学术投稿

鞘内注射氯胺酮对甲醛炎性疼痛大鼠脊髓背角蛋白激酶C表达的影响

杨勇;郭曲练;邹望远;王锷;鄢建勤

关键词:氯胺酮, 鞘内注射, 蛋白激酶C, 脊髓背角, 疼痛
摘要:目的 观察甲醛炎性疼痛大鼠脊髓背角蛋白激酶C(PKC)的表达,以及鞘内注射氯胺酮对甲醛炎性痛大鼠脊髓背角PKC表达的影响.方法 32只SD大鼠采用改良Yaksh法进行鞘内置管,随机分为4组(每组8只):对照组(C组)、鞘内注射生理盐水组(NS组)、氯胺酮50μg组(K1组)和氯胺酮100 μg组(K2组).NS、K1、K2组于置管5 d后,复制甲醛炎性疼痛模型.采用疼痛加权评分法(PIS)评估大鼠甲醛致痛后1 h内的疼痛行为,24 h后测量致痛足厚度并用免疫组化法观察大鼠腰5节段水平脊髓背角PKC的表达.结果 与NS组比较,K1组和K2组在甲醛炎性痛第二时相的PIS值明显降低(P<0.01);致痛24 h后,NS组大鼠致痛足厚度与对照组比较明显增加,而K1、K2组致痛足厚度与NS组比较则明显减少(P<0.05);NS组大鼠脊髓背角PKC免疫反应阳性细胞数量及免疫组化评分均较C组明显增加(P<0.01),而K1、K2组则明显低于NS组(P<0.05).结论 鞘内注射氯胺酮对甲醛炎性痛大鼠具有明显的抗伤害作用;鞘内注射氯胺酮可明显抑制甲醛炎性痛引起的脊髓背角PKC表达的增加,PKC在脊髓水平伤害性信息的传递和调节中可能发挥重要作用.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • Gluc-Fluc双荧光素酶质粒转染MB49细胞后荧光表达特性

    目的 利用生物发光成像技术对Glue-Flue双荧光素酶质粒转染MB49膀胱癌细胞后双荧光表达变化特性进行研究.方法 用pAAV2neo-Gluc和pAAV2neoCAG-Gluc-2A-Fluc分别转染MB49细胞,利用荧光照度计来研究双荧光素酶质粒中Gluc、Fluc的特性;利用体外活体成像系统对双荧光素酶质粒Glue-Flue转染MB49膀胱痛细胞后荧光表达情况的检测.结果 荧光照度计检测结果显示:Glue随着细胞数的增多或时间的延长,荧光表达量呈相应的增加.Fluc随细胞数目的 增多,荧光表达量增加;但随时间的延长,荧光表达量变化不大.体外活体成像结果显示:Gluc-Fluc双荧光素酶质粒已转染入MB49膀胱癌细胞,经过G418加压筛选获得稳定表达的细胞株.结论 双荧光索酶基因的构建并未改变Glue的自身荧光表达特性.转染双荧光索酶质粒的MB49膀胱癌细胞,由于其Fluc在活体成像时的定位优势和Glue易分泌、检测灵敏度高的定量优势,为后期动态检测肿瘤生长变化以及评价药物治疗效果提供了一个可靠的基石和平台.

    作者:张信基;石小军;孙鹏宇;张哲欢;付昕阳;谭万龙 刊期: 2011年第03期

  • 小动物超声仪与临床用超声仪评价小鼠心脏重构的对比分析

    目的 比较不同类型超声仪对小鼠压力负荷下心脏重构的评价结果.方法 C57 BL/6小鼠18只,随机分为假手术(sham)组和主动脉弓缩窄(TAC)组,每组9只.手术8周后,首先应用连接15L8高频探头的临床用西门子超声仪测定TAC组小鼠心功能,并比较清醒和麻醉状态下的差异.然后比较西门子超声仪和小动物用高分辨超声仪(Vevo770)对心功能评价的影响.结果 与清醒状态相比,异氟烷吸入麻醉小鼠的心率和左室短轴缩短率显著降低(P<0.001),而左室内径显著增加(P<0.05).但与相应的sham组比较,两种仪器都可以较敏感地反映TAC组的心脏重构.与西门子超声仪相比,小动物超声仪的分辨率明显增高,并可通过二尖瓣血流频谱图评价左室舒张功能,但暂不能在小鼠清醒状态下评价心功能.结论 麻醉本身会降低心功能,但在反映干预手段对心脏重构的影响程度上与清醒状态下有可比性.高分辨小动物超声仪在评价左室舒张功能方面优于西门子超声仪.

