王珊；夏耿红；何彦；廖硕希；尹恝；盛华芳；周宏伟
目的：探讨高糖环境下MiR-200b对人视网膜血管内皮细胞（hRECs）的作用机制。方法在高糖或正常环境培养hRECs，实时荧光定量PCR检测MiR-200b表达。MiR-200b转染hRECs，并且用MTT法检测高糖环境下MiR-200b对hRECs增殖的影响。结果与正常对照组比较，高糖组VEGF和TGF-β1的mRNA和蛋白表达明显增加（P<0.05）。转染MiR-200b后，hRECs中MiR-200b表达升高，而VEGF和TGF-β1 mRNA和蛋白的表达显著降低。与高糖组相比，转染MiR-200b后hRECs增殖受到明显抑制（P<0.05）。结论 MiR-200b可能通过改变VEGF和TGF-β1的表达，调节REC细胞生长和增殖，从而参与糖尿病视网膜病变发生、发展。
作者：蒋群；朱小华；刘新民；刘建明 刊期： 2016年第04期
目的：根据CDC42蛋白二级结构，设计CDC42 siRNA干扰片段，构建CDC42稳定干扰shRNA载体。观察CDC42有效沉默对结直肠癌SW480细胞形态的影响。方法根据CDC42基因CDS区序列，设计4条siRNA片段。Western blot筛选有效沉默片段，酶切插入真核表达载体，将构建的shRNA质粒载体，瞬时转染结直肠癌SW480细胞，QPCR及Western blot验证CDC42沉默效率；观察转染前后，SW480细胞形态变化。结果4条siRNA转染细胞后，验证结果显示siRNA-3沉默效率大于50%，沉默效果好，将此片段插入真核表达载体，测序结果提示CDC42 shRNA构建成功，转染SW480细胞后，CDC42基因mRNA及蛋白水平表达明显下降，差异有统计学意义；显微镜观察CDC42沉默后，SW480细胞周边伪足伸出减少，细胞变光滑，细胞整体体积明显减小。结论成功根据基因序列设计有效沉默片段，构建CDC42稳定沉默载体，证实CDC42沉默可以逆向改变结直肠癌细胞高侵袭性形态，为研究CDC42对结直肠癌的发生、发展提供分子工具。
作者：贺莉；马文霞；张庆玲 刊期： 2016年第04期
目的：构建表达荧光素酶与绿色荧光蛋白报告基因的重组人5型腺病毒rAd5/Luc/GFP，检测血清中和抗体佳实验方法，分析小型灵长类动物普通棉耳狨猴体内腺病毒5型中和抗体水平，为评价腺病毒载体疫苗提供实验动物基础数据。方法利用ADMax包装系统，首先构建穿梭质粒pDC315-Luc-GFP，将所得的穿梭质粒和骨架质粒pBHGloxΔE1，3Cre共转染293A细胞，进行重组人5型腺病毒（rAd5/Luc/GFP）的包装。通过3次空斑形成实验筛选出单克隆重组腺病毒，并在大量扩增单克隆腺病毒后用CsCl密度梯度离心法进行浓缩纯化。采用TCID50法测定纯化后病毒滴度，并挑选进行中和实验的优病毒滴度。将合适病毒滴度的rAd5/Luc/GFP与狨猴血清混合预孵育后感染293A细胞，分别采用化学发光法及流式细胞术，对14只普通棉耳狨猴血清中腺病毒5型中和抗体进行检测。结果 PCR、酶切和测序结果均表明穿梭质粒pDC315-Luc-GFP构建成功；GFP检测结果证明重组人5型腺病毒rAd5/Luc/GFP包装扩增成功，病毒滴度可达6.9×101.5 PFU/mL。两种不同方法检测检测14只狨猴的中和抗体结果一致性较好（P<0.05，Kappa=0.811），化学发光法或流式细胞术检测阳性狨猴比率分别为28.6%（4/14）或21.4%（3/14），化学发光法检测得其中2只狨猴中和抗体滴度为1/16，另2只为1/32，而流式细胞术检测得滴度均为1/16。结论化学发光法是一种快速，准确，适用于多物种的方法，其灵敏度略高于以GFP为报告基因的流式细胞术（7.2%）。普通棉耳狨猴体内Ad5血清阳性率较低，有望应用基于此型或其他型别腺病毒作为载体进行基因治疗和基因疫苗研究。
