郭培培；陈仲清；席小丽；陈辉；傅卫军；王瑞亭
目的 探讨哮喘血清、地塞米松、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)等不同刺激因子对人气道平滑肌细胞白细胞介素-22R1(IL-22R1)mRNA及蛋白表达的影响.方法 用免疫荧光PCR检测不同因素刺激下人气道平滑肌细胞IL-22R1mRNA的表达,用Western blot检测人不同因素刺激下的人气道平滑肌细胞IL-22R1蛋白的表达,比较不同组别之间的差异.结果 哮喘血清刺激下的人气道平滑肌细胞IL-22R1mRNA升至对照组345倍,而蛋白表达明显增强(P<0.01);加用地塞米松后IL-22R1mRNA降至对照组10倍,蛋白表达较仅用哮喘血清刺激明显减弱(P<0.01).IL-4、IFN-γ、TGF-β刺激后人气道平滑肌细胞IL-22R1mRNA及蛋白表达均显著性增加.结论 IL-22R1表达的改变可能参与支气管哮喘的病程,影响人气道平滑肌细胞IL-22R1受体的表达可能是地塞米松发挥其在支气管哮喘病程中作用的机制之一.IFN-γ、IL-4、TGF-β对气道平滑肌细胞IL-22R1的作用可能是其对支气管哮喘疾病产生影响的机制之一.
作者：张旃；罗雅玲；周丽丽；赖文岩；徐建；黎振兴；任敦强；叶涵；钟浩海 刊期： 2011年第06期
目的 应用吉非替尼作用于鼻咽癌细胞株CNE2,观察其放疗增敏作用.方法 体外培养鼻咽癌细胞株CNE2,以MTT实验检测细胞增殖抑制情况及吉非替尼对细胞放射敏感性的影响;用克隆形成法绘制细胞存活曲线,获得不同处理条件下的放射增敏比.以流式细胞术(FCM)分析细胞周期变化和凋亡情况.结果 MTT显示与单纯照射组比较,联合吉非替尼照射组细胞生存率显著降低(0.582±0.012 vs 0.398±0.016,P=0.0020);FCM显示吉非替尼联合放射组S期细胞显著下降(P=0.000),而G2/M期细胞比值显著增加(P=0.000),吉非替尼和放射线可协同作用,使CNE2细胞的周期再分布显著变化.结论 吉非替尼可增强鼻咽癌细胞株CNE2放射敏感性,其机制可能与改变细胞周期的分布相关.
作者：何本夫；孙爱民；黄碧燕；王雯珺；郑小康；罗荣城 刊期： 2011年第06期
目的 研究神经生长因子(NGF)与丹参对缺血再灌注后海马神经元的保护作用.方法 54只健康成年雄性Z∶ZCLA长爪沙鼠随机分为生理盐水对照组、NGF治疗组、丹参治疗组,通过尼氏染色观察各组缺血再灌注后不同时间点(6 h、3 d和7 d)海马CA1区锥体神经元的存活状况,通过免疫组化染色观察免疫组化结果.结果 全脑缺血再灌注6 h后,海马CA1区基本未见死亡神经元;与6 h组相比,3 d组和7 d组死亡神经元明显增加(P<0.05);与生理盐水组相比,NGF或丹参治疗3 d组和7 d组死亡神经元明显减少(P<0.05);两个治疗组第3天神经细胞元死亡数无明显差别,而第7天NGF治疗组效果明显优于丹参治疗组(P<0.05);Bcl-2在NGF组表达高;同组内不同时间相比,Bcl-2在6 h表达高;Bax在生理盐水组有阳性表达,同组内不同时间相比,Bax表达没有明显差异.结论 NGF与丹参均对脑缺血再灌注后损伤有保护作用,NFG优于丹参,为中风病人使用脑保护剂或中药治疗可减轻缺血造成的再损伤提供了依据.
作者：周宏珍；吕田明；申鹏；王梦龙；罗炳德 刊期： 2011年第06期
目的 研究凋亡和坏死细胞对脓毒症小鼠存活率的影响.方法 将BALB/c小鼠分为3组,分别为PBS对照组、凋亡细胞输注组和坏死细胞输注组,输注3 d后行盲肠结扎穿孔,制作脓毒症模型,观察脓毒症小鼠的存活率和器官病理损伤.结果 PBS对照组小鼠2周存活率为44.6%,肺脏和肾脏组织出现一定程度的损伤;凋亡细胞输注组1周存活率为69.6%,较对照组显著提高(P=-0.012),肺脏和肾脏组织损伤明显减轻;坏死细胞输注组1周存活率为31.6%,较对照组显著下降(P=0.035),肺脏和肾脏组织损伤明显加重.结论 脓毒症造模前3 d输注凋亡细胞可以减轻器官损伤,提高脓毒症小鼠的存活率,而输注坏死细胞可以加重器官损伤,降低存活率.
