王立军；何建桂；马虹；蔡乙明；廖新学；曾武涛；柳俊；王礼春
目的探讨制备脂质体包裹重组幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白60(Hsp60)口服疫苗的方法,并用Hp感染的小鼠模型评价其在预防Hp感染中的作用.方法将PET-22(+)/Hsp60在BL21(DE3)大肠杆菌表达,Ni-NTA琼脂糖树脂纯化Hsp60重组蛋白,用薄膜分散法制备以卵磷脂和胆固醇为膜组分包裹的Hsp60重组蛋白口服疫苗,并用透射电镜测定其粒径.75只BALB/C小鼠分为5组,分别通过灌胃方法给予PBS、空白脂质体、Hsp60重组蛋白+霍乱霉素(CT)、脂质体包裹Hsp60重组蛋白、脂质体包裹Hsp60重组蛋白+CT,每周1次共4次,末次攻击2周再用活Hp攻击3次,3周后处死小鼠,行胃组织快速尿素酶试验、Hp的定植半定量、炎症程度及其炎症活动度的评分.结果可溶性表达产物占全菌总蛋白的27%,经纯化获得纯度为95%的重组蛋白,制备的脂质体粒径为(0.7±0.4)μm.PBS组和空白脂质体组保护率均为0,而Hsp60重组蛋白+CT组、脂质体包裹Hsp60重组蛋白组、脂质体包裹Hsp60重组蛋白+CT组的保护率分别为73.3%、66.7%和86.7%,且均能使免疫小鼠胃粘膜Hp感染数目明显减少,炎症反应减轻.结论口服脂质体能分地代替免疫佐剂,作为Hp疫苗的免疫佐剂,将具有广泛的应用前景.
作者：黄文；白杨；王继德；武金宝；李国锋；张卫民；周殿元 刊期： 2005年第05期
目的建立一种检测日本血吸虫感染的胶体金免疫层析方法.方法将已获得的单抗用protein-G亲和层析纯化,通过间接ELISA测定每株单抗的亲和常数.按改良过碘酸钠标记法,8株单抗标记辣根过氧化物酶(HRP)后进行不同株单抗配对,选出亲和力高、稳定性强的单抗配对组合.胶体金标记4株抗体,选择佳反应模式,建立胶体金免疫层析方法,并对弓形虫感染鼠血样、血吸虫感染前和感染后2、3、4、5、6周的鼠血样进行检测.结果 8株抗SjP38单克隆抗体经纯化后纯度达95%以上,其亲和常数介于1×10-8mol/L～2.82×10-10mol/L.根据配对实验,1A6与9H6、1A6与9G7、6G12与9H6、6G12与9G7以及9H6与9G7为佳配对组合.标记1A6、6G12、9H6与9G7这4株单抗后筛选出佳反应模式,即以9G7为包被抗体,包被浓度为2.5μg/μl;当1A6为金标抗体,抗体稀释浓度为1:4时,检测效果佳.对rSjp38的低检测量为12.5 ng/ml.抗检测感染3、4、5、6周小鼠血清,阳性率分别为40%、50%、60%、80%,而弓形虫感染鼠和血吸虫感染前小鼠血样的检测结果为100%阴性.结论通过抗体配对、佳包被量和金标抗体稀释倍数条件的优化,建立了快速、简便、特异的胶体金免疫层析方法,自制的rSjP38试纸条能检测血吸虫早期感染鼠血清中的循环抗原SjP38.
作者：吴锦雅；杨培良；周晓红；李华；陈晓光 刊期： 2005年第05期
神经内分泌癌是由神经内分泌肿瘤恶变而来,多见于肺和腹腔器官,作者近期治疗1例极其罕见的颅内神经内分泌癌,报告如下.
作者：彭林；程江鹏；黄理金；黄传平 刊期： 2005年第05期
目的探讨保留回盲瓣之全结肠切除、直肠粘膜剥除,盲肠经直肠肌鞘肛管吻合术在溃疡性结肠炎、家族性腺瘤性息肉病患者中的应用及效果.方法回顾性总结1990年以来进行的8例保留回盲瓣之全结肠切除、直肠粘膜剥除,盲肠经直肠肌鞘肛管吻合患者,其中溃疡性结肠炎患者5例,家族性腺瘤性息肉病患者3例.结果随访5～10年无1例复发,无伤口感染、肛瘘形成,排尿及性功能无影响,8～10周排便次数恢复到3～5次/d,3～4月恢复正常(1～3次/d).结论保留回盲瓣之全结肠切除、盲肠经直肠肌鞘肛管吻合术治疗重症溃疡性结肠炎、家族性腺瘤性息肉病初步结果满意.
