刘福强;李岩;谢勇;赵冬华;萧钟波;周桂芳;彭健
目的 比较冰帽、全身低温及颈内动脉冷盐水灌注(ICSI)对于大鼠脑梗死急性期的治疗效果,为临床治疗急性脑梗死时不同低温方式的选择和ICSI的深入研究提供实验依据.方法 250~300 g SD大鼠随机分为模型组、冰帽组、全身低温组和ICSI组,用线栓法复制大脑中动脉栓塞2h模型,各低温方式的目标温度为33~34℃维持20 min.再灌48 h后,进行神经行为学评分;取脑行2,3,5-氯化三苯四氮唑染色;干湿重法检测脑含水量;酶联免疫吸附法检测血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100β和基质金属蛋白酶9(MMP9)的浓度.结果 各低温方式均能降低大鼠梗死体积,其中冰帽能使梗死体积减小27.4%(P<0.05),而全身低温和ICSI能使梗死体积减小47.6%和61.6%(P<0.01).全身低温组和ICSI组的脑含水量低于模型组(P<0.05);冰帽组的含水量低于模型组,但并无统计学意义.各低温组中,仅有ICSI组的神经行为学评分与模型组有统计学差异(P<0.05).血清学方面,ICSI组的NSE和S100β的浓度显著低于模型组(P<0.05);全身低温组和冰帽组中各指标与模型组比较均无统计学意义.结论 ICSI对于脑梗死急性期的治疗效果要优于冰帽和全身低温,而全身低温比冰帽有更好的疗效.
作者:冀雅彬;吴永明;姬仲;宋玮;徐隋意;王遥;潘速跃 刊期: 2012年第01期
目的 探讨全胸腔镜下非小细胞肺癌根治性手术的治疗体会.方法 2008年10月~2010年12月共施行全胸腔镜下肺叶切除+纵膈淋巴结清扫治疗非小细胞肺癌患者61例,其中通过全胸腔镜下传统式手术30例,全胸腔镜下单向式手术31例.本组病例全部经胸部1个观察孔和2个操作孔完成.传统式手术顺序同开放手术,单向式手术顺序由浅入深、渐次推进,后处理肺裂.结果 全部手术过程顺利,未发生严重并发症及围手术期死亡,无中转开胸.传统术式组与单向术式组两组间手术时间、出血量、摘除淋巴结数、术后带管时间及术后住院时间均无统计学差异(P>0.05).结论 全胸腔镜下行非小细胞肺癌根治术是安全、可靠的,单向术式有其优越性.
作者:刘德纲;蔡开灿;赵意;吴华;蔡瑞君;熊刚 刊期: 2012年第01期
目的 分析广州地区男男性接触者(men who have sex with men,MSM)人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)检测的相关情况,为开展艾滋病防治提供依据.方法 检测2010年1月~2010年12月参加艾滋病自愿咨询检测的MSM的抗-HIV,并采用x2检验分析其阳性率在性角色、文化程度、安全套使用、有无合并梅毒感染等方面的差异.结果 共调查1526名MSM,确认HIV感染的人数87例、阳性率为5.70%.近3个月内接受过HIV检查的有占27.36%(406/1484),知道自己的HIV检查结果的占83.00%(337/406),其阳性率达7.12%.MSM主动肛交者的抗-HIV阳性率为3.54%、被动肛交者为7.14%、两者兼有为6.70%,在性角色方面抗-HIV阳性率差异有统计学意义(x2=6.450,P=0.040).已婚的MSM其抗- HIV阳性率为9.45%,高于未婚的4.92%与离异的4.17%,其差异有统计学意义(x2=7.184,P=0.028).文化程度越低,抗- HIV阳性率越高,其差异有统计学意义(x2=8.90l,P=0.012).如MSM合并梅毒则其抗- HIV阳性率为21.31%,无梅毒感染者其阳性率仅为5.06%,其差异有统计学意义(x2=25.770,P<0.001).近3个月每次均使用安全套与近1次使用安全套的MSM其抗- HIV阳性率虽然高于未使用者,但其差异无统计学意义(P>0.05).结论 广州市MSM的抗- HIV阳性率较高,不安全性行为较高,特别是肛交时被动方MSM年纪轻,安全套使用率低,HIV感染率高,自我保护能力弱,成为MSM内HIV传播的高危人群.