作者：刘占国；张婕；何懿；常平；顾冬生；罗宇维；孙尔维 刊期： 2011年第06期
目的 探讨糖尿病肾病患者空腹血糖、糖化血红蛋白及糖化血清蛋白(GSP)等指标的关系.方法 选取某医院确诊为糖尿病肾病患者303例,同时选取基线资料相似的糖尿病未并发糖尿病肾病患者167例作为对照,测定两组患者的空腹血糖、糖化血红蛋白及GSP,分析糖尿病肾病组三者之间的相关性,并与非糖尿病肾病肾病患者组相比较.结果 糖尿病肾病患者血清空腹血糖、糖化血红蛋白及GSP含量显著大于非糖尿病肾病肾病患者(P<0.01),GSP与空腹血糖及糖化血红蛋白均呈正相关,相关系数(r)分别为0.606及0.733.结论 糖尿病肾病患者血清GSP含量大于非糖尿病肾病肾病患者,糖尿病肾病患者GSP与血清空腹血糖及糖化血红蛋白三者关系密切.GSP测定简单、实用、稳定,可以弥补瞬时血糖监测的波动及糖化血红蛋白不能反映近期血糖平均水平的缺点.
作者：李沛霖；杨锐；周勇；陈宏；蔡德鸿 刊期： 2011年第06期
目的 检测多巴胺受体D2在不同肺癌细胞中的表达,并初步探讨多巴胺对肺癌细胞凋亡的影响.方法 利用蛋白电泳及逆转录聚合酶链反应检测肺癌95D、H460、GLC-82、A549及H446细胞中多巴胺受体D2的表达;采用含有0.02%、0.04%、0.08%及0.1%多巴胺的细胞培养液培养A549细胞,6 h后行流式细胞仪凋亡检测;选取2只BALB/c-nu构建A549肿瘤模型,于瘤体内分别注射1%多巴胺及生理盐水,24 h后取出肿瘤并制成细胞悬液,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 蛋白电泳及逆转录聚合酶链反应检测显示多巴胺受体D2在肺癌95D、H460、GLC-82、A549及H446细胞上呈现阳性表达;多巴胺对A549细胞的促凋亡作用与多巴胺浓度呈现正相关;动物实验进一步证实,多巴胺对A549肿瘤具有明显促凋亡作用.结论 多巴胺受体D2广泛表达于不同类型肺癌细胞,多巴胺促进肿瘤细胞凋亡可能与多巴胺受体D2有关.
作者：彭阳红；张锦明；周乃康；王珊 刊期： 2011年第06期
目的 了解exendin-4对烫伤大鼠早期心肌细胞凋亡的作用和机制.方法 54只健康成年SD大鼠,随机分为正常对照组(N组,n=6)、单纯烫伤组(S组,n=24)和烫伤加exendin-4组(E组,n=24).S组和N组大鼠采用30%TBSAⅢ°烫伤模型,伤后按Parkland公式补液抗休克.E组伤后给予exendin-4.采用DNA切口末端标记法(TUNEL)检测左室心肌细胞凋亡;免疫荧光法检测心肌组织caspase-3活性.结果 S组大鼠于伤后6 h,心肌细胞凋亡指数即升高,12 h达高峰,48 h仍显著高于正常对照组;心肌组织caspase-3活性于伤后6 h开始增强,12 h达高峰,伤后24 h仍显著高于N组.E组较S组,在伤后6、12、24、48h大鼠心肌细胞凋亡指数显著降低(P<0.05),心肌组织caspase-3活性在伤后6、12、24h也显著降低(P<0.05).统计学分析表明心肌细胞凋亡指数与心肌组织caspase-3活性呈显著正相关(P<0.05).结论 Exdendin-4可抑制烫伤大鼠早期心肌细胞凋亡,其机制可能是通过抑制心肌组织caspase-3活性,从而抑制心肌细胞凋亡.
