刘丽娟;赵东阳;王建;姚陈果;孙才新;唐均英
目的 研究低强度脉冲超声(LIPUS)对大鼠正畸性牙根吸收过程中骨保护素(OPG)及核激活因子受体配体(RANKL)表达的影响.方法 32只Wistar雄性大鼠(6~8周),随机分成4组:阴性空白对照1组、实验组2组(100 MW/cm2超声组和150 MW/cm2超声组),接受LIPUS作用;对照组1组,不接受LIPUS作用,每组8只.100 g初始力值加载于大鼠右侧上颌中切牙与第一磨牙之间10 d.每组取上颌第一磨牙及其牙周组织,制作以上颌第一磨牙为中心的、近远中方向的组织切片,行OPG、RANKL免疫组化染色,光镜观察并作免疫组化光密度分析,对实验结果进行单因素方差分析.结果 LIPUS超声组OPG表达上调(P<0.05),100 MW/cm2与150 MW/cm2超声组间OPG表达有统计意义(P<0.05);LIPUS超声组RANKL表达下调(P<0.05),两超声组间RANKL表达有统计学意义(P<0.05).结论 LIPUS通过调节OPG/RANKL比值,进一步调节破骨细胞分化,进而对大鼠正畸性牙根吸收有治疗作用.
作者:刘志峰;徐娟;鄂玲玲;王东胜;贝丹丹 刊期: 2011年第05期
目的 研制光激化学发光免疫分析技术(AlphaLISA)建立人血清乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的快速检测试剂盒.方法 采用中和抑制法建立HBeAb AlphaLISA试剂盒.结果 自制HBeAb试剂盒灵敏度为0.003 NCU/ml,可测范围为0.003-16 NCU/ml.批内与批间的精密度分别为5.3%和6.8%,与HBeAb无交叉反应.使用自制试剂与罗氏化学发光试剂盒同时检测136份临床血清样本,结果具有相关性(r=0.961).结论 自制HBeAb AlphaLISA试剂盒的各项性能指标能够达到临床检测要求,可用于临床血清样本HBeAb浓度的测定.
作者:马强;贺安;董志宁;刘天才;邹丽萍;林冠峰;李明;吴英松 刊期: 2011年第05期
目的 探讨脂联素对自发性2型糖尿病(OLETF)大鼠肝脏胰岛素信号通路的影响及其分子信号机制.方法 自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只.于8周和32周龄分别宰杀.检测空腹血糖、血浆胰岛素、脂联素、血脂水平,并以ELISA、免疫印迹和免疫组化法检测肝脏脂联素、胰岛素受体底物-1酪氨酸磷酸化水平(py-IRS-1)以及IKKβ和NFkB表达水平.结果 OLETF鼠血浆脂联素水平在8周龄和32周龄均显著低于LETO鼠(P<0.05).32周龄时OLETF鼠血清胰岛素、TG、FFA、ISI均显著升高(P<0.05).脂联素水平与FBG、血清胰岛素、TG、FFA、ISI数显著相关(P均<0.01).OLETF鼠肝脏脂联素和py-IRS-1水平在8周龄和32周龄均显著低于LETO鼠,IKKβ和NFkB水平也显著升高(P<0.01).py-IRS-1与肝组织脂联素、IKKβ和NFkB变化显著相关(P<0.01).32周龄时脂联素水平与NF-κB和py-IRS-1显著负相关(P<0.05).结论OLETF鼠脂联素可能通过NFkB通路影响肝脏IRS-1酪氨酸磷酸化水平,导致肝脏的胰岛素信号传导障碍及糖、脂代谢紊乱,参与2型糖尿病的发生发展.
