蒋朴；徐颖；胡良安；刘杨；邓世雄
报道2例发生在脊柱和颅内具有幼稚性特征的透明细胞型脑脊膜瘤(CCM)患者,与经典的透明细胞型脑脊膜瘤不同的是2例患者肿瘤都有显示罕见的细胞核异型性、分裂活跃、坏死等原始化现象.肿瘤细胞对上皮膜抗原和Vimtine有免疫反应,MIB-1指数高达40％.对2例患者均实行肿瘤完整切除术.其中男性患者后3个月有局部复发和心室外侧转移.本文对脑脊膜病临床病理特点、诊断及预后进行探讨,并建议术后进行辅助放疗或化疗,并且在随访第1阶段每3～6个月复查磁共振.
作者：武彤彤；杨清绪；李智；蔡方；朱淑玲；张发仁 刊期： 2012年第01期
目的 对SDF-1进行遗传改造,将其第2位氨基酸由脯氨酸(P)突变为甘氨酸(G),且缺失其C-端α螺旋结构,以获得一种CXCR4特异性拮抗剂SDF- 1P2G54.方法 将PCR扩增的SDF-1突变体SDF-1p2g54的基因插入表达载体pET-30a(+),并转化BL21(DE3)菌株.IPTG诱导表达的重组蛋白SDF-1P2G54在变性条件下采用镍柱亲和层析纯化,并通过梯度稀释和超滤方法得以复性.利用趋化实验鉴定SDF-1P2G54对Jurkat细胞的趋化活性及对SDF-1趋化活性的抑制效应,流式细胞仪检测SDF-1P2G54诱导MOLT4细胞钙内流及细胞表面CXCR4内在化的能力.结果 SDF-1P2G54完全丧失激活CXCR4、趋化Jurkat细胞跨膜迁移和诱导MOLT4细胞钙内流的能力,却保持了与CXCR4的高亲和性,能有效抑制野生型SDF-1对Jurkat的趋化效应、诱导MOLT4细胞表面CXCR4的快速内在化.结论 SDF-1P2G54是一种新型的CXCR4特异性拮抗剂,具有开发成抑制HIV-1感染和癌细胞转移等重大疾病特效药物的潜在应用价值.
作者：杨飞华；龙北国；谭毅；龚雅；马伟峰 刊期： 2012年第01期
目的 构建来自华南不同慢性丙型肝炎(CHC)患者的HCV NS5A的复制子重组质粒并测序分析,探索HCV NS5A在抗病毒应答中生物学特性.方法 以能够高效复制的1b型HCV复制子质粒为骨架,构成带有MIuⅠ和BclⅠ双酶切位点的开关质粒,采用逆转录-聚合酶链反应从不同CHC患者血清中扩增获得HCV 1b亚型NS5A全长片段,克隆到pMD-18载体中,测序分析其中的PKRBD、ISDR、V3和IRRDR区域的变异情况.扩增产物中无MIu Ⅰ和Bcl Ⅰ酶切序列的,在引物中引入相关酶切序列后再扩增,双酶切后将NS5A区段置换入HCV 1b复制子骨架中.结果 成功扩增出NS5A全长片段并克隆测序,将NSSA区ISDR-V3区域置换入复制子中,测序结果正确.序列比对显示应答株的ISDR和PKRBD氨基酸变异数目比无应答株高；V3和IRRDR区域存在较高氨基酸突变率.结论 成功构建包含华南HCV 1b亚型NS5A核心区域的复制子插入式重组质粒,为研究HCV NS5A生物学特性、干扰素抵抗的机制以及难治性CHC患者的个体化抗病毒治疗分析奠定了基础.
