李正功;李涛平;叶红;冯媛;李丹青
目的 探讨1,2-二甲肼(1,2-dimethylhydrazine,DMH)对小鼠结直肠与卵巢的影响.方法 60只雌性ICR小鼠随机平均分为A、B两组,A组给予腹腔注射DMH(20mg/kg,每周1次,连续24周),B组注射生理盐水作为对照,首次注射后12、16、20、24、28和32周分批处死小鼠,观察其结直肠与卵巢病理形态学改变.结果 A组小鼠结直肠发生显著病理改变,DMH注射12~16周后,小鼠结直肠上皮出现不同程度增生改变,20周后,2只小鼠发生结直肠肿瘤,并且随DMH作用时间的延长,肿瘤发生率逐渐增加,至32周共有7只小鼠发生结直肠腺瘤,5只结直肠腺癌,且肿瘤主要位于距肛门8 cm内;值得注意的是,A组小鼠卵巢也发生明显病理改变,32周内共见21只A组小鼠发生卵巢血肿伴慢性炎症改变,而且,28和32周各发现1只A组小鼠卵巢出现绒毛膜癌病理学改变.实验过程中B组小鼠均未见异常.结论 DMH对小鼠结直肠与 卵巢组织形态学变化具有显著影响,多次腹腔注射DMH能够导致小鼠结直肠与卵巢发生病理改变.
作者:李新;于莉娜;张庆玲;齐鲁;丁彦青 刊期: 2011年第06期
目的 探讨哮喘血清、地塞米松、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)等不同刺激因子对人气道平滑肌细胞白细胞介素-22R1(IL-22R1)mRNA及蛋白表达的影响.方法 用免疫荧光PCR检测不同因素刺激下人气道平滑肌细胞IL-22R1mRNA的表达,用Western blot检测人不同因素刺激下的人气道平滑肌细胞IL-22R1蛋白的表达,比较不同组别之间的差异.结果 哮喘血清刺激下的人气道平滑肌细胞IL-22R1mRNA升至对照组345倍,而蛋白表达明显增强(P<0.01);加用地塞米松后IL-22R1mRNA降至对照组10倍,蛋白表达较仅用哮喘血清刺激明显减弱(P<0.01).IL-4、IFN-γ、TGF-β刺激后人气道平滑肌细胞IL-22R1mRNA及蛋白表达均显著性增加.结论 IL-22R1表达的改变可能参与支气管哮喘的病程,影响人气道平滑肌细胞IL-22R1受体的表达可能是地塞米松发挥其在支气管哮喘病程中作用的机制之一.IFN-γ、IL-4、TGF-β对气道平滑肌细胞IL-22R1的作用可能是其对支气管哮喘疾病产生影响的机制之一.
作者:张旃;罗雅玲;周丽丽;赖文岩;徐建;黎振兴;任敦强;叶涵;钟浩海 刊期: 2011年第06期
目的 研究凋亡和坏死细胞对脓毒症小鼠存活率的影响.方法 将BALB/c小鼠分为3组,分别为PBS对照组、凋亡细胞输注组和坏死细胞输注组,输注3 d后行盲肠结扎穿孔,制作脓毒症模型,观察脓毒症小鼠的存活率和器官病理损伤.结果 PBS对照组小鼠2周存活率为44.6%,肺脏和肾脏组织出现一定程度的损伤;凋亡细胞输注组1周存活率为69.6%,较对照组显著提高(P=-0.012),肺脏和肾脏组织损伤明显减轻;坏死细胞输注组1周存活率为31.6%,较对照组显著下降(P=0.035),肺脏和肾脏组织损伤明显加重.结论 脓毒症造模前3 d输注凋亡细胞可以减轻器官损伤,提高脓毒症小鼠的存活率,而输注坏死细胞可以加重器官损伤,降低存活率.
