赵雯红;程建新;史鹏飞;黄军岩
目的 研究子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)组织中抑癌基因ARHI的mRNA和蛋白表达情况.方法 利用RT-PCR和Western Blot免疫印迹的方法,对EMs的异位内膜组织、在位内膜组织和非EMs在位内膜组织(正常内膜组织)进行mRNA和蛋白表达的半定量分析.利用原位杂交和免疫组化技术对研究各组进行定性及定位分析.结果 (1)ARHI mRNA和蛋白在各组中均有表达,异位内膜的表达高于在位内膜和正常内膜,差异显著(P<0.005),在位内膜组与正常对照组比较,ARHI的表达无明显差异(P>0.05);(2)原位杂交阳性率分别为非EMs组97.3%,EMs异位内膜组100%,EMs在位内膜组93.8%;(3)免疫组化阳性率分别为非EMs组93.2%,EMs异位内膜组100%,EMs在位内膜组92.3%;(4)ARHI的DNA与蛋白表达一致;(5)5例恶变的异位内膜ARHI免疫组化检测,4例呈阴性,1例呈弱阳性表达.结论 抑癌基因ARHI在子宫内膜组织中均表达,且在异位内膜中呈表达上调,而在恶变的异位内膜中多呈阴性表达,提示ARHI基因可能与子宫内膜异位症不孕及恶变相关.
作者:李洁;汪淑娟;孙璐;李亚里 刊期: 2011年第05期
目的 检测大肠腺癌细胞SW620、LS-174T、HCT-8中ARD1(arrest defective 1)的表达.方法 应用RT-PCR、Western blot和细胞免疫组织化学法测定ARD1在三株大肠腺癌细胞中的表达水平.结果 ARD1在三株大肠腺癌细胞中分别在mRNA水平、蛋白水平和细胞水平上均有表达.定量分析显示,ARD1在SW620中表达高于其他两株(P<0.05).细胞免疫化学法染色显示,ARD1在三种大肠腺癌细胞株中,细胞膜及细胞浆中呈阳性表达,LS-174T细胞株中可见部分胞核呈阳性表达.结论 ARD1在HCT-8、LS174T和SW620三种腺癌细胞株中均有较高表达.
作者:白松;周媛媛;田风;赵翔宇;钟孝斌 刊期: 2011年第05期
目的 探讨骨髓间充质干细胞移植对免疫损伤卵巢的修复作用.方法 6~8周龄的野生型健康ICR雌性小鼠随机分为3组,每组各12只.A组不作任何处理,B、C组利用猪卵巢蛋白主动免疫建立免疫损伤卵巢模型.而后C组腹腔移植来自GFP转基因小鼠的骨髓MSCs细胞,A、B组各注射等体积的PBS.MSCs移植后按既定时间处死小鼠,利用PCR检测卵巢中GFP基因以判断MSCs是否到达卵巢;通过对卵巢组织切片HE染色以及细胞凋亡分析来检测MSCs是否对免疫损伤卵巢有修复作用及其机制.结果 PCR结果表明MSCs经腹腔移植可直接到达免疫损伤卵巢;MSCs移植可促进免疫损伤卵巢组织的修复;相应地,移植组颗粒细胞的凋亡比非移植组明显减少.结论 腹腔移植MSCs可促进免疫损伤卵巢的修复,其机制可能与减少颗粒细胞凋亡有关.
