章俊;李萍华;杨蕾;杜庆生;郭婷婷;汤珣
目的 探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对失血性休克-内毒素二次打击大鼠肾损伤的保护作用.方法 45只成年Wistar大鼠随机分为假二次打击组(S组)、二次打击组(M组)和PHC 1 mg/kg组(PHC1组)、2 mg/kg组(PHC2组)、3 mg/kg组(PHC3组).取动脉血2 ml测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-8(IL-8)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN),测定肾粘附分子-1(ICAM-1)和核转录因子-κB(NF-κB),HE染色观察肾的病理改变.结果 PHC1、PHC2、PHC3组与M组相比,血清TNF-α、IL-1、IL-8、Cr、BUN含量明显降低,肾组织ICAM-1和NF-κB表达明显减弱(P<0.05).与PHC2、PHC3组比较,PHC1组血清TNF-α,、IL-1、IL-8、Cr、BUN明显降低(P<0.05).光镜下PHC1、PHC2、PHC3组肾小管损伤均比M组轻.结论 PHC可抑制失血性休克-内毒素二次打击大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-8、Cr、BUN及ICAM-1、NF-κB在肾脏表达,减轻肾功能和肾小管的损伤程度,以1 mg/kg作用显著.
作者:何双双;林春水;古妙宁;陈冬婷;宗士兰;陈莺 刊期: 2011年第05期
目的 探讨直肠癌前切除手术术后吻合口漏的相关危险因素.方法 对1999年6月~2009年6月我院行直肠癌前切除手术患者628例的临床资料行回顾性研究,分析影响术后吻合口漏发生的危险因素.结果 628例直肠癌前切除术后共发生吻合口漏54例(8.6%,54/628).患者术前有糖尿病病史、术前血清白蛋白<35 g/L、术中没有行预防性近端肠造口、肿瘤下端距肛缘距离≤7 cm、肿瘤病灶直径>5 cm是患者术后发生吻合口漏的危险因素.并且肿瘤下端距肛缘距离≤7 cm是术后发生吻合口漏的独立危险因素(P<0.05).结论 低位直肠癌、肿瘤较大、合并糖尿病及营养不良是直肠癌术后吻合口漏的危险因素,行保护性近端肠造瘘可以预防吻合口漏的发生.
作者:冯超;姚若全;黄飞舟;聂晚频;刘浔阳 刊期: 2011年第05期
目的 研制光激化学发光免疫分析技术(AlphaLISA)建立人血清乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的快速检测试剂盒.方法 采用中和抑制法建立HBeAb AlphaLISA试剂盒.结果 自制HBeAb试剂盒灵敏度为0.003 NCU/ml,可测范围为0.003-16 NCU/ml.批内与批间的精密度分别为5.3%和6.8%,与HBeAb无交叉反应.使用自制试剂与罗氏化学发光试剂盒同时检测136份临床血清样本,结果具有相关性(r=0.961).结论 自制HBeAb AlphaLISA试剂盒的各项性能指标能够达到临床检测要求,可用于临床血清样本HBeAb浓度的测定.
作者:马强;贺安;董志宁;刘天才;邹丽萍;林冠峰;李明;吴英松 刊期: 2011年第05期
目的 应用免疫磁珠法分离筛选人乳牙牙髓干细胞,并做培养鉴定.方法 采用STRO-1为标记物以免疫磁珠分离筛选人乳牙牙髓干细胞,观察细胞形态及生长情况,流式细胞仪检测细胞表型,并检测细胞体外多向分化能力.结果 应用免疫磁珠法筛选人乳牙牙髓细胞可获得乳牙牙髓于细胞,经统计学处理证明看其生长速度慢于牙髓细胞,细胞表型分析证实CD29、CD105高表达,CD34、CD45低表达.矿化诱导和成脂诱导证实STRO-1+乳牙牙髓细胞具有干细胞多向分化的能力.结论 免疫磁珠法是有效的分离纯化人乳牙牙髓干细胞的方法.所分离的细胞具有干细胞的表型特点及多向分化能力.