作者:朱波;李晨钟;钱毅;潘永华;李佳;张燕;薛耀明 刊期: 2011年第05期
目的 探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓中CD133的表达及其临床意义.方法 应用流式细胞仪采用直接免疫荧光标记法,分别测定31例难治性贫血伴幼稚细胞增多(RAEB)、10例难治性血细胞减少伴多系发育异常(RCMD)以及11例再生障碍性贫血患者骨髓中CD133+细胞和CD34+/CD38-细胞比例,对比分析CD133及CD34/CD38在不同亚型MDS中的表达及临床意义.结果 在RAEB型MDS患者骨髓有核细胞中,CD133阳性细胞平均占6.75%,RCMD患者平均占1.41%,而再生障碍性贫血对照组占2.70%,RAEB组显著高于其他两组(P<0.05);再障对照组与RCMD组之间无显著性差异(P>0.05);CD34+/CD38-细胞比例在3组中均小于1%,统计学上无显著性差异(P>0.05).结论 CD133在MDS的进展类型RAEB患者骨髓细胞中高表达,CD133有助于RAEB分型诊断;而CD34+/CD38标记在MDS分型诊断中并无价值.
作者:钟立业;杜欣;耿素霞;翁建宇;郑海涛;吴穗晶;李扬秋 刊期: 2011年第05期
目的 报告显微神经外科手术治愈12岁男孩因复合型脂肪瘤导致脊髓拴系综合征1例,并结合文献讨论该病的分型、诊断、治疗和预后.方法 患者主诉渐进性排尿障碍2年多,检查存在会阴部感觉迟钝,肛门反射消失,肛门松弛,右侧提睾反射消失,骶尾部可触及脊柱裂口.腰骶椎MRI检查提示脊髓低位,脊髓栓系,骶椎脊柱裂,脊膜膨出,合并椎管内外脂肪瘤.超声检查提示残余尿量显著增加.确定诊断.显微手术借助接触式激光刀等松解脊髓、马尾神经与脂肪瘤的粘连,切除椎管内外脂肪瘤,修补局部硬膜缺损.结果 术后恢复顺利,随访半年,排尿功能恢复正常.结论 根据硬膜完整性可以将脊髓脂肪瘤分成2型,本例属于伴硬膜缺损型.临床表现、特别是MRI检查可以确定诊断,显微神经外科手术是目前唯一有效治疗方法,早期、特别是无脊髓功能损害前手术更好.局部硬膜是否完整对疗效影响大,硬膜缺损者手术难度大、效果欠佳.充分松解粘连,避免脊髓圆锥和马尾神经损伤是本例手术成功的关键.复发者是否再次手术需要谨慎评估.
作者:彭林;徐波涛 刊期: 2011年第05期
目的 探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对失血性休克-内毒素二次打击大鼠肾损伤的保护作用.方法 45只成年Wistar大鼠随机分为假二次打击组(S组)、二次打击组(M组)和PHC 1 mg/kg组(PHC1组)、2 mg/kg组(PHC2组)、3 mg/kg组(PHC3组).取动脉血2 ml测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-8(IL-8)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN),测定肾粘附分子-1(ICAM-1)和核转录因子-κB(NF-κB),HE染色观察肾的病理改变.结果 PHC1、PHC2、PHC3组与M组相比,血清TNF-α、IL-1、IL-8、Cr、BUN含量明显降低,肾组织ICAM-1和NF-κB表达明显减弱(P<0.05).与PHC2、PHC3组比较,PHC1组血清TNF-α,、IL-1、IL-8、Cr、BUN明显降低(P<0.05).光镜下PHC1、PHC2、PHC3组肾小管损伤均比M组轻.结论 PHC可抑制失血性休克-内毒素二次打击大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-8、Cr、BUN及ICAM-1、NF-κB在肾脏表达,减轻肾功能和肾小管的损伤程度,以1 mg/kg作用显著.
作者:何双双;林春水;古妙宁;陈冬婷;宗士兰;陈莺 刊期: 2011年第05期
目的 探讨B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石的可行性、疗效,探讨其临床价值.方法 回顾性分析2009年1月~2010年3月我院36例B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石,对患者基本资料,结石大小,手术时间,出血量,相关并发症及结石清除率等进行分析.结果 36例均在B超X线联合引导下准确建立理想的双工作通道,结石一期清除率为80.56%,平均手术时间100min,术后中位住院时间13.5 d(13~14d),术后5例行二期碎石术,1月后复查均无结石残留.18例术前血肌酐升高患者中16例恢复正常范围.结论 采用B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石是安全、有效的手段,且术后并发症少,值得推广.
