王君；李宝民；李生；曹向宇；刘新峰；张阿兰；葛爱丽
目的 筛选可与人肿瘤干细胞表面标记物CD133特异性结合的短肽并进行初步鉴定.方法 首先合成人肿瘤干细胞表面标记物CD133细胞外片段的生物素化蛋白,以此为靶,利用噬菌体肽库技术,高通量液相淘选CD133的特异性短肽.应用夹心EL ISA选择出结合较强的克隆.提取DNA测序,通过竞争性阻断实验验证其特异性,根据噬菌体基因序列推导出多肽序列.通过免疫荧光技术初步验证合成多肽和人大肠癌细胞的结合情况.结果 4轮液相筛选后,与CD133特异性结合的噬菌体得到有效富集,第4轮与第1轮相比,富集了388倍.经ELISA鉴定的20个噬菌体单克隆中,有13个与CD133有较高亲和力,具有阳性意义.经比对得到11条完全一致的氨基酸序列TISWPPR,2条完全一致的氨基酸序列STTKLAL,竞争性阻断ELISA实验表明第一条特异性较强.结论 成功利用噬菌体肽库技术,淘选出1条可和人CD133特异性结合的高亲和力短肽,为后续CD133的研究奠定了基础,表明从噬菌体肽库中液相淘选生物素化小分子的高亲和力多肽的方法切实可行.
作者：田平阁；周春平；张超；杨慧；吴小金；陆滟霞；刘国炳；李学农 刊期： 2011年第05期
目的 研究低强度脉冲超声(LIPUS)对大鼠正畸性牙根吸收过程中骨保护素(OPG)及核激活因子受体配体(RANKL)表达的影响.方法 32只Wistar雄性大鼠(6～8周),随机分成4组:阴性空白对照1组、实验组2组(100 MW/cm2超声组和150 MW/cm2超声组),接受LIPUS作用;对照组1组,不接受LIPUS作用,每组8只.100 g初始力值加载于大鼠右侧上颌中切牙与第一磨牙之间10 d.每组取上颌第一磨牙及其牙周组织,制作以上颌第一磨牙为中心的、近远中方向的组织切片,行OPG、RANKL免疫组化染色,光镜观察并作免疫组化光密度分析,对实验结果进行单因素方差分析.结果 LIPUS超声组OPG表达上调(P<0.05),100 MW/cm2与150 MW/cm2超声组间OPG表达有统计意义(P<0.05);LIPUS超声组RANKL表达下调(P<0.05),两超声组间RANKL表达有统计学意义(P<0.05).结论 LIPUS通过调节OPG/RANKL比值,进一步调节破骨细胞分化,进而对大鼠正畸性牙根吸收有治疗作用.
作者：刘志峰；徐娟；鄂玲玲；王东胜；贝丹丹 刊期： 2011年第05期
目的 斑马鱼原始造血髓系细胞突变体1 276的表型鉴定及性状分析.方法 利用化学诱变剂N-乙基-N-亚硝基脲诱变野生型AB斑马鱼雄鱼的精原细胞,突变基因组保留传代,采用中性红染液对F3代的胚胎进行细胞化学染色,筛选原始造血髓系细胞突变体.并通过细胞化学染色及检测不同谱系血细胞标记基因在不同发育阶段的mRNA及蛋白的表达水平,对其中之一突变体1276进行表型鉴定及性状分析.结果 成功筛选1296个F2家族,2140个突变基因组,发现中性红染色信号异常突变体12个.突变体1276在原始造血阶段,中性红染色全身信号缺失,小胶质细胞标记基因apoe表达缺失,巨噬细胞标记基因l-plastin,头部表达减少,背主动脉壁腹侧区域表达正常,粒细胞、红细胞均未见异常;在定向造血阶段,巨噬细胞仍存在异常,但粒细胞、红细胞、淋巴细胞以及造血干细胞均未见明显异常.结论 突变体1276在原始造血阶段,巨噬细胞存在功能障碍,以及不同程度发育及迁徙异常;在定向造血阶段这-性状并未得到代偿.
