曾曙光;刘启才;王素文;彭细毛;章锦才;张积仁
目的 使用两种不同方法提取人血清,研究对比得出快速、廉价、安全而有效的富含生长因子的人血清提取方法,以促进其在临床上的应用.方法 分离并培养人真皮成纤维细胞.分别使用全血凝固后离心法和Anitua法提取人血清.测定各血清样本中PDGF-AB及TGF-β1的含量.分别使用含有10%胎牛血清(FBS)和10%人血清(HS)的DMEM培养基培养成纤维细胞,比较不同培养基对细胞形态、活力、增殖的影响.结果 各组细胞形态正常,增殖活力良好.B组(全血凝固后离心组)细胞的数量及活力均明显高于其他各组(P<0.05),且该法获得的血清中生长因子含量高(P<0.05),与生长曲线及MTT曲线所示结果一致.结论 全血凝固后离心法提取的HS内所含生长因子浓度高,对细胞生长促进作用大,提取方法简单、廉价、有效.
作者:鲁华;鲁峰;刘戈;高建华 刊期: 2012年第01期
目的 观察部分肝切除联合D-氨基半乳糖(D-GaIN)、脂多糖对肝损伤后再生修复的影响.方法 40只BALB/c雄性小鼠随机均分为2组.D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组:腹腔注射D-GaIN(500 mg/kg),1h后注射脂多糖(50 μg/kg);肝脏部分切除组:生理盐水代替D-GaIN和脂多糖,同样方法注射;两组小鼠在第2次腹腔注射24 h后行肝脏1/3切除.观察两组小鼠术后肝脏体质量比值、肝再生率、肝细胞损伤、增殖与肝卵圆干细胞增生.结果 肝脏部分切除组术后第9天肝大体结构基本恢复正常,肝再生率为(22.26±105.93)%,而D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组第14天肝质量较术前仍偏小,肝再生率为(9.49±32.55)%,P<0.001.D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组术后肝窦和中央静脉充血,库普弗细胞增多;肝脏部分切除组术后第7天有明显肝细胞增殖,D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组肝细胞增殖甚少.D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组肝脏术后第3天开始出现肝卵圆干细胞增生,从汇管区开始向肝小叶内延伸以修复损伤.结论 D-GaIN联合脂多糖可部分抑制肝部分切除后小鼠成熟肝细胞增殖,D-GaIN/脂多糖/肝部分切除可诱导肝卵圆干细胞增生.
作者:李劲;张健;刘光泽;刘犇;孔祥平 刊期: 2012年第01期
目的 探讨补肾活血方对大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达的影响,为其抗心肌纤维化提供实验依据.方法 通过血清药理学方法制备补肾活血方含药血清,与DMEM配成细胞培养液.提取大鼠心脏成纤维细胞(CFs)并传代培养,将3,~4代CFs分为4组:A组为10%含药血清培养液培养,B组为20%含药血清培养液培养,C组为不含药血清培养液培养,D组为对照组,为常规胎牛血清培养液培养.培养72 h后CCK-8检测CFs增殖,RT-PCR检测胶原基因表达,Western blotting检测胶原蛋白表达.结果 与C组、D组相比,A组、B组CFs增殖明显降低,B组较A组进一步降低(P<0.05);Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA在A、B两组表达较C、D两组明显下调(P<0.05),Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达在A、B两组明显低于C、D两组(P<0.05).结论 补肾活血方可以抑制大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达.