作者:牟成惠;王强;钟逸雯;姜宜海;何宗忠 刊期: 2012年第01期
报道2例发生在脊柱和颅内具有幼稚性特征的透明细胞型脑脊膜瘤(CCM)患者,与经典的透明细胞型脑脊膜瘤不同的是2例患者肿瘤都有显示罕见的细胞核异型性、分裂活跃、坏死等原始化现象.肿瘤细胞对上皮膜抗原和Vimtine有免疫反应,MIB-1指数高达40%.对2例患者均实行肿瘤完整切除术.其中男性患者后3个月有局部复发和心室外侧转移.本文对脑脊膜病临床病理特点、诊断及预后进行探讨,并建议术后进行辅助放疗或化疗,并且在随访第1阶段每3~6个月复查磁共振.
作者:武彤彤;杨清绪;李智;蔡方;朱淑玲;张发仁 刊期: 2012年第01期
目的 提出一种精确有效的分割CT图像中的肝脏区域的算法.方法 在统计形状模型的基础上加入灰度模型,其中灰度模型包含了训练集中图像的统计灰度信息和测试集中病人的特异性信息.既从整体上对肝脏组织分割进行控制,又从边缘细节上加以优化.结果 对测试集中的10个数据进行测试,相较于传统方法,OE和ASD有明显的提高.结论 提出有效的灰度模型不仅提高了分割的精度,而且增强了稳定性.
作者:李春丽;张久楼;冯前进 刊期: 2012年第01期
目的 探讨ABCG1在高糖促进内皮细胞功能损伤中的作用.方法 不同浓度D-葡萄糖(5.6 mmol/L和30 mmol/L)干预血管内皮细胞24~72h,Real time PCR及Western blotting检测葡萄糖对血管内皮细胞ABCGl mRNA和蛋白水平的影响,液体闪烁仪分析细胞内胆固醇流出率,并测量葡萄糖干预后内皮细胞NOS活性;使用LXR内源性激活剂22(R)-hydroxycholesterol预先干预内皮细胞2h,再予不同浓度葡萄糖干预48 h,观察血管内皮细胞ABCG1表达、功能及内皮细胞NOS活性的改变.结果 高糖时间依赖性地抑制血管内皮细胞ABCGlmRNA和蛋白水平的表达,同时降低细胞内胆固醇向HDL流出,高糖也降低了内皮细胞eNOS活性.使用22(R)-hydroxycholesterol逆转高糖对ABCG1表达的抑制后,细胞内胆固醇流出率增加,高糖对内皮细胞eNOS活性的抑制也被部分逆转.结论 高糖损伤内皮细胞功能的机制可能与高糖降低内皮细胞ABCG1表达相关.
作者:薛嘉虹;牛小麟;魏瑾;董新;朱参战;党寅虎;宋安齐;黄惠梅 刊期: 2012年第01期
目的 构建来自华南不同慢性丙型肝炎(CHC)患者的HCV NS5A的复制子重组质粒并测序分析,探索HCV NS5A在抗病毒应答中生物学特性.方法 以能够高效复制的1b型HCV复制子质粒为骨架,构成带有MIuⅠ和BclⅠ双酶切位点的开关质粒,采用逆转录-聚合酶链反应从不同CHC患者血清中扩增获得HCV 1b亚型NS5A全长片段,克隆到pMD-18载体中,测序分析其中的PKRBD、ISDR、V3和IRRDR区域的变异情况.扩增产物中无MIu Ⅰ和Bcl Ⅰ酶切序列的,在引物中引入相关酶切序列后再扩增,双酶切后将NS5A区段置换入HCV 1b复制子骨架中.结果 成功扩增出NS5A全长片段并克隆测序,将NSSA区ISDR-V3区域置换入复制子中,测序结果正确.序列比对显示应答株的ISDR和PKRBD氨基酸变异数目比无应答株高;V3和IRRDR区域存在较高氨基酸突变率.结论 成功构建包含华南HCV 1b亚型NS5A核心区域的复制子插入式重组质粒,为研究HCV NS5A生物学特性、干扰素抵抗的机制以及难治性CHC患者的个体化抗病毒治疗分析奠定了基础.
