牟成惠；王强；钟逸雯；姜宜海；何宗忠
目的 应用慢病毒介导的RNA干扰技术,有效沉默黑色素瘤细胞株UACC903巢蛋白(nestin)的表达,研究其对黑色素瘤细胞转移能力的影响.方法 以人nestin mRNA编码序列作为干扰靶点,以慢病毒基因PLL3.7作为质粒载体,构建靶向人nestin的shRNA表达质粒,另构建不针对任何已知mRNA的阴性对照shRNA表达质粒,分别感染UACC903细胞并流式分选获得高纯度的nestin干扰或对照组细胞.应用RT-PCR、免疫荧光及Western blotting检测不同组别nestin表达的变化.分别用Transwell侵袭试验检测跨膜细胞的数量评估各组黑色素瘤细胞的侵袭能力,划痕法检测迁移能力改变.光镜观察各组细胞形态变化,免疫荧光检测E-cadherin、N-cadherin和β-catenin在不同组别的表达变化.结果 成功构建nestin shRNA慢病毒载体nestin-RNAi-LV.RT-PCR及免疫荧光结果显示干扰组UACC903细胞nestin mRNA及蛋白表达水平较对照组显著降低.nestin下调的UACC903细胞黏附、侵袭及迁移能力下降(P＜0.05).结论 慢病毒介导的shRNA能有效地静默食管癌细胞nestin基因的表达,能抑制黑色素瘤细胞UACC903迁移.
作者：杨旭辉；夏添；余伟华；卢晓芳；项鹏；何峰 刊期： 2012年第01期
目的 探讨胸部炎性肌纤维母细胞瘤(IMT)的病因、临床诊断、治疗方法及预后,以进一步提高对本病的认识.方法 回顾性分析2005年4月～2011年7月我院收治的12例胸部炎性肌纤维母细胞瘤患者的临床资料,其中男性9例,女性3例；年龄36～81岁,平均年龄60.08岁.5例行肺叶切除+纵膈淋巴结清扫术,2例行肺叶切除术,肺叶局部切除术、纵隔肿物切除术及肋骨切除术各1例,行保守治疗2例.结果 手术患者术后均平稳恢复,病理检查均未发现淋巴结转移；所有患者均随访,随访时间2月～5年,无肿瘤复发或转移征象.保守治疗患者1例随访3月肿瘤无明显变化,另l例患者病变基本消失.结论 胸部炎性肌纤维母细胞瘤是少见的良性肿瘤,但少数具有复发倾向及恶变潜能,明确诊断主要依靠病理检查结果.治疗以手术切除为主,可辅以其它治疗.所有IMT患者治疗后应密切随访.
作者：张竞；王云喜；初向阳；刘毅 刊期： 2012年第01期
目的 研究携带结核杆菌热休克蛋白70(mtHSP70)、人单纯疱疹病毒一胸苷激酶(HSV-TK)双基因的重组沙门菌瘤内注射抗小鼠黑色素瘤的抑瘤效应.方法 构建重组沙门菌SL7207/PCMV-mtHSP70-IRES-TK,建立小鼠黑色素瘤动物模型,瘤内注射重组沙门菌观察其抑瘤效应、荷瘤鼠的生存期并进行安全性评估.结果 瘤内注射重组沙门菌,实验组抑瘤率显著高于对照组,延长荷瘤鼠生存期,重组菌治疗后荷瘤小鼠的生存状态良好,无腹泻,治疗期间体质量无明显改变.结论 减毒沙门菌携带的mtHSP70/HSV-TK双基因真核共表达质粒瘤内注射对B16肿瘤细胞具有显著抑制作用.