    作者:赵静;曾智;颜亮;纪丽景;罗滔;宾建平;廖禹林 刊期: 2011年第03期

  • 来自不同地区的两组鼻咽癌活检组织样本共同失调的基因功能及通路

    目的 探究两组鼻咽癌活检组织样本中差异基因表达谱所显示的失调基因功能及通路的相同之处.方法 利用生物信息学的方法分析两组差异表达基因谱,对比其失调的基因功能及通路,同时探索其相同的失调功能与两组数据问相同的基因的关系.结果 两样本中显著上调的基因主要与细胞的周期调控、增殖、DNA损伤修复、细胞的粘附迁移、代谢及蛋白质结合等相关,但是显著下调的基因无明显的功能聚类;两差异基因表达谱显示出的相同失调基因功能并不是完全由它们的相同基因引起;两者共同失调的通路有10条,排在前4位的为白细胞内皮迁移、细胞粘附分子、粘着斑和磷脂酰肌醇信号系统.结论 来自两个不同地区的鼻咽癌活检组织样本的比较发现,其差异表达的基因多与细胞周期调控、DNA损伤修复、粘附迁移等相关,这与临床治疗首选放疗的原因相符;通路分析得出4条差异显著的共同通路也与肿瘤粘附迁移相关,通过干扰其在肿瘤中的病理作用,特别是磷脂酰肌醇信号系统在肿瘤发生、粘附及转移等关键步骤中的信号传导作用,有望提高鼻咽癌的治疗效果及预后.

    作者:熊艺颖;黄仲曦 刊期: 2011年第03期

  • 鼻咽癌细胞株5-8F-EGFP和肝转移亚群5-8F-H3B-EGFP的基因表达谱分析

    目的 区分不同转移能力的鼻咽癌细胞哑群,对于探讨鼻咽癌转移的分子机制、脏器亲和性具有重要的临床和生物学意义.我们拟应用基因芯片技术来分析鼻咽癌细胞株5-8F-EGFP和肝转移亚群5-8F-H3B-EGFP的基因表达谱差异.方法 分别提取鼻咽癌细胞株5-8F-EGFP和肝转移亚群5-8F-H3B-EGFP的总RNA,逆转录成荧光标记的cDNA,与Affymetrix(R) Human Genome U_133A2.0寡核苷酸芯片杂交(每株重复3次),用专业的软件和聚类分析法分析基因表达谱.结果 得到差异表达基因3767个,其中差异表达2倍以上的基因281个,进一步筛选出16个可能与鼻咽癌肝转移关系密切的基因16个.结论 这16个基因能够很好的区分5-8F-EGFP和肝转移亚群5-8F-H3B-EGFP,为进一步寻找鼻咽癌肝转移的临床分子标志物、判断预后缩小了范围.

    作者:韩春;杨俊兰;姚开泰 刊期: 2011年第03期

  • 斜矢状位黑血MRI增强扫描对颈动脉内膜剥脱手术的术前评估

    目的 探讨斜矢状位黑血MRI增强扫描对于颈动脉粥样硬化斑块内膜剥脱手术(CEA)的术前评估价值.方法 25例症状性颈动脉粥样硬化患者(26个粥样硬化颈动脉)进行了CEA.术前1周以内,对所有患者预手术侧颈总动脉远端、分叉处及颈内动脉近端进行了数字减影血管造影检奁(DSA)及斜矢状位黑血MRI增强扫描(OB-CEMRI).由2名放射科医师分别在DSA及OB-CEMRI图像上评价颈动脉(颈总动脉远端、分叉处及颈内动脉近端)大狭窄部位、斑块破溃情况、大狭窄程度、斑块累及范围,并将DSA、OB-CEMRI图像与CEA术后斑块病理切片图像进行对照,分别分析DSA和OB-CEMRI在显示上述评价指标方面的差异.结果 DSA(x=0.807)和OB-CEMRI(k=0.812)在判断颈动脉大狭窄部位方面与病理图像均有较好的一致性.DSA诊断斑块破溃的敏感性为40.0%、特异性为66.7%,而OB-CEMRI的敏感性为90.0%、特异性为83.3%.在评价颈动脉管腔大狭窄度方面,虽然DSA与OB-CEMRI无显著差异[(77.33+3.79)%vs(76.02+3.95)%,P=0.648],但与病理图像比较,OB-CEMRI低估了管腔狭窄程度(p=0.008).OB-CEMRI所显示的斑块累及范围18.96+4.96 mm更接近于病理(18.13+4.57 mm,P=0.506).明显大于DSA所显示的范围(14.80+3.78 mm,P=0.004).结论 作为一种无创的检查方法,OB-CEMRI可以较客观地评价粥样硬化颈动脉(颈总动脉远端、分叉处及颈内动脉近端)管腔大狭窄部位、斑块破溃、斑块累及范围,但在评价管腔大狭窄程度方面不如DSA准确,如果能在CEA术前联合使用OB-CEMRI和DSA对粥样硬化颈动脉进行检查,可为手术提供更加全面可靠的术前评估.