作者:李京涛;周斌;周元平;曾艳丽;李威;王俊洁;张健;张浩;刘叔文 刊期: 2012年第01期
目的 探讨不同压力CO2气腹对大鼠肾功能的影响,为临床上改善移植后肾功能提供依据.方法 选用SD大鼠120只,建立气腹模型,按不同CO2气腹压和不同的CO2气腹作用时间分为0.67 kPa 30 min组、0.67 kPa 60 min组、0.67 kPa 120 min组;1.33 kPa 30 min组、1.33 kPa 60 min组、1.33 kPa 120 min组;2.0 kPa 30 min组、2.0 kPa 60 min组以及2.0 kPa 120 min组,同时设立对照组,各组术后检测血尿素氮、血肌酐、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平.结果 随着手术时间的延长以及气腹压力的增加,血肌酐,血尿素氮及尿NAG均逐渐升高,各组差异有统计学意义(P<o.05).结论 随着手术时间延长及气腹压力的增加,肾功能损害逐渐加重.提示临床上实施后腹腔镜活体供肾切取术时应尽量缩短手术时间,降低气腹压力.
作者:徐战平;蒲小勇;杨浣情;郑祥光;刘久敏 刊期: 2012年第01期
目的 分析体外冲击波碎石术(ESWL)治疗下尿路结石的术后并发症,探讨影响术后并发症的可能因素.方法 回顾性分析83例下尿路结石患者的年龄、身高、体质量、体质量指数、结石特征、冲击次数和冲击能量与术后并发症之间的关系.结果 83例下尿路结石行ESWL治疗后,72.3% (60例)患者出现肉眼血尿,27.7%(23例)出现疼痛,25.3%(21例)出现疼痛并肉眼血尿,所有患者均未出现术后恶心、呕吐,皮肤红斑,肠胀气及消化道出血等并发症;术后肉眼血尿组、术后疼痛组、术后疼痛并肉眼血尿组结石长度、结石宽度、冲击次数分别高于无并发症组,两组间有明显的统计学差异(P<0.01或P<0.05),术后肉眼血尿组患者身高明显低于无并发症组,有明显的统计学差异(P<0.05).结论 ESWL治疗下尿路结石术后常见并发症为血尿及疼痛,患者身高、结石长度、结石宽度及冲击次数是影响术后并发症发生的重要因素.
作者:周其赵;刘存东;钟伟枫;刘成山 刊期: 2012年第01期
目的 提出一种改进的Demons非刚性配准算法,验证算法的有效性,并将其应用于图像引导放射治疗(image-guided radiotherapy,IGRT)中治疗图像和计划图像的配准.方法 基于Brox等提出的梯度恒定假设和Malis的高效二阶小化算法的思想将图像灰度梯度场的相似性加入原始的能量函数中,推导出更新变形场的公式.利用有限内存的BFGS算法优化能量函数,自动确定迭代次数.分别利用模拟形变图像、变形体模图像和肝癌病人的临床CT图像验证改进算法的配准精度.结果 改进的Demons变形配准算法与原始的“Additive Demons”算法相比,配准精度更高,收敛速度更快.结论 在放射治疗的不同分次扫描过程中,因实际扫描条件的影响,两幅待配准图像像素灰度值范围不同的情况下,改进的Demons算法能够更好地实现快速精确的配准.