作者:刘占国;张婕;何懿;常平;顾冬生;罗宇维;孙尔维 刊期: 2011年第06期
目的 观察自发性2型糖尿病大鼠血浆脂联素(APN)与胰岛素抵抗的关系.方法 自发性2型糖尿病大鼠OLETF鼠20只,同系健康对照LETO鼠10只作为正常对照组.饲养13和40周后,行口服葡萄糖耐量试验;于8、32和40周分批宰杀,检测血糖、血浆脂联素、胰岛素、血清甘油三酯、游离脂肪酸和胆固醇水平.结果 8周龄时OLETF鼠血浆APN水平显著低于LETO组(P<0.05),并进行性降低.32周龄和40周龄时OLETF组大鼠血浆胰岛素水平和甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸显著高于LEll0组(P<0.01).结论 OLETF鼠血浆APN水平与胰岛素抵抗显著负相关,且先于胰岛素抵抗和葡萄糖耐量受损发生;低脂联素血症可能是导致胰岛素抵抗的重要原因.
作者:郭煜;朱波;李晨钟;潘永华;张燕;薛耀明 刊期: 2011年第06期
目的 筛查可能导致青年骨量减少(OST)的危险因素.方法 按照世界卫生组织1992年颁布14~44岁属于青年的年龄划分界定,收集我院15~43岁原发性骨量减少(-2.5
作者:张丽;李文源 刊期: 2011年第06期
目的 观察大鼠肾脏创伤早期肾脏和下丘脑ADM表达的变化及外源性ADM对二者表达的影响.方法 将健康成年普通级Wistar大鼠随机分为对照组、创伤组(32只);预防组(32只)和治疗组(32只)4组,后3组均采用自由落体打击仪直接打击大鼠脊肋区制作创伤模型,两给药组分别于创伤前后10 min腹腔注射ADM(0.1 nmol/kg).平均分为四批于创伤后1、6、12、24 h采用快速心脏采血法处死.迅速解剖动物提取肾脏及下丘脑标本,中性福尔马林固定,免疫组织化学染色,观察ADM在肾脏及下丘脑组织中的表达,并进行统计学分析.结果 肾脏ADM阳性表达:预防组于伤后1 h阳性表达,其阳性结果随时间呈上升趋势,与创伤组及对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).治疗组于伤后1 h、6 h强阳性表达,并随时间呈下降趋势,至伤后24 h恢复正常水平,差异有统计学意义(P<0.05).创伤组ADM呈低阳性表达,以1 h及12h为著,24h基本恢复正常,差异有统计学意义(P<0.05).下丘脑ADM阳性表达:治疗组阳性表达趋势基本同肾脏ADM阳性表达趋势,与创伤组及对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).预防组于6 h及24 h呈强阳性表达;12 h阳性表达结果明显降低且达低峰,差异有统计学意义(P<0.05).创伤组于6 h阳性表达结果明显降低,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 下丘脑ADM对肾脏ADM的表达有一定的上调作用,ADM通过局部及全身的正负反馈调节以维持机体内环境的相对稳定和正常生理活动.
作者:陈丑彦;孙少华;钟翠萍;冯颖 刊期: 2011年第06期
目的 用酶联免疫吸附法(ELISA)测定广州市售柴胡药材中柴胡皂苷a(SSa)的含量,考察其质量情况.方法 使用抗SSa单克隆抗体,建立竞争性酶联免疫吸附检测(ELISA)法,测定广州市售柴胡药材样品中的SSa含量.结果 建立的竞争性ELISA法中,SSa在0.16~2.5μg/ml浓度范围内,与吸光度呈良好线性关系.10份市售柴胡药材中SSa的含量在0.32~6.87μg/mg之间.结论 ELISA是一种灵敏陕捷、经济环保,特别适合于批量检测的SSa测定法.广州市售柴胡药材质量参差,约30%不符合药典要求,需加强监管.
作者:马丽玲;谭铭铭;晁志 刊期: 2011年第06期
目的 探讨miR-145基因在糖尿病性勃起功能障碍(ED)大鼠发病过程中的作用.方法 建立糖尿病性ED大鼠动物模型,取阴茎海绵体组织,提取总RNA,qRT-PCR法检验miR-145在糖尿病性ED大鼠、糖尿病性勃起功能正常大鼠及正常大鼠阴茎海绵体组织中表达差异.结果 miR-145在糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体组织中的表达量下降.结论 糖尿病可导致大鼠阴茎ED,miR-145基因表达下调可能与ED发生有关.