作者：曾曙光；刘启才；王素文；彭细毛；章锦才；张积仁 刊期： 2012年第01期
目的 探讨多层CT在胰腺黏液性囊性肿瘤和浆液性囊性腺瘤诊断和鉴别诊断中的价值.方法 回顾性分析于2003年5月～2009年12月在我院经手术病理证实的黏液性囊性肿瘤患者(19例)和胰腺浆液性囊腺瘤(13例)的多层CT图像.图像分析包括肿瘤位置、形态、囊腔直径、囊壁、分隔、钙化、实性成份、胰腺萎缩、主胰管扩张、边界情况等.结果 胰腺黏液性囊性肿瘤与胰腺浆液性囊腺瘤囊腔直径大小比较有统计学意义(P=0.009)；囊腔直径大于2 cm多见于黏液性囊性肿瘤,与浆液性囊腺瘤之间差异统计学意义(P=0.01)；肿瘤实性成分多见于浆液性囊腺瘤,与粘液性囊性肿瘤比较有统计学意义(P=0.029).结论 多层CT在胰腺黏液生囊性肿瘤和浆液性囊性腺瘤诊断和鉴别诊断中具有重要的临床价值.
作者：鞠志国；鲁宏；朱晖；李清海；章士正 刊期： 2012年第01期
目的 提出一种改进的Demons非刚性配准算法,验证算法的有效性,并将其应用于图像引导放射治疗(image-guided radiotherapy,IGRT)中治疗图像和计划图像的配准.方法 基于Brox等提出的梯度恒定假设和Malis的高效二阶小化算法的思想将图像灰度梯度场的相似性加入原始的能量函数中,推导出更新变形场的公式.利用有限内存的BFGS算法优化能量函数,自动确定迭代次数.分别利用模拟形变图像、变形体模图像和肝癌病人的临床CT图像验证改进算法的配准精度.结果 改进的Demons变形配准算法与原始的“Additive Demons”算法相比,配准精度更高,收敛速度更快.结论 在放射治疗的不同分次扫描过程中,因实际扫描条件的影响,两幅待配准图像像素灰度值范围不同的情况下,改进的Demons算法能够更好地实现快速精确的配准.
作者：周露；甄鑫；卢文婷；窦建洪；周凌宏 刊期： 2012年第01期
目的 了解1例肺栓塞患者及其家系成员发生蛋白C缺陷症的分子发病学机制.方法 收集先证者及其家系成员的枸橼酸钠抗凝血,采用发色底物法检测PC活性(PC∶A)、蛋白S活性(FPS∶ A)和抗凝血酶活性(AT:A),采用ELISA方法检测PC抗原(PC∶Ag)水平.采用PCR方法对先证者PC基因所有9个外显子及其侧翼序列进行扩增、测序,发现突变后,对先证者家系成员的PC基因有关外显子片段进行PCR扩增和测序.结果 先证者及其父亲、母亲和妹妹均为Ⅱ型PC缺陷症患者.PC基因测序结果显示先证者的PC基因分别出现了位于3号外显子第5540位碱基的G→A的杂合突变和位于第7号外显子第10230位碱基C→T的杂合突变,导致PC E29K和R147W双杂合突变.先证者父亲携带PC E29K杂合突变,而先证者母亲和妹妹均为PCR147W杂合突变的携带者.结论 先证者为PC E29K和R147W基因复合杂合突变携带者,且这两种突变分别遗传自其父母.其中,PC E29K错义点突变为目前国际上尚未见报道的新突变,而PC R147W是一种已报道的常见于遗传性易栓症患者的可导致Ⅱ型PC缺乏的错义点突变.
作者：叶絮；刘晓力；冯莹；丁秋兰；周旭红；王学锋 刊期： 2012年第01期
目的 探讨一个家族性心脏传导疾病并房颤家系的临床特征及其有效的治疗方案.方法 对先证患者所在家系的家族成员进行常规临床体检和心电图、超声心动图、动态心电图、X线胸片、生化、自身抗体等检查.同时对先证者行双腔起搏器安置术联合口服胺碘酮治疗3个月,期间监测患者甲功及肺部情况,治疗完成后随访3个月,并对相关文献进行回顾.结果 家系中所有成员均无器质性心脏病的临床证据.先证者反复头晕、胸闷,以活动后较明显,静息心电图表现为心房纤颤伴高度房室传导阻滞；其叔叔于30岁时因晕厥发现“心房纤颤,三度房室传导阻滞”而安置起搏器治疗；其爷爷死于“心脏病”(具体不详)；其他家族成员心电图检查未见明显异常,既往亦未发生明显的心脏事件(晕厥、猝死).患者经治疗后症状明显好转,心电图及动态心电图均未见心房纤颤,起搏器工作良好.结论 心脏传导性疾病并心房纤颤可呈家族聚集性发病,双腔起搏器联合胺碘酮治疗可作为家族性心脏传导疾病并心房纤颤患者安全有效的治疗措施.
