组、LacZ AAV转染组、Smad 6 AAV转染组和Smad 7 AAV转染组(n=6),于术后第3周处死大鼠.采用β-半乳糖苷酶染色和免疫组化观察外源基因的定位,Western印迹法观察外源基因、胞内磷酸化Smad 2、PAI-1和α-SMA的表达;底物酶谱法检测MMP-2和MMP-9活性,分光光度法测定肾组织羟脯氨酸含量.结果Smad 6和Smad 7成功地转染到外髓的肾小管间质区,定位在肾小管和集合管细胞,而血管细胞、肾小球或间质细胞均未见有AAV转移基因的表达.Smad 7基因治疗可显著降低肾组织PAI-1、α-SMA的表达和肾组织羟脯氨酸含量,增加MMP-2和MMP-9活性,这些作用与Smad 7阻断Smad 2磷酸化有关.相反,Smad 6没有这样的治疗作用.结论Smad 7基因转移能有效缓解单侧输尿管梗阻肾小管间质纤维化,AAV介导的Smad 7基因转移有望成为治疗肾小管间质纤维化的方法之一.
作者：黄云剑；赵景宏；张憬；范晓棠；张金海；蔡文琴 刊期： 2004年第05期
肾脏硬化及其伴随的肾脏功能丧失依然是当今肾脏病研究领域的挑战性课题之一.近年研究认为肾脏固有细胞在肾脏病变过程中表现活跃,作用复杂.深刻认识肾脏固有细胞在生理、病理条件下的改变,将有助于深化对肾脏疾病发生机制及防治的理解.我们主要对各种肾脏固有细胞在生理、病理条件下的可塑性及其在肾脏重塑中的作用进行综述.
作者：刘必成；张建东 刊期： 2004年第05期
狼疮肾炎(LN)是免疫复合物介导的肾小球肾炎.肾脏是系统性红斑狼疮中易受累的器官之一,LN也是系统性红斑狼疮的主要致死原因之一.狼疮肾炎的肾活检病理检查不但要解决病理诊断问题,还要明确其病变的活动程度、慢性化指标及病理学类型,以便病理学家之间、病理学家和临床学家之间、临床学家之间取得共识,进而为临床治疗服务,为判断预后提供依据,并在病因发病机制方面有所发现.数十年来,为了上述目的,狼疮肾炎的病理学分类几经修订,由粗糙到细致,逐渐作到了病理和临床密切结合.
作者：邹万忠；王海燕 刊期： 2004年第05期
探讨超声引导下假腔内注射凝血酶对肱动脉假性动脉瘤的治疗效果.资料与方法自2000年1月至2004年3月,3例尿毒症患者,穿刺透析后出现假性血管瘤,压迫观察24～48 h无效后再采用假腔内注射凝血酶.男性1例,女性2例,年龄31～48岁.
作者：朱虎章；董丽洁；丁明；毕素栋；孙杰 刊期： 2004年第05期
肾上腺髓质素(adrenomedullin, AM)是一种血管扩张肽,在肾间质纤维化中可以通过自分泌和旁分泌的方式起调节作用[1].肾上腺髓质素基因敲除(AMKO)的杂合子小鼠,血清和器官中的AM含量为野生型的一半[2].通过本实验,我们研究内源性AM对肾间质纤维化的作用.