作者:丁祥龙;陈柯;申元源 刊期: 2011年第05期
目的 筛选肺鳞癌患者淋巴转移差异表达基因群及验证其中部分基因.方法 原发癌组织及区域淋巴结取自10例接受根治性手术的肺鳞癌患者.根据组织来源将标本分为3组:不伴淋巴转移的肺鳞癌组织(TxN-,n=5)、伴有淋巴转移的肺鳞癌组织(TxN+,n=5)及相应转移淋巴结中的肺鳞癌细胞(N+,n=5).对各组进行激光显微切割以获得纯净癌细胞,T7RNA线性扩增获取足够量的RNA,实验通道和参照通道分别标记以后与含6000个已知人类基因或表达序列标签的cDNA基因芯片杂交,扫描荧光信号以后进行数据分析.通过免疫组化的方法验证CCL20基因的表达.结果 共有37个基因可将TxN+组与TxN-组区分开,TxN+组中高表达的基因有85个,29个基因在TxN-组高表达.N+组与TxN+组没有发现具有显著性的差异表达基因.CCL20蛋白在TxN-组表达明显高于TxN+组(P<0.05).结论 肺鳞癌的淋巴转移表型的获得可能是早期事件.这些差异基因的发现有助于探讨肺鳞癌淋巴转移的分子机制和寻找新的治疗靶点.
作者:黎力;葛明建;赵晓龙 刊期: 2011年第05期
目的 证明纳秒级陡脉冲能够诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡,且钙离子是其凋亡通路的重要介质.方法 用不同参数组的纳秒级陡脉冲处理细胞,Annexin V/PI双染流式细胞仪检测其早期凋亡率及坏死率,用0、25、50、100 μmol/L BAP-TA-AM分组整合细胞内因纳秒级陡脉冲处理而增高的游离Ca2+后,MTT检测细胞存活率,Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡率,Western-blot技术检测caspase 12蛋白表达的变化.结果 Annexin V/PI双染流式细胞术结果示:佳治疗参数为场强90KV/cm;脉宽:100 ns;脉冲作用时间:30 s;频率:1Hz,其凋亡率高(60.31±5.67)%,坏死率为(1.35±0.39)%;BAPTA-AM作用过的细胞经纳秒级陡脉冲佳治疗参数处理后细胞存活率明显高于单用纳秒级陡脉冲处理的细胞(P<0.05).凋亡率也同时降低(O<0.05),caspase-12蛋白表达水平也相应降低(P<0.05).结论 纳秒级陡脉冲能诱导SKOV3细胞凋亡,细胞内游离的钙离子增高是其凋亡通路的重要介质,并有可能介导内质网通路.
作者:刘丽娟;赵东阳;王建;姚陈果;孙才新;唐均英 刊期: 2011年第05期
目的 探讨B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石的可行性、疗效,探讨其临床价值.方法 回顾性分析2009年1月~2010年3月我院36例B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石,对患者基本资料,结石大小,手术时间,出血量,相关并发症及结石清除率等进行分析.结果 36例均在B超X线联合引导下准确建立理想的双工作通道,结石一期清除率为80.56%,平均手术时间100min,术后中位住院时间13.5 d(13~14d),术后5例行二期碎石术,1月后复查均无结石残留.18例术前血肌酐升高患者中16例恢复正常范围.结论 采用B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石是安全、有效的手段,且术后并发症少,值得推广.