作者:周露;甄鑫;卢文婷;窦建洪;周凌宏 刊期: 2012年第01期
目的 探讨常压高浓度氧暴露对N9小胶质细胞功能的影响.方法 体外培养N9小胶质细胞,分别在900 ml/L高浓度氧中暴露2、6、12、16、24、48 h后(1)流式细胞术检测细胞存活率及凋亡率;(2)DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)含量的变化;(3)RT-PCR检测Toll样受体4(TLR4)mRNA表达变化;(4)ELISA检测N9细胞培养上清中IL-1β和TNF-α的含量;(5)免疫荧光化学染色检测TLR4蛋白的表达变化.结果 流式细胞术结果示,细胞凋亡率在高氧暴露12h后明显高于空气对照组(P<0.05),16h达高峰(P<0.01);高氧暴露2h后,细胞内ROS含量明显增加,呈一定时间依赖性;TLR4 mRNA及蛋白表达水平明显高于空气对照组(P<0.05);高氧暴露后细胞上清中TNF-α及IL-1β含量随暴露时间延长而增加,均在6h开始升高,12~16 h达高峰(P<0.05),IL-1β增高较TNF-α更为明显.结论 高氧暴露后N9小胶质细胞TLR4通路激活,产生大量神经毒性因子(ROS、IL-1β及TNF-α),细胞凋亡增加.
作者:蒋朴;徐颖;胡良安;刘杨;邓世雄 刊期: 2012年第01期
目的 研究携带结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)、人单纯疱疹病毒一胸苷激酶(HSV-TK)双基因的重组沙门菌瘤内注射抗小鼠黑色素瘤的抑瘤效应.方法 构建重组沙门菌SL7207/PCMV-mtHSP70-IRES-TK,建立小鼠黑色素瘤动物模型,瘤内注射重组沙门菌观察其抑瘤效应、荷瘤鼠的生存期并进行安全性评估.结果 瘤内注射重组沙门菌,实验组抑瘤率显著高于对照组,延长荷瘤鼠生存期,重组菌治疗后荷瘤小鼠的生存状态良好,无腹泻,治疗期间体质量无明显改变.结论 减毒沙门菌携带的mtHSP70/HSV-TK双基因真核共表达质粒瘤内注射对B16肿瘤细胞具有显著抑制作用.
作者:曾曙光;刘启才;王素文;彭细毛;章锦才;张积仁 刊期: 2012年第01期
目的 探讨补肾活血方对大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达的影响,为其抗心肌纤维化提供实验依据.方法 通过血清药理学方法制备补肾活血方含药血清,与DMEM配成细胞培养液.提取大鼠心脏成纤维细胞(CFs)并传代培养,将3,~4代CFs分为4组:A组为10%含药血清培养液培养,B组为20%含药血清培养液培养,C组为不含药血清培养液培养,D组为对照组,为常规胎牛血清培养液培养.培养72 h后CCK-8检测CFs增殖,RT-PCR检测胶原基因表达,Western blotting检测胶原蛋白表达.结果 与C组、D组相比,A组、B组CFs增殖明显降低,B组较A组进一步降低(P<0.05);Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA在A、B两组表达较C、D两组明显下调(P<0.05),Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达在A、B两组明显低于C、D两组(P<0.05).结论 补肾活血方可以抑制大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达.
作者:马新英;杨明会;陈劲松;刘毅;潘从泽;樊金灼 刊期: 2012年第01期
目的 对SDF-1进行遗传改造,将其第2位氨基酸由脯氨酸(P)突变为甘氨酸(G),且缺失其C-端α螺旋结构,以获得一种CXCR4特异性拮抗剂SDF- 1P2G54.方法 将PCR扩增的SDF-1突变体SDF-1p2g54的基因插入表达载体pET-30a(+),并转化BL21(DE3)菌株.IPTG诱导表达的重组蛋白SDF-1P2G54在变性条件下采用镍柱亲和层析纯化,并通过梯度稀释和超滤方法得以复性.利用趋化实验鉴定SDF-1P2G54对Jurkat细胞的趋化活性及对SDF-1趋化活性的抑制效应,流式细胞仪检测SDF-1P2G54诱导MOLT4细胞钙内流及细胞表面CXCR4内在化的能力.结果 SDF-1P2G54完全丧失激活CXCR4、趋化Jurkat细胞跨膜迁移和诱导MOLT4细胞钙内流的能力,却保持了与CXCR4的高亲和性,能有效抑制野生型SDF-1对Jurkat的趋化效应、诱导MOLT4细胞表面CXCR4的快速内在化.结论 SDF-1P2G54是一种新型的CXCR4特异性拮抗剂,具有开发成抑制HIV-1感染和癌细胞转移等重大疾病特效药物的潜在应用价值.
