张钰;陈银葵;范志平;徐丹;赵捷;江千里;凌奕文;刘灿;孙竟;刘启发
目的 探讨不同浓度干细胞因子对人乳牙牙髓干细胞增殖及向成骨方向分化能力的影响.方法 无菌条件下培养因发育滞留而拔除乳牙的牙髓,酶消化法培养乳牙牙髓十细胞,以浓度为3、10 μmol/干细胞因子培养液作用于乳牙牙髓干细胞,正常堵养基为对照组.MTT法检测干细胞因子对乳牙牙髓干细胞增殖能力的影响,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测干细胞因子作用于乳牙牙髓干细胞后ALP活性的改变,RT-PCR方法检测细胞内骨钙素、骨涎蛋白mRNA含量的改变.结果 MTT结果显示两种浓度的干细胞因子均可以促进乳牙牙髓干细胞增殖,且随浓度增加促进作用增强.ALP试剂盒检测结果表明干细胞因子也可以促进乳牙牙髓干细胞的ALP活性,且浓度为10μmol/的ALPOD值高.RT-PCR结果显示干细胞因子可以上调乳牙牙髓干细胞内骨钙素及骨涎蛋白mRNA的含量.结论 干细胞因子对乳牙牙髓干细胞的增殖和成骨方向分化能力具有一定的促进作用,提示干细胞因子具有促进牙齿再生的作用.
作者:路娟英;高杰;麻丹丹;陈婷 刊期: 2011年第03期
目的 探讨应用冠状动脉CT血管造影(CTA)图像测定冠心病患者心包内(PAT)、外(IAT)脂肪体积的可行性,并总结其分布特点.方法 收集109例(59.1±11.7岁)经临床确诊冠心病患并的冠状动脉CTA图像,应用半自动Volume软件程序逐层手动描画心包内、外脂肪轮廓,并计算出相应脂肪体积.判断冠心病患者心包内、外脂肪体积的相关因素,分析心包内、外脂肪体积的性别差异.结果 所有病例冠状动脉CTA图像的心包结构显示清楚,可准确测定心包内、外脂肪体积.心包内、外脂肪体积与体质量、BMI成正相关,与年龄无关,心包外脂肪体积与身高成正相关.男性冠心病患者心包外脂肪体积大于女性患者67%(P<0.05),而心包内脂肪体积无性别差异(P>0.05).结论 应用冠状动脉CTA图像叮以准确测定心包内、外脂肪体积.冠心病患者心包内、外体积与BMI、体质量呈正相关,心包内脂肪体积无性别差异.
作者:吴坚;张兴华;具海月;张帆;杨立 刊期: 2011年第03期
目的 探讨HIV-1 gp41胞外域gp41-I90肽对新生隐球菌致人脑微血管内皮细胞骨架改变的影响.方法 以人脑微血管内皮细胞作为体外血脑屏障模型,在细胞培养玻片或transwell小室上长成单层,用HIV-1 gp41-I90预处理后,再用新生隐球菌感染细胞单层,免疫荧光方法检测细胞骨架蛋白actin(肌动蛋白)和filamin(肌动蛋白连接蛋白)的形态变化,并测定gp41-I90处理的人脑微血管内皮细胞单层对辣根过氧化物酶和新生隐球菌的通过率.结果 gp41-I90能明显增强新生隐球菌所致的人脑微血管内皮细胞骨架蛋白actin和filamin的改变,actin和filamin的丝状排列扭曲,纹理稀疏;gp41-I90处理的人脑微血管内皮细胞单层通透性增强,对辣根过氧化物酶和新生隐球菌的通过率明显增加.结论 HIV-1 gp41胞外域gp41-I90肽促进新生隐球菌黏附和侵人血脑屏障,与其增强新生隐球菌所致人脑微血管内皮细胞骨架改变有关.
