李虎；罗文平；董超雄
目的 应用免疫磁珠法分离筛选人乳牙牙髓干细胞,并做培养鉴定.方法 采用STRO-1为标记物以免疫磁珠分离筛选人乳牙牙髓干细胞,观察细胞形态及生长情况,流式细胞仪检测细胞表型,并检测细胞体外多向分化能力.结果 应用免疫磁珠法筛选人乳牙牙髓细胞可获得乳牙牙髓于细胞,经统计学处理证明看其生长速度慢于牙髓细胞,细胞表型分析证实CD29、CD105高表达,CD34、CD45低表达.矿化诱导和成脂诱导证实STRO-1+乳牙牙髓细胞具有干细胞多向分化的能力.结论 免疫磁珠法是有效的分离纯化人乳牙牙髓干细胞的方法.所分离的细胞具有干细胞的表型特点及多向分化能力.
作者：丁祥龙；陈柯；申元源 刊期： 2011年第05期
目的 研究中青年颈椎无骨折脱位的急性颈脊髓中央型损伤的手术效果.方法 选择我院脊柱外科2005年8月～2009年8月间收治的中青年无骨折脱位型颈脊髓损伤患者中资料完整者58例,根据治疗方法不同分为手术组(33例)和非手术组(25例).分别于入院时、14d及1年随访时进行ASIA分级、ASIA运动及感觉评分.采用SPSS16.0软件完成统计分析两组神经症状改善情况,评价手术治疗效果.结果 终ASIA分级中D-E级所占比例、运动及感觉评分,手术组均明显优于非手术组(P<0.05).结论 对中青年颈椎脊髓中央性损伤患者,存在明显的脊髓受压或MRI检查显示脊髓异常信号在1个椎体高度以上者,应尽早手术治疗.手术可以解除损伤脊髓的受压,改善其微循环,利于脊髓功能的恢复.
作者：常青；邓展生；陈静 刊期： 2011年第05期
目的 探讨B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石的可行性、疗效,探讨其临床价值.方法 回顾性分析2009年1月～2010年3月我院36例B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石,对患者基本资料,结石大小,手术时间,出血量,相关并发症及结石清除率等进行分析.结果 36例均在B超X线联合引导下准确建立理想的双工作通道,结石一期清除率为80.56%,平均手术时间100min,术后中位住院时间13.5 d(13～14d),术后5例行二期碎石术,1月后复查均无结石残留.18例术前血肌酐升高患者中16例恢复正常范围.结论 采用B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石是安全、有效的手段,且术后并发症少,值得推广.
作者：李虎；罗文平；董超雄 刊期： 2011年第05期
目的 探讨瘦素和瘦素受体在原发性肝细胞癌中的表达及其与肝癌各临床病理因素的关系.方法 应用免疫组化EnVison法检测81例原发性肝细胞癌患者组织中瘦素和瘦素受体的表达情况,分析其表达特点和患者的临床病理特征之间的关系.结果 瘦素和瘦素受体在肝癌中的过表达率分别为56.8%和35.8%.二者表达没有显著相关性(r=0.236,P=0.034).瘦素受体表达与肿瘤直径和TNM分期相关(P<0.05),与年龄、体质量指数、血清AFP值、HBsAg状态、肿瘤分化程度、有无癌栓和有无肝硬化无关(P>0.05).瘦素表达与上述各临床病理因素均无关(P>0.05).结论 瘦素受体的过表达可能对原发性肝癌具有抑制作用,瘦素和瘦素受体相结合发挥功能时主要取决于瘦素受体的表达状态.