作者:李威娜;谢琪璇;秦俊文;黄伟;叶绍恩;罗峰;张春雪;肖銮娟 刊期: 2011年第05期
目的 证明纳秒级陡脉冲能够诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡,且钙离子是其凋亡通路的重要介质.方法 用不同参数组的纳秒级陡脉冲处理细胞,Annexin V/PI双染流式细胞仪检测其早期凋亡率及坏死率,用0、25、50、100 μmol/L BAP-TA-AM分组整合细胞内因纳秒级陡脉冲处理而增高的游离Ca2+后,MTT检测细胞存活率,Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡率,Western-blot技术检测caspase 12蛋白表达的变化.结果 Annexin V/PI双染流式细胞术结果示:佳治疗参数为场强90KV/cm;脉宽:100 ns;脉冲作用时间:30 s;频率:1Hz,其凋亡率高(60.31±5.67)%,坏死率为(1.35±0.39)%;BAPTA-AM作用过的细胞经纳秒级陡脉冲佳治疗参数处理后细胞存活率明显高于单用纳秒级陡脉冲处理的细胞(P<0.05).凋亡率也同时降低(O<0.05),caspase-12蛋白表达水平也相应降低(P<0.05).结论 纳秒级陡脉冲能诱导SKOV3细胞凋亡,细胞内游离的钙离子增高是其凋亡通路的重要介质,并有可能介导内质网通路.
作者:刘丽娟;赵东阳;王建;姚陈果;孙才新;唐均英 刊期: 2011年第05期
目的 观察新型苯二氮卓类药物L-838,417对三叉神经痛大鼠机械痛行为的影响.方法 健康雄性SD大鼠随机分为模型组、假手术组及正常对照组,采用经颧骨下缘入路建立大鼠三叉神经分支眶下神经慢性缩窄环术来建立模型.取模型制备成功的大鼠30只作为模型组,随机分为5组:L-838,417 1.0mg/kg组(L1组),L-838,417 10.0mg/kg组(L10组),吗啡5 mg/kg组(M组),安定3 mg/kg组(D组)及生理盐水组(NS组),采用Von-Frey法于给药后每1 h测各组大鼠触须垫部机械痛阈变化,并于各组痛阈达高时进行镇静实验,进行姿势评分及翻正反射评分.L1组L10组及M组连续给药10 d,每天测各组所能达到的高疼痛阈值,观察药物耐受情况.结果 各组大鼠疼痛基础阈值无统计学差异(P>0.05).模型组术后第9天疼痛阈值较术前明显降低(P<0.01),术后第9~18天,其疼痛阈值明显低于sham组(P<0.01).模型组各组给药后,除NS组给药前后阈值无变化(P>0.05)外,其余4组给药后1 h疼痛阈值明显增加(P<0.01),4组疼痛高阈值无统计学差异(P>0.05).NS组、L1组及L10组均没有出现异常姿势和翻正反射.连续给药后,M组第3天高疼痛阈值明显下降,与第1天相比有统计学差异(P<0.01),L1组及L10组与第1天比较均无统计学差异(P>0.05).结论 L-838,417对三叉神经痛大鼠具有良好的抗痛觉过敏作用,且不会带来镇静及运动损害等副作用,长期给药不会产生药物耐受.
作者:龚政;熊源长 刊期: 2011年第05期
目的 应用分子线性探针Geno Type(R)MTBDRplus Assay(Gtplus)试剂盒检测四川地区耐多药结核分枝杆菌(MTB)株的基因型特征,并初步了解耐药结核病的流行情况.方法 选取结核确诊患者105份临床标本和68株临床分离株,应用Gtplus试剂盒检测MTB耐利福平和异烟肼相关的rpoB、katG、inhA基因的突变,推测其对利福平和异烟肼的耐药性.结果 151例样本的Gtplus结果有效,总耐药率和耐多药率分别为29.14%(44/151)和17.22%(26/151);耐利福平和高、低水平耐异烟肼的突变菌株分别为21.85%(33/151)、21.19%(32/151)和3.31%(5/151);突变型以rpoB S531L、katGS315T1和inhA C-15T为主.痰标本组的耐多药菌株比率明显高于肺外标本组.结论 四川地区MTB耐药形势严峻,尤以耐多药结核病的情况严重,耐药菌株以rpoB S531L和katG S315T1突变型为主,应推广快速分子药敏试剂盒的临床应用,快速并提高对耐药结核病的诊断.