作者:马新英;杨明会;陈劲松;刘毅;潘从泽;樊金灼 刊期: 2012年第01期
目的 观察安神方颗粒的抗焦虑作用,并研究其机制.方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为6组(10只/组):正常对照组、模型组、地西泮组和安神方高、中、低剂量组.采用慢性情绪应激的方法建立焦虑大鼠模型,同时给予药物干预,以高架十字迷宫试验对其行为学进行评价.行为学观察后,麻醉处死正常对照组、模型组、地西泮组及安神方中剂量组大鼠,冰台上分离大鼠海马,冷冻离心后分离上清液,高效液相色谱法测定谷氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)含量;用免疫组织化学法测定γ-氨基丁酸受体(GABAAR)、N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)的表达.结果 与正常对照组比较,模型组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率明显减少;地西泮组与安神方高、中、低剂量组大鼠进入开臂的时间百分率、次数百分率较模型组显著上升,以安神方中剂量组上升明显;模型组大鼠海马组织中谷氨酸的表达量较正常对照组显著上升,GABA的表达量明显下降;地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,大鼠海马组织中谷氨酸的表达量显著降低和GABA的表达量明显提高,安神方中剂量组与地西泮组比较差异不显著;模型组与正常对照组比较,GABAAR免疫阳性细胞表达减少,NMDAR1免疫阳性细胞表达表达增多;地西泮组和安神方中剂量组同模型组比较,NMDAR1的表达水平降低,GABAAR的表达水平提高,安神方中剂量组与地西泮组比较无明显差异.结论 安神方具有抗焦虑的作用,可以提高中枢GABA的含量,增强GABAAR的表达,降低谷氨酸含量,减少NMDAR1的表达.
作者:张雪;黄仕营;张燊;丁秀芳;陈宝田 刊期: 2012年第01期
目的 了解1例肺栓塞患者及其家系成员发生蛋白C缺陷症的分子发病学机制.方法 收集先证者及其家系成员的枸橼酸钠抗凝血,采用发色底物法检测PC活性(PC∶A)、蛋白S活性(FPS∶ A)和抗凝血酶活性(AT:A),采用ELISA方法检测PC抗原(PC∶Ag)水平.采用PCR方法对先证者PC基因所有9个外显子及其侧翼序列进行扩增、测序,发现突变后,对先证者家系成员的PC基因有关外显子片段进行PCR扩增和测序.结果 先证者及其父亲、母亲和妹妹均为Ⅱ型PC缺陷症患者.PC基因测序结果显示先证者的PC基因分别出现了位于3号外显子第5540位碱基的G→A的杂合突变和位于第7号外显子第10230位碱基C→T的杂合突变,导致PC E29K和R147W双杂合突变.先证者父亲携带PC E29K杂合突变,而先证者母亲和妹妹均为PCR147W杂合突变的携带者.结论 先证者为PC E29K和R147W基因复合杂合突变携带者,且这两种突变分别遗传自其父母.其中,PC E29K错义点突变为目前国际上尚未见报道的新突变,而PC R147W是一种已报道的常见于遗传性易栓症患者的可导致Ⅱ型PC缺乏的错义点突变.
作者:叶絮;刘晓力;冯莹;丁秋兰;周旭红;王学锋 刊期: 2012年第01期
目的 探讨不同压力CO2气腹对大鼠肾功能的影响,为临床上改善移植后肾功能提供依据.方法 选用SD大鼠120只,建立气腹模型,按不同CO2气腹压和不同的CO2气腹作用时间分为0.67 kPa 30 min组、0.67 kPa 60 min组、0.67 kPa 120 min组;1.33 kPa 30 min组、1.33 kPa 60 min组、1.33 kPa 120 min组;2.0 kPa 30 min组、2.0 kPa 60 min组以及2.0 kPa 120 min组,同时设立对照组,各组术后检测血尿素氮、血肌酐、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平.结果 随着手术时间的延长以及气腹压力的增加,血肌酐,血尿素氮及尿NAG均逐渐升高,各组差异有统计学意义(P<o.05).结论 随着手术时间延长及气腹压力的增加,肾功能损害逐渐加重.提示临床上实施后腹腔镜活体供肾切取术时应尽量缩短手术时间,降低气腹压力.
作者:徐战平;蒲小勇;杨浣情;郑祥光;刘久敏 刊期: 2012年第01期
目的 探讨25羟维生素D3对人正常气道上皮维生素D受体表达及分布的影响.方法 选取正常人支气管上皮细胞系16HBE为研究对象,MTT法分别检测不同浓度25羟维生素D3对细胞活力的影响;实验组分为对照组和不同浓度25羟维生素D3处理组.各处理因素作用细胞时间为24 h.用实时荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光法观测各处理组维生素D受体(VDR)mRNA及蛋白表达、分布的情况.结果 与对照组相比,各个不同处理浓度的25羟维生素D3对VDR的表达量及分布均无显著增加(P>0.05).结论 25羟维生素D3对支气管上皮细胞的影响可能并不依赖于VDR的表达及转位.