作者：陈丽；石燕；蒋成英；孙琼；王玲兄；戴广海 刊期： 2011年第05期
目的 探讨小于35周岁不孕妇女的基础卵泡刺激素(FSH)升高是否影响卵子和胚胎的数量、质量及其临床结局.方法 回顾性分析294个年龄<35周岁的体外受精-胚胎移植治疗周期,按基础FSH水平分A组(10～14.99 U/L)、B组(15～19.99 U/L)和C组(FSH≥20 U/L),比较获卵数、卵子和胚胎的形态学、临床结局等指标的差异.结果 B组和C组的获卵数、总胚胎数和优质胚胎数较A组低,促性腺激素总量较A组高;三组间成熟卵子率、卵裂球数目比例、正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率、活产率和早期流产率差异无统计学意义,基础FSH≥15 U/L妇女的临床妊娠率和活产率有降低的趋势.结论 小于35岁不孕妇女随基础FSH升高,尤其≥15 U/L者,卵巢储备功能减退,卵子数和胚胎数明显减少,但卵子和胚胎质量未受影响,仍能获得相当好的临床妊娠率.
作者：陈士岭；罗燕群；夏容；陈薪；施晓鋆；郑海燕；王乐乐；吴雅琴 刊期： 2011年第05期
目的 利用激光三维扫描技术,建立一种快速简便的颌面部软组织三维数字化模型的重建方法,直观准确地观察监测颌面部软组织在正畸过程中的三维变化.方法 1例咬合关系正常健康女性,制作安氏Ⅱ类颌面部软组织模型,距三维激光扫描仪80 cm,扫描采集多幅点云文件,GeoMagic 10.0软件重建形成面部的三维模型,测量颌面部软组织指标.佩戴牙模2次,重复上述激光三维扫描,重建后进行测量.结果 重建形成具有较高清晰度的颌面部三维数字化模型,以及简易的安氏Ⅱ类颌面部软组织轮廓的数字化模型;不同的三维数字化模型直接融合对比,唇部出现高信区域代表颌面部软组织明显变化;利用软件分析工具直接测量鼻唇角、审美平面至上下唇突点及颏唇沟的距离,治疗前模型:111.86°、-3.57mm、-2.54 mm、3.95 mm,治疗中模型:114.31°.-2.73 mm、-1.06 mm、3.46 mm,治疗后模型:116.53°、-0.15 mm、0.64 mm、3.11 mm.结论 三维激光扫描是一种真实可靠、低成本、易操作的颌面部软组织建模方法,可为正畸临床中颌面部软组织分析及病历资料保存提供技术手段.
作者：田华；吴补领；毕振宇；焦培峰；赵卫东；孙凤阳；徐会勇；刘阳 刊期： 2011年第05期
目的 筛选肺鳞癌患者淋巴转移差异表达基因群及验证其中部分基因.方法 原发癌组织及区域淋巴结取自10例接受根治性手术的肺鳞癌患者.根据组织来源将标本分为3组:不伴淋巴转移的肺鳞癌组织(TxN-,n=5)、伴有淋巴转移的肺鳞癌组织(TxN+,n=5)及相应转移淋巴结中的肺鳞癌细胞(N+,n=5).对各组进行激光显微切割以获得纯净癌细胞,T7RNA线性扩增获取足够量的RNA,实验通道和参照通道分别标记以后与含6000个已知人类基因或表达序列标签的cDNA基因芯片杂交,扫描荧光信号以后进行数据分析.通过免疫组化的方法验证CCL20基因的表达.结果 共有37个基因可将TxN+组与TxN-组区分开,TxN+组中高表达的基因有85个,29个基因在TxN-组高表达.N+组与TxN+组没有发现具有显著性的差异表达基因.CCL20蛋白在TxN-组表达明显高于TxN+组(P<0.05).结论 肺鳞癌的淋巴转移表型的获得可能是早期事件.这些差异基因的发现有助于探讨肺鳞癌淋巴转移的分子机制和寻找新的治疗靶点.
