糖尿病肾病患者外周血单个核细胞中基质金属蛋白酶的表达

二羰基化合物激活人血管内皮细胞核因子κB

目的观察二羰基化合物对人血管内皮细胞(VEC)核因子(NF)κB的激活作用,以探讨该类物质病理生物学作用的机制.方法从人脐静脉分离VEC并与不同浓度的二羰基化合物共同培养.以氧化敏感的荧光染料2,7-二氢二氯荧光素(DCFH)染色,用流式细胞仪测定细胞内氧化水平;用间接免疫荧光法观察NF-κDp65在细胞内的分布,判断NF-κB的活化.结果二羰基化合物能够导致细胞内氧化水平升高,并激活人VECNF-κB;抗氧化剂(N-乙酰半胱氨酸和丙丁酚)以及羰基化合物清除剂(氨基胍)能够抑制二羰基化合物导致的细胞氧化应激,同时抑制NF-κB的活化.结论二羰基化合物通过诱导细胞氧化应激,激活人VECNF-κB,这一作用可能参与了慢性肾功能衰竭和糖尿病时血管病变的发生.

作者：梁敏；侯凡凡；张训 刊期： 2000年第06期

胰岛素样生长因子1对慢性肾功能衰竭大鼠骨骼肌蛋白质代谢的影响

目的探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)在慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠骨骼肌蛋白质代谢上的作用.方法用放射免疫分析法测定CRF大鼠和配对喂养的假手术(SO)对照大鼠血清及骨骼肌中IGF-1含量;计算骨骼肌蛋白质的基础合成率及分解率;评估重组人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1)对骨骼肌蛋白质合成与分解的影响.结果(1)CRF组血清和骨骼肌中IGF-1含量明显低于SO组;(2)CRF组骨骼肌基础蛋白合成率显著低于SO组,基础蛋白分解率显著高于SO组;(3)rhIGF-1对CRF大鼠骨骼肌蛋白质合成的促进作用仅为SO大鼠的25%～44%,对其分解的抑制作用仅为SO大鼠的15%～42%.结论CRF时,血清及骨骼肌的IGF-1含量的减少和骨骼肌对IGF-1促进蛋白质合成代谢作用的抵抗可能是白质合成减少、分解增强,导致营养不良、肌肉萎缩的主要原因.

作者：高秀林；Ding Hu；Joel D. Kopple 刊期： 2000年第06期

基因打靶技术及其在生物医学中的应用

一、基因打靶的概念利用细胞染色体DNA可与外源性DNA同源序列发生同源重组的性质,以定向修饰改造染色体上某一基因的技术叫基因打靶(gene targeting).它是80年代后半期发展起来的一门按预期方式精细改造生物遗传信息的实验手段.基因打靶常用的一种策略是通过同源重组使特定靶基因失活,以研究该基因的功能,称基因敲除(gene knock-out);也可通过同源重组用一种基因替换另一种基因,以便在体内测定它们是否具有相同的功能,或将正常基因引入基因组中置换突变基因以达到靶向基因治疗的目的,该技术叫基因敲入(gene knock-in),本文中,我们主要介绍基因敲除技术.

作者：白雪源；陈香美 刊期： 2000年第06期

血液透析患者的社会人口学特征与心理紧张来源关系

据不同血液透析(血透)患者的心理紧张来源的差异,采取相应的护理措施,可以降低患者的心理压力,提高其生存质量.为此,我们调查了我院慢性血透患者109例,探讨本地区血透患者的主要心理紧张来源以及影响因素.