作者:李虎;罗文平;董超雄 刊期: 2011年第05期
目的 运用RNA干扰(RNA inteference,RNAi)技术阻断胰腺癌细胞株PANC1中OCT4基因表达,并研究该基因沉默后对细胞增殖与凋亡的影响.方法 利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的人Octamer binding factor 4 (OCT4)的小干扰RNA转染入胰腺癌细胞株PANC1中.RT-PCR法测定胰腺癌细胞内OCT4 mRNA的表达.Western Blot测定OCT4、PARP.CCK8法测定细胞生长曲线观察细胞增殖的抑制情况.流式细胞仪测定细胞凋亡率的变化.结果 化学合成的人OCT4siRNA能有效地抑制PANC1细胞中OCT4的表达(P<0.05).OCT4 siRNA组中细胞增殖减慢,凋亡率较对照组明显增加(P<0.05).干扰OCT4能够激活PARP的表达.结论 体外实验初步证明OCT4基因在胰腺癌细胞株增殖分化与凋亡方面扮演重要角色.通过沉默其表达可抑制胰腺癌细胞株PANC1增殖并诱导其凋亡.
作者:黄健清 刊期: 2011年第05期
目的 探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用.方法 6~8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只.A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型.而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨髓MSCs细胞,A、B组各注射等体积的PBS.MSCs移植后按既定时间处死小鼠,利用PCR检测卵巢中GFP基因以判断MSCs是否到达卵巢;通过对卵巢组织切片HE染色以及细胞凋亡分析来检测MSCs是否对免疫损伤卵巢有修复作用及其机制.结果 PCR结果表明MSCs经腹腔移植可直接到达免疫损伤卵巢;MSCs移植可促进免疫损伤卵巢组织的修复;相应地,移植组颗粒细胞的凋亡比非移植组明显减少.结论 腹腔移植MSCs可促进免疫损伤卵巢的修复,其机制可能与减少颗粒细胞凋亡有关.
作者:李威娜;谢琪璇;秦俊文;黄伟;叶绍恩;罗峰;张春雪;肖銮娟 刊期: 2011年第05期
目的 探讨术中磁共振和功能神经导航在语言区病变手术中的应用价值.方法 61例右利手患者在术中磁共振和基于血氧水平依赖和弥散张量成像技术的功能神经导航辅助下实施语言功能区病变手术,按部位分为A组(左额下回后部附近病变)和B组(左颞上回后部附近病变),术前及术后2周用西方失语症成套试验对所有患者进行语言评估,获得失语指数(AQ).结果 AQ术前正常者(AQ≥93.8)33例,AQ术后与AQ术前对比无统计学差异(P>0.05),AQ术前低于正常者28例,AO术后较术前对比有所提高(P<0.01).术后2周时,14例(23.0%)出现语言功能下降,仅有2例(3.2%)在6个月随访时仍存在语言功能障碍.41例获得全切除,20例获得次全切除,AQ变化值(△AQ=AQ术后-AQ术前)与病变切除程度无关,A组△AQ高于B组.结论 术中磁共振和功能神经导航技术能够较好显示病变与语言相关皮层及纤维束之间的关系,有助于语言功能区病变患者术后语言功能的保留.