作者:李虎;罗文平;董超雄 刊期: 2011年第05期
目的 报告显微神经外科手术治愈12岁男孩因复合型脂肪瘤导致脊髓拴系综合征1例,并结合文献讨论该病的分型、诊断、治疗和预后.方法 患者主诉渐进性排尿障碍2年多,检查存在会阴部感觉迟钝,肛门反射消失,肛门松弛,右侧提睾反射消失,骶尾部可触及脊柱裂口.腰骶椎MRI检查提示脊髓低位,脊髓栓系,骶椎脊柱裂,脊膜膨出,合并椎管内外脂肪瘤.超声检查提示残余尿量显著增加.确定诊断.显微手术借助接触式激光刀等松解脊髓、马尾神经与脂肪瘤的粘连,切除椎管内外脂肪瘤,修补局部硬膜缺损.结果 术后恢复顺利,随访半年,排尿功能恢复正常.结论 根据硬膜完整性可以将脊髓脂肪瘤分成2型,本例属于伴硬膜缺损型.临床表现、特别是MRI检查可以确定诊断,显微神经外科手术是目前唯一有效治疗方法,早期、特别是无脊髓功能损害前手术更好.局部硬膜是否完整对疗效影响大,硬膜缺损者手术难度大、效果欠佳.充分松解粘连,避免脊髓圆锥和马尾神经损伤是本例手术成功的关键.复发者是否再次手术需要谨慎评估.
作者:彭林;徐波涛 刊期: 2011年第05期
目的 检测干细胞转录因子Oct-4皮肤鳞状细胞癌(SCC)、脂溢性角化病(SK)的组织表达,分析其表达差异及与肿瘤干细胞的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测Oct-4在35例SCC、21例SK及15例正常对照皮肤组织中的表达.结果 Oct-4在正常皮肤组织表达为阴性,在SCC、SK之间表达有显著性差异(P<0.05),间接反映SCC、SK的恶性程度不同.结论 SCC、SK中表达Oct-4基因的细胞很可能是SCC、SK的干细胞,这将为其终分离和鉴定人SCC、SK干细胞提供重要基础,将有助于揭示SCC、SK的肿瘤起始细胞,从而对预防和治疗SCC、SK有重大意义.
作者:李毓阳;戴永江;邓斌;梁雄安;谢志杰;陈海富 刊期: 2011年第05期
目的 筛选可与人肿瘤干细胞表面标记物CD133特异性结合的短肽并进行初步鉴定.方法 首先合成人肿瘤干细胞表面标记物CD133细胞外片段的生物素化蛋白,以此为靶,利用噬菌体肽库技术,高通量液相淘选CD133的特异性短肽.应用夹心EL ISA选择出结合较强的克隆.提取DNA测序,通过竞争性阻断实验验证其特异性,根据噬菌体基因序列推导出多肽序列.通过免疫荧光技术初步验证合成多肽和人大肠癌细胞的结合情况.结果 4轮液相筛选后,与CD133特异性结合的噬菌体得到有效富集,第4轮与第1轮相比,富集了388倍.经ELISA鉴定的20个噬菌体单克隆中,有13个与CD133有较高亲和力,具有阳性意义.经比对得到11条完全一致的氨基酸序列TISWPPR,2条完全一致的氨基酸序列STTKLAL,竞争性阻断ELISA实验表明第一条特异性较强.结论 成功利用噬菌体肽库技术,淘选出1条可和人CD133特异性结合的高亲和力短肽,为后续CD133的研究奠定了基础,表明从噬菌体肽库中液相淘选生物素化小分子的高亲和力多肽的方法切实可行.
作者:田平阁;周春平;张超;杨慧;吴小金;陆滟霞;刘国炳;李学农 刊期: 2011年第05期
目的 观察新型苯二氮卓类药物L-838,417对三叉神经痛大鼠机械痛行为的影响.方法 健康雄性SD大鼠随机分为模型组、假手术组及正常对照组,采用经颧骨下缘入路建立大鼠三叉神经分支眶下神经慢性缩窄环术来建立模型.取模型制备成功的大鼠30只作为模型组,随机分为5组:L-838,417 1.0mg/kg组(L1组),L-838,417 10.0mg/kg组(L10组),吗啡5 mg/kg组(M组),安定3 mg/kg组(D组)及生理盐水组(NS组),采用Von-Frey法于给药后每1 h测各组大鼠触须垫部机械痛阈变化,并于各组痛阈达高时进行镇静实验,进行姿势评分及翻正反射评分.L1组L10组及M组连续给药10 d,每天测各组所能达到的高疼痛阈值,观察药物耐受情况.结果 各组大鼠疼痛基础阈值无统计学差异(P>0.05).模型组术后第9天疼痛阈值较术前明显降低(P<0.01),术后第9~18天,其疼痛阈值明显低于sham组(P<0.01).模型组各组给药后,除NS组给药前后阈值无变化(P>0.05)外,其余4组给药后1 h疼痛阈值明显增加(P<0.01),4组疼痛高阈值无统计学差异(P>0.05).NS组、L1组及L10组均没有出现异常姿势和翻正反射.连续给药后,M组第3天高疼痛阈值明显下降,与第1天相比有统计学差异(P<0.01),L1组及L10组与第1天比较均无统计学差异(P>0.05).结论 L-838,417对三叉神经痛大鼠具有良好的抗痛觉过敏作用,且不会带来镇静及运动损害等副作用,长期给药不会产生药物耐受.