作者:多丽娜;王婷婷;宋兴勃;谢轶;陆小军;范红;应斌武;王兰兰;张磊 刊期: 2011年第05期
目的 探讨肝X受体激动剂T0901317对TGF-β1诱导的人正常肺成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 组织块贴壁法培养人正常肺成纤维细胞,波形蛋白和角蛋白免疫细胞化学鉴定.T0901317和/或TGF-β1刺激人正常肺成纤维细胞后,分别应用RT-PCR,Western blot和免疫荧光观察α-SMA mRNA和蛋白水平的表达.结果 人肺成纤维细胞表达波形蛋白而不表达角蛋白.RT-PCR,Western blot,免疫荧光结果均显示正常肺成纤维细胞基态下组成性表达少量的α-SMA,TGF-β1 5 ng/ml即可以诱导α-SMA mRNA和蛋白表达的明显上调,而T0901317 5μg/ml时可以明显抑制这种表达的上调.结论 肝X受体激动剂T0901317可以在基因和蛋白水平抑制TGF-β1诱导的体外人正常肺成纤维细胞α-SMA表达的上调,可能具有潜在抗纤维化应用价值.
作者:任敦强;刘明;郭永忠;马冉;钟南山 刊期: 2011年第05期
目的 探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对失血性休克-内毒素二次打击大鼠肾损伤的保护作用.方法 45只成年Wistar大鼠随机分为假二次打击组(S组)、二次打击组(M组)和PHC 1 mg/kg组(PHC1组)、2 mg/kg组(PHC2组)、3 mg/kg组(PHC3组).取动脉血2 ml测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-8(IL-8)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN),测定肾粘附分子-1(ICAM-1)和核转录因子-κB(NF-κB),HE染色观察肾的病理改变.结果 PHC1、PHC2、PHC3组与M组相比,血清TNF-α、IL-1、IL-8、Cr、BUN含量明显降低,肾组织ICAM-1和NF-κB表达明显减弱(P<0.05).与PHC2、PHC3组比较,PHC1组血清TNF-α,、IL-1、IL-8、Cr、BUN明显降低(P<0.05).光镜下PHC1、PHC2、PHC3组肾小管损伤均比M组轻.结论 PHC可抑制失血性休克-内毒素二次打击大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-8、Cr、BUN及ICAM-1、NF-κB在肾脏表达,减轻肾功能和肾小管的损伤程度,以1 mg/kg作用显著.
作者:何双双;林春水;古妙宁;陈冬婷;宗士兰;陈莺 刊期: 2011年第05期
目的 检测干细胞转录因子Oct-4皮肤鳞状细胞癌(SCC)、脂溢性角化病(SK)的组织表达,分析其表达差异及与肿瘤干细胞的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测Oct-4在35例SCC、21例SK及15例正常对照皮肤组织中的表达.结果 Oct-4在正常皮肤组织表达为阴性,在SCC、SK之间表达有显著性差异(P<0.05),间接反映SCC、SK的恶性程度不同.结论 SCC、SK中表达Oct-4基因的细胞很可能是SCC、SK的干细胞,这将为其终分离和鉴定人SCC、SK干细胞提供重要基础,将有助于揭示SCC、SK的肿瘤起始细胞,从而对预防和治疗SCC、SK有重大意义.
作者:李毓阳;戴永江;邓斌;梁雄安;谢志杰;陈海富 刊期: 2011年第05期
目的 探讨B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石的可行性、疗效,探讨其临床价值.方法 回顾性分析2009年1月~2010年3月我院36例B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石,对患者基本资料,结石大小,手术时间,出血量,相关并发症及结石清除率等进行分析.结果 36例均在B超X线联合引导下准确建立理想的双工作通道,结石一期清除率为80.56%,平均手术时间100min,术后中位住院时间13.5 d(13~14d),术后5例行二期碎石术,1月后复查均无结石残留.18例术前血肌酐升高患者中16例恢复正常范围.结论 采用B超X线联合引导下微创经皮肾镜治疗复杂性肾结石是安全、有效的手段,且术后并发症少,值得推广.