作者：李京涛；周斌；周元平；曾艳丽；李威；王俊洁；张健；张浩；刘叔文 刊期： 2012年第01期
目的 探讨全胸腔镜下非小细胞肺癌根治性手术的治疗体会.方法 2008年10月～2010年12月共施行全胸腔镜下肺叶切除+纵膈淋巴结清扫治疗非小细胞肺癌患者61例,其中通过全胸腔镜下传统式手术30例,全胸腔镜下单向式手术31例.本组病例全部经胸部1个观察孔和2个操作孔完成.传统式手术顺序同开放手术,单向式手术顺序由浅入深、渐次推进,后处理肺裂.结果 全部手术过程顺利,未发生严重并发症及围手术期死亡,无中转开胸.传统术式组与单向术式组两组间手术时间、出血量、摘除淋巴结数、术后带管时间及术后住院时间均无统计学差异(P＞0.05).结论 全胸腔镜下行非小细胞肺癌根治术是安全、可靠的,单向术式有其优越性.
作者：刘德纲；蔡开灿；赵意；吴华；蔡瑞君；熊刚 刊期： 2012年第01期
目的 探讨补肾活血方对大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达的影响,为其抗心肌纤维化提供实验依据.方法 通过血清药理学方法制备补肾活血方含药血清,与DMEM配成细胞培养液.提取大鼠心脏成纤维细胞(CFs)并传代培养,将3,～4代CFs分为4组:A组为10％含药血清培养液培养,B组为20％含药血清培养液培养,C组为不含药血清培养液培养,D组为对照组,为常规胎牛血清培养液培养.培养72 h后CCK-8检测CFs增殖,RT-PCR检测胶原基因表达,Western blotting检测胶原蛋白表达.结果 与C组、D组相比,A组、B组CFs增殖明显降低,B组较A组进一步降低(P＜0.05)；Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA在A、B两组表达较C、D两组明显下调(P＜0.05),Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达在A、B两组明显低于C、D两组(P＜0.05).结论 补肾活血方可以抑制大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达.
作者：马新英；杨明会；陈劲松；刘毅；潘从泽；樊金灼 刊期： 2012年第01期
目的 构建HNF6的慢病毒载体pLeno-DCE-HA-HNF6,建立稳定表达HNF6的大肠癌细胞系并观察HNF6对大肠癌细胞系SW620的侵袭转移能力的影响.方法 构建HNF6慢病毒载体pLeno-DCE-HA-HNF6,感染293T细胞,收集上清测定病毒滴度；病毒颗粒转染SW620细胞,通过荧光显微镜及流式细胞仪观察转染效率；定量PCR(qPCR)及Western blotting检测HNF6的表达；应用Transwell和划痕试验观察SW620细胞侵袭转移能力的变化.结果 通过PCR及酶切鉴定成功构建pLeno-DCE-HA-HNF6载体；包装并得到高滴度的病毒颗粒；转染SW620后,qPCR及Western blotting检测到HNF6表达明显升高；HNF6导致SW620明显的细胞形态变化,Transwell及划痕试验证明HNF6使SW620细胞迁移能力降低.结论 成功构建并包装得到HNF6的慢病毒颗粒,建立稳定表达HNF6的大肠癌细胞系SW620-HNF6,证明过表达HNF6后可以抑制大肠癌侵袭转移能力.
作者：耿海涛；肖乾；徐邓勇；胡立锋；丁克峰 刊期： 2012年第01期
目的 探讨一个家族性心脏传导疾病并房颤家系的临床特征及其有效的治疗方案.方法 对先证患者所在家系的家族成员进行常规临床体检和心电图、超声心动图、动态心电图、X线胸片、生化、自身抗体等检查.同时对先证者行双腔起搏器安置术联合口服胺碘酮治疗3个月,期间监测患者甲功及肺部情况,治疗完成后随访3个月,并对相关文献进行回顾.结果 家系中所有成员均无器质性心脏病的临床证据.先证者反复头晕、胸闷,以活动后较明显,静息心电图表现为心房纤颤伴高度房室传导阻滞；其叔叔于30岁时因晕厥发现“心房纤颤,三度房室传导阻滞”而安置起搏器治疗；其爷爷死于“心脏病”(具体不详)；其他家族成员心电图检查未见明显异常,既往亦未发生明显的心脏事件(晕厥、猝死).患者经治疗后症状明显好转,心电图及动态心电图均未见心房纤颤,起搏器工作良好.结论 心脏传导性疾病并心房纤颤可呈家族聚集性发病,双腔起搏器联合胺碘酮治疗可作为家族性心脏传导疾病并心房纤颤患者安全有效的治疗措施.