作者：陈云辉；王甲汉；李志清；易朝辉 刊期： 2011年第06期
目的 观察大鼠心肌缺血及再灌注过程中心肌细胞骨架蛋白α辅肌动蛋白(α-actinin)含量的变化及其与心功能的关系.方法 Wistar大鼠随机分为假手术组(sham),缺血30 min组(I30min),缺血1 h组(I1h),缺血1 h再灌注2 h组(IR),每组各8只.通过结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌缺血及再灌注模型,记录左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压上升大速度(+dp/dt max)、左室内压下降大速度(-dp/dt max).采用免疫组化方法检测各组心肌中α-actinin含量和分布.ELISA法定量检测各组心肌组织磷酸肌醇3激酶(P13K)和磷脂酶C(PLC)含量.急性分离大鼠心肌细胞,并用PI3K抑制剂(LY-29400)和PLC抑制剂(U-73122)处理细胞,观察其对心肌细胞收缩舒张能力及对α-actinin含量的影响.结果 (1)随缺血时间延长,大鼠LVSP、+dp/dtmax、-dp/dt max下降,LVEDP升高;再灌注后LVSP、+dp/dtmax、-dp/dt max回升,LVEDP回落,但不能恢复到缺血前水平.(2)免疫组化染色观察到随缺血时间延长,α-actinin 出现点状、片状缺失,含量下降.(3)急性缺血过程中PI3K和PLC含量逐渐增加(P<0.05).(4)应用LY-294002及U-73122 后单个心肌细胞收缩幅度较缺血组明显增加(P<0.05).(5)应用LY-294002及U-73122后心肌细胞α-actinin免疫荧光强度较缺血组增加(P<0.001).结论 心肌缺血时心肌细胞骨架蛋白α-actinin的含量减少可能与缺血后PI3K和PLC含量增加有关,并且α-actinin结构与含量变化可能是导致心肌功能障碍的原因之一.
作者：陈唐葶；周翔；王立群；金春华 刊期： 2011年第06期
目的 探讨1,2-二甲肼(1,2-dimethylhydrazine,DMH)对小鼠结直肠与卵巢的影响.方法 60只雌性ICR小鼠随机平均分为A、B两组,A组给予腹腔注射DMH(20mg/kg,每周1次,连续24周),B组注射生理盐水作为对照,首次注射后12、16、20、24、28和32周分批处死小鼠,观察其结直肠与卵巢病理形态学改变.结果 A组小鼠结直肠发生显著病理改变,DMH注射12～16周后,小鼠结直肠上皮出现不同程度增生改变,20周后,2只小鼠发生结直肠肿瘤,并且随DMH作用时间的延长,肿瘤发生率逐渐增加,至32周共有7只小鼠发生结直肠腺瘤,5只结直肠腺癌,且肿瘤主要位于距肛门8 cm内;值得注意的是,A组小鼠卵巢也发生明显病理改变,32周内共见21只A组小鼠发生卵巢血肿伴慢性炎症改变,而且,28和32周各发现1只A组小鼠卵巢出现绒毛膜癌病理学改变.实验过程中B组小鼠均未见异常.结论 DMH对小鼠结直肠与 卵巢组织形态学变化具有显著影响,多次腹腔注射DMH能够导致小鼠结直肠与卵巢发生病理改变.
作者：李新；于莉娜；张庆玲；齐鲁；丁彦青 刊期： 2011年第06期
目的 了解深圳地区札如病毒(sapovirus,SaV)的感染情况和流行病学特征.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对收集的852份腹泻患者粪便标本进行SaV检测,PCR产物测序进行核苷酸序列比对构建系统发生树并进行同源性比较.结果 检出SaV阳性株16例,阳性率为1.88%.同源性比较发现8例为SaV GⅠ型,7例GIV型,1例GⅡ型.结论 深圳地区存在SaV感染,主要基因型为GⅠ型;首次报道中国存在SaV GIV型,与先前检出的安徽株A141和北京株CHN99/BJ360均不同,说明SaV感染在中国存在基因多样性,为进一步研究SaV感染情况提供了流行病学及基因型别基本资料.