    作者:王庆军;王勇;蔡剑鸣;赵廷强;马林;蔡幼铨;陈利峰;王湛博 刊期: 2011年第03期

  • 曲古抑菌素A抑制小鼠CD4+T细胞活化的机制

    目的 研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对小鼠脾脏CD4+T细胞相关分子的基因转录和表达以及对活化信号转导途径的影响,探讨TSA影响CD4+T细胞活化的作用机制.方法 采用2、20、200 nmol/L倍比浓度TSA作用于C57BL小鼠脾脏中分离出的CD4+T细胞24 h,观察对CD3,CD28以及IL-2基因转录和表达的影响;观察TSA对采用抗CD3,CD28单抗激活CD4+T细胞表达蛋白酶ZAP70和PI3K的影响.结果 TSA能抑制CD4+T细胞CD28基因转录和分子表达,且与作用浓度相关;能抑制抗体激活的小鼠CD4+T细胞表达PI3K蛋白,而对GD3分子活化信号下游的ZAP70蛋白的表达无明显影响;TSA还能抑制CD4+T细胞IL-2的基因转录和显著减少激活的CD4+T细胞表达IL-2(P<0.01).结论 TSA通过抑制CD28基因转录和分子表达,影响激活CD4+T细胞活化过程中共刺激信号向细胞内的传导,减少IL-2的分泌,从而降低CD4+T细胞的免疫活性.

    作者:魏强;文晓芸;杜传福;吴少瑜;叶俊生;李忠海 刊期: 2011年第03期

  • HLA配型对慢性粒细胞白血病异基因造血干细胞移植效果的分析

    目的 分析HLA相合程度对慢性粒细胞白血病(CML)异基因造血干细胞移植的影响.方法 121例CML患者包括:慢性期90例、加速期8例、急变期23例.85例接受相关、36例无关移植.HLA全相合91例、部分相合30例.预处理方案:37例患者用含全身放疗+环磷酰胺、84例改良Bucy(白消安+环磷酰胺+阿糖胞苷)方案,移植物抗宿主病(GVHD)预防:HLA全相合相关移植用环孢素A+甲氨蝶呤(CsA+MTX),无关及相关HLA位点不合移植者采用CsA+MTX+抗胸腺细胞球蛋白或霉酚酸酯.COX模型分析影响长生存的因素.结果 121例患者除4例死于预处理相关毒性外、其余117例病人均获造血重建;HLA全相合与不相合移植者Ⅱ~Ⅳ°急性GVHD发生率分别为26.1%和53.3%(P=0.006),3年累计慢性GVHD发生率在全相合与不相合者分别为47.4%和49.6%(P=0.947);非复发移植相关死亡(TRM)率在HLA相合与不相合者分别为16.5%和40.0%(P=0.007);5年累积白血病复发率为16.7%、其中HLA相合与不相合者复发率分别为15.3%和22.7%(P=0.396);5年累积总生存(OS)和无病生存(DFS)率分别为70.6%和63.8%,其中OS和DFS在相合者为78.2%和70.3%、不相合者为47.6%和43.3%.多因素分析显示:HLA不合为Ⅱ~Ⅳ°急性GVHD的危险因素,Ⅱ~Ⅳ°急性GVHD为TRM发生的危险因素,HLA不合、急性GVHD、疾病分期为影响生存的危险因素.结论 HLA不相合移植TRM高于相合移植,从而导致OS显著低于HLA全相合移植,长期生存与供受来源无关.