作者:韦安阳;杨勇;何书华;罗新贵;张涛;刘洋 刊期: 2011年第06期
目的 探索三维可视化技术在肝胆管结石病术前诊断、术前评估及手术指导方面的应用价值.方法 对30例肝胆管结石病人的肝脏64排螺旋CT扫描原始数据,采用自主研发的腹部医学图像处理系统进行肝脏及胆道三维重建,根据三维重建结果进行术前诊断和病理分型,评估手术预案可行性及安全性,确定佳手术方案后指导临床实际手术过程;并观察术中所见与仿真手术的符合程度以及患者结石残留情况.结果 当肝脏设置为半透明时,可以清晰显示肝内、外胆管的立体解剖形态,病变胆管扩张及狭窄部位和程度,肝内结石的精确部位、大小及数量.术中所见与术前三维重建符合率、实际手术过程与术前仿真手术符合率均为100%,实际手术方案与术前预案符合率达到90%(27/30).随访半年,复发率7.4%(2/27).结论 三维可视化技术可实现肝胆管结石病的术前精确诊断和术中精确操作,可有效降低术后复发率.
作者:范应方;方驰华;陈建新;项楠;杨剑;李克晓 刊期: 2011年第06期
目的 通过基因工程技术制备结核分枝杆菌培养滤液蛋白10(CFP10)、链亲和素(SA),CFP10融合蛋白(包括SA-CFP10、CFP10-SA),筛选灵敏度高、稳定性好者作为时间分辨荧光免疫分析法检测(TRFIA)的参考标准品.方法 以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组为模板,扩增CFP10基因,将其克隆到pET24b、pET24b-SA、pET21a-SA三种载体中,转化到大肠杆菌Rosetta中进行表达,表达产物经镍离子亲和层析(Ni-NTA)柱纯化,透析法复性.三种重组蛋白用双抗体夹心法TRFIA从灵敏度、稳定性两方面进行评价.结果 成功构建了pET24b-CFP10、pET24b-SA-CFP10和pET21a-CFP10-SA三种表达载体,重组蛋白CFP10主要为可溶形式表达,融合蛋白CFP10-SA、SA-CFP10均以包涵体形式存在,Ni-NTA柱纯化后透析复性,纯度均可达90%以上.三种重组蛋白经双抗体夹心TRFIA,CFP10-SA灵敏度高(0.02μg/L),稳定性好.结论 得到了灵敏度高、稳定性好的TRFIA检测CFP10的参照品CFP10-SA融合蛋白,为研制该结核分支杆菌时间分辨荧光诊断试剂盒,并应用于临床打下了基础.
作者:郭芳芳;邹立林;吴英松;胡志明;李金龙;吕建新;高基民 刊期: 2011年第06期
目的 探讨多排CT(multi-detector row CT,MDCT)和MRI对视网膜脱离的诊断价值及临床意义.方法 回顾性分析2007年5月~2010年10月期间,中山大学中山眼科中心送至我院检查及中山大学附属第一医院检查的45例(47只眼)视网膜脱离患者的MDCT或MRI图像,其中16例(17只眼)经MDCT诊断,29例(30只眼)经MR诊断;45例(47只眼)视网膜脱离患者中的32例(33只眼)经手术证实,13例(14只眼)经其它临床相关检查得到验证.结果 MDCT或MRI图像上可见到脱离的视网膜与眼球后壁之间的积液征象.在所有视网膜脱离的患者中,单纯视网膜脱离21只眼;伴有其它相关征象的26只眼.伴出血者20只眼、伴钙化者6只眼.其中,脉络膜骨瘤3只眼、脉络膜黑色素瘤5只眼.结论 MDCT成像速度快、对钙化病灶显示敏感;MR无辐射,软组织分辨力高,对出血及小范围视网膜脱离显示敏感;二者对视网膜脱离均有较高的诊断价值,临床医生可根据不同患者合理选择.