作者：刘福强；李岩；谢勇；赵冬华；萧钟波；周桂芳；彭健 刊期： 2012年第01期
目的 使用两种不同方法提取人血清,研究对比得出快速、廉价、安全而有效的富含生长因子的人血清提取方法,以促进其在临床上的应用.方法 分离并培养人真皮成纤维细胞.分别使用全血凝固后离心法和Anitua法提取人血清.测定各血清样本中PDGF-AB及TGF-β1的含量.分别使用含有10％胎牛血清(FBS)和10％人血清(HS)的DMEM培养基培养成纤维细胞,比较不同培养基对细胞形态、活力、增殖的影响.结果 各组细胞形态正常,增殖活力良好.B组(全血凝固后离心组)细胞的数量及活力均明显高于其他各组(P＜0.05),且该法获得的血清中生长因子含量高(P＜0.05),与生长曲线及MTT曲线所示结果一致.结论 全血凝固后离心法提取的HS内所含生长因子浓度高,对细胞生长促进作用大,提取方法简单、廉价、有效.
作者：鲁华；鲁峰；刘戈；高建华 刊期： 2012年第01期
目的 研究携带结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)、人单纯疱疹病毒一胸苷激酶(HSV-TK)双基因的重组沙门菌瘤内注射抗小鼠黑色素瘤的抑瘤效应.方法 构建重组沙门菌SL7207/PCMV-mtHSP70-IRES-TK,建立小鼠黑色素瘤动物模型,瘤内注射重组沙门菌观察其抑瘤效应、荷瘤鼠的生存期并进行安全性评估.结果 瘤内注射重组沙门菌,实验组抑瘤率显著高于对照组,延长荷瘤鼠生存期,重组菌治疗后荷瘤小鼠的生存状态良好,无腹泻,治疗期间体质量无明显改变.结论 减毒沙门菌携带的mtHSP70/HSV-TK双基因真核共表达质粒瘤内注射对B16肿瘤细胞具有显著抑制作用.
作者：曾曙光；刘启才；王素文；彭细毛；章锦才；张积仁 刊期： 2012年第01期
目的 了解1例肺栓塞患者及其家系成员发生蛋白C缺陷症的分子发病学机制.方法 收集先证者及其家系成员的枸橼酸钠抗凝血,采用发色底物法检测PC活性(PC∶A)、蛋白S活性(FPS∶ A)和抗凝血酶活性(AT:A),采用ELISA方法检测PC抗原(PC∶Ag)水平.采用PCR方法对先证者PC基因所有9个外显子及其侧翼序列进行扩增、测序,发现突变后,对先证者家系成员的PC基因有关外显子片段进行PCR扩增和测序.结果 先证者及其父亲、母亲和妹妹均为Ⅱ型PC缺陷症患者.PC基因测序结果显示先证者的PC基因分别出现了位于3号外显子第5540位碱基的G→A的杂合突变和位于第7号外显子第10230位碱基C→T的杂合突变,导致PC E29K和R147W双杂合突变.先证者父亲携带PC E29K杂合突变,而先证者母亲和妹妹均为PCR147W杂合突变的携带者.结论 先证者为PC E29K和R147W基因复合杂合突变携带者,且这两种突变分别遗传自其父母.其中,PC E29K错义点突变为目前国际上尚未见报道的新突变,而PC R147W是一种已报道的常见于遗传性易栓症患者的可导致Ⅱ型PC缺乏的错义点突变.