作者：王颜歌；何雅青；向文龙；廖玉学；陈清；俞守义；胡贵方 刊期： 2011年第06期
目的 研究静脉注射甲泼尼龙预处理对兔复张性肺水肿肺通透性和肺泡表面活性物质的影响.方法 21只雄性新西 兰大耳兔随机分为3组:C组为空白对照组,R组为复张性肺水肿组,R+M组为复张性肺水肿+甲泼尼龙预处理组.按Sakao改良方法建立兔复张性肺水肿模型,分别在肺复张前20 min静脉注射甲泼尼龙3 mg/kg或生理盐水2.0 ml/kg对动物进行预处理.于复张后4 h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)及抽取动脉血样,测定总蛋白和二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)含量,并计算肺通透性指数.结果 BALF总蛋白含量R组高,与C组及R+M组相比差异有统计学意义(P<0.05).肺通透性指数比较,C组低,与R组有统计学差异(P<0.05),但与R+M组比较无统计学差异.BALF中DPPC含量C组高,且与其余两组比较有统计学意义(P<0.05),R+M组含量高于R组(P<0.05).结论 甲泼尼龙3 mg/kg预处理能降低复张性肺水肿兔肺的蛋白漏出,降低肺通透性指数,可提高复张性肺水肿兔肺的肺泡表面活性物质含量,改善肺通透性.
作者：柯毓文；古妙宁；刘绮虹；徐建设；万山河 刊期： 2011年第06期
目的 评估心肌钙蛋白Ⅰ(CTnI)对接受含蒽环类方案化疗的乳腺癌患者心脏毒性的预测价值.方法 收集186例在南方医院接受含蒽环类方案化疗的乳腺癌患者的病案资料,记录患者化疗前和每个化疗周期CTnI浓度及化疗前和首次化疗开始后第2、4、6月的左心室射血分数(LVEF).据文献报道,当患者血清CTnI≥0.1 ng/ml时,心脏毒性发生率明显升高,据此我们将患者定义为两组,化疗期间血清CTnI≥0.1 ng/ml者为CTnI+组(60例),小于0.1 ng/ml者为CTnI-组(126例).结果 所有患者均未出现充血性心力衰竭(CHF).LVEF较化疗前下降幅度超过10%的患者CTnI+组出现16例,占26.7%(16/60),而CTnI-组出现7例,占5.6%(7/126),两组间有统计学差异(P<0.01).结论 CTBI可作为早期预测蒽环类化疗药物引起心脏毒性的指标.
作者：黄伟斌；姚广裕；刘民锋；陈睿婷；陈路嘉；董建宇；顾繁；郭昭泽；叶长生 刊期： 2011年第06期
目的 探讨多排CT(multi-detector row CT,MDCT)和MRI对视网膜脱离的诊断价值及临床意义.方法 回顾性分析2007年5月～2010年10月期间,中山大学中山眼科中心送至我院检查及中山大学附属第一医院检查的45例(47只眼)视网膜脱离患者的MDCT或MRI图像,其中16例(17只眼)经MDCT诊断,29例(30只眼)经MR诊断;45例(47只眼)视网膜脱离患者中的32例(33只眼)经手术证实,13例(14只眼)经其它临床相关检查得到验证.结果 MDCT或MRI图像上可见到脱离的视网膜与眼球后壁之间的积液征象.在所有视网膜脱离的患者中,单纯视网膜脱离21只眼;伴有其它相关征象的26只眼.伴出血者20只眼、伴钙化者6只眼.其中,脉络膜骨瘤3只眼、脉络膜黑色素瘤5只眼.结论 MDCT成像速度快、对钙化病灶显示敏感;MR无辐射,软组织分辨力高,对出血及小范围视网膜脱离显示敏感;二者对视网膜脱离均有较高的诊断价值,临床医生可根据不同患者合理选择.