作者：黎力；葛明建；赵晓龙 刊期： 2011年第05期
目的 观察5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗寻常型银屑病模型的疗效,探讨ALA-PDT治疗寻常型银屑病的可行性.方法 5%心得安搽剂外涂豚鼠耳背部皮肤建立寻常型银屑病模型.20%ALA溶液局部封包模型皮损4 h后,635 nm半导体激光照射患处,能量密度12 J/cm2.分设模型对照组、单纯ALA组、单纯照光组、一次ALA-PDT治疗组和二次ALA-PDT治疗组5个组别,于治疗后第7、14、21及28天进行外观与组织活检观察.结果 在肉眼观察、表皮厚度和增殖细胞核抗原(PCNA)表达三项指标观察中,ALA-PDT均能明显改善寻常型银屑病模型的病变,二次治疗组疗效优于一次治疗组.结论 ALA-PDT疗法能治愈以表皮过度增殖为特征的豚鼠耳背部寻常型银屑病模型皮损,增加治疗次数疗效更佳.
作者：谢光辉；李康英；刘宏伟；段世军 刊期： 2011年第05期
目的 检测干细胞转录因子Oct-4皮肤鳞状细胞癌(SCC)、脂溢性角化病(SK)的组织表达,分析其表达差异及与肿瘤干细胞的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测Oct-4在35例SCC、21例SK及15例正常对照皮肤组织中的表达.结果 Oct-4在正常皮肤组织表达为阴性,在SCC、SK之间表达有显著性差异(P<0.05),间接反映SCC、SK的恶性程度不同.结论 SCC、SK中表达Oct-4基因的细胞很可能是SCC、SK的干细胞,这将为其终分离和鉴定人SCC、SK干细胞提供重要基础,将有助于揭示SCC、SK的肿瘤起始细胞,从而对预防和治疗SCC、SK有重大意义.
作者：李毓阳；戴永江；邓斌；梁雄安；谢志杰；陈海富 刊期： 2011年第05期
目的 应用分子线性探针Geno Type(R)MTBDRplus Assay(Gtplus)试剂盒检测四川地区耐多药结核分枝杆菌(MTB)株的基因型特征,并初步了解耐药结核病的流行情况.方法 选取结核确诊患者105份临床标本和68株临床分离株,应用Gtplus试剂盒检测MTB耐利福平和异烟肼相关的rpoB、katG、inhA基因的突变,推测其对利福平和异烟肼的耐药性.结果 151例样本的Gtplus结果有效,总耐药率和耐多药率分别为29.14%(44/151)和17.22%(26/151);耐利福平和高、低水平耐异烟肼的突变菌株分别为21.85%(33/151)、21.19%(32/151)和3.31%(5/151);突变型以rpoB S531L、katGS315T1和inhA C-15T为主.痰标本组的耐多药菌株比率明显高于肺外标本组.结论 四川地区MTB耐药形势严峻,尤以耐多药结核病的情况严重,耐药菌株以rpoB S531L和katG S315T1突变型为主,应推广快速分子药敏试剂盒的临床应用,快速并提高对耐药结核病的诊断.
作者：多丽娜；王婷婷；宋兴勃；谢轶；陆小军；范红；应斌武；王兰兰；张磊 刊期： 2011年第05期
目的 运用RNA干扰(RNA inteference,RNAi)技术阻断胰腺癌细胞株PANC1中OCT4基因表达,并研究该基因沉默后对细胞增殖与凋亡的影响.方法 利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的人Octamer binding factor 4 (OCT4)的小干扰RNA转染入胰腺癌细胞株PANC1中.RT-PCR法测定胰腺癌细胞内OCT4 mRNA的表达.Western Blot测定OCT4、PARP.CCK8法测定细胞生长曲线观察细胞增殖的抑制情况.流式细胞仪测定细胞凋亡率的变化.结果 化学合成的人OCT4siRNA能有效地抑制PANC1细胞中OCT4的表达(P<0.05).OCT4 siRNA组中细胞增殖减慢,凋亡率较对照组明显增加(P<0.05).干扰OCT4能够激活PARP的表达.结论 体外实验初步证明OCT4基因在胰腺癌细胞株增殖分化与凋亡方面扮演重要角色.通过沉默其表达可抑制胰腺癌细胞株PANC1增殖并诱导其凋亡.