作者：刘福强；李岩；谢勇；赵冬华；萧钟波；周桂芳；彭健 刊期： 2012年第01期
目的 比较冰帽、全身低温及颈内动脉冷盐水灌注(ICSI)对于大鼠脑梗死急性期的治疗效果,为临床治疗急性脑梗死时不同低温方式的选择和ICSI的深入研究提供实验依据.方法 250～300 g SD大鼠随机分为模型组、冰帽组、全身低温组和ICSI组,用线栓法复制大脑中动脉栓塞2h模型,各低温方式的目标温度为33～34℃维持20 min.再灌48 h后,进行神经行为学评分；取脑行2,3,5-氯化三苯四氮唑染色；干湿重法检测脑含水量；酶联免疫吸附法检测血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100β和基质金属蛋白酶9(MMP9)的浓度.结果 各低温方式均能降低大鼠梗死体积,其中冰帽能使梗死体积减小27.4％(P＜0.05),而全身低温和ICSI能使梗死体积减小47.6％和61.6％(P＜0.01).全身低温组和ICSI组的脑含水量低于模型组(P＜0.05)；冰帽组的含水量低于模型组,但并无统计学意义.各低温组中,仅有ICSI组的神经行为学评分与模型组有统计学差异(P＜0.05).血清学方面,ICSI组的NSE和S100β的浓度显著低于模型组(P＜0.05)；全身低温组和冰帽组中各指标与模型组比较均无统计学意义.结论 ICSI对于脑梗死急性期的治疗效果要优于冰帽和全身低温,而全身低温比冰帽有更好的疗效.
作者：冀雅彬；吴永明；姬仲；宋玮；徐隋意；王遥；潘速跃 刊期： 2012年第01期
目的 评估促红细胞生成素(EPO)预处理对重症急性胰腺炎促炎抗炎失衡的干预效果及探讨其可能机制.方法 健康雄性SD大鼠随机分成3组:假手术(SO)组、重症急性胰腺炎(SAP)组和EPO预处理组,每组各30只.SAP组和EPO组建立逆行胆胰管注射3.5％牛黄胆酸钠法(1 ml/kg) SAP模型,EPO组建模前1h予静脉注射促红细胞生成素(3000 U/kg,1000 U/ml),而SO组和SAP组予静脉注射等体积生理盐水.术后第1、3、6、12、24小时取血清和胰腺标本.检测血清淀粉酶活性；ELISA法检测血清IL-18水平,放射免疫法检测血清IL-10水平.免疫荧光法检测胰腺组织核因子-kappaB转运激活情况；胰腺组织石蜡切片HE染色,进行胰腺病理学评分.结果 与SAP组相应时点比较,EPO组核因子-kappaB激活率(除12h外)显著降低(P＜0.05)；血清淀粉酶活性显著降低,3、6、12 h(P＜0.05)；血清IL-18水平显著降低,3、6、24 h(P＜0.05),血清L-I0水平无明显降低；病理总评分降低,6、12、24 h(P＜0.05).结论 EPO预处理可通过抑制核因子-kappaB激活,减少促炎细胞因子产生,而对抗炎细胞因子影响不明显,进而调控促炎-抗炎失衡状态,改善SAP病情.