作者:李虎;罗文平;董超雄 刊期: 2011年第05期
目的 研制光激化学发光免疫分析技术(AlphaLISA)建立人血清乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的快速检测试剂盒.方法 采用中和抑制法建立HBeAb AlphaLISA试剂盒.结果 自制HBeAb试剂盒灵敏度为0.003 NCU/ml,可测范围为0.003-16 NCU/ml.批内与批间的精密度分别为5.3%和6.8%,与HBeAb无交叉反应.使用自制试剂与罗氏化学发光试剂盒同时检测136份临床血清样本,结果具有相关性(r=0.961).结论 自制HBeAb AlphaLISA试剂盒的各项性能指标能够达到临床检测要求,可用于临床血清样本HBeAb浓度的测定.
作者:马强;贺安;董志宁;刘天才;邹丽萍;林冠峰;李明;吴英松 刊期: 2011年第05期
目的 探讨中国人群CCR5△32、CCR2-64I、SDF1-3'A三种基因的多态性与HIV-1感染之间的关系.方法 检索国内外有关中国人群CCR5△32、CCR2-64I、SDF1-3'A基因多态性与HIV感染相关性的病例对照研究文献并进行Meta分析.结果 符合CCR5△32的研究共14个,累计HIV感染者病例1607例,正常对照组1632例.杂合子(wt/mt)、纯合子(mt/mt)和杂合子加纯合子(wt/mt+mt/mt)与野生基因型(wt/wt)相比合并的OR值(95%CI)分别为1.156(0.808,1.654)、0.997(0.198,5.022)、1.149(0.808,1.634).符合CCR2-64I的研究共12个,累计HIV感染者病例1415例,正常对照组1239例.杂合子(wt/mt)、纯合子(mt/mt)和杂合子加纯合子(wt/mt+mt/mt)与野生基因型(wt/wt)相比合并的OR值(95%CI)分别为1.005(0.844,1.197)、1.191(0.808,1.754)、1.028(0.870,1.214).符合SDF1-3'A的研究10个,累计HIV感染者病例1179例,正常对照组1003例.杂合子(wt/mt)、纯合子(mt/wt)和纯合子加杂合子(wt/mt+mt/mt)与野生基因型(wt/wt)相比合并的OR值(95%CI)分别为1.010(0.830,1.228)、1.188(0.860,1.643)、1.038(0.861,1.250).结论 中国人群CCR5△32、CCR2-64I、SDF1-3'A三种抗性基因与HIV-1感染之间无相关性,显示CCR5△32、CCR2-641、SDF1-3'A三种基因对中国人群HIV-1感染可能不具有保护作用,提示中国人群可能为易感人群.
作者:贺小峰;贾宁静;苏娇;陈清;朱文昌;俞守义 刊期: 2011年第05期
目的 研究人食管鳞癌细胞顺铂耐药性产生的机制.方法 MTT法检测顺铂对耐药细胞EC109/CDDP及其亲代细胞EC109的细胞毒作用.电感耦合等离子体质谱检测细胞内顺铂的蓄积和Pt-DNA加合物的形成.Western blotting检测人多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly-ADP-ribose polymerase,PARP)的剪切和铜离子转运蛋白1(copper transporter 1,CTR1)的蛋白表达.结果 顺铂耐药细胞株EC109/CDDP较其亲代细胞EC109对顺铂引起的细胞毒作用和凋亡敏感性下降,细胞内顺铂蓄积和Pt-DNA加合物的形成减少,并且CTR1蛋白表达水平降低.结论 顺铂通过降低细胞CTR1蛋白表达抑制顺铂进入细胞,导致细胞耐药性的产生.
作者:余乐;陈明辉;古春萍;李亦蕾;文静;傅剑华;曹之宪;刘叔文 刊期: 2011年第05期
目的 研究中青年颈椎无骨折脱位的急性颈脊髓中央型损伤的手术效果.方法 选择我院脊柱外科2005年8月~2009年8月间收治的中青年无骨折脱位型颈脊髓损伤患者中资料完整者58例,根据治疗方法不同分为手术组(33例)和非手术组(25例).分别于入院时、14d及1年随访时进行ASIA分级、ASIA运动及感觉评分.采用SPSS16.0软件完成统计分析两组神经症状改善情况,评价手术治疗效果.结果 终ASIA分级中D-E级所占比例、运动及感觉评分,手术组均明显优于非手术组(P<0.05).结论 对中青年颈椎脊髓中央性损伤患者,存在明显的脊髓受压或MRI检查显示脊髓异常信号在1个椎体高度以上者,应尽早手术治疗.手术可以解除损伤脊髓的受压,改善其微循环,利于脊髓功能的恢复.