作者:董航明;赵海金;刘来昱;梁振宇;吕燕华;蔡绍曦 刊期: 2012年第01期
目的 探讨多层CT在胰腺黏液性囊性肿瘤和浆液性囊性腺瘤诊断和鉴别诊断中的价值.方法 回顾性分析于2003年5月~2009年12月在我院经手术病理证实的黏液性囊性肿瘤患者(19例)和胰腺浆液性囊腺瘤(13例)的多层CT图像.图像分析包括肿瘤位置、形态、囊腔直径、囊壁、分隔、钙化、实性成份、胰腺萎缩、主胰管扩张、边界情况等.结果 胰腺黏液性囊性肿瘤与胰腺浆液性囊腺瘤囊腔直径大小比较有统计学意义(P=0.009);囊腔直径大于2 cm多见于黏液性囊性肿瘤,与浆液性囊腺瘤之间差异统计学意义(P=0.01);肿瘤实性成分多见于浆液性囊腺瘤,与粘液性囊性肿瘤比较有统计学意义(P=0.029).结论 多层CT在胰腺黏液生囊性肿瘤和浆液性囊性腺瘤诊断和鉴别诊断中具有重要的临床价值.
作者:鞠志国;鲁宏;朱晖;李清海;章士正 刊期: 2012年第01期
目的 探讨ABCG1在高糖促进内皮细胞功能损伤中的作用.方法 不同浓度D-葡萄糖(5.6 mmol/L和30 mmol/L)干预血管内皮细胞24~72h,Real time PCR及Western blotting检测葡萄糖对血管内皮细胞ABCGl mRNA和蛋白水平的影响,液体闪烁仪分析细胞内胆固醇流出率,并测量葡萄糖干预后内皮细胞NOS活性;使用LXR内源性激活剂22(R)-hydroxycholesterol预先干预内皮细胞2h,再予不同浓度葡萄糖干预48 h,观察血管内皮细胞ABCG1表达、功能及内皮细胞NOS活性的改变.结果 高糖时间依赖性地抑制血管内皮细胞ABCGlmRNA和蛋白水平的表达,同时降低细胞内胆固醇向HDL流出,高糖也降低了内皮细胞eNOS活性.使用22(R)-hydroxycholesterol逆转高糖对ABCG1表达的抑制后,细胞内胆固醇流出率增加,高糖对内皮细胞eNOS活性的抑制也被部分逆转.结论 高糖损伤内皮细胞功能的机制可能与高糖降低内皮细胞ABCG1表达相关.
作者:薛嘉虹;牛小麟;魏瑾;董新;朱参战;党寅虎;宋安齐;黄惠梅 刊期: 2012年第01期
目的 观察奇壬醇对牛Ⅱ型胶原特异性淋巴细胞体内和体外的免疫调节作用,探讨奇壬醇对抗原特异性淋巴细胞的免疫抑制作用机制.方法 将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、奇壬醇组和泼尼松龙组.除对照组外,均复制胶原诱导关节炎大鼠模型,造模当天开始给药.造模30 d后取脾脏和引流淋巴结,制备单细胞悬液,经体外培养48 h后,ELISA法检测培养上清中干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)、IL-4、肿瘤坏死因子-α(TNF-t)含量;在Ⅱ型胶原诱导下,取正常大鼠淋巴结细胞、脾细胞与不同浓度的奇壬醇共同培养,检测胶原诱导的淋巴细胞增殖及凋亡.结果与模型组相比,奇壬醇组脾细胞培养上清中IFN-γ和TNF-α含量降低(P<0.05,P<0.01),IL-10和IL-4水平升高(P<0.05,P<0.01);淋巴结细胞培养上清中IFN-γ和TNF-α含量降低(P<0.05,P<0.001),IL-10和IL-4水平升高(P<0.05,P<0.001);体外实验中,奇壬醇抑制Ⅱ型胶原特异性淋巴结细胞增殖,促进Ⅱ型胶原特异性淋巴结细胞和脾细胞凋亡,均呈剂量依赖关系.结论 奇壬醇可通过抑制Ⅱ型胶原特异性淋巴细胞分泌促炎因子,促进胶原特异性淋巴细胞分泌抗炎因子,抑制胶原特异性淋巴细胞增殖和促进其凋亡,以多条途径发挥免疫抑制作用.
