田丰莲;杨冬梓;张小庄;赵庆国;詹新林;李容汉;穆荔;江雪芳;李洁明
目的对导致泌尿生殖系感染的大肠埃希菌对抗菌素的耐药趋势进行调查分析.方法应用纸片扩散法(K-B法)对分离的148株大肠埃希菌进行药敏测试与分析,并用纸片扩散法对β-内酰胺酶(ESBLs)菌株作确认试验.结果对28种抗生素的耐药检测结果显示,大肠埃希菌对青霉素类和喹诺酮类抗生素耐药率达73.6%~86.4%;对一代、二代头孢菌素(头孢拉啶、头孢唑啉、头孢克洛)耐药率在44%以上;对三代头孢菌中的头孢他啶耐药率低,为10.1%;对哌拉西林、头孢哌酮和氨苄西林的耐药率为84.5%、44.6%、83.0%;对含酶抑制剂的复合β-内酰胺类抗生素的耐药率(哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和氨苄西林/舒巴坦为4.1%、10.8%和52.0%)要明显低于单剂型的同种抗生素,抗菌敏感率均有不同程度的提高(P<0.001).148株大肠埃希菌中,产ESBLs菌株有38株(25.7%),不产ESBLs菌株有110株(74.3%).产ESBLs菌株对多种抗生素的耐药率显著高于不产ESBLs的菌株(P<0.05).结论对于治疗因大肠埃希菌引起的泌尿生殖系感染,应该根据实验室的药敏和ESBLs的检测结果来指导合理用药,以提高治疗效果.呋南妥因和含酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素比较有效.
作者:崔伟历;徐德兴;李文玲;王露霞 刊期: 2004年第08期
目的研究洛拉曲克作用后不同细胞胸苷酸合成酶(TS)蛋白质表达水平的动态变化有无差异.方法时间曲线中,LoVo、Lo2细胞分别用浓度为10、75μmo1/L(接近各自的IC90值)的洛拉曲克处理0~60h.剂量曲线中,洛拉曲克作用时间36h,LoVo细胞剂量范围0~40μmol/L.Lo2细胞剂量范围0~125μmol/L.分别以流式细胞术法、Westemblot法检测两种细胞TS蛋白表达水平.结果两种细胞在经过洛拉曲克处理后,TS表达的时间和剂量曲线具有显著不同的动态规律.在时间曲线中,LoVo细胞TS蛋白的表达水平与对照相比呈持续升高的趋势,Lo2细胞TS蛋白的表达水平与对照相比先降低,24 h后TS蛋白表达水平逐渐回升,但至60 h尚未恢复至对照水平.在剂量曲线中,LoVo细胞TS蛋白的表达水平的变化呈峰形,以IC90值附近为高,Lo2细胞TS蛋白的表达水平,在低于IC90值的剂量点TS蛋白水平降低程度相似,高于IC90值的剂量处理后TS水平随剂量的升高而下降.结论洛拉曲克可以产生TS诱导现象,不同细胞在洛拉曲克作用后TS动态表达的差异是细胞耐药性不同的原因之一.
作者:李亦蕾;吴曙光 刊期: 2004年第08期
目的评价RT-PCR法检测MN/CAⅨ基因在肾癌组织表达的可靠性.方法以5例肾癌和5例正常肾组织为研究对象,提取总RNA,两步法进行RT-PCR反应,用MN/CAⅨ的特异性引物扩增,2%琼脂糖凝胶电泳后观察并测序.结果经过测序证实5例肾癌组织的RT-PCR产物中有4例可见特异的MN/CAⅨ条带,而正常肾组织的RT-PCR产物均无相应的MN/CAⅨ条带.结论RT-PCR法检测MN/CAⅨ在肾癌组织中的表达是准确、可靠的.