作者：黄健清 刊期： 2011年第05期
分析临床分期为T1-3N1-2M0肾癌的临床病理及预后资料,探讨其生物学行为特点.方法 1988年至2008年间我院共收治无远处转移肾癌并行开放性肾癌根治术的患者531例,其中42例伴淋巴结转移患者顺利完成了手术,对其临床病理及预后资料进行回顾性分析.结果 42例患者中,19.0%为T1期,21.4%为T2期,59.5%为T3期;42.9%为N1期和57.1%为N2期.末次随访30例(71.4%)出现肿瘤复发,26例(61.9%)患者死亡,83.3%(25/30)初次复发即为多发性.42例患者中位肿瘤特异生存期(CSS)和无病生存期(DFS)分别为23个月和11个月.多因素生存分析显示,病理分级(P＝0.005),淋巴结分期(P＝0.014)和T分期(P=0.037)是CSS的独立影响因素;术前状态(P＝0.002),肿瘤大小(P=0.007),病理分级(P=0.009)和淋巴结分期(P=0.019)是DFS的独立影响因素.结论 T1-3N1-2M0期肾癌患者预后较差.淋巴结分期是T1-3N1-2M0期肾癌CSS和DFS的独立影响因素,对术中出现可疑肿大淋巴结者应行扩大的淋巴结清扫术.
作者：陈壮飞；吴芃；郑少斌；张鹏；谭万龙；毛向明 刊期： 2011年第05期
目的 探讨高糖对小鼠足细胞podocalyxin表达的影响及结缔组织生长因子(CTGF)参与其损伤的可能机制.方法 构建针对CTGF基因的特异性siRNA质粒并转染至小鼠足细胞.将体外培养的足细胞分为6组(1)正常对照组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖1 g/L;(2)等渗对照组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖1 g/L,甘露醇3.5 g/L;(3)高糖组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖4.5 g/L;(4)高糖+空白对照组:足细胞转染空白质粒后于高糖培养基中培养;(5)高糖+阴性对照组:足细胞转染含无关序列的重组质粒后于高糖培养基中培养;(6)高糖+干扰组:足细胞转染针对CTGF的siRNA表达质粒后于高糖培养基中培养.Western blot方法检测小鼠足细胞Podocalyxin、CTGF蛋白表达及细胞外信号调节激酶(ERK1/2)磷酸化水平.结果 高糖培养足细胞24、48 h时均可下调其Podocalyxin蛋白表达量(P<0.05).并可诱导CTGF蛋白表达增加(P<0.05).同时高糖可以活化足细胞ERK1/2信号途径,在高糖刺激30 min时开始活化,持续活化至24 h.特异性siRNA干扰CTGF合成后,ERK1/2活化减少,并且足细胞Podocalyxin表达升高.结论 CTGF是高糖诱导小鼠足细胞损伤的重要介质,可通过ERK1/2途径诱导podocalyxin表达下降,针对CTGF的siRNA能明显改善podocalyxin表达量,为DN的治疗提供新的思路.
作者：章俊；李萍华；杨蕾；杜庆生；郭婷婷；汤珣 刊期： 2011年第05期
目的 探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对失血性休克-内毒素二次打击大鼠肾损伤的保护作用.方法 45只成年Wistar大鼠随机分为假二次打击组(S组)、二次打击组(M组)和PHC 1 mg/kg组(PHC1组)、2 mg/kg组(PHC2组)、3 mg/kg组(PHC3组).取动脉血2 ml测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-8(IL-8)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN),测定肾粘附分子-1(ICAM-1)和核转录因子-κB(NF-κB),HE染色观察肾的病理改变.结果 PHC1、PHC2、PHC3组与M组相比,血清TNF-α、IL-1、IL-8、Cr、BUN含量明显降低,肾组织ICAM-1和NF-κB表达明显减弱(P<0.05).与PHC2、PHC3组比较,PHC1组血清TNF-α,、IL-1、IL-8、Cr、BUN明显降低(P<0.05).光镜下PHC1、PHC2、PHC3组肾小管损伤均比M组轻.结论 PHC可抑制失血性休克-内毒素二次打击大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-8、Cr、BUN及ICAM-1、NF-κB在肾脏表达,减轻肾功能和肾小管的损伤程度,以1 mg/kg作用显著.