作者：黄伟枚；叶晓青；林芳宇；侯秋秀；刘永文；黄峭 刊期： 2000年第06期

血清胰岛素样生长因子1与肾病大鼠生长障碍的关系

目的探讨营养不良、肾病本身和糖皮质激素作为各自独立因素对大鼠血清胰岛素样生长因子1(IGF-1)浓度的影响,阐明血清IGF-1代谢紊乱与肾病综合征(NS)大鼠生长障碍的关系.方法24只周龄相同体重相近的雄性SD大鼠被随机分成正常对照、食物对照、阿霉素肾病和地塞米松治疗的阿霉素肾病4组.血清IGF-1浓度和肝脏ICF-1Mrna表达分别采用放射免疫(RIA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测.结果1.食物对照和肾病组大鼠较正常组血清IGP-1明显减低,肝脏IGF-1Mrna表达明显增高,但两组间差异显著性学意义.2.激素治疗组大鼠较肾病组血清IGF-1及肝脏IGF-1Mrna表达均显著下降.3.血清IGF-1浓度与大鼠鼻-尾长度和体重均呈正相关(P<0.01).结论肾病综合征生长障碍归因于继发性营养不良所致的血清IGF-1浓度减低,糖皮质激素治疗则通过进一步减低血清IGF-1浓度使生长障碍加剧.

作者：易著文；刘建华 刊期： 2000年第06期

中西医结合治疗小儿难治性肾病

1996年以来,我们将小儿难治性肾病分别予以中西医结合治疗和西药治疗,并对比观察,现报告如下.

作者：朱晓萍 刊期： 2000年第06期

葡萄糖转运蛋白1基因转染对系膜细胞功能的影响

目的通过建立葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的基因转染系统,观察GLUT1的过度表达对系膜细胞功能的影响.方法利用逆转录病毒载体建立CLUT1基因转染的大鼠系膜细胞(MCGT1),以β-半乳糖苷酶转染细胞(MCLacZ)为对照.用2-脱氧-3H-萄萄糖(2-DG)测定细胞葡萄糖摄入,流式细胞仪分析细胞表型,3H-脯氨酸掺入和流式细胞仪分别检测细胞胶原和纤维连接蛋白(FN)的合成,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞胶原Ⅳ、FN的表达.结果MCGT1的2-DG摄入率明显高于MCLacZ[(741.0±60.5)dpm·μgprot-1比(92.2±9.0)dpm·μgprot-1,P<0.01].动力学分析发现MCGT1的Vmax是MCLacZ的3.7倍,而两者Km值无明显差别.在相同的葡萄糖浓度下,MCGT1的乳酸生成增多,表现出细胞体积增大、RNA/DNA和蛋白质/DNA比值增高等细胞肥大表型.与对照相比,MCGT1的胶原和FN合成与表达明显增加.结论GLUT1的过度表达使系膜细胞具有糖尿病肾病(DN)的细胞表型.GLUT1的功能状态直接影响系膜细胞的糖代谢及功能变化.

作者：李颖健；刘志红；刘栋；朱加明；郭啸华；黎磊石 刊期： 2000年第06期

慢性肾功能衰竭患者消化道运动功能研究

慢性肾功能衰竭(CRF)患者多有消化道症状,包括恶心、呕吐、上腹胀、腹泻、便秘等,这些临床症状与消化道动力密切相关.我们对CRF患者进行胃窦-幽门-十二指肠运动功能研究,探讨CRF出现消化道症状的病理生理机制.

作者：张金黎；赵石；罗惠民；陈艳敏；唐晓丹；范红；刘华 刊期： 2000年第06期

谷胱甘肽与促红细胞生成素治疗慢性肾功能衰竭贫血

慢性肾功能衰竭(CRF)患者体内存在低水平还原型谷胱甘肽(GSH),高水平氧化型谷胱甘肽(GSSH)和高浓度自由基,提示CRF贫血可能与GSH以及相关的酶有关.因此,我们以外源性GSH配合促红细胞生成素(r-HuEPO)治疗CRF患者,证实其对CRF贫血的疗效.