作者:卢月;肖娟;吴再旺;王喆明;付宏征;陈英玉;钱瑞琴 刊期: 2012年第01期
目的 观察汉防己甲素(Tet)对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞(tenon's capsule fibroblasts,TCFS)中bax、bcl-2、转化生长因子-β2(TGF-β2)mRNA表达的影响,探讨其可能的作用机制.方法 将体外培养的第3代TCFS分别置于浓度为10-5 mol/LTet的培养液和1640培养液中培养48 h,采用实时荧光定量PCR检测细胞中bax、bcl-2和TGF-β2 mRNA的表达变化.结果 同对照组比较,Tet实验组中bax mRNA的表达量明显升高,bcl-2、TGF-β2 mRNA的表达量显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 一定浓度的汉防己甲素可以通过降低bcl-2、TGF-β2 mRNA的表达量,同时提高bax mRNA的表达量来抑制TCFS的增殖,并可诱导其凋亡,可能成为一种潜在的抗青光眼滤过瘢痕药物.
作者:李岱;孙明;李青春;杨芳;林少春;吴开力 刊期: 2012年第01期
目的 探讨一个家族性心脏传导疾病并房颤家系的临床特征及其有效的治疗方案.方法 对先证患者所在家系的家族成员进行常规临床体检和心电图、超声心动图、动态心电图、X线胸片、生化、自身抗体等检查.同时对先证者行双腔起搏器安置术联合口服胺碘酮治疗3个月,期间监测患者甲功及肺部情况,治疗完成后随访3个月,并对相关文献进行回顾.结果 家系中所有成员均无器质性心脏病的临床证据.先证者反复头晕、胸闷,以活动后较明显,静息心电图表现为心房纤颤伴高度房室传导阻滞;其叔叔于30岁时因晕厥发现“心房纤颤,三度房室传导阻滞”而安置起搏器治疗;其爷爷死于“心脏病”(具体不详);其他家族成员心电图检查未见明显异常,既往亦未发生明显的心脏事件(晕厥、猝死).患者经治疗后症状明显好转,心电图及动态心电图均未见心房纤颤,起搏器工作良好.结论 心脏传导性疾病并心房纤颤可呈家族聚集性发病,双腔起搏器联合胺碘酮治疗可作为家族性心脏传导疾病并心房纤颤患者安全有效的治疗措施.
作者:刘福强;李岩;谢勇;赵冬华;萧钟波;周桂芳;彭健 刊期: 2012年第01期
目的 分析广州地区男男性接触者(men who have sex with men,MSM)人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)检测的相关情况,为开展艾滋病防治提供依据.方法 检测2010年1月~2010年12月参加艾滋病自愿咨询检测的MSM的抗-HIV,并采用x2检验分析其阳性率在性角色、文化程度、安全套使用、有无合并梅毒感染等方面的差异.结果 共调查1526名MSM,确认HIV感染的人数87例、阳性率为5.70%.近3个月内接受过HIV检查的有占27.36%(406/1484),知道自己的HIV检查结果的占83.00%(337/406),其阳性率达7.12%.MSM主动肛交者的抗-HIV阳性率为3.54%、被动肛交者为7.14%、两者兼有为6.70%,在性角色方面抗-HIV阳性率差异有统计学意义(x2=6.450,P=0.040).已婚的MSM其抗- HIV阳性率为9.45%,高于未婚的4.92%与离异的4.17%,其差异有统计学意义(x2=7.184,P=0.028).文化程度越低,抗- HIV阳性率越高,其差异有统计学意义(x2=8.90l,P=0.012).如MSM合并梅毒则其抗- HIV阳性率为21.31%,无梅毒感染者其阳性率仅为5.06%,其差异有统计学意义(x2=25.770,P<0.001).近3个月每次均使用安全套与近1次使用安全套的MSM其抗- HIV阳性率虽然高于未使用者,但其差异无统计学意义(P>0.05).结论 广州市MSM的抗- HIV阳性率较高,不安全性行为较高,特别是肛交时被动方MSM年纪轻,安全套使用率低,HIV感染率高,自我保护能力弱,成为MSM内HIV传播的高危人群.