作者:龚政;熊源长 刊期: 2011年第05期
目的 研究子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)组织中抑癌基因ARHI的mRNA和蛋白表达情况.方法 利用RT-PCR和Western Blot免疫印迹的方法,对EMs的异位内膜组织、在位内膜组织和非EMs在位内膜组织(正常内膜组织)进行mRNA和蛋白表达的半定量分析.利用原位杂交和免疫组化技术对研究各组进行定性及定位分析.结果 (1)ARHI mRNA和蛋白在各组中均有表达,异位内膜的表达高于在位内膜和正常内膜,差异显著(P<0.005),在位内膜组与正常对照组比较,ARHI的表达无明显差异(P>0.05);(2)原位杂交阳性率分别为非EMs组97.3%,EMs异位内膜组100%,EMs在位内膜组93.8%;(3)免疫组化阳性率分别为非EMs组93.2%,EMs异位内膜组100%,EMs在位内膜组92.3%;(4)ARHI的DNA与蛋白表达一致;(5)5例恶变的异位内膜ARHI免疫组化检测,4例呈阴性,1例呈弱阳性表达.结论 抑癌基因ARHI在子宫内膜组织中均表达,且在异位内膜中呈表达上调,而在恶变的异位内膜中多呈阴性表达,提示ARHI基因可能与子宫内膜异位症不孕及恶变相关.
作者:李洁;汪淑娟;孙璐;李亚里 刊期: 2011年第05期
目的 合成具有抗肿瘤活性的新型CDKs抑制剂,并评价其抗肿瘤活性.方法 根据生物活性叠加原理,将1-(甲磺酰基)哌啶-4-氨和嘧啶杂环片段合理组合,设计合成了5个结构新颖的N4-取代苯胺基-N2-(1-甲磺酰基哌啶-4-氨基)-5-硝基嘧啶类化合物3a~3e.结果 目标化合物的结构经质谱和核磁共振氢谱等表征确认.采用MTT法测试了目标化合物抑制肿瘤细胞增殖活性.测试结果表明,部分化合物对MCF-7(人乳腺癌细胞)肿瘤细胞有弱的细胞毒性,而对HepG2(人肝癌细胞)没有抑制活性,表现出一定的选择性.结论 化合物3b对MCF-7(人乳腺癌细胞)肿瘤细胞有较强的抑制活性(IC50=13.6 μmol·L-1).初步的构效关系研究表明化合物的立体结构可能对其抗肿瘤活性影响较大.
作者:游文玮;赵培亮;邹敏;周中振;段安娜;吴曙光 刊期: 2011年第05期
目的 探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用.方法 6~8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只.A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型.而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨髓MSCs细胞,A、B组各注射等体积的PBS.MSCs移植后按既定时间处死小鼠,利用PCR检测卵巢中GFP基因以判断MSCs是否到达卵巢;通过对卵巢组织切片HE染色以及细胞凋亡分析来检测MSCs是否对免疫损伤卵巢有修复作用及其机制.结果 PCR结果表明MSCs经腹腔移植可直接到达免疫损伤卵巢;MSCs移植可促进免疫损伤卵巢组织的修复;相应地,移植组颗粒细胞的凋亡比非移植组明显减少.结论 腹腔移植MSCs可促进免疫损伤卵巢的修复,其机制可能与减少颗粒细胞凋亡有关.