作者：邢广群；赵秀珍；刘丽秋；高延霞；下泽达雄；藤田敏郎 刊期： 2004年第05期
目的观察骨成形蛋白7(BMP-7)对TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响,以探讨其延缓小管间质纤维化病变的作用及其可能机制.方法将体外培养的人肾小管上皮细胞分为空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1+50 ng/ml BMP-7组、TGF-β1+100 ng/ml BMP-7组.应用MTT比色法测定BMP-7对人肾小管上皮细胞增殖的作用;间接免疫荧光法测定人肾小管上皮细胞α-SMA、角蛋白、波形蛋白的表达;流式细胞仪检测表达α-SMA阳性的HK-2细胞百分率;RT-PCR检测细胞中α-SMA mRNA的表达.结果与空白对照组相比,不同浓度的BMP-7处理HK-2细胞24、48 h后,HK-2细胞均明显增殖(P＜0.05).免疫荧光检测结果显示,经TGF-β1刺激后,角蛋白表达减弱,α-SMA和波形蛋白表达增强;加入50 ng/ml BMP-7处理24、48 h后,细胞中α-SMA和波形蛋白表达减弱.流式细胞仪检测发现,加入50 ng/ml BMP-7处理24、48 h后,表达α-SMA的HK-2细胞阳性率逐渐下降,与TGF-β1处理组相比差异有显著性意义(P＜0.05).RT-PCR结果显示,空白对照组无α-SMA mRNA表达,5 ng/ml TGF-β1组与空白对照组相比,α-SMA mRNA表达明显上调(P＜0.05),而TGF-β1+50 ng/ml BMP-7组、TGF-β1+100 ng/ml BMP-7组与TGF-β1组相比,α-SMAmRNA表达有下降趋势,但无显著性差异(P＞0.05).结论 TGF-β1促进肾小管上皮细胞转分化是肾间质纤维化的重要发病机制之一.而上述TGF-β1的促进作用可以被BMP-7所阻断,从而为防治肾间质纤维化提供了新的理论依据和防治手段.
作者：陈楠；李娅；刘峰；严富洪 刊期： 2004年第05期
目的探讨高糖和胰岛素对肾小球系膜细胞(GMC)葡萄糖转运蛋白4(GluT4)mRNA表达及细胞骨架纤维状肌动蛋白(F-actin)的影响,进一步研究糖尿病肾病发生发展中GluT4及其下游分子F-actin的重要作用.方法将培养的鼠1097系膜细胞分为8组:正常对照组,生理浓度胰岛素组(10-9mol/L),低浓度胰岛素组(10-8mol/L),高浓度胰岛素组(10-6mol/L),高糖组(30 mmol/L),甘露醇组,高糖加高浓度胰岛素组,高糖加生理浓度胰岛素组.采用RT-PCR法检测GluT4mRNA含量,rhodamine-phalloidin染色,激光共聚焦显微镜观察F-actln形态并测定荧光强度.结果(1)正常系膜细胞可检测到GluT4 mRNA.(2)高糖组GluT4 mRNA表达为对照组的58.7%(P＜0.05);10-8mol/L胰岛素组、10-6mol/L胰岛素组分别为对照组的230.2%和297.2%(P＜0.01);高糖加10-6mol/L胰岛素组,高糖加10-9mol/L胰岛素组分别为高糖组的170.6%和140.3%(P＜0.05).(3)高糖组F-actin荧光强度为对照组的44.5%;10-8mmol/L胰岛素组、10-6mol/L胰岛素组分别为对照组的122.4%(P＜0.05)和129.6%(P＜0.01);高糖加10-6mol/L胰岛素组为高糖组的183.8%(P＜0.05).(4)GluT4 mRNA表达与F-actin荧光强度呈正相关(r=0.786,P＜0.05).结论(1)正常系膜细胞有GluT4 mRNA表达.(2)高糖可抑制GluT4 mRNA表达及促进F-actin解聚.(3)胰岛素有一定拮抗作用,且呈剂量依赖性.(4)GluT4 mRNA表达与F-actin荧光强度呈正相关.(5)GluT4、F-actin是糖尿病肾病发生发展过程中的重要因子.