作者：颜广；刘伟；戴朝霞；王鹍；刘靖；赵灵凤；黄志斌；陈小辉；马宁；孟萍；许孟畅；温子龙；张文清 刊期： 2011年第05期
目的 利用激光三维扫描技术,建立一种快速简便的颌面部软组织三维数字化模型的重建方法,直观准确地观察监测颌面部软组织在正畸过程中的三维变化.方法 1例咬合关系正常健康女性,制作安氏Ⅱ类颌面部软组织模型,距三维激光扫描仪80 cm,扫描采集多幅点云文件,GeoMagic 10.0软件重建形成面部的三维模型,测量颌面部软组织指标.佩戴牙模2次,重复上述激光三维扫描,重建后进行测量.结果 重建形成具有较高清晰度的颌面部三维数字化模型,以及简易的安氏Ⅱ类颌面部软组织轮廓的数字化模型;不同的三维数字化模型直接融合对比,唇部出现高信区域代表颌面部软组织明显变化;利用软件分析工具直接测量鼻唇角、审美平面至上下唇突点及颏唇沟的距离,治疗前模型:111.86°、-3.57mm、-2.54 mm、3.95 mm,治疗中模型:114.31°.-2.73 mm、-1.06 mm、3.46 mm,治疗后模型:116.53°、-0.15 mm、0.64 mm、3.11 mm.结论 三维激光扫描是一种真实可靠、低成本、易操作的颌面部软组织建模方法,可为正畸临床中颌面部软组织分析及病历资料保存提供技术手段.
作者：田华；吴补领；毕振宇；焦培峰；赵卫东；孙凤阳；徐会勇；刘阳 刊期： 2011年第05期
目的 探讨B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石的可行性、疗效,探讨其临床价值.方法 回顾性分析2009年1月～2010年3月我院36例B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石,对患者基本资料,结石大小,手术时间,出血量,相关并发症及结石清除率等进行分析.结果 36例均在B超X线联合引导下准确建立理想的双工作通道,结石一期清除率为80.56%,平均手术时间100min,术后中位住院时间13.5 d(13～14d),术后5例行二期碎石术,1月后复查均无结石残留.18例术前血肌酐升高患者中16例恢复正常范围.结论 采用B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石是安全、有效的手段,且术后并发症少,值得推广.
作者：李虎；罗文平；董超雄 刊期： 2011年第05期
目的 探讨人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)负载白细胞介素12(IL-12)重组腺病毒载体抗卵巢癌SKOV3作用的研究.方法 腺病毒介导IL-12基因转染体外培养的UC-MSCs(AdIL-12-MSCs),Western blotting和RT-PCR检测AdIL-12-MSCs中IL-12基因蛋白及mRNA表达,ELISA法检测AdIL-12-MSCs上清液中IL-12的表达.光镜下观察外源性IL-12对SKOV3细胞形态的影响,MTT法检测AdIL-12-MSCs分泌的IL-12对SKOV3细胞增殖活性的影响,流式细胞仪检测AdIL-12-MSCs上清液对SKOV3细胞凋亡的影响.建立裸鼠卵巢癌SKOV3皮下移植瘤模型,观察移植AdIL-12-MSCs后对移植瘤的影响.结果 腺病毒介导IL-12基因成功转染UC-MSCs形成AdIL-12-MSCs,转染后细胞IL-12基因在蛋白及mRNA水平均有明显表达.AdIL-12-MSCs分泌的外源性IL-12显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖并诱导其凋亡,并抑制卵巢癌SKOV3移植瘤在裸鼠体内的生长(P<0.05).结论 转染IL-12基因的UC-MSCs能够在蛋白及mRNA水平表达IL-12基因,显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖并诱导其凋亡,抑制卵巢癌SKOV3移植瘤在裸鼠体内的生长.