作者：李接兴；罗羽宏；李震东；刘勇；刘朝祥 刊期： 2012年第01期
报道2例发生在脊柱和颅内具有幼稚性特征的透明细胞型脑脊膜瘤(CCM)患者,与经典的透明细胞型脑脊膜瘤不同的是2例患者肿瘤都有显示罕见的细胞核异型性、分裂活跃、坏死等原始化现象.肿瘤细胞对上皮膜抗原和Vimtine有免疫反应,MIB-1指数高达40％.对2例患者均实行肿瘤完整切除术.其中男性患者后3个月有局部复发和心室外侧转移.本文对脑脊膜病临床病理特点、诊断及预后进行探讨,并建议术后进行辅助放疗或化疗,并且在随访第1阶段每3～6个月复查磁共振.
作者：武彤彤；杨清绪；李智；蔡方；朱淑玲；张发仁 刊期： 2012年第01期
目的 探讨不同压力CO2气腹对大鼠肾功能的影响,为临床上改善移植后肾功能提供依据.方法 选用SD大鼠120只,建立气腹模型,按不同CO2气腹压和不同的CO2气腹作用时间分为0.67 kPa 30 min组、0.67 kPa 60 min组、0.67 kPa 120 min组；1.33 kPa 30 min组、1.33 kPa 60 min组、1.33 kPa 120 min组；2.0 kPa 30 min组、2.0 kPa 60 min组以及2.0 kPa 120 min组,同时设立对照组,各组术后检测血尿素氮、血肌酐、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平.结果 随着手术时间的延长以及气腹压力的增加,血肌酐,血尿素氮及尿NAG均逐渐升高,各组差异有统计学意义(P＜o.05).结论 随着手术时间延长及气腹压力的增加,肾功能损害逐渐加重.提示临床上实施后腹腔镜活体供肾切取术时应尽量缩短手术时间,降低气腹压力.
作者：徐战平；蒲小勇；杨浣情；郑祥光；刘久敏 刊期： 2012年第01期
目的 探讨25羟维生素D3对人正常气道上皮维生素D受体表达及分布的影响.方法 选取正常人支气管上皮细胞系16HBE为研究对象,MTT法分别检测不同浓度25羟维生素D3对细胞活力的影响；实验组分为对照组和不同浓度25羟维生素D3处理组.各处理因素作用细胞时间为24 h.用实时荧光定量PCR、Western blot、免疫荧光法观测各处理组维生素D受体(VDR)mRNA及蛋白表达、分布的情况.结果 与对照组相比,各个不同处理浓度的25羟维生素D3对VDR的表达量及分布均无显著增加(P＞0.05).结论 25羟维生素D3对支气管上皮细胞的影响可能并不依赖于VDR的表达及转位.
作者：董航明；赵海金；刘来昱；梁振宇；吕燕华；蔡绍曦 刊期： 2012年第01期
目的 构建HNF6的慢病毒载体pLeno-DCE-HA-HNF6,建立稳定表达HNF6的大肠癌细胞系并观察HNF6对大肠癌细胞系SW620的侵袭转移能力的影响.方法 构建HNF6慢病毒载体pLeno-DCE-HA-HNF6,感染293T细胞,收集上清测定病毒滴度；病毒颗粒转染SW620细胞,通过荧光显微镜及流式细胞仪观察转染效率；定量PCR(qPCR)及Western blotting检测HNF6的表达；应用Transwell和划痕试验观察SW620细胞侵袭转移能力的变化.结果 通过PCR及酶切鉴定成功构建pLeno-DCE-HA-HNF6载体；包装并得到高滴度的病毒颗粒；转染SW620后,qPCR及Western blotting检测到HNF6表达明显升高；HNF6导致SW620明显的细胞形态变化,Transwell及划痕试验证明HNF6使SW620细胞迁移能力降低.结论 成功构建并包装得到HNF6的慢病毒颗粒,建立稳定表达HNF6的大肠癌细胞系SW620-HNF6,证明过表达HNF6后可以抑制大肠癌侵袭转移能力.