作者：孙亚纯；李婷婷；王一琳；张玲；朱海；黎诚耀 刊期： 2016年第04期
目的：评价他汀类药物治疗对非透析的慢性肾脏病患者肾脏病进展的影响。方法通过对电子数据库（时间截止2015年2月）的检索，筛选符合纳入标准的随机对照试验，采用随机效应模型合并相关肾脏病进展指标。结果共纳入28个研究，共包括45688例慢性肾脏病患者。Meta分析结果显示，与对照组相比，非透析的慢性肾脏病患者接受他汀类药物治疗不能减少终末期肾病的发生（RR=0.98，95%CI：0.91-1.05），也不能降低肌酐翻倍风险（RR 1.43，95%CI 0.26 to 7.79），但是可以降低肾小球滤过率下降≥25%的风险（RR=0.91，95%CI：0.83=0.99以及延缓肾小球滤过率下降（SMD=0.04，95%CI：0.02-0.07）。亚组分析显示，在中度慢性肾脏病患者中，他汀类药物治疗对治疗前后肾小球滤过率变化这一指标有疗效（SMD=0.09，95%CI：0.04=0.13）。阿托伐他汀（SMD=0.10，95%CI：0.03-0.17）及高强度降脂治疗（SMD=0.12，95%CI：0.02-0.21）对治疗前后肾小球滤过率变化这一指标有效。结论尽管他汀类药物对降低终末期肾病发及肌酐翻倍的发生率无明显效果，但可以延缓肾小球滤过率下降，其疗效与肾脏病分期、药物种类及降脂强度有关。
作者：刘宗瑞；赵豪；陈艳荣；唐冬冬；牛红心 刊期： 2016年第04期
目的：探讨5次“起-坐”试验（5STS）在我国老年慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者临床评价中的应用价值。方法入选符合入选标准的COPD患者51例及健康对照20例，收集其一般资料，并完成5STS试验、肺通气功能检查、6 min步行试验（6MWT），及呼吸困难评分（mMRC）、BODE指数评分等。结果所有入选者均能完成5STS试验，两组所行3次5STS时间均具有良好的可重复性（P<0.001），但COPD患者5STS时间12.93±3.11 s较健康对照组10.72±0.71 s明显延长（P=0.002）。无论COPD患者还是健康对照5STS时间与6MWT结果均具有显著负相关（P<0.05），其相关系数分别为-0.611、-0.682；另外，COPD患者5STS时间与第1秒用力呼气容积占预计值百分比（FEV1%预）、体质量指数（BMI）显著负相关，与mMRC、BODE指数显著正相关，P<0.05。结论5STS试验简便易行、可重复性好，与现有的多数COPD评价指标具有良好的相关性，可有效反映老年COPD患者的活动耐力及疾病严重程度，值得在临床工作中推广应用。
作者：吕燕华；朱顺芳；曾小莉；陈燕君；刘丹；牟菁菁；刘来昱；邹飞 刊期： 2016年第04期
目的：比较吴茱萸碱分子包合物与吴茱萸碱在大鼠体内药代动力学行为和特征。方法制备吴茱萸碱分子包合物，以吴茱萸碱为对照，检测二者在水中的溶解度及体外累计释放百分率；大鼠尾静脉给予吴茱萸碱包合物以及游离吴茱萸碱后，HPLC法测定血浆中吴茱萸碱的浓度。用DAS 2.1.1软件计算药动学参数及生物利用度。结果吴茱萸碱包合物在水中的溶解度约为18μg/mL、累计释放百分率约为80%，与游离吴茱萸碱相比都有很大的提高。吴茱萸碱包合物和游离吴茱萸碱在大鼠体内的Cmax分别为252.5±12.43μg/L和161.3±3.45μg/L；Tmax分别为4.00 h和4.07 h；MRT0-∞分别为8.46±0.91 h和4.43±0.74 h；AUC0-t分别为2266.40±28.64μg·L-1·h-1和911.92±8.53μg·L-1·h-1；AUC0-∞分别为2359.76±31.58μg·L-1·h-1和919.16±9.73μg·L-1·h-1；吴茱萸碱包合物相对生物利用度256.73%。结论吴茱萸碱包合物明显改善了药物的药代动力学行为，提高了药物的生物利用度。