作者：赵雯红；程建新；史鹏飞；黄军岩 刊期： 2011年第05期
目的 检测干细胞转录因子Oct-4皮肤鳞状细胞癌(SCC)、脂溢性角化病(SK)的组织表达,分析其表达差异及与肿瘤干细胞的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测Oct-4在35例SCC、21例SK及15例正常对照皮肤组织中的表达.结果 Oct-4在正常皮肤组织表达为阴性,在SCC、SK之间表达有显著性差异(P<0.05),间接反映SCC、SK的恶性程度不同.结论 SCC、SK中表达Oct-4基因的细胞很可能是SCC、SK的干细胞,这将为其终分离和鉴定人SCC、SK干细胞提供重要基础,将有助于揭示SCC、SK的肿瘤起始细胞,从而对预防和治疗SCC、SK有重大意义.
作者：李毓阳；戴永江；邓斌；梁雄安；谢志杰；陈海富 刊期： 2011年第05期
目的 探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓中CD133的表达及其临床意义.方法 应用流式细胞仪采用直接免疫荧光标记法,分别测定31例难治性贫血伴幼稚细胞增多(RAEB)、10例难治性血细胞减少伴多系发育异常(RCMD)以及11例再生障碍性贫血患者骨髓中CD133+细胞和CD34+/CD38-细胞比例,对比分析CD133及CD34/CD38在不同亚型MDS中的表达及临床意义.结果 在RAEB型MDS患者骨髓有核细胞中,CD133阳性细胞平均占6.75%,RCMD患者平均占1.41%,而再生障碍性贫血对照组占2.70%,RAEB组显著高于其他两组(P<0.05);再障对照组与RCMD组之间无显著性差异(P>0.05);CD34+/CD38-细胞比例在3组中均小于1%,统计学上无显著性差异(P>0.05).结论 CD133在MDS的进展类型RAEB患者骨髓细胞中高表达,CD133有助于RAEB分型诊断;而CD34+/CD38标记在MDS分型诊断中并无价值.
作者：钟立业；杜欣；耿素霞；翁建宇；郑海涛；吴穗晶；李扬秋 刊期： 2011年第05期
目的 探讨直肠癌前切除手术术后吻合口漏的相关危险因素.方法 对1999年6月～2009年6月我院行直肠癌前切除手术患者628例的临床资料行回顾性研究,分析影响术后吻合口漏发生的危险因素.结果 628例直肠癌前切除术后共发生吻合口漏54例(8.6%,54/628).患者术前有糖尿病病史、术前血清白蛋白<35 g/L、术中没有行预防性近端肠造口、肿瘤下端距肛缘距离≤7 cm、肿瘤病灶直径>5 cm是患者术后发生吻合口漏的危险因素.并且肿瘤下端距肛缘距离≤7 cm是术后发生吻合口漏的独立危险因素(P<0.05).结论 低位直肠癌、肿瘤较大、合并糖尿病及营养不良是直肠癌术后吻合口漏的危险因素,行保护性近端肠造瘘可以预防吻合口漏的发生.
作者：冯超；姚若全；黄飞舟；聂晚频；刘浔阳 刊期： 2011年第05期
目的 探讨血管内治疗颅内假性动脉瘤的效果.方法 对17例颅内假性动脉瘤患者选用弹簧圈、NBCA胶栓塞及血管内支架置入等方法进行血管内治疗.术后即刻复查血管造影并进行造影随访评价血管内治疗效果.结果 除1例栓塞过程中发生动脉瘤破裂引起死亡外,其余16例患者手术均获成功.动脉瘤腔弹簧圈致密填塞率:单纯瘤腔内弹簧圈栓塞组致密填塞率50%;支架辅助弹簧圈栓塞组的致密填塞率42.9%.15例3个月到2年随访,单纯瘤腔内弹簧圈栓塞组2例复发,给予支架辅助弹簧圈补充栓塞,疗效满意;支架辅助弹簧圈栓塞组动脉瘤消失.结论 根据病变不同特点选择个体化的血管内治疗技术治疗假性动脉瘤,而瘤腔内栓塞结合血管壁内支架重建治疗颅内假性动脉瘤可大限度的减少复发,提高治愈率,是一种安全、有效的治疗手段.