作者：何双双；林春水；古妙宁；陈冬婷；宗士兰；陈莺 刊期： 2011年第05期
目的 研制一种敏感、特异、快速的免疫试纸条,用于创伤弧菌检测.方法 用创伤弧菌(ATCC27562)菌体抗原免疫家兔,制备兔抗创伤弧菌多克隆抗体;采用柠檬酸盐还原法制备胶体金颗粒并标记多克隆抗体,纯化后滴加在玻璃纤维素膜上;在硝酸纤维素膜上包被兔抗创伤弧菌多克隆抗体和羊抗兔IgG,分别作为检测线和质控线;将处理后的硝酸纤维膜、玻璃纤维素膜与样品垫、吸水纸组装成试纸条,4℃保存并定期检测;设阳性及阴性对照,对本试纸条检测的灵敏度、特异性进行检测.结果 将试纸条插入样品溶液中,20～30min内即可显示结果,其检测灵敏度为2×106CFU/ml;特异性检测显示本试纸条与溶血性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌等12种菌株均无交叉反应;稳定性检测表明该试纸条可4℃保存4个月.结论 本研究构建出创伤弧菌多克隆检测试纸条,具有较高的灵敏度和较好的特异性,简便,20～30 min即可获得检测结果,可用于创伤弧菌的快速检测.
作者：严智敏；郑晶；陈清；申洪 刊期： 2011年第05期
目的 探讨血管内治疗颅内假性动脉瘤的效果.方法 对17例颅内假性动脉瘤患者选用弹簧圈、NBCA胶栓塞及血管内支架置入等方法进行血管内治疗.术后即刻复查血管造影并进行造影随访评价血管内治疗效果.结果 除1例栓塞过程中发生动脉瘤破裂引起死亡外,其余16例患者手术均获成功.动脉瘤腔弹簧圈致密填塞率:单纯瘤腔内弹簧圈栓塞组致密填塞率50%;支架辅助弹簧圈栓塞组的致密填塞率42.9%.15例3个月到2年随访,单纯瘤腔内弹簧圈栓塞组2例复发,给予支架辅助弹簧圈补充栓塞,疗效满意;支架辅助弹簧圈栓塞组动脉瘤消失.结论 根据病变不同特点选择个体化的血管内治疗技术治疗假性动脉瘤,而瘤腔内栓塞结合血管壁内支架重建治疗颅内假性动脉瘤可大限度的减少复发,提高治愈率,是一种安全、有效的治疗手段.
作者：王君；李宝民；李生；曹向宇；刘新峰；张阿兰；葛爱丽 刊期： 2011年第05期
目的 筛选可与人肿瘤干细胞表面标记物CD133特异性结合的短肽并进行初步鉴定.方法 首先合成人肿瘤干细胞表面标记物CD133细胞外片段的生物素化蛋白,以此为靶,利用噬菌体肽库技术,高通量液相淘选CD133的特异性短肽.应用夹心EL ISA选择出结合较强的克隆.提取DNA测序,通过竞争性阻断实验验证其特异性,根据噬菌体基因序列推导出多肽序列.通过免疫荧光技术初步验证合成多肽和人大肠癌细胞的结合情况.结果 4轮液相筛选后,与CD133特异性结合的噬菌体得到有效富集,第4轮与第1轮相比,富集了388倍.经ELISA鉴定的20个噬菌体单克隆中,有13个与CD133有较高亲和力,具有阳性意义.经比对得到11条完全一致的氨基酸序列TISWPPR,2条完全一致的氨基酸序列STTKLAL,竞争性阻断ELISA实验表明第一条特异性较强.结论 成功利用噬菌体肽库技术,淘选出1条可和人CD133特异性结合的高亲和力短肽,为后续CD133的研究奠定了基础,表明从噬菌体肽库中液相淘选生物素化小分子的高亲和力多肽的方法切实可行.