作者：夏妮娅；屈燧林 刊期： 2000年第06期

中华肾脏病杂志2000年第16卷主题词索引

作者： 刊期： 2000年第06期

白细胞介素13基因在人肾组织的表达及其意义

目的探讨白细胞介素13(IL-13)基因在原发性非IgA系膜增生性肾炎(MsPGN)、原发性局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)和狼疮肾炎(LN)患者肾组织的表达及其意义.方法采用原位杂交技术(ISH)检测34例上述3种肾脏病患者及4例对照组肾组织中IL-13mRNA表达量的变化,分析IL-13基因表达量与肾功能变化的关系.结果IL-13mRNA在FSGS、MsPGN和LN患者肾组织内表达均增高,而对照者肾组织内无明显IL-13mRNA表达.LN患者肾小管间质区IL-13mBNA表达水平与狼疮活动相关,MsPGN及FSGS患者肾小管间质区IL-13mRNA表达量与肾功能变化及24h尿蛋白量相关.结论IL-13可能直接参与人类肾小球疾病的免疫反应过程.

作者：张肇；江黎明；叶锋；王建勋；吴平；黄萍萍；陈孝文 刊期： 2000年第06期

聚合酶链反应为基础的差异表达基因分析技术及其在肾脏疾病研究中的应用

随着人类基因组计划的完成,探讨基因的功能及其在人类疾病中的作用是未来基因研究工作的重点.其中,基因表达的差异分析对阐明各种疾病的分子基础具有重要意义.自90年代以来,以聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)为基础的差异表达基因分析技术,即:差异显示逆转录PCR(differential display reverse transcription-PCR,DDRT-PCR)、cDNA代表性差异分析(representational diffcrence analysis of cDNA,cDNA-RDA)和抑制性差减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)等在肾脏疾病研究领域中被广泛应用并已经成功地分离和克隆了一些与肾脏疾病相关的基因.结合自己的研究工作,我们主要介绍这3种技术的基本原理、主要操作方法、各自的优、缺点以及它们在肾脏疾病研究中的应用.

作者：张宏 刊期： 2000年第06期

原发性IgA肾病与HLA-DQA1、-DQB1等位基因相关性研究

原发性IgA肾病(IgAN)的发病率及临床表现在世界各地存在较大的地域性差异,从1978年起人们相继对IgAN患者的HLA多态性进行了研究,试图从免疫遗传学角度来探讨该病的病因学及其所显示的发病率、临床表现等方面的地域性与种族性差异.

作者：谢宗法；范丽安；陈光明；陈楠；杨珏琴；姚芳娟 刊期： 2000年第06期

增殖性肾小球肾炎中白细胞介素8的表达及作用

以炎症为主的肾炎,早期均伴有明显的系膜增殖,中性粒细胞(PMN)大量渗出,继之以系膜细胞(MC)及内皮细胞增殖,不可避免地导致肾小球疤痕形成和肾小球疾病的慢性化,而白细胞介素8(IL-8)正是在炎症的启动和维持中发挥重要作用.我们观察重组人类白细胞介素8(rhIL-8)在有或无PMN参与两种条件下,对培养的MC的增殖和分泌纤维连接蛋白(PN)的影响,以期探讨IL-8及其介导的炎症对系膜增殖的作用及机制.

作者：朱妙珍；申海鹰；薛超 刊期： 2000年第06期

改良静-静脉血液滤过抢救产时心功能不全疗效分析

产时心功能不全是妊娠的高危因素,是产科领域中的一种严重并发症,对孕产妇及胎儿构成严重威胁.我院应用改良静静脉血液滤过抢救产时心功能不全患者3例,取得显著疗效,现报道如下.

作者：黎培石；钟汉；李汉桐 刊期： 2000年第06期

腹膜透析在骨髓移植并发急性肾功能衰竭时的临床应用

实体瘤自体骨髓移植(ABMT)是目前治疗某些恶性肿瘤的新方法,疗效颇佳.但由于大剂量化疗药物的应用,因急性肾小管坏死(ATN)致急性肾功能衰竭(ARF)的发生率增高.我们成功应用O型管道装置行腹膜透析(腹透)治疗ABMT并发ARF 2例,浅谈临床体会如下.