作者:陈芳妮;范淼;毛羽翔;李华雨 刊期: 2011年第06期
目的 探讨单孔腹腔镜(laparoendoscopic single-sitesurgery,LESS)下男假两性畸形整形术,包括LESS行下乙状结肠阴道成形术、双侧隐睾切除术及开放式外阴整形手术对男假两性畸形的疗效.方法 患者为17岁,社会性别为女性.基因性别为男性,要求实现女性性别.行LESS下乙状结肠阴道成形术、双侧隐睾切除及开放式外阴整形手术,于脐下缘取2.5 cm弧形切口,置入自制(2环1套法)单孔多通道开口器建立手术入路.手术过程包括LESS下双侧隐睾切除术、乙状结肠阴道成形术及开放式会阴部整形术.结果 手术总时间7 h,LESS部分3.5 h.术中没有增加其它手术通道或者中转开放手术.术中失血约400 ml,围手术期未发生水电解质平衡紊乱及酸碱失衡.术后6月复查,新阴道生长良好,无明显挛缩,固定适当,会阴部外形构建良好.结论 LESS手术创伤小,恢复快,对两性畸形的美容效果十分明显,有望成为治疗两性畸形的更加微创、美观的手术方法.
作者:温勇;徐啊白;郑少波;刘春晓;徐亚文;李虎林;许凯;方平;李传印 刊期: 2011年第06期
目的 通过肠道内灌注蛋白酶抑制剂乌司他丁(UTI),探讨肠道蛋白酶在失血性休克大鼠炎症反应中的作用.方法 28只Wistar大鼠(雌雄不限)随机分为4组:未灌注肠道组(A组)、盐水灌注肠道组(B组)、UTI灌注肠道组(C组)、静脉UTI组(D组).记录各组大鼠平均动脉压和生存时间的变化,通过流式细胞术检测人粒细胞表面CD11b表达的变化,从而比较不同处理对大鼠血浆活性的影响.采用手工计数法计量不同时间点外周血白细胞数目,后制作肠道组织病理切片,比较不同组别大鼠肠道黏膜的损害程度.结果 (1)平均动脉压:休克后,C组和D组大鼠血压下降较其他两组缓慢(P<0.05).(2)生存时间:C组大鼠生存时间明显长于其余3组(P<0.05).(3)血浆活性:休克后各组大鼠血浆活性均呈增高趋势,但C组活性与其他3组比较明显降低(P<0.05).(4)外周血白细胞:休克后各组大鼠外周血白细胞总数呈下降趋势,但C组数目与其他3组比较明显升高(P<0.05).(5)比较空肠黏膜组织病理变化发现,A组黏膜损害程度深,B、D组次之,C组轻.结论 肠道内灌注蛋白酶抑制剂UTI可以延缓大鼠休克后血压下降过程,减弱血浆活性及炎症反应水平,终延长生存时间,说明肠道蛋白酶在失血性休克大鼠炎症反应的发生发展中起重要作用.
作者:郭培培;陈仲清;席小丽;陈辉;傅卫军;王瑞亭 刊期: 2011年第06期
目的 检测多巴胺受体D2在不同肺癌细胞中的表达,并初步探讨多巴胺对肺癌细胞凋亡的影响.方法 利用蛋白电泳及逆转录聚合酶链反应检测肺癌95D、H460、GLC-82、A549及H446细胞中多巴胺受体D2的表达;采用含有0.02%、0.04%、0.08%及0.1%多巴胺的细胞培养液培养A549细胞,6 h后行流式细胞仪凋亡检测;选取2只BALB/c-nu构建A549肿瘤模型,于瘤体内分别注射1%多巴胺及生理盐水,24 h后取出肿瘤并制成细胞悬液,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 蛋白电泳及逆转录聚合酶链反应检测显示多巴胺受体D2在肺癌95D、H460、GLC-82、A549及H446细胞上呈现阳性表达;多巴胺对A549细胞的促凋亡作用与多巴胺浓度呈现正相关;动物实验进一步证实,多巴胺对A549肿瘤具有明显促凋亡作用.结论 多巴胺受体D2广泛表达于不同类型肺癌细胞,多巴胺促进肿瘤细胞凋亡可能与多巴胺受体D2有关.