作者：张雪；刘宏明；雷婷婷；冯娇；张景勍 刊期： 2016年第04期
目的：利用雷帕霉素靶向抑制mTOR并探讨其对大鼠心瓣膜间质细胞增殖的影响。方法体外分离大鼠瓣膜间质细胞后培养并鉴定；细胞随机分为两组：雷帕霉素组与对照组；MTT法检测并绘制大鼠瓣膜间质细胞用药前后的生长曲线；流式细胞仪检测雷帕霉素对细胞周期的影响；RT-PCR检测细胞中S6、P70S6K的mRNA表达水平；Western blotting检测细胞中S6、P70S6K、P-S6、P-P70S6K蛋白的表达水平。结果体外分离获得的大鼠瓣膜间质细胞分离培养成功；对照组细胞活性显著高于加药组细胞（P<0.05），加药组细胞生长变缓。流式细胞术检测发现加药组和对照组细胞的各周期占比均没有明显差别；加药组细胞的S6蛋白与P70S6K蛋白的磷酸化水平降低（P<0.05）。结论雷帕霉素能抑制瓣膜间质细胞的增殖其原因，可能不是通过改变细胞周期而是通过抑制mTOR后下调其靶蛋白S6和P70S6K的磷酸化水平引起的。
作者：谭焱；王继业；易仁亮；邱健 刊期： 2016年第04期
目的：探究活体牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）侵入人牙周膜细胞（HPDLCs）后，对细胞增殖性能及成骨向分化作用的影响。方法将P. gingivalis与HPDLCs以感染复数（MOI）为10、100共培养90 min、8、24 h后，利用细胞侵袭实验比较不同时间及MOI值下，P. gingivalis对HPDLCs的侵袭效能。用CFDA-SE（Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester, C29H19NO11）标记HPDLCs，加入P. gingivalis后共培养8、24、48、72 h，流式细胞仪检测细胞增殖性能的变化。将SYTO9标记的P. gingivalis与HPDLCs共培养24 h后，流式细胞荧光分选技术（Fluorescence activated Cell Sorting, FACS）分选出被感染细胞，利用实时荧光定量PCR对Runx2基因进行检测，并且对分选出的细胞进行矿化诱导，分别于7、14、21 d，进行茜素红染色检测HPDLCs矿化结节形成。结果 P. gingivalis与HPDLCs共培养90 min后，即可进入细胞内，共培养24 h后，侵袭效能达到大值。被P. gingivalis感染后，细胞的Runx2基因表达明显下调，且其矿化结节的形成明显低于对照组。结论侵袭进入HPDLCs内的活体P. gingivalis，未对细胞的增殖产生明显的影响，但可以明显抑制细胞的成骨分化作用，这可能是通过下调Runx2的表达来实现的。
作者：谭咏梅；侯晋；杨小军；梁悦娥；张琰；赵望泓 刊期： 2016年第04期