作者:牟成惠;王强;钟逸雯;姜宜海;何宗忠 刊期: 2012年第01期
目的 探讨全胸腔镜下非小细胞肺癌根治性手术的治疗体会.方法 2008年10月~2010年12月共施行全胸腔镜下肺叶切除+纵膈淋巴结清扫治疗非小细胞肺癌患者61例,其中通过全胸腔镜下传统式手术30例,全胸腔镜下单向式手术31例.本组病例全部经胸部1个观察孔和2个操作孔完成.传统式手术顺序同开放手术,单向式手术顺序由浅入深、渐次推进,后处理肺裂.结果 全部手术过程顺利,未发生严重并发症及围手术期死亡,无中转开胸.传统术式组与单向术式组两组间手术时间、出血量、摘除淋巴结数、术后带管时间及术后住院时间均无统计学差异(P>0.05).结论 全胸腔镜下行非小细胞肺癌根治术是安全、可靠的,单向术式有其优越性.
作者:刘德纲;蔡开灿;赵意;吴华;蔡瑞君;熊刚 刊期: 2012年第01期
目的 研究携带结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)、人单纯疱疹病毒一胸苷激酶(HSV-TK)双基因的重组沙门菌瘤内注射抗小鼠黑色素瘤的抑瘤效应.方法 构建重组沙门菌SL7207/PCMV-mtHSP70-IRES-TK,建立小鼠黑色素瘤动物模型,瘤内注射重组沙门菌观察其抑瘤效应、荷瘤鼠的生存期并进行安全性评估.结果 瘤内注射重组沙门菌,实验组抑瘤率显著高于对照组,延长荷瘤鼠生存期,重组菌治疗后荷瘤小鼠的生存状态良好,无腹泻,治疗期间体质量无明显改变.结论 减毒沙门菌携带的mtHSP70/HSV-TK双基因真核共表达质粒瘤内注射对B16肿瘤细胞具有显著抑制作用.
作者:曾曙光;刘启才;王素文;彭细毛;章锦才;张积仁 刊期: 2012年第01期
目的 建立应用高效液相色谱—质谱法(LC/MS)检测泌尿系结石中三聚氰胺含量的方法.方法 应用高效液相色谱—质谱法对17例因怀疑食用三聚氰胺污染奶粉在婴幼儿形成的泌尿系结石以及4例既往保存的成人尿酸结石进行三聚氰胺含量分析.采用正离子模式的电喷雾质谱检测.三聚氰胺低检出限为0.1 mg/kg.结果 4例已知成人尿酸结石标本中均未检测到三聚氰胺,17例疑似标本中应用液相色谱—质谱联用仪分析后共4例标本中检测出三聚氰胺,含量浓度分别为0.8、0.5、1.2和64 mg/kg.结论 高效液相色谱—质谱法准确度高、稳定性好,可以有效检测泌尿系结石中三聚氰胺含量,为进一步治疗和随访提供了帮助,但含三聚氰胺奶粉对患儿的长期影响还需进一步随访研究.
作者:吴文起;王露萍;欧莉莉;梁叶萍;麦赞林;李舒珏;单炽昌;袁坚;曾国华 刊期: 2012年第01期
目的 探讨胸部炎性肌纤维母细胞瘤(IMT)的病因、临床诊断、治疗方法及预后,以进一步提高对本病的认识.方法 回顾性分析2005年4月~2011年7月我院收治的12例胸部炎性肌纤维母细胞瘤患者的临床资料,其中男性9例,女性3例;年龄36~81岁,平均年龄60.08岁.5例行肺叶切除+纵膈淋巴结清扫术,2例行肺叶切除术,肺叶局部切除术、纵隔肿物切除术及肋骨切除术各1例,行保守治疗2例.结果 手术患者术后均平稳恢复,病理检查均未发现淋巴结转移;所有患者均随访,随访时间2月~5年,无肿瘤复发或转移征象.保守治疗患者1例随访3月肿瘤无明显变化,另l例患者病变基本消失.结论 胸部炎性肌纤维母细胞瘤是少见的良性肿瘤,但少数具有复发倾向及恶变潜能,明确诊断主要依靠病理检查结果.治疗以手术切除为主,可辅以其它治疗.所有IMT患者治疗后应密切随访.