作者:龙敏;曹虹;Ambrose Jong 刊期: 2011年第03期
目的 探讨聚肌胞(poly I∶C)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染哮喘加重小鼠气道分泌胸腺幕质淋巴细胞生成素(TSLP)和气道炎症的影响.方法 雌性BALB/c小鼠32只,随机分成4组:分别为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、鸡卵白蛋白(OVA)组、OVA/RSV组、OVA/RSV/polyI∶C组;应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化结合RSV滴鼻激发哮喘,聚肌胞1mg/kg肌肉注射;无创肺功能检测各组小鼠气道反应性;ELISA法检测小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ水平;ELISA法检测气管灌洗液(BALF)中TSLP含量;BALF行细胞分类计数;病理观察小鼠肺组织炎症反应,免疫组化观察小鼠气道上皮细胞TSLP表达水平.结果 无创肺功能检测显示聚肌胞抑制RSV感染哮喘加重小鼠气道反应性的增高,OVA/RSV/polyI∶C组小鼠Perth值明显低于OVA/RSV组(P<0.01);OVA/RSV/polyI∶C组小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13和BALF中TSLP浓度均明显低于OVA/RSV组(P<0.05);OVA/RSV/poly I∶C组小鼠BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞数及淋巴细胞数明显少于OVA/RSV组(P<0.05);病理观察显示聚肌胞减轻RSV感染哮喘小鼠气道炎症细胞浸润;免疫组化染色证实聚肌胞抑制RSV感染哮喘小鼠气道上皮细胞TSLP表达.结论 聚肌胞前期注射减少RSV感染哮喘加重小鼠气道上皮细胞表达TSLP,抑制哮喘小鼠气道炎症反应.
作者:夏虎;于化鹏;骆利敏;蔡绍曦 刊期: 2011年第03期
目的 研究血清脂肪细胞脂肪酸结合蛋白(A-FABP)水平与社区人群2型糖尿病的相关性.方法 在广州市海珠区整群分层随机抽样法抽取255名45~85岁社区居民,平均年龄63.90岁,测定空腹血糖(FPG)、餐后2小时血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、体重指数(BMI)、腰围(WC)、臀围(HC)、腰臀比(WHR)、血压(BP)、甘油三脂(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清A-FABP及空腹胰岛素(FINs)水平,根据血糖情况分为3组:血糖正常组(A组):90例,糖耐量受损组(B组):85例,糖尿病组(C组):80例,比较各组A-FABP的水平.结果 与A组相比,B组、C组FPG、2hPGh、HbA1C、HOMA-IR、SBP、WC、WHR均明显升高(P=0.001,FINs、DBP、TG、HDL-C也显著增高(P=0.038、0.047、0.01、0.046);与B组相比,C组FPG、2hPG、HbA1c、TG、SBP均明显升高(P=0.00),FINS、BMI、WC、DBP、HDL-C也显著增高(P=0.012、0.006、0.03、0.019、0.029).A-FABP在A组、B组和C组的浓度差异有统计学意义(P=0.00),呈升高趋势.而以上3组年龄差异对A-FABP的影响无统计学意义(P>0.05).A-FABP浓度与FPB、2hPG、FINS、WHR、BMI、WC、SBP、HOMA-IR呈直线正相关,与TG、HDL-C呈负相关(P=0.00).结论 血清A-FABP表达升高与糖调节异常相关,是社区人群2型糖尿病发生、发展的重要标志物.
作者:叶文慧;彭湘杭;艾雅琴;陈宏;张桦;蔡德鸿 刊期: 2011年第03期
目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)患者外周血白细胞端粒长度的变化及意义.方法 OSAS患者11例,健康对照组10例,提取外周血白细胞DNA,纯度检测合格后,用Q-PCR法检测端粒长度相对T/S比率.结果 OSAS组外周血白细胞端粒长度相对T/S比率较对照组小(P<0.05).结论 OSAS患者外周血白细胞端粒长度的缩短可能与其发病机制有关,低氧血症和高碳酸血症加速r端粒的损耗和细胞的凋亡.