作者：王君；李宝民；李生；曹向宇；刘新峰；张阿兰；葛爱丽 刊期： 2011年第05期
目的 报告显微神经外科手术治愈12岁男孩因复合型脂肪瘤导致脊髓拴系综合征1例,并结合文献讨论该病的分型、诊断、治疗和预后.方法 患者主诉渐进性排尿障碍2年多,检查存在会阴部感觉迟钝,肛门反射消失,肛门松弛,右侧提睾反射消失,骶尾部可触及脊柱裂口.腰骶椎MRI检查提示脊髓低位,脊髓栓系,骶椎脊柱裂,脊膜膨出,合并椎管内外脂肪瘤.超声检查提示残余尿量显著增加.确定诊断.显微手术借助接触式激光刀等松解脊髓、马尾神经与脂肪瘤的粘连,切除椎管内外脂肪瘤,修补局部硬膜缺损.结果 术后恢复顺利,随访半年,排尿功能恢复正常.结论 根据硬膜完整性可以将脊髓脂肪瘤分成2型,本例属于伴硬膜缺损型.临床表现、特别是MRI检查可以确定诊断,显微神经外科手术是目前唯一有效治疗方法,早期、特别是无脊髓功能损害前手术更好.局部硬膜是否完整对疗效影响大,硬膜缺损者手术难度大、效果欠佳.充分松解粘连,避免脊髓圆锥和马尾神经损伤是本例手术成功的关键.复发者是否再次手术需要谨慎评估.
作者：彭林；徐波涛 刊期： 2011年第05期
目的 应用免疫磁珠法分离筛选人乳牙牙髓干细胞,并做培养鉴定.方法 采用STRO-1为标记物以免疫磁珠分离筛选人乳牙牙髓干细胞,观察细胞形态及生长情况,流式细胞仪检测细胞表型,并检测细胞体外多向分化能力.结果 应用免疫磁珠法筛选人乳牙牙髓细胞可获得乳牙牙髓于细胞,经统计学处理证明看其生长速度慢于牙髓细胞,细胞表型分析证实CD29、CD105高表达,CD34、CD45低表达.矿化诱导和成脂诱导证实STRO-1+乳牙牙髓细胞具有干细胞多向分化的能力.结论 免疫磁珠法是有效的分离纯化人乳牙牙髓干细胞的方法.所分离的细胞具有干细胞的表型特点及多向分化能力.
作者：丁祥龙；陈柯；申元源 刊期： 2011年第05期
目的 探讨瘦素和瘦素受体在原发性肝细胞癌中的表达及其与肝癌各临床病理因素的关系.方法 应用免疫组化EnVison法检测81例原发性肝细胞癌患者组织中瘦素和瘦素受体的表达情况,分析其表达特点和患者的临床病理特征之间的关系.结果 瘦素和瘦素受体在肝癌中的过表达率分别为56.8%和35.8%.二者表达没有显著相关性(r=0.236,P=0.034).瘦素受体表达与肿瘤直径和TNM分期相关(P<0.05),与年龄、体质量指数、血清AFP值、HBsAg状态、肿瘤分化程度、有无癌栓和有无肝硬化无关(P>0.05).瘦素表达与上述各临床病理因素均无关(P>0.05).结论 瘦素受体的过表达可能对原发性肝癌具有抑制作用,瘦素和瘦素受体相结合发挥功能时主要取决于瘦素受体的表达状态.