作者:张竞;王云喜;初向阳;刘毅 刊期: 2012年第01期
目的 评估促红细胞生成素(EPO)预处理对重症急性胰腺炎促炎抗炎失衡的干预效果及探讨其可能机制.方法 健康雄性SD大鼠随机分成3组:假手术(SO)组、重症急性胰腺炎(SAP)组和EPO预处理组,每组各30只.SAP组和EPO组建立逆行胆胰管注射3.5%牛黄胆酸钠法(1 ml/kg) SAP模型,EPO组建模前1h予静脉注射促红细胞生成素(3000 U/kg,1000 U/ml),而SO组和SAP组予静脉注射等体积生理盐水.术后第1、3、6、12、24小时取血清和胰腺标本.检测血清淀粉酶活性;ELISA法检测血清IL-18水平,放射免疫法检测血清IL-10水平.免疫荧光法检测胰腺组织核因子-kappaB转运激活情况;胰腺组织石蜡切片HE染色,进行胰腺病理学评分.结果 与SAP组相应时点比较,EPO组核因子-kappaB激活率(除12h外)显著降低(P<0.05);血清淀粉酶活性显著降低,3、6、12 h(P<0.05);血清IL-18水平显著降低,3、6、24 h(P<0.05),血清L-I0水平无明显降低;病理总评分降低,6、12、24 h(P<0.05).结论 EPO预处理可通过抑制核因子-kappaB激活,减少促炎细胞因子产生,而对抗炎细胞因子影响不明显,进而调控促炎-抗炎失衡状态,改善SAP病情.
作者:李接兴;罗羽宏;李震东;刘勇;刘朝祥 刊期: 2012年第01期
目的 探讨IL-17对博来霉素诱导肺纤维化形成中的肺成纤维细胞增殖、转化、胶原合成作用.方法 用5 mg/kg博来霉素气管内注入的方法诱导肺纤维化形成,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL- 17/IL- 17RmRNA在肺纤维化形成中表达的变化,选择表达IL-17RmRNA佳时间的肺成纤维细胞进行原代培养、鉴定.使用四氮唑蓝比色法检测不同浓度的IL-17对肺成纤维细胞的增殖.使用RT-PCR和Western Blotting检测肌成纤维细胞标志物α-SMA以及Ⅰ和Ⅲ型胶原的表达.结果 (1)IL-17/IL-17RmRNA在肺纤维化形成中明显升高,在第14天表达高.(2)不同浓度IL-17能够促进肺成纤维细胞的增殖,佳浓度为50 ng/ml.(3)IL-17促进肺成纤维细胞表达α-SMA增加.(4)IL-17促进肺成纤维细胞I和III型胶原合成.结论 IL-17具有促进小鼠肺纤维化形成中肺成纤维细胞增殖、转化和胶原的合成作用,可能在肺纤维化形成中起重要作用.
作者:董昭兴;康庆鑫;雷雯;钟红;邰文琳;王殿华 刊期: 2012年第01期
目的 探讨常压高浓度氧暴露对N9小胶质细胞功能的影响.方法 体外培养N9小胶质细胞,分别在900 ml/L高浓度氧中暴露2、6、12、16、24、48 h后(1)流式细胞术检测细胞存活率及凋亡率;(2)DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)含量的变化;(3)RT-PCR检测Toll样受体4(TLR4)mRNA表达变化;(4)ELISA检测N9细胞培养上清中IL-1β和TNF-α的含量;(5)免疫荧光化学染色检测TLR4蛋白的表达变化.结果 流式细胞术结果示,细胞凋亡率在高氧暴露12h后明显高于空气对照组(P<0.05),16h达高峰(P<0.01);高氧暴露2h后,细胞内ROS含量明显增加,呈一定时间依赖性;TLR4 mRNA及蛋白表达水平明显高于空气对照组(P<0.05);高氧暴露后细胞上清中TNF-α及IL-1β含量随暴露时间延长而增加,均在6h开始升高,12~16 h达高峰(P<0.05),IL-1β增高较TNF-α更为明显.结论 高氧暴露后N9小胶质细胞TLR4通路激活,产生大量神经毒性因子(ROS、IL-1β及TNF-α),细胞凋亡增加.
作者:蒋朴;徐颖;胡良安;刘杨;邓世雄 刊期: 2012年第01期