作者:常青;邓展生;陈静 刊期: 2011年第05期
目的 探讨特发性卵巢早衰(POF)的临床特点,为早期诊断POF提供依据.方法 回顾性分析2009年2月~2010年1月的39例特发性卵巢早衰患者的临床资料,对月经特点、发病情况、B超结果和妊娠情况等进行研究.结果 1例患者为原发性闭经,38例为继发性闭经,平均闭经5.82±3.88年,2例(5.1%)在月经初潮后有1~2次月经即出现闭经,闭经前月经规律而突然闭经患者9例(23%),月经紊乱27例(69%),其中3例(7.7%)月经频发,24例(61.5%)患者早期表现月经稀发,逐渐出现闭经.30岁以前发病的POF患者占87.2%,94.9%患者初潮后15年发病.特发性POF患者的子宫体积、卵巢体积小于正常组,基础窦卵泡计数(AFC)明显少于对照组,阴道超声检测有35例(89.7%)患者至少探及一侧卵巢,31例(79.5%)患者有窦卵泡样回声.用阴道B超定期监测有2例患者恢复排卵后自然妊娠,妊娠率5.1%.结论 对月经不规律、稀发、频发患者,应用B超监测子宫体积,卵巢体积和AFC,同时进行激素测定,及早识别是否有POF的可能;使用HRT时积极监测,必要时辅助生殖技术助孕.
作者:覃春容;陈士岭;陈薪;夏容;罗燕群 刊期: 2011年第05期
目的 研究不同剂量蜕皮甾酮(EDS)对人脐带间充质干细胞体外增殖的影响.方法 分离培养并鉴定人脐带间充质干细胞(hUCMSCs).取第3代hUCMSCs分别在基础培养基(低糖DMEM培养基、10%的胎牛血清、100 U/m青/链霉素、4mmol/L L-谷氨酰胺)中加入不同浓度(0、25、50、100、150、200 μg/ml)EDS予以干预,分别于第1、3、5、7天行MTT法检测细胞增殖活性;另外,设置相同分组EDS干预培养hUCMSCs7天,绘制细胞生长曲线.结果 第3代细胞阳性表达CD29、CD105,阴性表达CD34、CD45.MTT法检测结果显示经EDS干预培养的hUCMSCs增殖能力较空白对照组有明显差异(P<0.05),其中EDS 100、150及200 μg/ml组细胞活性比较无显著差异(P>0.05),较其他实验组有统计学意义(P<0.05).细胞生长曲线同样显示EDS实验组可有效促进间充质干细胞的增殖.结论 一定浓度范围内EDS对hUCMSCs具有促增殖作用,该作用在EDS浓度为100 μg/ml时较为显著,不随浓度的增加而增强.这有望成为促进脐带间充质干细胞增殖的新方法.
作者:张元中;付小兵;黄沙;马奎;张子良;冯长江;吴旭 刊期: 2011年第05期
目的 探讨瘦素和瘦素受体在原发性肝细胞癌中的表达及其与肝癌各临床病理因素的关系.方法 应用免疫组化EnVison法检测81例原发性肝细胞癌患者组织中瘦素和瘦素受体的表达情况,分析其表达特点和患者的临床病理特征之间的关系.结果 瘦素和瘦素受体在肝癌中的过表达率分别为56.8%和35.8%.二者表达没有显著相关性(r=0.236,P=0.034).瘦素受体表达与肿瘤直径和TNM分期相关(P<0.05),与年龄、体质量指数、血清AFP值、HBsAg状态、肿瘤分化程度、有无癌栓和有无肝硬化无关(P>0.05).瘦素表达与上述各临床病理因素均无关(P>0.05).结论 瘦素受体的过表达可能对原发性肝癌具有抑制作用,瘦素和瘦素受体相结合发挥功能时主要取决于瘦素受体的表达状态.