作者：许辉；肖建秋 刊期： 2005年第05期
目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)和Ⅳ型胶原在慢性移植肾病(CAN)患者肾组织中的表达及意义.方法采用免疫组织化学技术及计算机图像分析系统,观测19例CAN患者移植肾组织中TGF-β1和Ⅳ型胶原的表达情况,分析两者间及与CAN病理分级之间的关系.结果 CAN移植肾组织中TGF-β1和Ⅳ型胶原的表达比正常肾组织明显增加(P＜0.001),并随CAN病理分级呈逐渐递增的趋势;与正常肾组织相比TGF-β1和Ⅳ型胶原在CAN患者肾小球和肾小管间质中的表达呈正相关(r=0.943,P＜0.001及r=0.910,P＜0.001).结论Ⅳ型胶原的异常沉积是CAN患者移植肾纤维化的重要表现,TGF-β1可能通过调控Ⅳ型胶原等成分的变化在CAN移植肾的纤维化进程中起重要作用.
作者：韩聪祥；于立新；徐健；谢庆祥；王亦斌；邓文锋；刘小友；曾京华 刊期： 2005年第05期
目的探讨小鼠脾脏CD4+T细胞的分离方法,观察钩吻素子(Kou)对小鼠脾脏CD4+T细胞体外增殖的影响.方法以免疫磁珠分选法从小鼠脾脏细胞中分离CD4+T细胞,流式细胞术检测所得细胞的纯度,台盼蓝法检测细胞活力.将10～320μg/ml Kou分别作用于经刀豆蛋白A或植物血凝素刺激的小鼠T淋巴细胞,四唑盐比色法检测细胞增殖情况,用酶联免疫法检测细胞上清中IL-2的含量.结果经过流式细胞仪测定分离后的小鼠脾脏CD4+T细胞纯度达到90.3%±5.8%:0.2%台盼兰染色细胞活力为94.9%±3.6%;增殖试验表明分离后未加Kou的CD4+T细胞对刀豆蛋白A、植物血凝素的刺激保持了良好的增殖能力,当浓度范围为20～320μg/ml时,Kou均能抑制淋巴细胞的增殖(P＜0.05),且表现出一定的剂量相关性;不同浓度的Kou(20、100、200μgm1)作用后,CD4+T细胞培养上清中的IL-2水平明显低于对照组(P＜0.05).结论免疫磁珠阴性分选法操作简单、快速,可获得较高纯化率、有活性的CD4+T细胞;Kou明显抑制小鼠CD4+T淋巴细胞增殖反应,此抑制作用可能与Kou抑制小鼠CD4+T细胞IL-2的分泌及免疫抑制作用相关.
作者：王志睿；黄昌全；张忠义；张兰兰；林敬明 刊期： 2005年第05期
目的获得弓形虫多表位基因在原核系统中可溶性表达产物,为弓形虫病重组抗原试剂盒的制备及疫苗的研究奠定基础.方法以PCR法扩增弓形虫多表位基因,使其两端带有与载体pET32a相匹配的酶切位点,插入载体pET32a,酶切并测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行诱导,SDS-PAGE分析和鉴定该基因的表达水平、表达产物的可溶性及其相对分子质量,Western-blot分析表达产物的免疫反应性.结果该基因在原核表达系统中经诱导,得到了Mr31000的可溶性融合表达产物.经Ni-NTA纯化,纯度可达90%以上.免疫印迹实验表明该产物能够被弓形虫B36感染的小鼠血清和弓形虫RH感染的兔血清特异识别.结论弓形虫多表位基因在原核中的可溶性表达产物在弓形虫病诊断及疫苗研究中有潜在的应用价值.