作者:杨飞华;龙北国;谭毅;龚雅;马伟峰 刊期: 2012年第01期
目的 探讨IL-17对博来霉素诱导肺纤维化形成中的肺成纤维细胞增殖、转化、胶原合成作用.方法 用5 mg/kg博来霉素气管内注入的方法诱导肺纤维化形成,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL- 17/IL- 17RmRNA在肺纤维化形成中表达的变化,选择表达IL-17RmRNA佳时间的肺成纤维细胞进行原代培养、鉴定.使用四氮唑蓝比色法检测不同浓度的IL-17对肺成纤维细胞的增殖.使用RT-PCR和Western Blotting检测肌成纤维细胞标志物α-SMA以及Ⅰ和Ⅲ型胶原的表达.结果 (1)IL-17/IL-17RmRNA在肺纤维化形成中明显升高,在第14天表达高.(2)不同浓度IL-17能够促进肺成纤维细胞的增殖,佳浓度为50 ng/ml.(3)IL-17促进肺成纤维细胞表达α-SMA增加.(4)IL-17促进肺成纤维细胞I和III型胶原合成.结论 IL-17具有促进小鼠肺纤维化形成中肺成纤维细胞增殖、转化和胶原的合成作用,可能在肺纤维化形成中起重要作用.
作者:董昭兴;康庆鑫;雷雯;钟红;邰文琳;王殿华 刊期: 2012年第01期
目的 探讨25羟维生素D3对人正常气道上皮维生素D受体表达及分布的影响.方法 选取正常人支气管上皮细胞系16HBE为研究对象,MTT法分别检测不同浓度25羟维生素D3对细胞活力的影响;实验组分为对照组和不同浓度25羟维生素D3处理组.各处理因素作用细胞时间为24 h.用实时荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光法观测各处理组维生素D受体(VDR)mRNA及蛋白表达、分布的情况.结果 与对照组相比,各个不同处理浓度的25羟维生素D3对VDR的表达量及分布均无显著增加(P>0.05).结论 25羟维生素D3对支气管上皮细胞的影响可能并不依赖于VDR的表达及转位.
作者:董航明;赵海金;刘来昱;梁振宇;吕燕华;蔡绍曦 刊期: 2012年第01期
目的 优化处方,以期得到疗效确切,低毒的抗肝纤维化复方.方法 运用硫代乙酰胺诱导大鼠肝纤维化模型,采用均匀设计法(二因素五水平)分组实验,并设有正常组,模型组,以大鼠肝组织羟脯氨酸含量作为检测指标,经均匀设计软件3.0处理分析得佳处方;运用相同方法诱导大鼠肝纤维化模型,设正常组,模型组,秋水仙碱组,佳处方组,通过观察肝组织羟脯氨酸含量,大鼠血清HA,AL,AST,ALB含量以及肝组织纤维化变化,对于佳处方的疗效进行比较和验证实验.结果 经实验筛选的佳处方为甘草甜素70 mg/kg,苦参碱70 mg/kg;验证实验中,佳处方组抗肝纤维化作用显著(P<0.05),与秋水仙碱组无显著性差异(P>0.05).结论 均匀设计在处方优化中作用显著,明显减少实验次数,结果可靠;苦参碱与甘草甜素合用抗肝纤维化作用明显.