    作者:张钰;陈银葵;范志平;徐丹;赵捷;江千里;凌奕文;刘灿;孙竟;刘启发 刊期: 2011年第03期

  • 聚肌胞对RSV感染哮喘加重小鼠气道分泌TSLP和炎症的影响

    目的 探讨聚肌胞(poly I∶C)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染哮喘加重小鼠气道分泌胸腺幕质淋巴细胞生成素(TSLP)和气道炎症的影响.方法 雌性BALB/c小鼠32只,随机分成4组:分别为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、鸡卵白蛋白(OVA)组、OVA/RSV组、OVA/RSV/polyI∶C组;应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化结合RSV滴鼻激发哮喘,聚肌胞1mg/kg肌肉注射;无创肺功能检测各组小鼠气道反应性;ELISA法检测小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ水平;ELISA法检测气管灌洗液(BALF)中TSLP含量;BALF行细胞分类计数;病理观察小鼠肺组织炎症反应,免疫组化观察小鼠气道上皮细胞TSLP表达水平.结果 无创肺功能检测显示聚肌胞抑制RSV感染哮喘加重小鼠气道反应性的增高,OVA/RSV/polyI∶C组小鼠Perth值明显低于OVA/RSV组(P<0.01);OVA/RSV/polyI∶C组小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13和BALF中TSLP浓度均明显低于OVA/RSV组(P<0.05);OVA/RSV/poly I∶C组小鼠BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞数及淋巴细胞数明显少于OVA/RSV组(P<0.05);病理观察显示聚肌胞减轻RSV感染哮喘小鼠气道炎症细胞浸润;免疫组化染色证实聚肌胞抑制RSV感染哮喘小鼠气道上皮细胞TSLP表达.结论 聚肌胞前期注射减少RSV感染哮喘加重小鼠气道上皮细胞表达TSLP,抑制哮喘小鼠气道炎症反应.

    作者:夏虎;于化鹏;骆利敏;蔡绍曦 刊期: 2011年第03期

  • 富血小板血浆对体外培养人脂肪来源干细胞增殖及成脂分化的作用

    目的 观察富血小板血浆对体外培养的人脂肪来源干细胞增殖与成脂能力的影响.方法 用酶消化法获取人脂肪来源干细胞,二次离心法制备自体富血小板血浆,将细胞分为实验组与对照组,实验组以含5%、10%、20%自体富血小板血浆的条件培养液干预,对照组不进行富血小板血浆干预.观察细胞形态学,以XTT比色法测定细胞增殖状况,油红O染色检测细胞成脂活性.结果 寓血小板血浆实验组较对照组细胞形态饱满、密度增大;XTT比色法显示实验组细胞增殖明显(P<0.01);实验组油红O染色阳性率较对照组增高明显(P<0.01).结论 富血小板血浆对体外培养的人脂肪来源干细胞增殖与成脂分化活性具有显著的促进作用.

    作者:张云松;何井华;肖冠英;黎庆梅 刊期: 2011年第03期

  • 稳定表达新抑癌基因WTX的胃癌BGC-823/WTX-EGFP细胞株的建立

    目的 构建含有全长WTX(Wilms tumor gene on the X chromosome)目的 基因的表达载体,建立稳定表达WTX基因的胃癌BGC-823/WTX-EGFP细胞系,为WTX基因功能研究提供保障.方法 以人胚肾293FT细胞为模板,经PCR扩增获得全长WTX cDNA序列,将全长WTX目的 基因序列克隆人带有绿色荧光蛋白报告基因的pEGFP-NI表达载体,建立pEGFP-WTX表达载体.经限制性内切酶酶切鉴定、测序并转染293FT细胞观察报告基因表达情况,判断pEGFP-WTX表达载体构建是否成功.构建成功的pEGFP-WTX表达载体转染人胃癌BGC-823细胞,建立稳定表达WTX的BGC-823/WTX-EGFP细胞.qRT-PCR及免疫组化检测转染细胞WTX表达.结果 PCR方法从人胚肾293FT细胞扩增获得全长WTX cDNA,经测序鉴定序列完全正确;pEGFP-WTX质粒DNA经酶切鉴定片段大小正确、转染294FT细胞可见清晰的绿色荧光表达.BGC-823/WTX-EGFP细胞能够稳定表达WTX.结论 本研究成功构建了含有全长WTX cDNA的表达载体系统,建立了稳定表达WTX的BGC-823/WTX-EGFP细胞,为WTX基因功能研究奠定了良好基础.