作者：梁萌；许树根；吴晓安；洪节约 刊期： 2000年第06期

透析膜和内毒素对尿毒症患者外周血单个核细胞白细胞介素1受体拮抗物产生的协同作用

血液透析(血透)过程中患者血液与异己材料接触后导致血液中白细胞的激活,其产生的前炎症性细胞因子和透析患者的急、慢性并发症密切相关.有研究显示,白介素-1受体拮抗物(IL-1Ra)在反映机体炎症反应方面较为敏感[1].因此,我们采用细胞培养和原位杂交等技术观察不同条件下正常人和尿毒症患者外周血单个核细胞(PBMC)IL-1Ra的mRNA转录和蛋白质合成情况,以了解透析膜和内毒素在PBMC激活中的作用,为将来超净水透析的临床应用提供理论依据.

作者：丁峰；顾勇；薛骏；郑秀娟；秦慧莲；赵涵芳；林善锬 刊期： 2000年第06期

人纤溶酶原激活物抑制物1转基因小鼠的建立

目的建立人纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)转基因小鼠.方法利用构建的高效真核表达载体pCAGGS-PAI-1,制备注射用DNA.以显微注射法将目的DNA注入小鼠受精卵,再将受精卵移植到受体母鼠,制备转基因小鼠.经鼠尾组织DNA提取、PCR筛选、Southern杂交、DNA序列测定对转基因小鼠进行鉴定.结果对获得的29只小鼠经PCR筛选、Southern杂交分析、DNA序列测定,得到了2只整合了人PAI-1cDNA的转基因小鼠.在刚出生的转基因小鼠尾部及后肢发现出血性改变,免疫组织化学观察到在,肾脏局部PAI-1表达稍有增高.结论本研究中,我们建立了人PAI-1基因转基因小鼠,为进一步研究PAI-1在肾脏疾病中调控细胞外基质降解的机制提供了动物模型,为研究利用抗凝、促纤溶疗法治疗慢性肾炎奠定了基础.

作者：刘述文；陈香美；叶一舟 刊期： 2000年第06期

小儿紫癜性肾炎145例临床分析及36例随访结果

为了解紫癜性肾炎(APN)临床特点和长期预后,将其145例及随访16例作以临床分析.

作者：任少敏；李国华；郭妍妍；锡林高娃；高忠献 刊期： 2000年第06期

淋巴细胞特异蛋白质酪氨酸激酶/P38信号传递途径在小鼠肾小管上皮细胞的作用

目的探讨小鼠肾小管上皮细胞是否存在淋巴细胞特异蛋白质酪氨酸激酶(lck)基因表达及lck/p38细胞分裂原活化蛋白信号传递分子经IL-12、IL-2、脂多糖(LPS)等刺激时在肾小管上皮细胞的变化.方法无菌分离培养BALB/C小鼠肾小管上皮细胞,采用地高辛标记的lck寡核苷酸探针原位杂交检测肾小管上皮细胞中lck基因表达;应用放射自显影方法观察lck活性变化,利用免疫印迹分析lck蛋白表达及p38磷酸化.结果IL-12、IL-2、LPS刺激肾小管上皮细胞活化,lckmRNA表达较对照组明显增强;经上述物质刺激后lck活性、p38磷酸化分别于5min、15mln强,其中LPS刺激显著而lck、p38蛋白水平则无明显变化.加入lck抑制剂PP1,IL-12刺激时未发现p38磷酸化,而IL-2、LPS刺激只有轻度抑制.结论IL-12、IL-2、LPS促进肾小管上皮细胞中lck基因表达,并只有IL-12唯一通过lck诱导p38磷酸化,它们皆可通过lck/p38信号传递途径参与对肾小管上皮细胞发挥生物学作用.

作者：李清刚；李幼姬；郑勋华；李志坚；黄凌虹 刊期： 2000年第06期