作者：耿海涛；肖乾；徐邓勇；胡立锋；丁克峰 刊期： 2012年第01期
目的 建立应用高效液相色谱—质谱法(LC/MS)检测泌尿系结石中三聚氰胺含量的方法.方法 应用高效液相色谱—质谱法对17例因怀疑食用三聚氰胺污染奶粉在婴幼儿形成的泌尿系结石以及4例既往保存的成人尿酸结石进行三聚氰胺含量分析.采用正离子模式的电喷雾质谱检测.三聚氰胺低检出限为0.1 mg/kg.结果 4例已知成人尿酸结石标本中均未检测到三聚氰胺,17例疑似标本中应用液相色谱—质谱联用仪分析后共4例标本中检测出三聚氰胺,含量浓度分别为0.8、0.5、1.2和64 mg/kg.结论 高效液相色谱—质谱法准确度高、稳定性好,可以有效检测泌尿系结石中三聚氰胺含量,为进一步治疗和随访提供了帮助,但含三聚氰胺奶粉对患儿的长期影响还需进一步随访研究.
作者：吴文起；王露萍；欧莉莉；梁叶萍；麦赞林；李舒珏；单炽昌；袁坚；曾国华 刊期： 2012年第01期
目的 观察部分肝切除联合D-氨基半乳糖(D-GaIN)、脂多糖对肝损伤后再生修复的影响.方法 40只BALB/c雄性小鼠随机均分为2组.D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组:腹腔注射D-GaIN(500 mg/kg),1h后注射脂多糖(50 μg/kg);肝脏部分切除组:生理盐水代替D-GaIN和脂多糖,同样方法注射；两组小鼠在第2次腹腔注射24 h后行肝脏1/3切除.观察两组小鼠术后肝脏体质量比值、肝再生率、肝细胞损伤、增殖与肝卵圆干细胞增生.结果 肝脏部分切除组术后第9天肝大体结构基本恢复正常,肝再生率为(22.26±105.93)％,而D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组第14天肝质量较术前仍偏小,肝再生率为(9.49±32.55)％,P＜0.001.D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组术后肝窦和中央静脉充血,库普弗细胞增多；肝脏部分切除组术后第7天有明显肝细胞增殖,D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组肝细胞增殖甚少.D-GaIN/脂多糖/肝脏部分切除组肝脏术后第3天开始出现肝卵圆干细胞增生,从汇管区开始向肝小叶内延伸以修复损伤.结论 D-GaIN联合脂多糖可部分抑制肝部分切除后小鼠成熟肝细胞增殖,D-GaIN/脂多糖/肝部分切除可诱导肝卵圆干细胞增生.
作者：李劲；张健；刘光泽；刘犇；孔祥平 刊期： 2012年第01期
目的 观察汉防己甲素(Tet)对体外培养的人眼Tenon囊成纤维细胞(tenon's capsule fibroblasts,TCFS)中bax、bcl-2、转化生长因子-β2(TGF-β2)mRNA表达的影响,探讨其可能的作用机制.方法 将体外培养的第3代TCFS分别置于浓度为10-5 mol/LTet的培养液和1640培养液中培养48 h,采用实时荧光定量PCR检测细胞中bax、bcl-2和TGF-β2 mRNA的表达变化.结果 同对照组比较,Tet实验组中bax mRNA的表达量明显升高,bcl-2、TGF-β2 mRNA的表达量显著下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 一定浓度的汉防己甲素可以通过降低bcl-2、TGF-β2 mRNA的表达量,同时提高bax mRNA的表达量来抑制TCFS的增殖,并可诱导其凋亡,可能成为一种潜在的抗青光眼滤过瘢痕药物.