作者:李威娜;谢琪璇;秦俊文;黄伟;叶绍恩;罗峰;张春雪;肖銮娟 刊期: 2011年第05期
目的 探讨肝X受体激动剂T0901317对TGF-β1诱导的人正常肺成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 组织块贴壁法培养人正常肺成纤维细胞,波形蛋白和角蛋白免疫细胞化学鉴定.T0901317和/或TGF-β1刺激人正常肺成纤维细胞后,分别应用RT-PCR,Western blot和免疫荧光观察α-SMA mRNA和蛋白水平的表达.结果 人肺成纤维细胞表达波形蛋白而不表达角蛋白.RT-PCR,Western blot,免疫荧光结果均显示正常肺成纤维细胞基态下组成性表达少量的α-SMA,TGF-β1 5 ng/ml即可以诱导α-SMA mRNA和蛋白表达的明显上调,而T0901317 5μg/ml时可以明显抑制这种表达的上调.结论 肝X受体激动剂T0901317可以在基因和蛋白水平抑制TGF-β1诱导的体外人正常肺成纤维细胞α-SMA表达的上调,可能具有潜在抗纤维化应用价值.
作者:任敦强;刘明;郭永忠;马冉;钟南山 刊期: 2011年第05期
分析临床分期为T1-3N1-2M0肾癌的临床病理及预后资料,探讨其生物学行为特点.方法 1988年至2008年间我院共收治无远处转移肾癌并行开放性肾癌根治术的患者531例,其中42例伴淋巴结转移患者顺利完成了手术,对其临床病理及预后资料进行回顾性分析.结果 42例患者中,19.0%为T1期,21.4%为T2期,59.5%为T3期;42.9%为N1期和57.1%为N2期.末次随访30例(71.4%)出现肿瘤复发,26例(61.9%)患者死亡,83.3%(25/30)初次复发即为多发性.42例患者中位肿瘤特异生存期(CSS)和无病生存期(DFS)分别为23个月和11个月.多因素生存分析显示,病理分级(P=0.005),淋巴结分期(P=0.014)和T分期(P=0.037)是CSS的独立影响因素;术前状态(P=0.002),肿瘤大小(P=0.007),病理分级(P=0.009)和淋巴结分期(P=0.019)是DFS的独立影响因素.结论 T1-3N1-2M0期肾癌患者预后较差.淋巴结分期是T1-3N1-2M0期肾癌CSS和DFS的独立影响因素,对术中出现可疑肿大淋巴结者应行扩大的淋巴结清扫术.
作者:陈壮飞;吴芃;郑少斌;张鹏;谭万龙;毛向明 刊期: 2011年第05期
目的 应用分子线性探针Geno Type(R)MTBDRplus Assay(Gtplus)试剂盒检测四川地区耐多药结核分枝杆菌(MTB)株的基因型特征,并初步了解耐药结核病的流行情况.方法 选取结核确诊患者105份临床标本和68株临床分离株,应用Gtplus试剂盒检测MTB耐利福平和异烟肼相关的rpoB、katG、inhA基因的突变,推测其对利福平和异烟肼的耐药性.结果 151例样本的Gtplus结果有效,总耐药率和耐多药率分别为29.14%(44/151)和17.22%(26/151);耐利福平和高、低水平耐异烟肼的突变菌株分别为21.85%(33/151)、21.19%(32/151)和3.31%(5/151);突变型以rpoB S531L、katGS315T1和inhA C-15T为主.痰标本组的耐多药菌株比率明显高于肺外标本组.结论 四川地区MTB耐药形势严峻,尤以耐多药结核病的情况严重,耐药菌株以rpoB S531L和katG S315T1突变型为主,应推广快速分子药敏试剂盒的临床应用,快速并提高对耐药结核病的诊断.