作者:彭阳红;张锦明;周乃康;王珊 刊期: 2011年第06期
目的 观察大鼠心肌缺血及再灌注过程中心肌细胞骨架蛋白α辅肌动蛋白(α-actinin)含量的变化及其与心功能的关系.方法 Wistar大鼠随机分为假手术组(sham),缺血30 min组(I30min),缺血1 h组(I1h),缺血1 h再灌注2 h组(IR),每组各8只.通过结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌缺血及再灌注模型,记录左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左室内压上升大速度(+dp/dt max)、左室内压下降大速度(-dp/dt max).采用免疫组化方法检测各组心肌中α-actinin含量和分布.ELISA法定量检测各组心肌组织磷酸肌醇3激酶(P13K)和磷脂酶C(PLC)含量.急性分离大鼠心肌细胞,并用PI3K抑制剂(LY-29400)和PLC抑制剂(U-73122)处理细胞,观察其对心肌细胞收缩舒张能力及对α-actinin含量的影响.结果 (1)随缺血时间延长,大鼠LVSP、+dp/dtmax、-dp/dt max下降,LVEDP升高;再灌注后LVSP、+dp/dtmax、-dp/dt max回升,LVEDP回落,但不能恢复到缺血前水平.(2)免疫组化染色观察到随缺血时间延长,α-actinin 出现点状、片状缺失,含量下降.(3)急性缺血过程中PI3K和PLC含量逐渐增加(P<0.05).(4)应用LY-294002及U-73122 后单个心肌细胞收缩幅度较缺血组明显增加(P<0.05).(5)应用LY-294002及U-73122后心肌细胞α-actinin免疫荧光强度较缺血组增加(P<0.001).结论 心肌缺血时心肌细胞骨架蛋白α-actinin的含量减少可能与缺血后PI3K和PLC含量增加有关,并且α-actinin结构与含量变化可能是导致心肌功能障碍的原因之一.
作者:陈唐葶;周翔;王立群;金春华 刊期: 2011年第06期
目的 研究鬼臼毒素纳米脂质载体(POD-NLC)的体外对HPV感染的永生化人宫颈上皮细胞的作用.方法 采用乳化蒸发法制备POD-NLC,分别应用扫描电镜、粒径仪、高效液相法等方法研究其表征,并观察其稳定性.分别以不同浓度(0.0001~1 μg/ml)的POD-NLC和鬼臼毒素(POD)处理H8细胞,采用MTT法检测细胞的增殖活性,以荧光显微镜观察细胞的形态变化,流式细胞术(FCM)检测其凋亡率和细胞周期.结果 ①制备的POD-NLC扫描电镜下呈球形,有较好的稳定性,粒径为(85.6±10.25)nm,电位为(26.2±4.1)mV,包封率为(88.56±3.1)%;②POD-NLC能较强地抑制H8细胞的增殖,其抑制作用呈现时间和剂量依赖性;POD-NLC和POD作用72 h对H8细胞的抑制率高分别为95.8%、65.6%,半数抑制浓度(IC50)分别为0.015、0.13 μg/ml;空白NLC对H8细胞的增殖无影响;③浓度为0.01 μg/ml的POD-NLC和POD分别处理H8细胞48 h后,H8细胞的凋亡率分别为(88.30±4.28)%和(59.95±3.26)%;荧光显微镜观察,均出现了核固缩、染色质高度凝聚、凋亡小体等典型的凋亡形态改变;与空白对照组相比,POD-NLC组和POD组G2/M期细胞比例明显增多,S期细胞比例无明显变化,G0/G1期细胞比例明显减少,但两组间细胞周期时相比例的差异无统计学意义(P>0.05).结论 该制备工艺可行;与POD相比,POD-NLC对H8细胞具有更强的增殖抑制和凋亡诱导效果,可使细胞阻滞于G2/M期,显示出良好的抗宫颈HPV感染的效果.