作者：杨培梁；陈晓光；王元占；李华；周晓红；吴焜；言慧 刊期： 2005年第05期
子宫颈癌是我国常见的妇科恶性肿瘤之一,每年新发病例为13万左右,对妇女健康构成严重的威胁.目前临床治疗宫颈癌仍是行手术、放疗、化疗三者综合治疗,放疗扮演着重要的角色.只有提高放疗水平,才能提高患者的生存率,而准确的放疗剂量资料,来源于直接测量.由于女姓盆腔及周围组织的解剖学结构复杂,在实施放射测量过程中需要一系列测量设备、实验技术、照射参数等等,测量成本高,工作程序繁琐.本工作采用随机光子跟踪模拟方法,进行宫颈癌腔内放射治疗时组织中光子通量的计算,简单、灵活、准确、受条件影响不大,对复杂的女性盆腔结构、组织参数随能量的剧烈变化及散射各向异性均能很好地处理,值得推广.
作者：徐海荣 刊期： 2005年第05期
目的探讨腺病毒介导KDR启动子驱动的融合基因体系对人脐血管内皮细胞株ECV304的增殖活性、细胞周期及凋亡的影响.方法以重组腺病毒AdEasy-KDR-CDglyTK体外感染表达KDR的ECV304细胞株和对照组不表达KDR的LS174T细胞株,并给予不同浓度的前药GCV(ganciclovir)和/或5-FC(5-fluorocytosine),观察该体系对ECV304细胞的杀伤效应及其旁观者效应;并以流式细胞仪检测细胞周期的变化,电镜观察细胞的病变.结果重组腺病毒对ECV304细胞及对照组LS174T细胞的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的递增而增加,当MOI为200时,所有细胞株均达约100%感染.以MOI为100的重组体分别感染各细胞株表现出对前药的不同敏感性:表达KDR的ECV304细胞对前药的具有较高的敏感性,与前者相比,不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感(P均＜0.001).融合基因的疗效优于任一单自杀基因(P均＜0.001).将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同混合培养,观察到该体系明显的旁观者效应.流式细胞术检测表明该体系抑制ECV304细胞DNA的合成,表现为S期细胞比率增多及G1期细胞减少(P均＜0.001).同时,电镜下可见ECV304有凋亡和坏死改变.结论 KDR基因启动子可调控融合基因体系选择性杀伤人血管内皮细胞,其机制与细胞周期阻滞、凋亡及坏死有关.
作者：苏国强；黄宗海；俞金龙；厉周；范应方；宋慧娟；王蔚；张进华 刊期： 2005年第05期
目的采用主观法和客观法测试CT机的空间分辨力,探讨与空间分辨力相关的各项参数.方法采用Catphan500和自制体模对2台CT在不同条件下进行了测试.结果分别得出了线对法和MTF方法下的结果.结论每种测试方法各有优缺点,有多种因素影响CT空间分辨力.
作者：李萍；余晓锷；杨克柽；占杰 刊期： 2005年第05期
目的探讨儿童外伤性脾破裂治疗方法的选择.方法回顾性分析了70例儿童外伤性脾破裂病例.结果 10例患儿经非手术治疗治愈.60例患儿采用手术治疗,其中35例采取脾部分切除或修补术;25例全脾切除,其中21例实行自体脾移植术.术后随访61例,随访时间3个月～5年,无脾切除后凶险性感染.结论儿童脾外伤后应根据病情和脾脏损伤的程度选择合理的治疗方式,对于脾切除患儿自体脾片移植是安全有效的疗法.
作者：徐建国；杨四清 刊期： 2005年第05期
目的了解微囊藻毒素对小鼠的急性损伤作用.方法以BALB/C小鼠为材料,腹腔注射22μg./kg·b.w.和43μg/kg·b.w.剂量的微囊藻毒素LR,测定脏器系数和一系列生化指标.结果肾脏指数与肝脏指数明显增加,表明两种器官都受到损伤;血清中天冬氨酸转氨和丙氨酸转氨酶活力上升,尿素含量下降预示着肝脏损伤,尿酸含量上升则预示肾脏损伤的发生.结论肾脏也可能是易受微囊藻毒素损伤的器官.