目的：了解中国社区人群氧化三甲胺（TMAO）分布水平，分析TMAO与心脑血管风险因素的相关性及探讨TMAO与肠道菌群关系。方法研究对象为颈动脉彩超检查无动脉硬化斑块的体检人群，共纳入181例，男96人，年龄30~73岁。采集血清标本，运用稳定同位素内标液质联用法检测TMAO。采集粪便标本，通过Illumina高通量测序检测16S rRNA基因V4可变区，进行肠道菌群检测。采用SPSS分析TMAO与心脑血管疾病相关风险因素相关性，运用QIIME及LEfSe分析肠道菌群，找出与TMAO相关的菌属。结果健康人群中TMAO中值为2.66（1.96~4.91）μmol/L，呈偏态分布。TMAO不同水平组间传统心脑血管疾病风险因子没有差异，也没有特征性肠道菌群结构。通过统计发现TMAO与BMI及肠道菌群中的梭菌目（Clostridiales）下属的厌氧孢杆菌属（Anaerosporobacter）、梭菌属（Clostridiales）、考拉杆菌属（Phascolarctobacterium）、颤杆菌克属（Oscillibacter）及拟杆菌目（Bacteroidales）下属的Alistipes有相关性。结论中国人群TMAO水平普遍较低，TMAO水平与传统心脑血管疾病风险因子没有显著相关性，不同TMAO水平组间肠道菌群组成没有差异，个别菌属与TMAO水平有相关关系。
作者：王珊；夏耿红；何彦；廖硕希；尹恝；盛华芳；周宏伟 刊期： 2016年第04期
目的：分析钼靶（MG）、计算机断层扫描（CT）与动态增强磁共振成像（DCE-MRI）对乳腺癌患者腋窝淋巴结有无转移的诊断价值。方法回顾性分析2014年2月~2015年10月在我院就诊的乳腺癌的女性患者109例，以淋巴结病理检查结果为金标准，比较和分析MG、CT及DCE-MRI诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移(LNM)的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值以及阴性预测值。结果纳入的乳腺癌患者中，39.4%（43/109）的患者病理确诊LNM。MG诊断LNM的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值以及阴性预测值分别为：14.0%、84.8%、56.9%、37.5%和60.0%。CT诊断腋窝LNM的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值以及阴性预测值分别为：93.0%、57.6%、71.6%、58.8%和92.7%。DCE-MRI诊断腋窝LNM的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值以及阴性预测值分别为：95.3%、65.2%、77.1%、64.1%和95.6%。与病理结果相比较，MG、CT、DCE-MRI的κ值分别为-0.13、0.459、0.558。MG的特异度高于CT和DCE-MRI，但灵敏度、准确度、阳性预测值、阴性预测值均明显低于CT及DCE-MRI，差异具有统计学意义。DCE-MRI与CT相比，前者的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值均高于后者，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论对于乳腺癌腋窝LN有无转移，DCE-MRI的诊断效能明显优于CT和MG，而CT明显优于MG。DCE-MRI和CT均可以提供相对较准确的LNM相关情况，在这方面的临床应用价值较高。MG常不能为临床提供可靠的信息，利用MG判断LNM时必须谨慎，并结合其他检查。
作者：吴佩琪；刘春玲；刘再毅；叶维韬；梁长虹 刊期： 2016年第04期