作者:林里;李涛平 刊期: 2011年第03期
目的 探讨卵巢癌肉瘤的临床特征、治疗方法及预后.方法 收集中山大学肿瘤防治中心2002年5月至2009年5月收治的12例卵巢癌肉瘤的临床资料进行回顾性分析.结果 12例患者诊断时中位年龄55岁,其中10例为绝经后患者.患者就诊时主要临床症状为腹痛、腹胀、腹水等.10例入院时血CA125升高,7例术后化疗后降至正常,8例病情复发时伴CA125升高.影像学检查均发现盆腔包块.确诊依靠术后病理.所有患者均接受手术治疗及术后以铂类为基础的联合化疗,2例术后无瘤生存;10例术后2年内复发,其中2例经再次治疗后缓解生存,1例正接受化疗,5例死亡,2例失访.结论 卵巢癌肉瘤预后差,手术及术后以铂类为基础的联合化疗是卵巢癌肉瘤的主要治疗方法,预后与减瘤术后残存病灶大小有关,复发性卵巢癌肉瘤患者经积极治疗后仍有可能获得缓解,血清CA125可作为观察化疗疗效的标志物,并用于治疗后的监测随访.
作者:朱安娜;李俊东;冯艳玲;徐漫漫;庄圆 刊期: 2011年第03期
目的 通过影像学表现、术中所见及病理成分探讨松果体区混合性生殖细胞肿瘤的起源.方法 回顾分析我院2000年1月致2010年9月间经术后病理证实的15例松果体区混合性生殖细胞肿瘤的术前影像学表现和病理标本.结果 影像学表现,12例存在钙化,10例含有囊变,5例含有脂质.矢状位类圆或类椭圆状6例,边缘均较光滑,不规则形状9例,边缘多突起;术中所见,所有肿瘤均位于大脑大静脉蛛网膜袖套包绕形成的松果体隐窝内;病理成分,13例含有生殖细胞成分,9例含有畸胎瘤成分,4例含有胚胎性癌成分,3例含有绒癌成分,7例含有卵黄囊瘤成分,3例含有横纹肌瘤成分.在7例标本边缘发现牛殖细胞瘤,10例患者生殖细胞瘤成分与其余成分相互穿插或被其它成分包绕.结论 松果体区混合性生殖细胞肿瘤起源于松果体周围残余生殖细胞,其极有可能来自单一的原始生殖细胞.
作者:肖罡;方陆雄;邱炳辉;漆松涛 刊期: 2011年第03期
1临床资料停经31+5周,B超发现胎儿畸形4 d.我院B超示:胎儿脑部及颜面部发育异常(全前脑并喙鼻、唇裂),故于2010年5月16日在南方医院妇产科行利凡诺腔内引产术,引产一死男婴.为进一步明确胎儿畸形种类、病因,受南方医院委托和家属同意,遂于2010年5月21日上午8时在南方医院病理解剖楼对此胎儿进行病理解剖.
作者:周洁;邓永键;司马雪琴;吴观信 刊期: 2011年第03期
目的 研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对小鼠脾脏CD4+T细胞相关分子的基因转录和表达以及对活化信号转导途径的影响,探讨TSA影响CD4+T细胞活化的作用机制.方法 采用2、20、200 nmol/L倍比浓度TSA作用于C57BL小鼠脾脏中分离出的CD4+T细胞24 h,观察对CD3,CD28以及IL-2基因转录和表达的影响;观察TSA对采用抗CD3,CD28单抗激活CD4+T细胞表达蛋白酶ZAP70和PI3K的影响.结果 TSA能抑制CD4+T细胞CD28基因转录和分子表达,且与作用浓度相关;能抑制抗体激活的小鼠CD4+T细胞表达PI3K蛋白,而对GD3分子活化信号下游的ZAP70蛋白的表达无明显影响;TSA还能抑制CD4+T细胞IL-2的基因转录和显著减少激活的CD4+T细胞表达IL-2(P<0.01).结论 TSA通过抑制CD28基因转录和分子表达,影响激活CD4+T细胞活化过程中共刺激信号向细胞内的传导,减少IL-2的分泌,从而降低CD4+T细胞的免疫活性.