作者：雷腊梅；宋立荣 刊期： 2005年第05期
目的探讨血管内皮生长因子受体(KDR)启动子驱动重组腺病毒CDglyTK融合基因体系对结直肠癌细胞株LOVO及人脐血管内皮细胞株ECV304的选择性杀伤作用.方法将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的LoVo、ECV304细胞和对照组不表达KDR的LS174T细胞,并给予不同浓度的前药GCV(ganciclovir)和/或5-FC(5-fluorocytosine),观察该体系对细胞株的杀伤效应.结果制备的病毒滴度为2.0×1012pfu/ml.3种细胞的感染率相似,且感染率随腺病毒滴度的递增而增加,当MOI为200时,所有细胞株均接近100%感染.以MOI为100的重组体分别感染各细胞株,发现其对前药的敏感性不同:表达KDR的LoVo和ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,且二者敏感性无显著差异(P＞0.1);与前二者相比,LS174T细胞对前药不敏感(P＜0.001).同时,CDglyTK双自杀基因的疗效优于任一单自杀基因(P＜0.001).流式细胞术检测表明该体系抑制LoVo细胞DNA的合成,表现为S期细胞比率增多及G1期细胞减少(P＜0.001).结论 KDR基因启动子调控的CDglyTK融合基因体系可选择性杀伤结直肠癌LoVo细胞和血管内皮细胞.
作者：林荣凯；黄宗海；苏国强；柯志勇；陈建雄；周俊杰 刊期： 2005年第05期
目的了解社区中老年人骨质疏松症(OP)自我效能和相关健康行为.方法对广州市海珠区南石头街的290名社区中老年人,用Horan等人编制的OP自我效能问卷和自制的OP行为问卷进行调查.结果(1)OP自我效能得分64.75+21.93,不同性别和运动量之间的差异无统计学意义.不同年龄、学历、职业和摄钙量组之间的自我效能得分差异有统计学意义(P＜0.01),随着年龄增高,得分降低;随着学历增高自我效能得分则增高;脑力劳动者比体力劳动者的得分高;摄钙高组自我效能得分高.(2)OP预防行为不足,只有36.1%的人每日饮牛奶,29.2%的人常吃豆制品,49.8%的人间断补充钙片,58.1%的人运动3次/周以上,每次超过30 min,运动以散步为主.结论在社区中老年人的OP健康教育中,应提高自我效能,克服不良行为善.
作者：黎明；陈玉平 刊期： 2005年第05期
目的探讨心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、肌红蛋白(Mb)两种生化指标在急性心肌梗死诊治中的应用价值.方法对胸痛发作后2～4 h的50例急性心肌梗死患者,定量检测血清cTnI、Mb、肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同功酶(CK-MB)浓度,并对结果进行统计分析.结果急性心肌梗死患者Mbc、TnI、CK、CK-MB明显升高;峰值时间:Mb,(8±2.2)h;CK-MB,(18.1±3.2)h;CK,(19.4±4.1)h;cTnI,(18.6±2.9)h.病情恶化时各项指标持续上升,病情好转时降至正常范围.对照组的cTnI、Mb、CK和CK-MB4项指标均正常.结论 cTnI是诊断急性心肌梗死较理想的指标,同时Mb可对急性心肌梗死的早期诊断提供一种快速、可靠的生化指标,具有临床应用价值.
作者：肖洪广；黄泽红；刘汉欣；林勇平 刊期： 2005年第05期
目的建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞(MAPCs)的方法.方法取健康成人志愿者适量骨髓采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)负分选,流式细胞术鉴定分选后细胞纯度;对传代到不同阶段的细胞进行CD45、GlyA流式细胞分析,初步了解MAPCs在培养、增殖过程中的免疫学稳定性.结果通过miniMACS分选,平均每1×106/ml骨髓贴壁细胞可分选出约(5～10)×104/ml的MAPCs,分选前后细胞活力分别为(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,无明显差异;自制的培养基培养分选后的MAPCs生长良好,长传代到第16代;流式细胞仪分析获取的CD45、G1yA-细胞纯度大于98%;流式细胞仪分析传代第4、8、12代MAPCs,CD45-、G1yA-细胞纯度大于98%.结论CD45、GlyA miniMACS负分选可从骨髓中分离高纯度的MAPCs;MAPCs在本室自制的人MAPCs培养基中体外有较强的增殖能力,且能保持较长时间的稳定状态.
作者：慕宁；高毅；唐力军 刊期： 2005年第05期
目的探讨氯沙坦对犬在体心肌缺血再灌注时心肌损伤的保护作用.方法 16只健康家犬,分为2组:(1)对照组(n=8),阻断左前降支主干30 min后恢复前降支血流30 min.应用单相动作电位记录技术,同步记录犬在体心肌再灌注时单相动作电位及体表心电图;(2)氯沙坦组(n=8):氯沙坦5 mg/(kg·d)经胃管灌入,持续2周后开胸,缺血再灌注方法及观察指标同对照组.结果再灌注30 min内,对照组8只犬中有5只出现了早期后除极(EAD)和再灌注室性心律失常,再灌注心律失常发生率为62.5%;氯沙坦组3只犬出现EAD和再灌注室性心律失常(37.5%,P＜0.05),氯沙坦组EAD和心律失常发生率较对照组明显减小(P＜0.01).结论氯沙坦可抑制再灌注时EAD的发生,可能因此而减少再灌注心律失常的发生.