作者:王飞;陈晓雷;孙正辉;赵岩;孙国臣;王宇博;宋志军;许百男 刊期: 2011年第05期
目的 研究中青年颈椎无骨折脱位的急性颈脊髓中央型损伤的手术效果.方法 选择我院脊柱外科2005年8月~2009年8月间收治的中青年无骨折脱位型颈脊髓损伤患者中资料完整者58例,根据治疗方法不同分为手术组(33例)和非手术组(25例).分别于入院时、14d及1年随访时进行ASIA分级、ASIA运动及感觉评分.采用SPSS16.0软件完成统计分析两组神经症状改善情况,评价手术治疗效果.结果 终ASIA分级中D-E级所占比例、运动及感觉评分,手术组均明显优于非手术组(P<0.05).结论 对中青年颈椎脊髓中央性损伤患者,存在明显的脊髓受压或MRI检查显示脊髓异常信号在1个椎体高度以上者,应尽早手术治疗.手术可以解除损伤脊髓的受压,改善其微循环,利于脊髓功能的恢复.
作者:常青;邓展生;陈静 刊期: 2011年第05期
目的 检测干细胞转录因子Oct-4皮肤鳞状细胞癌(SCC)、脂溢性角化病(SK)的组织表达,分析其表达差异及与肿瘤干细胞的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测Oct-4在35例SCC、21例SK及15例正常对照皮肤组织中的表达.结果 Oct-4在正常皮肤组织表达为阴性,在SCC、SK之间表达有显著性差异(P<0.05),间接反映SCC、SK的恶性程度不同.结论 SCC、SK中表达Oct-4基因的细胞很可能是SCC、SK的干细胞,这将为其终分离和鉴定人SCC、SK干细胞提供重要基础,将有助于揭示SCC、SK的肿瘤起始细胞,从而对预防和治疗SCC、SK有重大意义.
作者:李毓阳;戴永江;邓斌;梁雄安;谢志杰;陈海富 刊期: 2011年第05期
目的 合成具有抗肿瘤活性的新型CDKs抑制剂,并评价其抗肿瘤活性.方法 根据生物活性叠加原理,将1-(甲磺酰基)哌啶-4-氨和嘧啶杂环片段合理组合,设计合成了5个结构新颖的N4-取代苯胺基-N2-(1-甲磺酰基哌啶-4-氨基)-5-硝基嘧啶类化合物3a~3e.结果 目标化合物的结构经质谱和核磁共振氢谱等表征确认.采用MTT法测试了目标化合物抑制肿瘤细胞增殖活性.测试结果表明,部分化合物对MCF-7(人乳腺癌细胞)肿瘤细胞有弱的细胞毒性,而对HepG2(人肝癌细胞)没有抑制活性,表现出一定的选择性.结论 化合物3b对MCF-7(人乳腺癌细胞)肿瘤细胞有较强的抑制活性(IC50=13.6 μmol·L-1).初步的构效关系研究表明化合物的立体结构可能对其抗肿瘤活性影响较大.
作者:游文玮;赵培亮;邹敏;周中振;段安娜;吴曙光 刊期: 2011年第05期
目的 观察5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗寻常型银屑病模型的疗效,探讨ALA-PDT治疗寻常型银屑病的可行性.方法 5%心得安搽剂外涂豚鼠耳背部皮肤建立寻常型银屑病模型.20%ALA溶液局部封包模型皮损4 h后,635 nm半导体激光照射患处,能量密度12 J/cm2.分设模型对照组、单纯ALA组、单纯照光组、一次ALA-PDT治疗组和二次ALA-PDT治疗组5个组别,于治疗后第7、14、21及28天进行外观与组织活检观察.结果 在肉眼观察、表皮厚度和增殖细胞核抗原(PCNA)表达三项指标观察中,ALA-PDT均能明显改善寻常型银屑病模型的病变,二次治疗组疗效优于一次治疗组.结论 ALA-PDT疗法能治愈以表皮过度增殖为特征的豚鼠耳背部寻常型银屑病模型皮损,增加治疗次数疗效更佳.