目的：探讨广东人群亚健康状态与健康促进生活方式的相关性。方法对2012~2013年进行了24159人（12~80岁）的大样本、多中心的横断面调查；生活方式的评估使用《健康促进生活方式量表》，健康状况的判定主要结合被调查者的体检报告及《亚健康评定量表》。结果在24159名调查对象中，亚健康（46.0%）及疾病（35.2%）人群所占的比例远高于健康者（18.8%）；回归分析发现健康促进生活方式对健康状态有显著影响（P<0.001），不良的生活方式是亚健康和疾病的危险因素，且其对亚健康状态的影响比对疾病的影响更大；在校正一般人口学资料的模型中，相对于优秀的促进健康生活方式（小暴露者），差的生活方式（高暴露者）发生亚健康的危险性高达43倍（OR：42.825，95%CI：30.567~59.997），一般的生活方式（较高暴露者）发生亚健康的危险性高达21倍（OR：21.072，95%CI：17.258~25.729），次优的生活方式发生亚健康的危险性为4倍（OR：4.085，95%CI：3.352~4.979）。且在一般人群中，压力管理差、自我实现差、运动锻炼少、人际关系差是亚健康状态的主要危险因素。结论亚健康状态与不良生活方式密切相关；对可改变的生活方式危险因素的组合进行干预，是健康促进的有效方法；将慢性管理的窗口前移，加强对亚健康状态“窗口”的健康管理至关重要。
作者：陈洁瑜；杨乐斌；蒋平平；孙晓敏；余克强；李斐；吴升伟；姬彦兆；赵晓山；罗仁 刊期： 2016年第04期
目的：通过妊娠期邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）的暴露，在体观察DEHP暴露对小鼠胎盘生长发育、母胎界面uNK细胞数及血管形成的影响。方法从妊娠第1天起，通过体外强制性灌胃方法，给予不同剂量的DEHP 125、250、500 mg · kg-1· d-1，于妊娠第13天取子宫、胎盘标本及称重，通过HE染色和免疫组织化学方法，观察其对小鼠胎盘生长发育、母胎界面uNK细胞数和血管形成的影响。结果（1）与对照组相比，低剂量DEHP125、250 mg·kg-1·d-1对胚胎着床数没有明显影响（P>0.05）。然而，高剂量组500 mg · kg-1· d-1 DEHP可显著性降低胚胎着床数（P<0.05）。此外，DEHP暴露可导致胎儿流产率明显上升；（2）与对照组相比（0.0786±0.0143 g），DEHP呈剂量125、250、500 mg·kg-1·d-1依赖性降低胎盘的重量（分别为：0.0637±0.0133、0.0587±0.0176、0.0524±0.0183 g；P<0.01），且明显降低胎盘的总面积和海绵层滋养层细胞的面积；（3）与对照组相比，DEHP暴露将导致胎儿血管分支数显著性降低，血管塌陷及闭锁；（4）与对照组相比（105.1±14.2/HP），DEHP暴露呈剂量依赖性抑制uNK细胞数（分别为：83.2±10.3、60.7±12.4、50.4±14.5/HP；P<0.01）。结论妊娠期DEHP暴露可显著性抑制胎盘的生长发育，其可能是通过影响母胎界面的血管形成及uNK细胞数。
作者：张璐；张腾令；宗滕；陈艺璐；任敏；俞晓春；况海斌 刊期： 2016年第04期
目的：研究S期细胞热损伤后DNA双链断裂形成规律，以阐明S期细胞热敏感原因，并分析DNA双链断裂延迟性形成的可能机制。方法流式细胞术分析热损伤后细胞周期阻滞；EdU掺入实验检测DNA复制能力；血清饥饿法同步H1299细胞周期；中性彗星实验动态观察热损伤后DNA双链断裂形成；台盼蓝拒染实验研究热损伤后细胞存活率；蛋白免疫印记实验检测ATM磷酸化及DNA结合RAD18情况。结果流式结果显示H1299细胞经45℃热损伤1 h后S期细胞较未加热组明显增多（P<0.01）；热损伤后EdU阳性率随时间变化趋势同S期比例变化；S期细胞热损伤后需经37℃正常孵育一定时间方可观察到“彗星拖尾”现象，且随着正常孵育时间延长，反映DNA双链断裂的尾力矩值越大；台盼蓝拒染实验显示S期细胞受热后7.5 h内死亡率保持较低水平，之后细胞死亡加速；热损伤后ATM磷酸化先增多后减少，热损伤导致DNA结合RAD18明显减少。结论细胞热损伤后可发生S期阻滞，阻滞期间因复制继续、DNA损伤修复抑制而延迟形成的致死性DNA双链断裂是S期细胞热敏感的可能原因。