作者：杨云；霍志成；彭健；贾满盈；黄铮；王智明；陈玉兰 刊期： 2005年第05期
目的调查、分析和评价南方战区部分空军官兵的生存质量.方法采用自行设计的部队官兵生存质量量表--自测健康评定量表,在南方战区调查了783名空军官兵,从生理、心理、社会3方面考察了其生存质量状况.结果空军官兵的生存质量情况为中等水平.生理得分为66.33±9.38,心理得分为58.99±10.09,社会得分为53.69±12.40,总得分为:178.44±22.60.不同文化程度(P＜0.01)、不同入伍地(P＜0.01)、不同兵种(P＜0.05)、不同身份(P＜0.01)、入伍前不同职业(P＜0.01)的空军官兵的生存质量有显著差别.结论不同文化程度、不同入伍地、不同兵种、不同身份、入伍前不同职业对军人的生存质量有一定影响,但不同民族、是否为独生子女对军人的生存质量影响并不大.
作者：王斌会；俞守义 刊期： 2005年第05期
目的观察特比奈芬治疗儿童甲真菌病的疗效及安全性.方法应用特比奈芬治疗儿童指甲真菌病50例及趾甲真菌病38例,并作疗效、真菌清除率及安全性观察.结果特比奈芬治疗儿童指甲真菌病的痊愈率及总有效率分别为92.1%和97.37%;趾甲真菌病则分别为86.36%和93.94%.真菌清除率均达到96.59%.在本临床研究中未发现特比奈芬有严重的毒副反应.结论特比奈芬治疗儿童甲真菌病疗效显著、安全性高,是有效根治儿童甲真菌病的方法之一.
作者：温炬；林中方 刊期： 2005年第05期
目的探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对腹主动脉缩窄所诱导的大鼠心肌肥厚和纤维化的影响.方法对8周龄雄性SD大鼠行腹主动脉缩窄术并随机分为假手术组、模型对照组和Ang-(1-7)治疗组,对1d后仍存活者皮下植入微量泵持续静脉输注Ang-(1-7)或生理盐水,Ang-(1-7)组(n=14)输注Ang-(1-7)(25μg·kg-1·h-1),假手术组(n=15)及模型对照组(n=12)则输注等量的生理盐水,4周后检测血流动力学参数、血浆和心肌AngⅡ浓度、左心室重量指数、心肌细胞横径和心肌胶原容积分数.结果(1)模型对照组动脉收缩压、舒张压、心率、左室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压、左室内压大上升速率(+dp/dtmax)均明显高于假手术组(P均＜0.01),左室内压大下降速率(-dp/dtmax)低于假手术组(P＜0.01).与模型对照组比较,Ang-(1-7)治疗组LVDEP显著减低(P＜0.05),-dp/dtmax升高(P＜0.05),而收缩压、舒张压、心率、LVSP及+dp/dtmax在两组间无明显差异.(2)在腹主动脉缩窄术后4周,模型对照组左心室质量、左心室质量指数及心肌细胞横径明显高于假手术组(P＜0.01),Ang-(1-7)治疗组上述指标虽高于假手术组,但均明显低于模型对照组(P＜0.05).(3)Ang-(1-7)治疗组心肌中小血管周围及心肌间质中胶原沉积虽多于假手术组,但明显少于模型对照组(P＜0.05).(4)与假手术组比较,模型对照组和Ang-(1-7)治疗组心肌中AngⅡ浓度均明显增高(P＜0.01),但模型对照组和Ang-(1-7)治疗组之间无显著差异(P＞0.05);3组间血浆AngⅡ水平无明显差异(P＞0.05).结论长期静脉输注Ang(1-7)对腹主动脉缩窄引起的动脉压和心肌血管紧张素Ⅱ水平的升高无影响,但使心肌肥厚和纤维化程度显著减轻,并保护受损的心功能.
作者：王立军；何建桂；马虹；蔡乙明；廖新学；曾武涛；柳俊；王礼春 刊期： 2005年第05期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