作者:谢光辉;李康英;刘宏伟;段世军 刊期: 2011年第05期
目的 探讨特发性卵巢早衰(POF)的临床特点,为早期诊断POF提供依据.方法 回顾性分析2009年2月~2010年1月的39例特发性卵巢早衰患者的临床资料,对月经特点、发病情况、B超结果和妊娠情况等进行研究.结果 1例患者为原发性闭经,38例为继发性闭经,平均闭经5.82±3.88年,2例(5.1%)在月经初潮后有1~2次月经即出现闭经,闭经前月经规律而突然闭经患者9例(23%),月经紊乱27例(69%),其中3例(7.7%)月经频发,24例(61.5%)患者早期表现月经稀发,逐渐出现闭经.30岁以前发病的POF患者占87.2%,94.9%患者初潮后15年发病.特发性POF患者的子宫体积、卵巢体积小于正常组,基础窦卵泡计数(AFC)明显少于对照组,阴道超声检测有35例(89.7%)患者至少探及一侧卵巢,31例(79.5%)患者有窦卵泡样回声.用阴道B超定期监测有2例患者恢复排卵后自然妊娠,妊娠率5.1%.结论 对月经不规律、稀发、频发患者,应用B超监测子宫体积,卵巢体积和AFC,同时进行激素测定,及早识别是否有POF的可能;使用HRT时积极监测,必要时辅助生殖技术助孕.
作者:覃春容;陈士岭;陈薪;夏容;罗燕群 刊期: 2011年第05期
目的 探讨高糖对小鼠足细胞podocalyxin表达的影响及结缔组织生长因子(CTGF)参与其损伤的可能机制.方法 构建针对CTGF基因的特异性siRNA质粒并转染至小鼠足细胞.将体外培养的足细胞分为6组(1)正常对照组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖1 g/L;(2)等渗对照组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖1 g/L,甘露醇3.5 g/L;(3)高糖组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖4.5 g/L;(4)高糖+空白对照组:足细胞转染空白质粒后于高糖培养基中培养;(5)高糖+阴性对照组:足细胞转染含无关序列的重组质粒后于高糖培养基中培养;(6)高糖+干扰组:足细胞转染针对CTGF的siRNA表达质粒后于高糖培养基中培养.Western blot方法检测小鼠足细胞Podocalyxin、CTGF蛋白表达及细胞外信号调节激酶(ERK1/2)磷酸化水平.结果 高糖培养足细胞24、48 h时均可下调其Podocalyxin蛋白表达量(P<0.05).并可诱导CTGF蛋白表达增加(P<0.05).同时高糖可以活化足细胞ERK1/2信号途径,在高糖刺激30 min时开始活化,持续活化至24 h.特异性siRNA干扰CTGF合成后,ERK1/2活化减少,并且足细胞Podocalyxin表达升高.结论 CTGF是高糖诱导小鼠足细胞损伤的重要介质,可通过ERK1/2途径诱导podocalyxin表达下降,针对CTGF的siRNA能明显改善podocalyxin表达量,为DN的治疗提供新的思路.
作者:章俊;李萍华;杨蕾;杜庆生;郭婷婷;汤珣 刊期: 2011年第05期
目的 探讨瘦素和瘦素受体在原发性肝细胞癌中的表达及其与肝癌各临床病理因素的关系.方法 应用免疫组化EnVison法检测81例原发性肝细胞癌患者组织中瘦素和瘦素受体的表达情况,分析其表达特点和患者的临床病理特征之间的关系.结果 瘦素和瘦素受体在肝癌中的过表达率分别为56.8%和35.8%.二者表达没有显著相关性(r=0.236,P=0.034).瘦素受体表达与肿瘤直径和TNM分期相关(P<0.05),与年龄、体质量指数、血清AFP值、HBsAg状态、肿瘤分化程度、有无癌栓和有无肝硬化无关(P>0.05).瘦素表达与上述各临床病理因素均无关(P>0.05).结论 瘦素受体的过表达可能对原发性肝癌具有抑制作用,瘦素和瘦素受体相结合发挥功能时主要取决于瘦素受体的表达状态.