作者:黄亮;漆林艳;陈志良;李亦蕾;文志勇 刊期: 2012年第01期
目的 构建HNF6的慢病毒载体pLeno-DCE-HA-HNF6,建立稳定表达HNF6的大肠癌细胞系并观察HNF6对大肠癌细胞系SW620的侵袭转移能力的影响.方法 构建HNF6慢病毒载体pLeno-DCE-HA-HNF6,感染293T细胞,收集上清测定病毒滴度;病毒颗粒转染SW620细胞,通过荧光显微镜及流式细胞仪观察转染效率;定量PCR(qPCR)及Western blotting检测HNF6的表达;应用Transwell和划痕试验观察SW620细胞侵袭转移能力的变化.结果 通过PCR及酶切鉴定成功构建pLeno-DCE-HA-HNF6载体;包装并得到高滴度的病毒颗粒;转染SW620后,qPCR及Western blotting检测到HNF6表达明显升高;HNF6导致SW620明显的细胞形态变化,Transwell及划痕试验证明HNF6使SW620细胞迁移能力降低.结论 成功构建并包装得到HNF6的慢病毒颗粒,建立稳定表达HNF6的大肠癌细胞系SW620-HNF6,证明过表达HNF6后可以抑制大肠癌侵袭转移能力.
作者:耿海涛;肖乾;徐邓勇;胡立锋;丁克峰 刊期: 2012年第01期
目的 应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默黑色素瘤细胞株UACC903巢蛋白(nestin)的表达,研究其对黑色素瘤细胞转移能力的影响.方法 以人nestin mRNA编码序列作为干扰靶点,以慢病毒基因PLL3.7作为质粒载体,构建靶向人nestin的shRNA表达质粒,另构建不针对任何已知mRNA的阴性对照shRNA表达质粒,分别感染UACC903细胞并流式分选获得高纯度的nestin干扰或对照组细胞.应用RT-PCR、免疫荧光及Western blotting检测不同组别nestin表达的变化.分别用Transwell侵袭试验检测跨膜细胞的数量评估各组黑色素瘤细胞的侵袭能力,划痕法检测迁移能力改变.光镜观察各组细胞形态变化,免疫荧光检测E-cadherin、N-cadherin和β-catenin在不同组别的表达变化.结果 成功构建nestin shRNA慢病毒载体nestin-RNAi-LV.RT-PCR及免疫荧光结果显示干扰组UACC903细胞nestin mRNA及蛋白表达水平较对照组显著降低.nestin下调的UACC903细胞黏附、侵袭及迁移能力下降(P<0.05).结论 慢病毒介导的shRNA能有效地静默食管癌细胞nestin基因的表达,能抑制黑色素瘤细胞UACC903迁移.
作者:杨旭辉;夏添;余伟华;卢晓芳;项鹏;何峰 刊期: 2012年第01期
目的 研究T2DM患者头发中mtDNA异质性的规律.方法 选择T2DM高突变位点的mtDNA编码区和控制区2片段进行PCR扩增,以DHPLC技术分析黑、白头发mtDNA目标片段在T2DM组和对照组异质性差异.结果 在20~45岁对照组、20~45岁T2DM组、45~70岁对照组和45~70岁T2DM组4个研究对象群,黑头发的mtDNA异质性分别为:3%,10%,9%,17%,白头发的mtDNA异质性分别为:9%,20%,21%,40%.其中同年龄T2DM组和对照组比较:20~45岁、45~70岁2个年龄组T2DM患者黑头发mtDNA异质性均高于同年龄对照组,45~70岁T2DM组白头发mtDNA异质性也高于同年龄对照组患者;不同年龄的T2DM组以及不同年龄对照组之间比较:45~70岁对照组白头发mtDNA异质性高于20~45岁对照组、45~70岁T2DM组黑头发mtDNA异质性明显高于20~45岁T2DM患者(P<0.05);组内比较:白头发mtDNA异质性在45~70岁对照者和2个年龄组的T2DM患者组内内明显高于黑头发(P<0.05).结论 T2DM患者mtDNA异质性增高,年龄越大程度越高.
作者:谭凤明;程喜平;陈盛强;陈智超;王延平;沈岩松 刊期: 2012年第01期