    作者:陈可绪;王啓名;黄怡哲;吴焕;张庆玲 刊期: 2011年第03期

  • 尿酸与2型糖尿病代谢紊乱及危险因素分析

    目的 探讨2型糖尿病(T2DM)尿酸升高与代谢紊乱的关系及其危险因素.方法 收集159例T2DM住院患者[年龄40~80岁,SCr水平51~159 μmol/L(0.6~1.8 mg/dl)]临床实验室资料,明确高尿酸血症(HUA)与T2DM代谢紊乱的关系及其危险因素.结果 159例患者中HUA患者40例,占25.2%;单因素分析发现男性、体质指数(BMI)≥25 kg/m2、高血压、血肌酐(SCr)≥110 μmol/L、血尿素氮(BUN)≥7.0 μmol/L、尿微量白蛋白(U-MA)≥11.2 mg/L、血甘油三酯(TG)≥1.70 mmol/L、血高密度脂蛋白(HDL)<1.04mmol/L、血低密度脂蛋白(LDL)≥3.37 mmol/L等因素影响HUA的发生(P<0.05);Logistic回归分析提示SCr、BMI、TG水平是影响T2DM发生HUA的独立危险因素;各主要危险因素在T2DM中均有较高的发生率;T2DM合并HUA患者冠心病、颈动脉粥样硬化、脑梗死、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变发生率明显增高(P<0.05).结论 T2DM尿酸升高与多种危险因素有关,HUA与T2DM代谢紊乱及并发症密切关联.

    作者:邬丹;刘宏;李申恒 刊期: 2011年第03期

  • 内皮祖细胞对心梗后心衰患者心功能改变的影响

    目的 研究应用粒细胞集落刺激因子动员内皮祖细胞治疗心肌梗死后心力衰竭患者心功能的改变.方法 选取38例心肌梗死后心衰患者,随机分成治疗组和对照组,治疗组在常规治疗(包括药物和介入治疗)基础上给予内皮祖细胞动员剂G-CSF(600μg/d)静脉注射,连续注射7 d.检测两组治疗前、治疗后第7天和第4个月BNP值及外周血内皮祖细胞数量,行心脏超声检测LVSD、EDV、LVEF.结果 治疗组的内皮祖细胞数量较对照组增加明显,尤其第7天增加有显著差异(P<0.01).两组患者血浆BNP值较治疗前均显著下降恢复正常值(P<0.01);两组心功能指标治疗后均有所好转(P<0.05),治疗组较对照组改善明显(P<0.05),尤以治疗组LVEF值第4个月增加明显,差异有显著性(P<0.01).结论 内皮祖细胞治疗心肌梗死后心衰患者,町有效减轻心室重构,改善心功能.

    作者:赵子粼;许顶立;郭志刚;吴平生;沈安娜 刊期: 2011年第03期

  • 胃大部切除术后Roux-en-Y吻合对非肥胖2型糖尿病的临床疗效观察

    目的 评价胃大部切除术后Roux-en-Y吻合对非肥胖2型糖尿病患者的临床疗效.方法 同顾性分析我院2005年1月~2010年1月收治的16例因为胃癌或胃溃疡接受Roux-en-Y胃肠转流术,且不合并肥胖的糖尿病患者的临床资料.结果 所有患者随访6个月,空腹血糖、餐后2 h血槠、糖化血红蛋白较术前下降(P<0.05).8例病人不需要药物和饮食控制达到糖尿病治愈标准(50%),5例病人治疗药物较前订减少,糖尿病明显改善(31.25%).总体有效率81.25%.结论 Roux-cn-Y胃肠转流术可以改善非肥胖2型糖尿病患者的糖尿病症状,为糖尿病的治疗提供了一种新的手段.