作者:陈丽;石燕;蒋成英;孙琼;王玲兄;戴广海 刊期: 2011年第05期
目的 研究子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)组织中抑癌基因ARHI的mRNA和蛋白表达情况.方法 利用RT-PCR和Western Blot免疫印迹的方法,对EMs的异位内膜组织、在位内膜组织和非EMs在位内膜组织(正常内膜组织)进行mRNA和蛋白表达的半定量分析.利用原位杂交和免疫组化技术对研究各组进行定性及定位分析.结果 (1)ARHI mRNA和蛋白在各组中均有表达,异位内膜的表达高于在位内膜和正常内膜,差异显著(P<0.005),在位内膜组与正常对照组比较,ARHI的表达无明显差异(P>0.05);(2)原位杂交阳性率分别为非EMs组97.3%,EMs异位内膜组100%,EMs在位内膜组93.8%;(3)免疫组化阳性率分别为非EMs组93.2%,EMs异位内膜组100%,EMs在位内膜组92.3%;(4)ARHI的DNA与蛋白表达一致;(5)5例恶变的异位内膜ARHI免疫组化检测,4例呈阴性,1例呈弱阳性表达.结论 抑癌基因ARHI在子宫内膜组织中均表达,且在异位内膜中呈表达上调,而在恶变的异位内膜中多呈阴性表达,提示ARHI基因可能与子宫内膜异位症不孕及恶变相关.
作者:李洁;汪淑娟;孙璐;李亚里 刊期: 2011年第05期
目的 筛选肺鳞癌患者淋巴转移差异表达基因群及验证其中部分基因.方法 原发癌组织及区域淋巴结取自10例接受根治性手术的肺鳞癌患者.根据组织来源将标本分为3组:不伴淋巴转移的肺鳞癌组织(TxN-,n=5)、伴有淋巴转移的肺鳞癌组织(TxN+,n=5)及相应转移淋巴结中的肺鳞癌细胞(N+,n=5).对各组进行激光显微切割以获得纯净癌细胞,T7RNA线性扩增获取足够量的RNA,实验通道和参照通道分别标记以后与含6000个已知人类基因或表达序列标签的cDNA基因芯片杂交,扫描荧光信号以后进行数据分析.通过免疫组化的方法验证CCL20基因的表达.结果 共有37个基因可将TxN+组与TxN-组区分开,TxN+组中高表达的基因有85个,29个基因在TxN-组高表达.N+组与TxN+组没有发现具有显著性的差异表达基因.CCL20蛋白在TxN-组表达明显高于TxN+组(P<0.05).结论 肺鳞癌的淋巴转移表型的获得可能是早期事件.这些差异基因的发现有助于探讨肺鳞癌淋巴转移的分子机制和寻找新的治疗靶点.
作者:黎力;葛明建;赵晓龙 刊期: 2011年第05期
目的 证明纳秒级陡脉冲能够诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡,且钙离子是其凋亡通路的重要介质.方法 用不同参数组的纳秒级陡脉冲处理细胞,Annexin V/PI双染流式细胞仪检测其早期凋亡率及坏死率,用0、25、50、100 μmol/L BAP-TA-AM分组整合细胞内因纳秒级陡脉冲处理而增高的游离Ca2+后,MTT检测细胞存活率,Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡率,Western-blot技术检测caspase 12蛋白表达的变化.结果 Annexin V/PI双染流式细胞术结果示:佳治疗参数为场强90KV/cm;脉宽:100 ns;脉冲作用时间:30 s;频率:1Hz,其凋亡率高(60.31±5.67)%,坏死率为(1.35±0.39)%;BAPTA-AM作用过的细胞经纳秒级陡脉冲佳治疗参数处理后细胞存活率明显高于单用纳秒级陡脉冲处理的细胞(P<0.05).凋亡率也同时降低(O<0.05),caspase-12蛋白表达水平也相应降低(P<0.05).结论 纳秒级陡脉冲能诱导SKOV3细胞凋亡,细胞内游离的钙离子增高是其凋亡通路的重要介质,并有可能介导内质网通路.
作者:刘丽娟;赵东阳;王建;姚陈果;孙才新;唐均英 刊期: 2011年第05期