作者：孙婷；丁为民；李凌；张彦 刊期： 2016年第04期
目的：探讨基于血压变异性的评分系统（BPVSS）与高血压患者靶器官损害的关系。方法连续选取2015年1～6月在广州军区广州总医院心内科住院的原发性高血压患者95例；比较各BPV指标与舒张期室间隔厚度（IVSd）、左室后壁厚度（LVPWd）、左/右侧肱踝脉搏波传导速度（baPWV_L/R）和左/右侧颈动脉内膜中层厚度（IMT_L/R）之间的Pearson相关性；按3.9对BPVSS进行量化分组，BPVSS≥3.9为对照组（43例），BPVSS<3.9为观察组（52例），并分析两组之间IVSd、LVPWd、baPWV、IMT及颈动脉斑块所占比的差异。结果 BPVSS和传统的BPV指标一样与IMT_L/R具有负相关性（r=-0.278/-0.324，P<0.05）；与IVSd、LVPWd、baPWV_L/R具有负相关性（r=-0.241，r=-0.223，r=-0.468/-0.373，P均<0.05）；观察组的IVSd、LVPWd、baPWV_L/R、IMT_L/R均显著高于对照组（t=2.307，t=2.516，t=3.250/2.790，t=2.372/3.425，P均<0.05）；观察组的颈动脉斑块所占比也显著高于对照组，χ2=27.833，P<0.001。结论 BPVSS能够全面的反映高血压患者靶器官损害的严重程度，BPV越大，该评分越低，其心脏和血管靶器官损害越严重。
作者：朱威；徐琳；邱健；马骏；郭琰；招慧；雷洪强；蔡泽坤 刊期： 2016年第04期
目的：探讨在下肢深静脉血栓（DVT）经导管溶栓（CDT）中，凝血-纤溶指标的变化及其临床意义。方法选择2014年6月~2015年6月在我院经CDT治疗的急性下肢DVT患者50例作为病例组，在溶栓前、CDT溶栓24 h、溶栓结束分别检测血浆D-二聚体、纤维蛋白原（FIB）和纤维蛋白降解产物（FDP）浓度。另选择健康体检50例作为健康对照组。结果 DVT患者D-二聚体、FIB和FDP在溶栓前浓度分别为29.17±38.67μg/mL、3.66±0.95 g/L、76.14±131.48μg/mL，和健康对照组0.21±0.27μg/mL、3.32±0.65 g/L、1.08±0.73μg/mL相比，差异有统计学意义（P<0.05）。疗效判定为再通者34例（再通组），未通者16例（未通组）；实施溶栓24 h后，再通组D-二聚体和FDP浓度较前显著升高（P<0.05），FIB则较前显著降低（P<0.05）。未通组上述指标变化在溶栓24 h后无显著改变（P>0.05）。Spearman相关性分析表明，实施溶栓24 h后，D-二聚体和FDP的浓度与疗效存在正相关关系，相关系数分别为r=0.66及r=0.50（P<0.05）。结论在CDT治疗过程中监测D-二聚体、FIB及FDP的浓度的变化，对及时了解血栓溶解情况，判断溶栓效果有重要的临床意义。
作者：董嘉尧；朱桥华；罗美华；周成宇；黄维；于新发 刊期： 2016年第04期