作者：唐万欣；黄颂敏；柳飞；沙朝晖 刊期： 2004年第05期
目的探讨人类转化生长因子β诱导基因-克隆3(TGF-β-induced gene-human,clone3,βig-h3)在糖尿病大鼠肾组织中的表达意义,以及血管紧张素受体拮抗剂洛沙坦losartan和中药黄芪对糖尿病大鼠肾组织βig-h3表达的影响.方法采用链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠模型.将SD大鼠随机分成5组,每组6只:正常对照组(N组)、糖尿病组(D组)、losartan治疗组(DL组)、黄芪治疗组(DA组)和losartan黄芪联合治疗组(DLA组).治疗8周后取肾组织,观察肾脏病理改变;半定量RT-PCR法检测各组肾组织中βig-h3和TGF-β1 mRNA的表达;免疫组化方法检测各组肾组织中βig-h3和TGF-β1蛋白质的表达水平.结果处理8周后,与N组相比,D组肾小球系膜增生、基质大量堆积,部分肾小球出现硬化;各治疗组系膜增生均有减轻.D组肾组织βig-h3、TGF-β1 mRNA和蛋白表达均明显升高(与C组比较,P＜0.05);各治疗组上述指标均有不同程度的下降(与D组相比,P＜0.05).βig-h3的表达与TGF-β1呈正相关(r=0.81,P＜0.05).结论βig-h3在糖尿病肾病发生发展过程中可能起重要作用;losartan和黄芪可能部分通过下调肾组织βig-h3mRNA和蛋白的表达对糖尿病肾病发挥抗纤维化作用.
作者：杨蓉；倪兆慧；钱家麒；张庆怡；牟珊；戴慧莉；姚莒华；赵涵芳 刊期： 2004年第05期
目的研究转化生长因子(TGF)-β1对大鼠系膜细胞纤维蛋白溶酶(纤溶酶)系统的影响,并探讨反应性氧基(ROS)的作用.方法以体外培养的大鼠系膜细胞为对象,采用TGF-β1刺激12 h,部分实验中培养的细胞在刺激前应用DL-buthionine-(S,R)-sulfoximine(BSO)预处理24 h,或应用抗氧化剂N-acetylcysteine(NAC)预处理1 h.应用荧光素法测定细胞ROS含量.系膜细胞tPA、uPA和PAI-1 mRNA的表达采用RT-PCR测定.PAI-1蛋白表达应用ELISA检测.应用合成的荧光素酶底物及荧光扫描法分别测定纤溶酶、uPA、tPA活性.结果 TGF-β1可显著增加细胞ROS含量.2 ng/ml TGF-β1可显著上调PAI-1 mRNA和蛋白的表达,分别为1.9倍(P＜0.01)和1.5倍(P＜0.05).tPA mRNA的表达不受影响但uPA mRNA的表达较对照组下调52%(P＜0.01).TGF-β1可抑制纤溶酶和uPA活性,分别为30%(P＜0.01)和23%(P＜0.05),但对tPA的活性无显著影响.在βSO预处理组,TGF-β1对uPA、PAI-1 mRNA表达和蛋白释放的影响得到显著增强;而NAC预处理可明显逆转由TGF-β1诱导的uPA、PAI-1 mRNA表达的上调和蛋白表达增加以及活性的改变.结论TGF-β1可促使细胞ROS产生增加.ROS介导了由TGF-β1诱导的系膜细胞PAI-1 mRNA和蛋白表达的上调以及uPA mRNA表达的下调和uPA、纤溶酶活性的下降.TGF-β1对系膜细胞纤溶酶活性的抑制主要通过抑制uPA表达和活性而实现.
作者：姜宗培；余学清；陈雄辉；杨念生 刊期： 2004年第05期
重组人红细胞生成素(rHuEPO)主要的副作用是诱发和(或)加重高血压,其机制尚未充分阐明.研究显示,内皮素(ET)可能起重要作用[1,2].本实验拟用rHuEPO纠正5/6肾切除大鼠模型的贫血,并观察用内皮素受体拮抗剂波生坦(bosentan)干预后其血压的变化和探讨相关机制.
作者：邢国兰；刘章锁；王明臣 刊期： 2004年第05期
中华肾脏病杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