作者:魏强;文晓芸;杜传福;吴少瑜;叶俊生;李忠海 刊期: 2011年第03期
目的 通过腺病毒载体体外转染人气道平滑肌细胞(HASMC),使肿瘤抑制基因PTEN过表达和RNA干扰表达,观察其对HASMC迁移的影响,并探讨其作用机制.方法 利用携带野生型PTEN基因的重组腺病毒(Ad-GFP-PTEN)和针对PTEN基因的腺病毒短发夹状RNA(shRNA)载体(Ad-GFP-shRNA-PTEN)转染HASMC细胞,并以感染空载腺病毒Ad-GFP和空白组(DMEM)作为对照,用流式细胞计数确立佳转染复数后,通过Transwell趋化小室和细胞划痕实验检测HASMC跨膜迁移能力和横向迁移能力的变化.Western blotting检测PTEN蛋白的表达和AKT、ERK1/2通路的活化情况,并加入两通路的抑制剂作为阳性对照.结果 腺病毒搭载的PTEN基因过表达和干扰载体能成功改变PTEN基因的表达.上调PTEN表达能显著抑制HASMC迁移;蛋白水平上抑制PI3K/AKT通路,而MAPK/ERK通路未见变化.下调PTEN表达不能明显促进HASMC迁移;但在蛋白水平能使P13K/AKT通路激活,而MAPK/ERK通路却受到抑制.结论 上调PTEN表达能有效抑制HASMC的迁移,可能主要是通过抑制P13K/AKT通路起作用.
作者:高杨;钟浩海;罗雅玲;赖文岩;徐健;张达成;蓝海兵 刊期: 2011年第03期
目的 观察免疫吸附联合激素治疗茕症肌无力患者的疗效,探讨该治疗方法的作用机制.方法 收集全身型重症肌无力患者40例及健康对照者15例,根据给予不同的治疗方法分为3组即免疫吸附联合激素治疗组、单一激素治疗组和正常对照组.用ELISA法榆测各组患者治疗前后外周血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)及白介素-18(IL-18)含量变化,应用临床记分法评价不同治疗方法的效果.结果 在免疫吸附联合激素治疗组中其临床评分较单一激素治疗组降低,临床症状好转明显;各治疗组外周血清中TNF-α及IL-18含量均较正常对照组高,各组相比较差异均有显著性(P<0.05).免疫吸附治疗组较单一激素治疗组明显降低.两组各指标相比较差异有显著性(P<0.05).结论 免疫吸附不仅可以清除体内自身免疫抗体,还可以直接清除免疫炎性细胞因子达到保护血-脑屏障,发挥改善重症肌无力患者的临床症状的作用.
作者:李麒麟;谢富华;罗永胜 刊期: 2011年第03期
目的 探讨脂肪组织源性干细胞(ADSCs)诱导分化为神经元样细胞的可行性.方法 ADSCs分离自雄性SD大鼠附睾脂肪垫,差速贴壁法纯化ADSCs,传至第3代培养细胞行流式细胞术行表型鉴定(CD106,CD11b,CD45,CD90,CD29,CD49d),并进行成脂诱导.取鉴定后的ADSCs用分步诱导法,即先用含10 ng/ml碱性成纤维细胞牛长因子(bFGF)、20ng/ml表皮生长因子(EGF)、2%B27的DMEM/F12培养基1培养,诱导其向神经干细胞转分化,再用含10 ng/ml胶质细胞源性神经营养因子(GDNF),10 ng/ml脑源性神经营养因子(BDNF),1μmol/L维甲酸(RA)的培养基Ⅱ诱导分化为神经元样细胞(NLCs),免疫细胞化学法鉴定细胞表面标记物巢蛋白(nestin),神经细胞特异性标志微管相关蛋白(MAP2),神经元核蛋白(NeuN).结果 分离纯化的ADSCs CD90、CD29表达强阳性;成脂诱导分化后细胞油红O染色阳性;ADSCs经培养基Ⅰ培养7 d后聚集成球样细胞团悬浮于培养液中,表达nestin;继而用培养基Ⅱ诱导分化4 h后细胞球逐渐贴壁,球周边少数细胞向外发出突起,形似神经元,MAP2、NeuN均呈阳性.结论 特定条件下,ADSCs在体外町被逐步诱导分化为NLCs.