    作者:冯超;姚若全;黄飞舟;聂晚频;刘浔阳 刊期: 2011年第03期

  • 经小隐静脉插管予以阿加曲班和尿激酶区域给药治疗急性下肢深静脉血栓

    目的 探讨经小隐静脉(SSV)插管予以阿加曲班和尿激酶区域抗凝溶栓治疗急性下肢深静脉血栓(LDVT)的临床价值.方法 前瞻性地将56例急性LDVT随机分为两组,研究组(2l例/24条肢体)予以经SSV插管予以阿加曲班和尿激酶区域抗凝溶栓,对照组(35例/36条肢体)经外周静脉予以阿加曲班和尿激酶,分析两组血清纤维蛋白原(FBG)和D-二聚体变化,调查静脉血栓的消长、患肢周径及溶栓抗凝相关并发症.结果 经校正x2检验,研究组相关并发症发生率低于对照组1/21 vs 4/36,x2=1.92,P≤0.05).经威尔科克森检验,研究组总有效率(95.8%,23/24)和对照组(94.4%,34/36)无统计学差异(V=0.52,P>0.05),但总显效率存在统计学差异(83.3% vs 55.6%,V=2.36,P≤0.05).经配对t检验,研究组溶栓期间血清FBG无明显变化(P>0.05).而对照组血清FBG明显下降(P≤0.05).研究组患肢周径减少时相和血清D-二聚体下降时相早于对照组(P≤0.05).结论 经SSV插管予以区域灌注阿加曲班和尿激酶可提高溶栓疗效,减少出血风险.

    作者:周忠信;潘春球;符方勇;林智琪;刘正军 刊期: 2011年第03期

  • 小电导钙激活钾通道在人心房肌细胞中的表达及功能

    目的 探讨小电导钙激活钾通道在人心房肌细胞巾的表达情况和功能意义.方法 收集行心内直视手术的窦性心律先心病患者8例,取右心耳组织,行免疫组化分析3种SK通道亚型(SK1、SK2和SK3)表达情况;使用经典两步酶解法分离心房肌细胞,应用穿孔膜片钳和传统电压钳技术分别记录心房肌细胞动作电位(APs)和全细胞的钙激活钾电流(IK,Ca),比较给予SK通道特异性阻断剂apamm(100 nmol/L)前、后动作电位时程(APD)变化.结果 SK1、SK2和SK3通道亚型在心房肌细胞中均呈阳性表达,膜片钳记录证实IK,Ca的存在,且apamin明显延长复极化90%的动作电位时程(APD90),而对APD50无明显影响.结论 3种SK通道亚型在人心房肌细胞中均有表达;与SK通道在神经元细胞中介导动作电位后超极化过程的功能小同,在心房肌细胞中,SK通道是参与APs复极未期过程的重要离子通道.

    作者:于涛;吴若彬;郭惠明;邓春玉;郑少忆;邝素娟 刊期: 2011年第03期

  • 免疫吸附治疗全身型重症肌无力的疗效及作用机制研究

    目的 观察免疫吸附联合激素治疗茕症肌无力患者的疗效,探讨该治疗方法的作用机制.方法 收集全身型重症肌无力患者40例及健康对照者15例,根据给予不同的治疗方法分为3组即免疫吸附联合激素治疗组、单一激素治疗组和正常对照组.用ELISA法榆测各组患者治疗前后外周血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)及白介素-18(IL-18)含量变化,应用临床记分法评价不同治疗方法的效果.结果 在免疫吸附联合激素治疗组中其临床评分较单一激素治疗组降低,临床症状好转明显;各治疗组外周血清中TNF-α及IL-18含量均较正常对照组高,各组相比较差异均有显著性(P<0.05).免疫吸附治疗组较单一激素治疗组明显降低.两组各指标相比较差异有显著性(P<0.05).结论 免疫吸附不仅可以清除体内自身免疫抗体,还可以直接清除免疫炎性细胞因子达到保护血-脑屏障,发挥改善重症肌无力患者的临床症状的作用.

    作者:李麒麟;谢富华;罗永胜 刊期: 2011年第03期

  • 沃特杆菌败血症1例报告

    沃特杆菌是一种革兰阴性杆菌,国外与其相关的临床病例甚少,而国内未见报道.我科在1例败血症患者血液和骨髓中分离出该菌.