目的：观察豚鼠耳蜗自噬相关蛋白beclin1和LC3、Na+-K+-2Cl-联合转运体（NKCC1）mRNA、内皮素（ET）表达与耳蜗庆大霉素（GM）损伤关系及盐酸椒苯酮胺（PPTA）对损伤的保护作用及其机制。方法将60只豚鼠随机分成对照组、模型组、同期治疗组、造模后对照组、后期治疗组。对照组给NS+人工外淋巴液、模型组给GM+人工外淋巴液、治疗组给GM+PPTA（均连续给药7 d），造模后对照组及后期治疗组均连续注射GM 7 d后，再分别行人工外淋巴液及PPTA连续注入7 d。所有豚鼠给药前均手术行听泡置管，NS及GM（160 mg · kg-1· d-1）采用腹腔注射，人工外淋巴液及PPTA采用听泡注入。各组豚鼠完成给药后ABR测试分析听力，检测beclin1和LC3、NKCC1 mRNA及ET-1的表达。结果模型组、造模后对照组的ABR结果差异无统计学意义（P>0.05），但两者均明显高于其余3组（P<0.05），同期治疗组豚鼠ABR阈值明显低于后期治疗组（P<0.05）；模型组LC3Ⅱ及Beclin1的表达量较其余4组明显升高，后期治疗组LC3Ⅱ及Beclin1的表达量较造模后对照组降低；模型组NKCC1 mRNA表达较其余4组明显升高（P<0.05），后期治疗组NKCC1 mRNA表达明显低于造模后对照组（P<0.05）。模型组各部位ET-1表达较其余4组明显增高，对照组各部位ET-1表达低于其余4组，后期治疗组各部位ET-1表达较造模后对照组降低。结论 PPTA可抑制耳蜗细胞自噬、NKCC1、ET-1的表达，从而对耳蜗庆大霉素损伤起到保护作用；PPTA早期对抗庆大霉素耳蜗损伤效果更优，提示GM可能对听觉细胞产生不可逆损伤。
作者：李波波；吴剑；陈婧；陈浩；李永贺 刊期： 2016年第04期
目的：检测链脲佐菌素造模后9周的糖尿病SD大鼠膀胱平滑肌收缩型标志物和关键调控基因myocardin的表达水平，了解糖尿病大鼠膀胱平滑肌是否发生表型转化。方法32只体质量200~220 g的8周龄雄性SD大鼠随机平均分为糖尿病（DM）组和非糖尿病（NDM）组，9周后取膀胱组织行HE和Masson三色染色观察膀胱组织病理变化，qRT-PCR、Western blotting分别检测膀胱组织平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、平滑肌肌球蛋白重链收缩型平滑肌标志物及myocardin基因的mRNA和蛋白表达水平。结果 DM组大鼠较NDM组明显消瘦（286.25±71.20 g vs 412.71±102.74 g，P=0.001），多饮、多尿，膀胱中胶原纤维组织增多（P<0.001），myocardin、α-SMA、平滑肌肌球蛋白重链的mRNA和蛋白水平均显著下降（P均<0.05）。结论糖尿病大鼠膀胱平滑肌在造模9周时发生表型转化，引起膀胱平滑肌舒缩障碍，可能在糖尿病膀胱病理变化过程中起重要作用。
作者：梁雁冰；韦安阳；王涛；何书华；张海波；陈泽荣；陈逢志；汪志强 刊期： 2016年第04期
目的：评价改良Bethesda方法、改良Nijmegen方法和空白法检测血友病A患者凝血因子Ⅷ抑制物的临床应用价值，并探讨凝血因子Ⅷ抑制物检测的影响因素。方法采用改良Bethesda方法、改良Nijmegen方法和以去离子水替代缓冲液或乏Ⅷ因子血浆的空白法，分别检测257例血友病A患者的抑制物水平，以抑制物滴度≥0.60 BU/mL判为阳性结果，并对3种方法检测结果的阳性率及抑制物滴度水平进行分析。结果改良Bethesda方法、改良Nijmegen方法和空白法的阳性率分别为79.38%、85.21%和72.37%。