作者：陈芳妮；范淼；毛羽翔；李华雨 刊期： 2011年第06期
背景嗜酸粒细胞(EOS)在哮喘气道炎症中起着很重作用,我们前期发Slingshot-1L(SSH-1L)在急性发作期哮喘病人外周血EOS表达明显增高,可能在EOS的激活、迁移中发挥重要作用.目的 探讨SSH-1L在哮喘急性发作期病人外周血EOS的定位及治疗后的表达及功能变化.方法 招募4例未经糖皮质激素治疗的急性发作期哮喘门诊病人,在治疗前及吸入糖皮质激素3个月后抽取外周静脉血各30ml进行EOS的分离纯化并计数,应用RT-PCR和WesternBlotting方法分别在基因及蛋白质水平检测哮喘外周血EOS SSH-1L的表达变化;应用免疫荧光观察其中1例病人SSH-1L在外周静脉血EOS中的定位.结果 免疫荧光显示外周血EOS的SSH-1L定位在胞浆中,在贴近胞壁处丰富表达.急性发作期哮喘病人糖皮质激素治疗前后外周血EOS RT-PCR扩增SSH-1L基因的SSH-1L/β-Actin灰度值比:治疗前0.7403±0.1124,治疗后0.4101±0.0363,治疗前后有显著差异(P=-0.001);急性发作期哮喘病人吸入糖皮质激素治疗前后外周血EOS蛋白的SSH.1L/β-actin灰度值比分别为0.3410±0.1337和0.1543±0.0551,治疗后明显降低(P=0.039).结论 SSH-1L可能在急性发作期哮喘病人外周血EOS的激活、迁移上发挥作用,糖皮质激素可能通过抑制哮喘急性发作期EOS的SSH表达而抑制Eos的激活、迁移起到治疗作用.
作者：张卫珍；赵海金；邹飞；李文军；蔡绍曦 刊期： 2011年第06期
目的 探讨miR-145基因在糖尿病性勃起功能障碍(ED)大鼠发病过程中的作用.方法 建立糖尿病性ED大鼠动物模型,取阴茎海绵体组织,提取总RNA,qRT-PCR法检验miR-145在糖尿病性ED大鼠、糖尿病性勃起功能正常大鼠及正常大鼠阴茎海绵体组织中表达差异.结果 miR-145在糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体组织中的表达量下降.结论 糖尿病可导致大鼠阴茎ED,miR-145基因表达下调可能与ED发生有关.
作者：韦安阳；杨勇；何书华；罗新贵；张涛；刘洋 刊期： 2011年第06期
目的 探讨p53通路相关基因p53、mdm2、p63蛋白和EZH2在鼻咽癌中的表达关系和意义.方法 用免疫组化法检测 47例鼻咽未分化癌及12例慢性鼻咽炎中p53、mdm2、p63和EZH2蛋白的表达状况并分析其与临床参数、预后,以及相互关系.结果 p53、mdm2、p63及EZH2蛋白在鼻咽癌的阳性表达率分别为31.9%,85.1%,95.7%;mdm2、EZH2与p53蛋白 的表达无关,EZH2与p63蛋白的表达呈正相关,p53与p63蛋白的表达呈正相关;EZH2和p63蛋白的高表达与T分期和临 床分期的升高有关(P<0.05);EZH2蛋白的高表达组的五年无疾病生存率明显低于低表达组(P<0.05).结论 在鼻咽癌中 mdm2的表达可能与p53蛋白失活的关系不大,p63蛋白的过表达可能与p53蛋白的失活有关,EZH2的过表达与鼻咽癌的 进展及不良预后有关.
作者：刘晓东；季明芳 刊期： 2011年第06期
目的 建立阿莫西林钠/克拉维酸钾人血药浓度的色谱分析方法.方法 采用对乙酰氨基酚为内标,人血浆样品用甲醇沉淀蛋白后高速离心进样;色谱柱:C18色谱柱(依利特Hypersil BDS,5μm,4.6 mm×150 mm);流动相:乙腈-0.05mmol/L磷酸盐缓冲液=10∶90(V/V,磷酸调pH至2.3);紫外检测波长:220nm;流速:1.0ml/min;柱温:25℃.结果 克拉维酸钾、阿莫西林钠及内标物对乙酰氨基酚保留时间分别为5.3、7.2、8.5 min,人血浆中内源性杂质对目标物的测定没有干扰.阿莫西林钠在0.52～4.16μg/ml范围线性良好(r2=0.9996),克拉维酸钾在0.266 ～2.14μg/ml范围线性良好(r2=0.9998);阿莫西林钠和克拉维酸钾的低检测浓度分别为0.065和0.066μg/ml.;阿莫西林钠的相对回收率分别为95.9%～96.5%(n=5),克拉维酸钾的相对回收率分别为92.5%～98.8%(n=5),阿莫西林钠日内RSD为1.84%～6.4%,日间RSD为2.1%～7.8%;克拉维酸钾日内RSD为3.57%～8.6%,日间RSD为1.8%～9.1%.结论 本方法简便、准确、灵敏、特异性强、重现性好,可作为同时测定人血浆中阿莫西林钠/束拉维酸钾浓度方法.