    作者:高方;薛耀明;陆雯;魏伟平 刊期: 2011年第03期

  • 冻干重组人三突变型HIF-1α腺病毒生物学效应考察

    目的 研究冻干对重组人三突变型HIF-1α病毒(Ad-HIF-1α-564/402/803)生物学效应的影响.方法 将前期构建的Ad-HIF-1α-564/402/803在HEK293A细胞中进行扩增,用氯化铯浓度梯度离心法进行腺病毒纯化,X-Gal染色法测定重组腺病毒转染效率,在适宜的条件下制成冻于剂.采用MTS试剂盒观察冻干前后Ad-HIF-1α-564/402/803对hMvECs增殖的影响.分别在冻干前、冻干后1 d、6月、12月四个时间点提取病毒DNA,进行PCR及PCR产物测序鉴定重组人三突变型HIF-1α腺病毒基因;并在4个时间点以Ad-HIF-1α-564/402/803转染hMVECs,提取蛋白进行western blot检测HIF-1α蛋白的表达.结果 X-gal染色显示MOI为100pfu/cell时,转染效率趋于稳定.冻干前后重组人三突变型HIF-1α腺病毒对hMVECs增殖影响无显著差异(P>0.05).经PCR及基因测序鉴定,在四个时间点,腺病毒所携带的目的 基因信息无丢失或突变,HIF-1α蛋白表达无差异(P>0.05).结论 冻干能够长期保持重组人三突变型HIF-1α腺病毒的高生物活性.

    作者:陶宇;王月刚;魏旋;刘城;陈冬冬;吴平生 刊期: 2011年第03期

  • 脂肪组织源性干细胞分步诱导分化为神经元样细胞

    目的 探讨脂肪组织源性干细胞(ADSCs)诱导分化为神经元样细胞的可行性.方法 ADSCs分离自雄性SD大鼠附睾脂肪垫,差速贴壁法纯化ADSCs,传至第3代培养细胞行流式细胞术行表型鉴定(CD106,CD11b,CD45,CD90,CD29,CD49d),并进行成脂诱导.取鉴定后的ADSCs用分步诱导法,即先用含10 ng/ml碱性成纤维细胞牛长因子(bFGF)、20ng/ml表皮生长因子(EGF)、2%B27的DMEM/F12培养基1培养,诱导其向神经干细胞转分化,再用含10 ng/ml胶质细胞源性神经营养因子(GDNF),10 ng/ml脑源性神经营养因子(BDNF),1μmol/L维甲酸(RA)的培养基Ⅱ诱导分化为神经元样细胞(NLCs),免疫细胞化学法鉴定细胞表面标记物巢蛋白(nestin),神经细胞特异性标志微管相关蛋白(MAP2),神经元核蛋白(NeuN).结果 分离纯化的ADSCs CD90、CD29表达强阳性;成脂诱导分化后细胞油红O染色阳性;ADSCs经培养基Ⅰ培养7 d后聚集成球样细胞团悬浮于培养液中,表达nestin;继而用培养基Ⅱ诱导分化4 h后细胞球逐渐贴壁,球周边少数细胞向外发出突起,形似神经元,MAP2、NeuN均呈阳性.结论 特定条件下,ADSCs在体外町被逐步诱导分化为NLCs.

    作者:陈盼盼;张丽华;董为人;刘杰明;张易;乔伟光;陈英华;赵姝;郭家松 刊期: 2011年第03期

  • 慢病毒介导的ebv-miR-BART7稳定过表达鼻咽癌细胞株CNE1的建立

    目的 构建ebv-miR-BART7慢病毒表达载体.建立其稳定表达的鼻咽癌细胞株CNE1-pLVTHM/BART7.方法 构建慢病毒表达质粒pLVTHM/BART7.用293FT细胞包装后产生的成熟慢病毒颗粒感染CNE1细胞.经流式细胞仪筛选后,建立稳定表达ebv-miR-BART7鼻咽癌细胞株.后用荧光定量PCR检测其表达水平.结果 PCR和测序验证pLVTHM/BART7重组质粒构建成功;经293FT细胞病毒包装,感染CNE1细胞后,与阴性对照组和未感染组相比,其表达水平明显升高.结论 成功构建了pLVTHM/BART7慢病毒重组质粒,建立了稳定表达ebv-miR-BART7的鼻咽癌细胞株CNE1-pLVTHM/BART7,为研究ebv-miR-BART7在鼻咽癌发生发展过程中的基因调控和相应的作用机制提供了有用的细胞模型.

    作者:袁存存;蔡红兵;黄宇琦;叶艳芬;赵曼丽;吕晓明;李欣 刊期: 2011年第03期

南方医科大学学报杂志

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