作者:陈盼盼;张丽华;董为人;刘杰明;张易;乔伟光;陈英华;赵姝;郭家松 刊期: 2011年第03期
目的 研究应用粒细胞集落刺激因子动员内皮祖细胞治疗心肌梗死后心力衰竭患者心功能的改变.方法 选取38例心肌梗死后心衰患者,随机分成治疗组和对照组,治疗组在常规治疗(包括药物和介入治疗)基础上给予内皮祖细胞动员剂G-CSF(600μg/d)静脉注射,连续注射7 d.检测两组治疗前、治疗后第7天和第4个月BNP值及外周血内皮祖细胞数量,行心脏超声检测LVSD、EDV、LVEF.结果 治疗组的内皮祖细胞数量较对照组增加明显,尤其第7天增加有显著差异(P<0.01).两组患者血浆BNP值较治疗前均显著下降恢复正常值(P<0.01);两组心功能指标治疗后均有所好转(P<0.05),治疗组较对照组改善明显(P<0.05),尤以治疗组LVEF值第4个月增加明显,差异有显著性(P<0.01).结论 内皮祖细胞治疗心肌梗死后心衰患者,町有效减轻心室重构,改善心功能.
作者:赵子粼;许顶立;郭志刚;吴平生;沈安娜 刊期: 2011年第03期
目的 观察短疗程糖皮质激素治疗早期亚急性肝功能衰竭患者的临床疗效及安全性.方法 选择乙型病毒性肝炎早期亚急性肝功能衰竭患者87例;分治疗组43例,对照组44例;其中埘照组采用拉米夫定抗乙型肝炎病毒及常规综合治疗,治疗组在采用与对照组相同治疗的基础上联合短疗程糖皮质激素治疗;分别观察其救治成功率、平均住院日及不良反应,并进行相互比较.结果 治疗组患者救治成功率明显高于对照组,住院日中位数明显小于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);两组患者并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05).结论 短疗程糖皮质激素治疗乙型病毒性肝炎早期亚急性肝功能衰竭,可以提高患者救治成功率,缩短患者病程;严格把握糖皮质激应用指征及治疗时机,并联合有效的抗HBV治疗,临床应用比较安全.
作者:吴锦瑜;黎明;张华 刊期: 2011年第03期
目的 建立一套高纯度、高活性表达糖原合成酶激酶3β的技术.方法 分别采用大肠杆菌和杆状病毒昆虫细胞蛋白表达系统表达糖原合成酶激酶3β,通过His和GST标签两步纯化目的 蛋白,SDS-PAGE观察目的 蛋白的纯度,激酶反应观察目的 蛋白的活性.结果 大肠杆菌表达纯化的糖原合成酶激酶3β占纯化后总蛋白的壁为54%,昆虫细胞表达纯化的糖原合成酶激酶3p占纯化后总蛋白的量为96%;昆虫细胞来源的目的 蛋白比大肠杆菌来源的目的 蛋白活性高-倍左右.结论 相比大肠杆菌表达的糖原合成酶激酶3β,昆虫细胞表达的目的 蛋白具有更高的纯度和活性.
作者:许少飞;徐杰;黎明涛 刊期: 2011年第03期
目的 探讨小电导钙激活钾通道在人心房肌细胞巾的表达情况和功能意义.方法 收集行心内直视手术的窦性心律先心病患者8例,取右心耳组织,行免疫组化分析3种SK通道亚型(SK1、SK2和SK3)表达情况;使用经典两步酶解法分离心房肌细胞,应用穿孔膜片钳和传统电压钳技术分别记录心房肌细胞动作电位(APs)和全细胞的钙激活钾电流(IK,Ca),比较给予SK通道特异性阻断剂apamm(100 nmol/L)前、后动作电位时程(APD)变化.结果 SK1、SK2和SK3通道亚型在心房肌细胞中均呈阳性表达,膜片钳记录证实IK,Ca的存在,且apamin明显延长复极化90%的动作电位时程(APD90),而对APD50无明显影响.结论 3种SK通道亚型在人心房肌细胞中均有表达;与SK通道在神经元细胞中介导动作电位后超极化过程的功能小同,在心房肌细胞中,SK通道是参与APs复极未期过程的重要离子通道.