作者：林祖文；李源；宋玮娟；胡海燕；曾颖；许百虹 刊期： 2011年第06期
目的 评价恩替卡韦(ETV)联合阿德福韦酯(ADV)对既往核苷类似物(Nas)治疗失败的慢性乙肝(CHB)患者的疗效和安全性,并分析可能影响应答的因素.方法 回顾性分析既往Nas治疗失败,经ETV和ADV治疗24周以上(随访中位数18周)的45例CHB和代偿期肝硬化患者,比较治疗24和48周病毒学应答率(VR)、生化学应答率(BR)及联合应答率(CR).运用单因素分析可能影响疗效的因素.结果 24周时VR率、BR率和cR率分别是66.7%、77.8%和57.8%;48周时VR率、BR率和CR率分别是76.2%、78.6%和61.9%.与基线相比,24周VR率(Z=-4.796,P=0.000)、BR率(Z=-5.196,P=0.000)及CR率(Z=-3.606,P=0.000)均显著提高.48VR率(Z=-3.742,P=0.000)、BR率(Z=-4.472,P=0.000)及CR率(Z=-4.690,P=0.000)均显著提高.单因素分析显示肝硬化患者比非肝硬化BR率低(24周:BR率17.1%vs82.9%,x2=4.546,P=0.048;48周BR率23.8%vs76.2%,x2=6.364,P=0.023)有统计学意义;联合基线HBVDNA水平3～6 Log10 copies/ml与>6 Log10 copies/ml相比,前者48周VR率高于后者(85.2%vs40%,Z=-4.796,P=0.037)有统计学意义.结论 ETV联合ADV对既往Nas治疗失败的CHB患者是一种安全有效的补救治疗方案.治疗前HBVDNA水平低的非肝硬化患者疗效更优.
作者：阎丽；王战会；杨洁；周彬；郭亚兵；彭劼；孙剑；侯金林 刊期： 2011年第06期
目的 观察自发性2型糖尿病大鼠血浆脂联素(APN)与胰岛素抵抗的关系.方法 自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只作为正常对照组.饲养13和40周后,行口服葡萄糖耐量试验;于8、32和40周分批宰杀,检测血糖、血浆脂联素、胰岛素、血清甘油三酯、游离脂肪酸和胆固醇水平.结果 8周龄时OLETF鼠血浆APN水平显著低于LETO组(P<0.05),并进行性降低.32周龄和40周龄时OLETF组大鼠血浆胰岛素水平和甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸显著高于LEll0组(P<0.01).结论 OLETF鼠血浆APN水平与胰岛素抵抗显著负相关,且先于胰岛素抵抗和葡萄糖耐量受损发生;低脂联素血症可能是导致胰岛素抵抗的重要原因.
作者：郭煜；朱波；李晨钟；潘永华；张燕；薛耀明 刊期： 2011年第06期
目的 通过基因工程技术制备结核分枝杆菌培养滤液蛋白10(CFP10)、链亲和素(SA),CFP10融合蛋白(包括SA-CFP10、CFP10-SA),筛选灵敏度高、稳定性好者作为时间分辨荧光免疫分析法检测(TRFIA)的参考标准品.方法 以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组为模板,扩增CFP10基因,将其克隆到pET24b、pET24b-SA、pET21a-SA三种载体中,转化到大肠杆菌Rosetta中进行表达,表达产物经镍离子亲和层析(Ni-NTA)柱纯化,透析法复性.三种重组蛋白用双抗体夹心法TRFIA从灵敏度、稳定性两方面进行评价.结果 成功构建了pET24b-CFP10、pET24b-SA-CFP10和pET21a-CFP10-SA三种表达载体,重组蛋白CFP10主要为可溶形式表达,融合蛋白CFP10-SA、SA-CFP10均以包涵体形式存在,Ni-NTA柱纯化后透析复性,纯度均可达90%以上.三种重组蛋白经双抗体夹心TRFIA,CFP10-SA灵敏度高(0.02μg/L),稳定性好.结论 得到了灵敏度高、稳定性好的TRFIA检测CFP10的参照品CFP10-SA融合蛋白,为研制该结核分支杆菌时间分辨荧光诊断试剂盒,并应用于临床打下了基础.
作者：郭芳芳；邹立林；吴英松；胡志明；李金龙；吕建新；高基民 刊期： 2011年第06期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