作者：田平阁；周春平；张超；杨慧；吴小金；陆滟霞；刘国炳；李学农 刊期： 2011年第05期
目的 合成具有抗肿瘤活性的新型CDKs抑制剂,并评价其抗肿瘤活性.方法 根据生物活性叠加原理,将1-(甲磺酰基)哌啶-4-氨和嘧啶杂环片段合理组合,设计合成了5个结构新颖的N4-取代苯胺基-N2-(1-甲磺酰基哌啶-4-氨基)-5-硝基嘧啶类化合物3a～3e.结果 目标化合物的结构经质谱和核磁共振氢谱等表征确认.采用MTT法测试了目标化合物抑制肿瘤细胞增殖活性.测试结果表明,部分化合物对MCF-7(人乳腺癌细胞)肿瘤细胞有弱的细胞毒性,而对HepG2(人肝癌细胞)没有抑制活性,表现出一定的选择性.结论 化合物3b对MCF-7(人乳腺癌细胞)肿瘤细胞有较强的抑制活性(IC50=13.6 μmol·L-1).初步的构效关系研究表明化合物的立体结构可能对其抗肿瘤活性影响较大.
作者：游文玮；赵培亮；邹敏；周中振；段安娜；吴曙光 刊期： 2011年第05期
目的 证明纳秒级陡脉冲能够诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡,且钙离子是其凋亡通路的重要介质.方法 用不同参数组的纳秒级陡脉冲处理细胞,Annexin V/PI双染流式细胞仪检测其早期凋亡率及坏死率,用0、25、50、100 μmol/L BAP-TA-AM分组整合细胞内因纳秒级陡脉冲处理而增高的游离Ca2+后,MTT检测细胞存活率,Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡率,Western-blot技术检测caspase 12蛋白表达的变化.结果 Annexin V/PI双染流式细胞术结果示:佳治疗参数为场强90KV/cm;脉宽:100 ns;脉冲作用时间:30 s;频率:1Hz,其凋亡率高(60.31±5.67)%,坏死率为(1.35±0.39)%;BAPTA-AM作用过的细胞经纳秒级陡脉冲佳治疗参数处理后细胞存活率明显高于单用纳秒级陡脉冲处理的细胞(P<0.05).凋亡率也同时降低(O<0.05),caspase-12蛋白表达水平也相应降低(P<0.05).结论 纳秒级陡脉冲能诱导SKOV3细胞凋亡,细胞内游离的钙离子增高是其凋亡通路的重要介质,并有可能介导内质网通路.
作者：刘丽娟；赵东阳；王建；姚陈果；孙才新；唐均英 刊期： 2011年第05期
目的 研究子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)组织中抑癌基因ARHI的mRNA和蛋白表达情况.方法 利用RT-PCR和Western Blot免疫印迹的方法,对EMs的异位内膜组织、在位内膜组织和非EMs在位内膜组织(正常内膜组织)进行mRNA和蛋白表达的半定量分析.利用原位杂交和免疫组化技术对研究各组进行定性及定位分析.结果 (1)ARHI mRNA和蛋白在各组中均有表达,异位内膜的表达高于在位内膜和正常内膜,差异显著(P<0.005),在位内膜组与正常对照组比较,ARHI的表达无明显差异(P>0.05);(2)原位杂交阳性率分别为非EMs组97.3%,EMs异位内膜组100%,EMs在位内膜组93.8%;(3)免疫组化阳性率分别为非EMs组93.2%,EMs异位内膜组100%,EMs在位内膜组92.3%;(4)ARHI的DNA与蛋白表达一致;(5)5例恶变的异位内膜ARHI免疫组化检测,4例呈阴性,1例呈弱阳性表达.结论 抑癌基因ARHI在子宫内膜组织中均表达,且在异位内膜中呈表达上调,而在恶变的异位内膜中多呈阴性表达,提示ARHI基因可能与子宫内膜异位症不孕及恶变相关.
作者：李洁；汪淑娟；孙璐；李亚里 刊期： 2011年第05期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