作者:于涛;吴若彬;郭惠明;邓春玉;郑少忆;邝素娟 刊期: 2011年第03期
目的 通过构建磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)增强型绿色荧光蛋白真核表达载体,研究GPC3对人肝癌细胞株MHCC97-L增殖的影响.方法 用基因重组及限制性内切酶技术构建并鉴定表达载体pEGFP-c3-GPC3,通过脂质体介导转染人肝癌细胞株MHCC-97L,流式细胞术和G418筛选建立稳定细胞株;采用荧光定量PCR、Western blotting分别检测MHCC-97L中GPC3 mRNA和蛋白的表达情况,并在荧光显微镜下观察细胞荧光;MTT法检测GPC3对肝癌细胞MHCC97-L体外增殖能力的影响.结果 经酶切及测序鉴定,确认成功构建真核表达载体pEGFP-c3-GPC3,荧光显微镜下观察到绿色荧光表达;从mRNA和蛋白水平证实,GPC3基因在转染后的MHCC-97L中成功表达;MTT生长曲线证实MHCC97-L/GPC3较其他两株细胞增殖显著加强(P<0.001).结论 成功构建pEGFR-c3-GPC3真核表达载体;筛选出稳定表达GPC3基因的MHCC97-L/GPC3细胞株;GPC3基因表达升高可促进肝癌细胞株MHCC97-L的增殖.
作者:秦如斋;刘斐烨;陈斌;谢剑明;杨洋;郑大勇;罗荣城 刊期: 2011年第03期
目的 探讨经小隐静脉(SSV)插管予以阿加曲班和尿激酶区域抗凝溶栓治疗急性下肢深静脉血栓(LDVT)的临床价值.方法 前瞻性地将56例急性LDVT随机分为两组,研究组(2l例/24条肢体)予以经SSV插管予以阿加曲班和尿激酶区域抗凝溶栓,对照组(35例/36条肢体)经外周静脉予以阿加曲班和尿激酶,分析两组血清纤维蛋白原(FBG)和D-二聚体变化,调查静脉血栓的消长、患肢周径及溶栓抗凝相关并发症.结果 经校正x2检验,研究组相关并发症发生率低于对照组1/21 vs 4/36,x2=1.92,P≤0.05).经威尔科克森检验,研究组总有效率(95.8%,23/24)和对照组(94.4%,34/36)无统计学差异(V=0.52,P>0.05),但总显效率存在统计学差异(83.3% vs 55.6%,V=2.36,P≤0.05).经配对t检验,研究组溶栓期间血清FBG无明显变化(P>0.05).而对照组血清FBG明显下降(P≤0.05).研究组患肢周径减少时相和血清D-二聚体下降时相早于对照组(P≤0.05).结论 经SSV插管予以区域灌注阿加曲班和尿激酶可提高溶栓疗效,减少出血风险.
作者:周忠信;潘春球;符方勇;林智琪;刘正军 刊期: 2011年第03期
目的 区分不同转移能力的鼻咽癌细胞哑群,对于探讨鼻咽癌转移的分子机制、脏器亲和性具有重要的临床和生物学意义.我们拟应用基因芯片技术来分析鼻咽癌细胞株5-8F-EGFP和肝转移亚群5-8F-H3B-EGFP的基因表达谱差异.方法 分别提取鼻咽癌细胞株5-8F-EGFP和肝转移亚群5-8F-H3B-EGFP的总RNA,逆转录成荧光标记的cDNA,与Affymetrix(R) Human Genome U_133A2.0寡核苷酸芯片杂交(每株重复3次),用专业的软件和聚类分析法分析基因表达谱.结果 得到差异表达基因3767个,其中差异表达2倍以上的基因281个,进一步筛选出16个可能与鼻咽癌肝转移关系密切的基因16个.结论 这16个基因能够很好的区分5-8F-EGFP和肝转移亚群5-8F-H3B-EGFP,为进一步寻找鼻咽癌肝转移的临床分子标志物、判断预后缩小了范围.
作者:韩春;杨俊兰;姚开泰 刊期: 2011年第03期