作者：叶絮；刘晓力；冯莹；丁秋兰；周旭红；王学锋 刊期： 2012年第01期
目的 观察安神方颗粒的抗焦虑作用,并研究其机制.方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为6组(10只/组):正常对照组、模型组、地西泮组和安神方高、中、低剂量组.采用慢性情绪应激的方法建立焦虑大鼠模型,同时给予药物干预,以高架十字迷宫试验对其行为学进行评价.行为学观察后,麻醉处死正常对照组、模型组、地西泮组及安神方中剂量组大鼠,冰台上分离大鼠海马,冷冻离心后分离上清液,高效液相色谱法测定谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)含量；用免疫组织化学法测定γ-氨基丁酸受体(GABAAR)、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的表达.结果 与正常对照组比较,模型组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率明显减少；地西泮组与安神方高、中、低剂量组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率较模型组显著上升,以安神方中剂量组上升明显；模型组大鼠海马组织中谷氨酸的表达量较正常对照组显著上升,GABA的表达量明显下降；地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,大鼠海马组织中谷氨酸的表达量显著降低和GABA的表达量明显提高,安神方中剂量组与地西泮组比较差异不显著；模型组与正常对照组比较,GABAAR免疫阳性细胞表达减少,NMDAR1免疫阳性细胞表达表达增多；地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,NMDAR1的表达水平降低,GABAAR的表达水平提高,安神方中剂量组与地西泮组比较无明显差异.结论 安神方具有抗焦虑的作用,可以提高中枢GABA的含量,增强GABAAR的表达,降低谷氨酸含量,减少NMDAR1的表达.
作者：张雪；黄仕营；张燊；丁秀芳；陈宝田 刊期： 2012年第01期
目的 探讨胸部炎性肌纤维母细胞瘤(IMT)的病因、临床诊断、治疗方法及预后,以进一步提高对本病的认识.方法 回顾性分析2005年4月～2011年7月我院收治的12例胸部炎性肌纤维母细胞瘤患者的临床资料,其中男性9例,女性3例；年龄36～81岁,平均年龄60.08岁.5例行肺叶切除+纵膈淋巴结清扫术,2例行肺叶切除术,肺叶局部切除术、纵隔肿物切除术及肋骨切除术各1例,行保守治疗2例.结果 手术患者术后均平稳恢复,病理检查均未发现淋巴结转移；所有患者均随访,随访时间2月～5年,无肿瘤复发或转移征象.保守治疗患者1例随访3月肿瘤无明显变化,另l例患者病变基本消失.结论 胸部炎性肌纤维母细胞瘤是少见的良性肿瘤,但少数具有复发倾向及恶变潜能,明确诊断主要依靠病理检查结果.治疗以手术切除为主,可辅以其它治疗.所有IMT患者治疗后应密切随访.
作者：张竞；王云喜；初向阳；刘毅 刊期： 2012年第01期
目的 探讨ABCG1在高糖促进内皮细胞功能损伤中的作用.方法 不同浓度D-葡萄糖(5.6 mmol/L和30 mmol/L)干预血管内皮细胞24～72h,Real time PCR及Western blotting检测葡萄糖对血管内皮细胞ABCGl mRNA和蛋白水平的影响,液体闪烁仪分析细胞内胆固醇流出率,并测量葡萄糖干预后内皮细胞NOS活性；使用LXR内源性激活剂22(R)-hydroxycholesterol预先干预内皮细胞2h,再予不同浓度葡萄糖干预48 h,观察血管内皮细胞ABCG1表达、功能及内皮细胞NOS活性的改变.结果 高糖时间依赖性地抑制血管内皮细胞ABCGlmRNA和蛋白水平的表达,同时降低细胞内胆固醇向HDL流出,高糖也降低了内皮细胞eNOS活性.使用22(R)-hydroxycholesterol逆转高糖对ABCG1表达的抑制后,细胞内胆固醇流出率增加,高糖对内皮细胞eNOS活性的抑制也被部分逆转.结论 高糖损伤内皮细胞功能的机制可能与高糖降低内皮细胞ABCG1表达相关.
作者：薛嘉虹；牛小麟；魏瑾；董新；朱参战；党寅虎；宋安齐；黄惠梅 刊期： 2012年第01期
目的 提出一种改进的Demons非刚性配准算法,验证算法的有效性,并将其应用于图像引导放射治疗(image-guided radiotherapy,IGRT)中治疗图像和计划图像的配准.方法 基于Brox等提出的梯度恒定假设和Malis的高效二阶小化算法的思想将图像灰度梯度场的相似性加入原始的能量函数中,推导出更新变形场的公式.利用有限内存的BFGS算法优化能量函数,自动确定迭代次数.分别利用模拟形变图像、变形体模图像和肝癌病人的临床CT图像验证改进算法的配准精度.结果 改进的Demons变形配准算法与原始的“Additive Demons”算法相比,配准精度更高,收敛速度更快.结论 在放射治疗的不同分次扫描过程中,因实际扫描条件的影响,两幅待配准图像像素灰度值范围不同的情况下,改进的Demons算法能够更好地实现快速精确的配准.