作者:陈丽;石燕;蒋成英;孙琼;王玲兄;戴广海 刊期: 2011年第05期
目的 运用RNA干扰(RNA inteference,RNAi)技术阻断胰腺癌细胞株PANC1中OCT4基因表达,并研究该基因沉默后对细胞增殖与凋亡的影响.方法 利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的人Octamer binding factor 4 (OCT4)的小干扰RNA转染入胰腺癌细胞株PANC1中.RT-PCR法测定胰腺癌细胞内OCT4 mRNA的表达.Western Blot测定OCT4、PARP.CCK8法测定细胞生长曲线观察细胞增殖的抑制情况.流式细胞仪测定细胞凋亡率的变化.结果 化学合成的人OCT4siRNA能有效地抑制PANC1细胞中OCT4的表达(P<0.05).OCT4 siRNA组中细胞增殖减慢,凋亡率较对照组明显增加(P<0.05).干扰OCT4能够激活PARP的表达.结论 体外实验初步证明OCT4基因在胰腺癌细胞株增殖分化与凋亡方面扮演重要角色.通过沉默其表达可抑制胰腺癌细胞株PANC1增殖并诱导其凋亡.
作者:黄健清 刊期: 2011年第05期
分析临床分期为T1-3N1-2M0肾癌的临床病理及预后资料,探讨其生物学行为特点.方法 1988年至2008年间我院共收治无远处转移肾癌并行开放性肾癌根治术的患者531例,其中42例伴淋巴结转移患者顺利完成了手术,对其临床病理及预后资料进行回顾性分析.结果 42例患者中,19.0%为T1期,21.4%为T2期,59.5%为T3期;42.9%为N1期和57.1%为N2期.末次随访30例(71.4%)出现肿瘤复发,26例(61.9%)患者死亡,83.3%(25/30)初次复发即为多发性.42例患者中位肿瘤特异生存期(CSS)和无病生存期(DFS)分别为23个月和11个月.多因素生存分析显示,病理分级(P=0.005),淋巴结分期(P=0.014)和T分期(P=0.037)是CSS的独立影响因素;术前状态(P=0.002),肿瘤大小(P=0.007),病理分级(P=0.009)和淋巴结分期(P=0.019)是DFS的独立影响因素.结论 T1-3N1-2M0期肾癌患者预后较差.淋巴结分期是T1-3N1-2M0期肾癌CSS和DFS的独立影响因素,对术中出现可疑肿大淋巴结者应行扩大的淋巴结清扫术.
作者:陈壮飞;吴芃;郑少斌;张鹏;谭万龙;毛向明 刊期: 2011年第05期
目的 探讨术中磁共振和功能神经导航在语言区病变手术中的应用价值.方法 61例右利手患者在术中磁共振和基于血氧水平依赖和弥散张量成像技术的功能神经导航辅助下实施语言功能区病变手术,按部位分为A组(左额下回后部附近病变)和B组(左颞上回后部附近病变),术前及术后2周用西方失语症成套试验对所有患者进行语言评估,获得失语指数(AQ).结果 AQ术前正常者(AQ≥93.8)33例,AQ术后与AQ术前对比无统计学差异(P>0.05),AQ术前低于正常者28例,AO术后较术前对比有所提高(P<0.01).术后2周时,14例(23.0%)出现语言功能下降,仅有2例(3.2%)在6个月随访时仍存在语言功能障碍.41例获得全切除,20例获得次全切除,AQ变化值(△AQ=AQ术后-AQ术前)与病变切除程度无关,A组△AQ高于B组.结论 术中磁共振和功能神经导航技术能够较好显示病变与语言相关皮层及纤维束之间的关系,有助于语言功能区病变患者术后语言功能的保留.
作者:王飞;陈晓雷;孙正辉;赵岩;孙国臣;王宇博;宋志军;许百男 刊期: 2011年第05期