改良Bethesda方法与改良Nijmegen方法之间相关系数为0.996（P<0.001），两种方法的抑制物滴度水平之间有显著的统计学差异（P<0.001），阳性率无显著的统计学差异（P=0.105）；改良Bethesda方法与空白法之间相关系数为0.994（P<0.001），抑制物滴度水平之间有显著的统计学差异（P<0.001），阳性率无显著的统计学差异（P=0.079）；改良Nijmegen方法与空白法之间相关系数为0.994（P<0.001），抑制物滴度水平之间有显著的统计学差异（P<0.001），阳性率有显著的统计学差异（P=0.001）。结论改良Nijmegen方法具有较高的灵敏度，改良Bethesda方法次之，空白法差。反应体系中各凝血因子活性水平的一致性是影响凝血因子Ⅷ抑制物检测的主要因素，而稳定的缓冲体系也是影响检测结果稳定性、灵敏度及特异性不可忽视的因素。
作者：冯厚梅；李强；许伟珊；陈东妙；郑磊 刊期： 2016年第04期
目的：计算并预测13562个GENCODE项目首期鉴定的人类长链非编码RNA在16个哺乳动物的直系同源基因，并建立数据库LongMan，为长链非编码RNA研究提供重要数据。方法使用RNAfold预测13562个人类长链非编码RNA每个外显子的结构；使用Infernal对每个外显子进行基因组搜索，分析其在16个哺乳动物可能的同源外显子；分析每个人类长链非编码RNA是否有同源基因；分析同源长链非编码RNA中的转座子和剪切信号；构造数据库的搜索引擎和输出界面；实现数据库维护更新机制。结果 LongMan目前收录133646个直系同源长链非编码RNA；提供序列、比对、转座子和种系特异性插缺（indel）等信息；提供多条件组合查询；提供显示与下载功能。结论 LongMan是首个大规模多种系同源长链非编码RNA数据库，对长链非编码RNA比较与功能研究具有重要价值。
作者：杨小雪；张海；贺莎；林杰；朱浩 刊期： 2016年第04期
目的：探讨长链非编码RNA HOTAIR在乳腺癌血浆中的表达情况及其对乳腺癌的潜在诊断价值。方法首先采用实时定量PCR（RT-PCR）的方法检测HOTAIR在24例乳腺癌组织和70例乳腺癌血浆中的表达情况，分析血浆HOTAIR与临床病理特征相关性；其次采用电化学发光免疫测定法检测血浆中CEA、CA153水平，并建立多元逻辑回归模型分析血浆中HOTAIR相对于传统标记物CEA和CA153对乳腺癌诊断价值及3项指标联合后诊断价值；后采用定量PCR的方法检测24位乳腺癌患者术前和术后血浆中HOTAIR表达水平，并分析24位乳腺癌患者血浆中HOTAIR与组织表达相关性，以评价血浆中的HOTAIR对患者体内肿瘤动态监测情况。结果与对照组相比，HOTAIR在乳腺癌组织和血浆中表达增高，且血浆中HOTAIR的表达水平与雌激素受体（ER）（P=0.004）和淋巴结转移明显相关（P=0.010）。通过对血浆中高表达的HOTAIR、CEA及CA153绘制ROC曲线并建立多元逻辑回归模型，发现HOTAIR曲线下面积（AUC）为0.82（P<0.001），灵敏度和特异性分别为73.3%和93.3%，其诊断价值高于传统标记物CA153（AUC=0.66，P=0.030）和CEA（AUC=0.52，P=0.001），且3项指标联合后诊断效能（AUC=0.84）和特异度（96.7%）高于HOTAIR单独检测。此外，术后血浆中HOTAIR表达水平较术前明显降低（P<0.0001），且血浆中HOTAIR表达水平与体内肿瘤表达中度相关（r=0.62，P<0.0001）。结论血浆中高表达的HOTAIR可作为乳腺癌诊断的一个潜在的新型生物标志物。
作者：张开炯；张毅；罗正莲；刘恋；杨洁；吴立春；张莉；余思思；刘靳波 刊期： 2016年第04期
南方医科大学学报杂志
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