作者:种树彬;曾抗;李国锋;任非;朱晓亮;周金洁 刊期: 2011年第06期
目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者是否存在免疫功能的异常.方法 回顾性研究187名确诊OSAHS患者及20名体检健康对照组资料,观察指标包括整晚睡眠监测、体液免疫、细胞免疫.结果 OSAHS与正常健康对照组比较,体液免疫中C3明显升高,IgM下降,细胞免疫中NK细胞所占T淋巴细胞的百分率明显下降(P<0.01);相关性分析示C3与呼吸暂停低通气指数(AHI)正相关、与经皮低血氧饱和度(LSpO2)负相关;IgM与LSpO2弱正相关;NK细胞与AHI弱负相关;其他免疫功能指标在统计学上无显著相关性.结论 OSAHS患者存在免疫功能改变,可能存在免疫功能下降.
作者:李正功;李涛平;叶红;冯媛;李丹青 刊期: 2011年第06期
目的 了解深圳地区札如病毒(sapovirus,SaV)的感染情况和流行病学特征.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对收集的852份腹泻患者粪便标本进行SaV检测,PCR产物测序进行核苷酸序列比对构建系统发生树并进行同源性比较.结果 检出SaV阳性株16例,阳性率为1.88%.同源性比较发现8例为SaV GⅠ型,7例GIV型,1例GⅡ型.结论 深圳地区存在SaV感染,主要基因型为GⅠ型;首次报道中国存在SaV GIV型,与先前检出的安徽株A141和北京株CHN99/BJ360均不同,说明SaV感染在中国存在基因多样性,为进一步研究SaV感染情况提供了流行病学及基因型别基本资料.
作者:王颜歌;何雅青;向文龙;廖玉学;陈清;俞守义;胡贵方 刊期: 2011年第06期
目的 应用吉非替尼作用于鼻咽癌细胞株CNE2,观察其放疗增敏作用.方法 体外培养鼻咽癌细胞株CNE2,以MTT实验检测细胞增殖抑制情况及吉非替尼对细胞放射敏感性的影响;用克隆形成法绘制细胞存活曲线,获得不同处理条件下的放射增敏比.以流式细胞术(FCM)分析细胞周期变化和凋亡情况.结果 MTT显示与单纯照射组比较,联合吉非替尼照射组细胞生存率显著降低(0.582±0.012 vs 0.398±0.016,P=0.0020);FCM显示吉非替尼联合放射组S期细胞显著下降(P=0.000),而G2/M期细胞比值显著增加(P=0.000),吉非替尼和放射线可协同作用,使CNE2细胞的周期再分布显著变化.结论 吉非替尼可增强鼻咽癌细胞株CNE2放射敏感性,其机制可能与改变细胞周期的分布相关.
作者:何本夫;孙爱民;黄碧燕;王雯珺;郑小康;罗荣城 刊期: 2011年第06期
目的 总结对冠心病合并重度缺血性二尖瓣关闭不全外科治疗的经验.方法 自2006年1月~2009年12月,45例冠心病合并重度缺血性二尖瓣关闭不全(ischemic mitral valve regurgitation,IMR珩冠状动脉旁路移植术时同期行二尖瓣成形术24例,瓣膜置换术21例.男35例,女10例;年龄32~74岁[平均(58.46±12.51)岁].结果 围术期死亡2例,死于多器官功能衰竭(multiple organ failure,MOF).超声心动图检查提示:术后二尖瓣反流面积与术前比较明显下降[(11.80±2.45)cm2和(2.83±0.98)cm2,t=22.80,P=0.00],术后左心室舒张期末内径(left ventricular end diastolic diameter,LVEDD) 与术前比较明显减小[(57.61±10.06)mm和(51.84±8.98)mm,t=2.85,P=0.005)].左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)无明显差异(52.7%±15.4%和53.2%±13.2%,t=0.16,P=0.87).结论 治疗冠心病合并重度缺血性二尖瓣关闭不全,对二尖瓣病变进行必要的外科手术矫正,早期可改善左心室收缩功能,长期预后有待更多的追踪.
作者:麦明杰;陈星权;郑少忆;吴若彬;郭惠明;黄劲松 刊期: 2011年第06期