作者:多丽娜;王婷婷;宋兴勃;谢轶;陆小军;范红;应斌武;王兰兰;张磊 刊期: 2011年第05期
目的 探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓中CD133的表达及其临床意义.方法 应用流式细胞仪采用直接免疫荧光标记法,分别测定31例难治性贫血伴幼稚细胞增多(RAEB)、10例难治性血细胞减少伴多系发育异常(RCMD)以及11例再生障碍性贫血患者骨髓中CD133+细胞和CD34+/CD38-细胞比例,对比分析CD133及CD34/CD38在不同亚型MDS中的表达及临床意义.结果 在RAEB型MDS患者骨髓有核细胞中,CD133阳性细胞平均占6.75%,RCMD患者平均占1.41%,而再生障碍性贫血对照组占2.70%,RAEB组显著高于其他两组(P<0.05);再障对照组与RCMD组之间无显著性差异(P>0.05);CD34+/CD38-细胞比例在3组中均小于1%,统计学上无显著性差异(P>0.05).结论 CD133在MDS的进展类型RAEB患者骨髓细胞中高表达,CD133有助于RAEB分型诊断;而CD34+/CD38标记在MDS分型诊断中并无价值.
作者:钟立业;杜欣;耿素霞;翁建宇;郑海涛;吴穗晶;李扬秋 刊期: 2011年第05期
目的 研究在颈椎单开门OsteoMed M3钉板内固定椎管扩大成形术中螺钉不同角度固定的拔出力大小.方法 6具颈椎标本随机编号分别行后路单开门OsteoMed M3钉板内固定,在关节突关节侧行螺钉固定时按序按组分别采用螺钉固定角度垂直于侧块皮质0°、外倾30°及外倾45°位组,使用ElectroForce测试仪测试螺钉的大拔出力.结果 外倾0°组、30°组和45°组大拔出阻力平均为(81.60±7.33)N、(150.05±15.57)N和(160.08±17.77)N.外倾0°组拔出力小于外倾30°及外倾45°位组(P<0.05),而外倾30°及外倾45°位组之间拔出力无统计学差异(P>0.05).结论 颈椎单开门OsteoMedM3钉板内固定椎管扩大成形术中螺钉外倾30°以上角度固定抗拔出能力高.
作者:胡孔和;靳安民;段扬;刘成龙;闵少雄;朱立新;赵卫东 刊期: 2011年第05期
目的 探讨中国人群CCR5△32、CCR2-64I、SDF1-3'A三种基因的多态性与HIV-1感染之间的关系.方法 检索国内外有关中国人群CCR5△32、CCR2-64I、SDF1-3'A基因多态性与HIV感染相关性的病例对照研究文献并进行Meta分析.结果 符合CCR5△32的研究共14个,累计HIV感染者病例1607例,正常对照组1632例.杂合子(wt/mt)、纯合子(mt/mt)和杂合子加纯合子(wt/mt+mt/mt)与野生基因型(wt/wt)相比合并的OR值(95%CI)分别为1.156(0.808,1.654)、0.997(0.198,5.022)、1.149(0.808,1.634).符合CCR2-64I的研究共12个,累计HIV感染者病例1415例,正常对照组1239例.杂合子(wt/mt)、纯合子(mt/mt)和杂合子加纯合子(wt/mt+mt/mt)与野生基因型(wt/wt)相比合并的OR值(95%CI)分别为1.005(0.844,1.197)、1.191(0.808,1.754)、1.028(0.870,1.214).符合SDF1-3'A的研究10个,累计HIV感染者病例1179例,正常对照组1003例.杂合子(wt/mt)、纯合子(mt/wt)和纯合子加杂合子(wt/mt+mt/mt)与野生基因型(wt/wt)相比合并的OR值(95%CI)分别为1.010(0.830,1.228)、1.188(0.860,1.643)、1.038(0.861,1.250).结论 中国人群CCR5△32、CCR2-64I、SDF1-3'A三种抗性基因与HIV-1感染之间无相关性,显示CCR5△32、CCR2-641、SDF1-3'A三种基因对中国人群HIV-1感染可能不具有保护作用,提示中国人群可能为易感人群.
作者:贺小峰;贾宁静;苏娇;陈清;朱文昌;俞守义 刊期: 2011年第05期