作者：陈丽；石燕；蒋成英；孙琼；王玲兄；戴广海 刊期： 2011年第05期
目的 观察5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗寻常型银屑病模型的疗效,探讨ALA-PDT治疗寻常型银屑病的可行性.方法 5%心得安搽剂外涂豚鼠耳背部皮肤建立寻常型银屑病模型.20%ALA溶液局部封包模型皮损4 h后,635 nm半导体激光照射患处,能量密度12 J/cm2.分设模型对照组、单纯ALA组、单纯照光组、一次ALA-PDT治疗组和二次ALA-PDT治疗组5个组别,于治疗后第7、14、21及28天进行外观与组织活检观察.结果 在肉眼观察、表皮厚度和增殖细胞核抗原(PCNA)表达三项指标观察中,ALA-PDT均能明显改善寻常型银屑病模型的病变,二次治疗组疗效优于一次治疗组.结论 ALA-PDT疗法能治愈以表皮过度增殖为特征的豚鼠耳背部寻常型银屑病模型皮损,增加治疗次数疗效更佳.
作者：谢光辉；李康英；刘宏伟；段世军 刊期： 2011年第05期
目的 观察新型苯二氮卓类药物L-838,417对三叉神经痛大鼠机械痛行为的影响.方法 健康雄性SD大鼠随机分为模型组、假手术组及正常对照组,采用经颧骨下缘入路建立大鼠三叉神经分支眶下神经慢性缩窄环术来建立模型.取模型制备成功的大鼠30只作为模型组,随机分为5组:L-838,417 1.0mg/kg组(L1组),L-838,417 10.0mg/kg组(L10组),吗啡5 mg/kg组(M组),安定3 mg/kg组(D组)及生理盐水组(NS组),采用Von-Frey法于给药后每1 h测各组大鼠触须垫部机械痛阈变化,并于各组痛阈达高时进行镇静实验,进行姿势评分及翻正反射评分.L1组L10组及M组连续给药10 d,每天测各组所能达到的高疼痛阈值,观察药物耐受情况.结果 各组大鼠疼痛基础阈值无统计学差异(P>0.05).模型组术后第9天疼痛阈值较术前明显降低(P<0.01),术后第9～18天,其疼痛阈值明显低于sham组(P<0.01).模型组各组给药后,除NS组给药前后阈值无变化(P>0.05)外,其余4组给药后1 h疼痛阈值明显增加(P<0.01),4组疼痛高阈值无统计学差异(P>0.05).NS组、L1组及L10组均没有出现异常姿势和翻正反射.连续给药后,M组第3天高疼痛阈值明显下降,与第1天相比有统计学差异(P<0.01),L1组及L10组与第1天比较均无统计学差异(P>0.05).结论 L-838,417对三叉神经痛大鼠具有良好的抗痛觉过敏作用,且不会带来镇静及运动损害等副作用,长期给药不会产生药物耐受.
作者：龚政；熊源长 刊期： 2011年第05期
目的 探讨术中磁共振和功能神经导航在语言区病变手术中的应用价值.方法 61例右利手患者在术中磁共振和基于血氧水平依赖和弥散张量成像技术的功能神经导航辅助下实施语言功能区病变手术,按部位分为A组(左额下回后部附近病变)和B组(左颞上回后部附近病变),术前及术后2周用西方失语症成套试验对所有患者进行语言评估,获得失语指数(AQ).结果 AQ术前正常者(AQ≥93.8)33例,AQ术后与AQ术前对比无统计学差异(P>0.05),AQ术前低于正常者28例,AO术后较术前对比有所提高(P<0.01).术后2周时,14例(23.0%)出现语言功能下降,仅有2例(3.2%)在6个月随访时仍存在语言功能障碍.41例获得全切除,20例获得次全切除,AQ变化值(△AQ=AQ术后-AQ术前)与病变切除程度无关,A组△AQ高于B组.结论 术中磁共振和功能神经导航技术能够较好显示病变与语言相关皮层及纤维束之间的关系,有助于语言功能区病变患者术后语言功能的保留.