作者：周露；甄鑫；卢文婷；窦建洪；周凌宏 刊期： 2012年第01期
目的 探讨Slit-Robo信号对粘液表皮样癌细胞系Mc3细胞生长与增殖作用的影响及其作用机制.方法 免疫组织化学方法及流式细胞术细胞内因子检测法检测Mc3细胞Slit2及Robol蛋白的表达；在Robol受体胞外区的单克隆抗体R5作用下,以细胞计数法与软琼脂克隆形成实验观察Mc3细胞生长变化及用流式细胞术细胞内因子检测法检测增殖相关蛋白PCNA的表达.结果 Mc3细胞表达Slit2及Robol蛋白,并且在R5单克隆抗体作用下,Mc3细胞体外生长能力受到抑制,增殖能力明显减弱,PCNA蛋白表达水平下降.结论 Slit-Robo信号可能影响Mc3细胞的生长增殖能力,对肿瘤细胞内的PCNA有正调控作用,提示该信号可能参与粘液表皮样癌的发生及发展过程.
作者：韩冰；王丽京；王静；张洁；赵媛；亓翠玲 刊期： 2012年第01期
目的 优化处方,以期得到疗效确切,低毒的抗肝纤维化复方.方法 运用硫代乙酰胺诱导大鼠肝纤维化模型,采用均匀设计法(二因素五水平)分组实验,并设有正常组,模型组,以大鼠肝组织羟脯氨酸含量作为检测指标,经均匀设计软件3.0处理分析得佳处方；运用相同方法诱导大鼠肝纤维化模型,设正常组,模型组,秋水仙碱组,佳处方组,通过观察肝组织羟脯氨酸含量,大鼠血清HA,AL,AST,ALB含量以及肝组织纤维化变化,对于佳处方的疗效进行比较和验证实验.结果 经实验筛选的佳处方为甘草甜素70 mg/kg,苦参碱70 mg/kg;验证实验中,佳处方组抗肝纤维化作用显著(P＜0.05),与秋水仙碱组无显著性差异(P＞0.05).结论 均匀设计在处方优化中作用显著,明显减少实验次数,结果可靠；苦参碱与甘草甜素合用抗肝纤维化作用明显.
作者：黄亮；漆林艳；陈志良；李亦蕾；文志勇 刊期： 2012年第01期
目的 探索脂肪源干细胞(ADSCs)在维甲酸(RA)诱导下是否表达原始生殖细胞标记碱性磷酸酶(ALP)及生殖标记基因vasa.方法 分离培养2个月龄SD雌性大鼠ADSCs,传至第3代进行成脂、成骨诱导和表面标记鉴定.将第3代ADSCs分别用10-5、10-6、10-7 mol/L RA诱导7d和14 d,采用ALP检测试剂盒检测各组ALP的活性水平.用RT-PCR方法检测10-5 mol/L RA组Vasa mRNA表达.结果 将第3代ADSCs分别用10-5、10-6、10-7 mol/L RA诱导7d的D520nm值分别为0.59±0.04,0.27±0.07,0.15±0.03,对照组为0.07±0.01,诱导14d的OD值分别为0.42±0.02,0.34±0.01,0.19±0.02,对照组为0.07±0.01,说明RA能显著性促进ADSCs碱性磷酸酶的表达(P＜0.01).第3代ADSCs用10-5 mol/L RA诱导7 dVasa mRNA的表达为阴性.结论 第3代ADSCs在维甲酸诱导下能够表达原始生殖细胞标记碱性磷酸酶,但用10-5 mol/L RA诱导7d不能表达生殖标记基因Vasa.