作者：李岱；孙明；李青春；杨芳；林少春；吴开力 刊期： 2012年第01期
目的 构建来自华南不同慢性丙型肝炎(CHC)患者的HCV NS5A的复制子重组质粒并测序分析,探索HCV NS5A在抗病毒应答中生物学特性.方法 以能够高效复制的1b型HCV复制子质粒为骨架,构成带有MIuⅠ和BclⅠ双酶切位点的开关质粒,采用逆转录-聚合酶链反应从不同CHC患者血清中扩增获得HCV 1b亚型NS5A全长片段,克隆到pMD-18载体中,测序分析其中的PKRBD、ISDR、V3和IRRDR区域的变异情况.扩增产物中无MIu Ⅰ和Bcl Ⅰ酶切序列的,在引物中引入相关酶切序列后再扩增,双酶切后将NS5A区段置换入HCV 1b复制子骨架中.结果 成功扩增出NS5A全长片段并克隆测序,将NSSA区ISDR-V3区域置换入复制子中,测序结果正确.序列比对显示应答株的ISDR和PKRBD氨基酸变异数目比无应答株高；V3和IRRDR区域存在较高氨基酸突变率.结论 成功构建包含华南HCV 1b亚型NS5A核心区域的复制子插入式重组质粒,为研究HCV NS5A生物学特性、干扰素抵抗的机制以及难治性CHC患者的个体化抗病毒治疗分析奠定了基础.
作者：李京涛；周斌；周元平；曾艳丽；李威；王俊洁；张健；张浩；刘叔文 刊期： 2012年第01期
目的 优化处方,以期得到疗效确切,低毒的抗肝纤维化复方.方法 运用硫代乙酰胺诱导大鼠肝纤维化模型,采用均匀设计法(二因素五水平)分组实验,并设有正常组,模型组,以大鼠肝组织羟脯氨酸含量作为检测指标,经均匀设计软件3.0处理分析得佳处方；运用相同方法诱导大鼠肝纤维化模型,设正常组,模型组,秋水仙碱组,佳处方组,通过观察肝组织羟脯氨酸含量,大鼠血清HA,AL,AST,ALB含量以及肝组织纤维化变化,对于佳处方的疗效进行比较和验证实验.结果 经实验筛选的佳处方为甘草甜素70 mg/kg,苦参碱70 mg/kg;验证实验中,佳处方组抗肝纤维化作用显著(P＜0.05),与秋水仙碱组无显著性差异(P＞0.05).结论 均匀设计在处方优化中作用显著,明显减少实验次数,结果可靠；苦参碱与甘草甜素合用抗肝纤维化作用明显.
作者：黄亮；漆林艳；陈志良；李亦蕾；文志勇 刊期： 2012年第01期
目的 探讨IL-17对博来霉素诱导肺纤维化形成中的肺成纤维细胞增殖、转化、胶原合成作用.方法 用5 mg/kg博来霉素气管内注入的方法诱导肺纤维化形成,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL- 17/IL- 17RmRNA在肺纤维化形成中表达的变化,选择表达IL-17RmRNA佳时间的肺成纤维细胞进行原代培养、鉴定.使用四氮唑蓝比色法检测不同浓度的IL-17对肺成纤维细胞的增殖.使用RT-PCR和Western Blotting检测肌成纤维细胞标志物α-SMA以及Ⅰ和Ⅲ型胶原的表达.结果 (1)IL-17/IL-17RmRNA在肺纤维化形成中明显升高,在第14天表达高.(2)不同浓度IL-17能够促进肺成纤维细胞的增殖,佳浓度为50 ng/ml.(3)IL-17促进肺成纤维细胞表达α-SMA增加.(4)IL-17促进肺成纤维细胞I和III型胶原合成.结论 IL-17具有促进小鼠肺纤维化形成中肺成纤维细胞增殖、转化和胶原的合成作用,可能在肺纤维化形成中起重要作用.
作者：董昭兴；康庆鑫；雷雯；钟红；邰文琳；王殿华 刊期： 2012年第01期
目的 提出一种精确有效的分割CT图像中的肝脏区域的算法.方法 在统计形状模型的基础上加入灰度模型,其中灰度模型包含了训练集中图像的统计灰度信息和测试集中病人的特异性信息.既从整体上对肝脏组织分割进行控制,又从边缘细节上加以优化.结果 对测试集中的10个数据进行测试,相较于传统方法,OE和ASD有明显的提高.结论 提出有效的灰度模型不仅提高了分割的精度,而且增强了稳定性.
作者：李春丽；张久楼；冯前进 刊期： 2012年第01期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