作者：王飞；陈晓雷；孙正辉；赵岩；孙国臣；王宇博；宋志军；许百男 刊期： 2011年第05期
目的 研制光激化学发光免疫分析技术(AlphaLISA)建立人血清乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的快速检测试剂盒.方法 采用中和抑制法建立HBeAb AlphaLISA试剂盒.结果 自制HBeAb试剂盒灵敏度为0.003 NCU/ml,可测范围为0.003-16 NCU/ml.批内与批间的精密度分别为5.3%和6.8%,与HBeAb无交叉反应.使用自制试剂与罗氏化学发光试剂盒同时检测136份临床血清样本,结果具有相关性(r=0.961).结论 自制HBeAb AlphaLISA试剂盒的各项性能指标能够达到临床检测要求,可用于临床血清样本HBeAb浓度的测定.
作者：马强；贺安；董志宁；刘天才；邹丽萍；林冠峰；李明；吴英松 刊期： 2011年第05期
目的 探讨小于35周岁不孕妇女的基础卵泡刺激素(FSH)升高是否影响卵子和胚胎的数量、质量及其临床结局.方法 回顾性分析294个年龄<35周岁的体外受精-胚胎移植治疗周期,按基础FSH水平分A组(10～14.99 U/L)、B组(15～19.99 U/L)和C组(FSH≥20 U/L),比较获卵数、卵子和胚胎的形态学、临床结局等指标的差异.结果 B组和C组的获卵数、总胚胎数和优质胚胎数较A组低,促性腺激素总量较A组高;三组间成熟卵子率、卵裂球数目比例、正常受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率、活产率和早期流产率差异无统计学意义,基础FSH≥15 U/L妇女的临床妊娠率和活产率有降低的趋势.结论 小于35岁不孕妇女随基础FSH升高,尤其≥15 U/L者,卵巢储备功能减退,卵子数和胚胎数明显减少,但卵子和胚胎质量未受影响,仍能获得相当好的临床妊娠率.
作者：陈士岭；罗燕群；夏容；陈薪；施晓鋆；郑海燕；王乐乐；吴雅琴 刊期： 2011年第05期
目的 运用RNA干扰(RNA inteference,RNAi)技术阻断胰腺癌细胞株PANC1中OCT4基因表达,并研究该基因沉默后对细胞增殖与凋亡的影响.方法 利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的人Octamer binding factor 4 (OCT4)的小干扰RNA转染入胰腺癌细胞株PANC1中.RT-PCR法测定胰腺癌细胞内OCT4 mRNA的表达.Western Blot测定OCT4、PARP.CCK8法测定细胞生长曲线观察细胞增殖的抑制情况.流式细胞仪测定细胞凋亡率的变化.结果 化学合成的人OCT4siRNA能有效地抑制PANC1细胞中OCT4的表达(P<0.05).OCT4 siRNA组中细胞增殖减慢,凋亡率较对照组明显增加(P<0.05).干扰OCT4能够激活PARP的表达.结论 体外实验初步证明OCT4基因在胰腺癌细胞株增殖分化与凋亡方面扮演重要角色.通过沉默其表达可抑制胰腺癌细胞株PANC1增殖并诱导其凋亡.
作者：黄健清 刊期： 2011年第05期
目的 探讨肝X受体激动剂T0901317对TGF-β1诱导的人正常肺成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 组织块贴壁法培养人正常肺成纤维细胞,波形蛋白和角蛋白免疫细胞化学鉴定.T0901317和/或TGF-β1刺激人正常肺成纤维细胞后,分别应用RT-PCR,Western blot和免疫荧光观察α-SMA mRNA和蛋白水平的表达.结果 人肺成纤维细胞表达波形蛋白而不表达角蛋白.RT-PCR,Western blot,免疫荧光结果均显示正常肺成纤维细胞基态下组成性表达少量的α-SMA,TGF-β1 5 ng/ml即可以诱导α-SMA mRNA和蛋白表达的明显上调,而T0901317 5μg/ml时可以明显抑制这种表达的上调.结论 肝X受体激动剂T0901317可以在基因和蛋白水平抑制TGF-β1诱导的体外人正常肺成纤维细胞α-SMA表达的上调,可能具有潜在抗纤维化应用价值.
作者：任敦强；刘明；郭永忠；马冉；钟南山 刊期： 2011年第05期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