作者：段富华；杨春；杨会营；余美春；陶晖；曾文钦；戴景兴；原林 刊期： 2012年第01期
目的 探讨IL-17对博来霉素诱导肺纤维化形成中的肺成纤维细胞增殖、转化、胶原合成作用.方法 用5 mg/kg博来霉素气管内注入的方法诱导肺纤维化形成,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL- 17/IL- 17RmRNA在肺纤维化形成中表达的变化,选择表达IL-17RmRNA佳时间的肺成纤维细胞进行原代培养、鉴定.使用四氮唑蓝比色法检测不同浓度的IL-17对肺成纤维细胞的增殖.使用RT-PCR和Western Blotting检测肌成纤维细胞标志物α-SMA以及Ⅰ和Ⅲ型胶原的表达.结果 (1)IL-17/IL-17RmRNA在肺纤维化形成中明显升高,在第14天表达高.(2)不同浓度IL-17能够促进肺成纤维细胞的增殖,佳浓度为50 ng/ml.(3)IL-17促进肺成纤维细胞表达α-SMA增加.(4)IL-17促进肺成纤维细胞I和III型胶原合成.结论 IL-17具有促进小鼠肺纤维化形成中肺成纤维细胞增殖、转化和胶原的合成作用,可能在肺纤维化形成中起重要作用.
作者：董昭兴；康庆鑫；雷雯；钟红；邰文琳；王殿华 刊期： 2012年第01期
目的 观察奇壬醇对牛Ⅱ型胶原特异性淋巴细胞体内和体外的免疫调节作用,探讨奇壬醇对抗原特异性淋巴细胞的免疫抑制作用机制.方法 将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、奇壬醇组和泼尼松龙组.除对照组外,均复制胶原诱导关节炎大鼠模型,造模当天开始给药.造模30 d后取脾脏和引流淋巴结,制备单细胞悬液,经体外培养48 h后,ELISA法检测培养上清中干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(TNF-t)含量；在Ⅱ型胶原诱导下,取正常大鼠淋巴结细胞、脾细胞与不同浓度的奇壬醇共同培养,检测胶原诱导的淋巴细胞增殖及凋亡.结果与模型组相比,奇壬醇组脾细胞培养上清中IFN-γ和TNF-α含量降低(P＜0.05,P＜0.01),IL-10和IL-4水平升高(P＜0.05,P＜0.01)；淋巴结细胞培养上清中IFN-γ和TNF-α含量降低(P＜0.05,P＜0.001),IL-10和IL-4水平升高(P＜0.05,P＜0.001);体外实验中,奇壬醇抑制Ⅱ型胶原特异性淋巴结细胞增殖,促进Ⅱ型胶原特异性淋巴结细胞和脾细胞凋亡,均呈剂量依赖关系.结论 奇壬醇可通过抑制Ⅱ型胶原特异性淋巴细胞分泌促炎因子,促进胶原特异性淋巴细胞分泌抗炎因子,抑制胶原特异性淋巴细胞增殖和促进其凋亡,以多条途径发挥免疫抑制作用.
作者：卢月；肖娟；吴再旺；王喆明；付宏征；陈英玉；钱瑞琴 刊期： 2012年第01期
目的 观察汉防己甲素(Tet)对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞(tenon's capsule fibroblasts,TCFS)中bax、bcl-2、转化生长因子-β2(TGF-β2)mRNA表达的影响,探讨其可能的作用机制.方法 将体外培养的第3代TCFS分别置于浓度为10-5 mol/LTet的培养液和1640培养液中培养48 h,采用实时荧光定量PCR检测细胞中bax、bcl-2和TGF-β2 mRNA的表达变化.结果 同对照组比较,Tet实验组中bax mRNA的表达量明显升高,bcl-2、TGF-β2 mRNA的表达量显著下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 一定浓度的汉防己甲素可以通过降低bcl-2、TGF-β2 mRNA的表达量,同时提高bax mRNA的表达量来抑制TCFS的增殖,并可诱导其凋亡,可能成为一种潜在的抗青光眼滤过瘢痕药物.
作者：李岱；孙明；李青春；杨芳；林少春；吴开力 刊期： 2012年第01期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