作者:姜耀东;郑少斌;王战会 刊期: 2004年第08期
目的构建人全长PLCγ1基因真核表达载体,以便进一步研究PLCγ1的作用及其机制.方法自行设计一对带有HindⅢ和NotⅠ酶切位点的引物,采用RT-PCR技术从MG63细胞中扩增人全长PLCγ1 cDNA(3 878 bp),纯化后,经HindⅢ-NotⅠ酶切,插入真核表达载体pLNCX2中,构建重组质粒pLNCX2/PLCγ1.通过PCR,限制性酶切分析及DNA直接测序对所构建的重组质粒进行鉴定.同时经瞬时转染后,利用RT-PCR及Western blotting转染后LoVo细胞中PLCγ1的表达.结果RT-PCR产物经琼脂糖电泳分析所得片段大小与预期相符(3 878bp).重组质粒经HindⅢ-Not Ⅰ酶切后,得到3 878bp(PLCγ1基因)及6 100bp(载体pLNCX2)两个片段,同时重组质粒经HindⅢ-BglⅡ酶切后,得到约4300bp及约8 500bp两个片段,与预期一致.DNA测序也证实了重组质粒的正确.经RT-PCR和Western blot分析证实转染pLNCX2/PLCγ1的LoVo细胞中PLCγ1的表达均高于转染空质粒pLNCX2的LoVo细胞及未转染的LoVo细胞.结论成功构建了人全长PLCγ1基因真核表达载体pLNCX2/PLCγ1,为进一步研究PLCγ1的作用奠定了基础.
作者:李秀梅;邓凡;曾位森;华亮;陆地;李明;王宏;刘忠英;罗深秋 刊期: 2004年第08期
目的了解广东地区围绝经期妇女的健康状况和健康需求,从而进一步探索围绝经期、老年期保健模式和方法,为政府部门提供决策依据.方法采取分层整群抽样的方法,将广东省按地理地貌分为5层,共抽取了5个地级市(代表城市)和4个县级市(代表农村).对40~65岁的4 500个围绝经期妇女进行调查.结果广东地区妇女自然绝经年龄48.6岁,其中城市48.9岁、农村48.3岁.现患病率39%,其中城市38.5%、农村39.5%,两者比较无显著性差异.前6位现患疾病的顺位是骨关节疾病(12.5%)、高血压(9.2%)、子宫肌瘤(6.8%)、胃或十二指肠溃疡(5.2%)、心脏病(2.7%)和糖尿病(2.2%).骨关节疾病中膝关节疾病(34.3%)、腰椎疾病(32.8%)是高发病,骨折患病率2.5%.围绝期综合征的患病率为68.1%,为痛苦的症状是失眠、肌肉骨关节疼痛、烦躁、头晕,以心理症状(86.8%)和躯体症状(86.0%)为主;出现围绝经期综合征未就医者占71.2%,到妇产科就医者仅20.5%,以服用中药为主(53.9%),应用性激素疗法者1.4%(城市1.8%、农村1.0%).无健康体检者37.8%,有过健康体检者62.2%,其中城市80.4%、农村44.4%,城市明显高于农村.结论围绝经期综合征及相关疾病严重地影响围绝经期妇女的身心健康,这一人群的保健、医疗存在广泛需求,应该全方位地进行防治.
作者:田丰莲;杨冬梓;张小庄;赵庆国;詹新林;李容汉;穆荔;江雪芳;李洁明 刊期: 2004年第08期
目的研究药物1,25-二羟基维生素D3(二羟维D3)在高危角膜移植模型中对免疫排斥反应及新生血管生长情况的影响,揭示1,25-二羟维D3作为免疫抑制剂在角膜移植中的治疗作用及机制.方法建立大鼠高危角膜移植模型,按不同浓度的1,25-二羟维D3(1×10-5和1×10-7mol/L)及环孢霉素A(CsA)分组,连续用药2周,观察移植物排斥情况并于术后4、7、14 d取材行原位杂交等实验,分析各组细胞因子:白介素1α(IL-1α)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA水平的变化情况.结果在1,25-二羟维D3作用下,高危角膜移植物的存活时间明显延长;新生血管生长受抑制;合用CsA后效果更明显.原位杂交实验证实1,25-二羟维D3能显著抑制植片IL-1α、TNF-αmRNA表达(P<0.01);对VEGF表达无直接影响.结论1,25-二羟维D3能有效地抑制新生血管生长及角膜移植急排期的免疫哌排斥反应,机制可能包括对前炎症因子(IL-1α、TNF-α)生成的抑制作用,而对VEGF无明显直接作用.
作者:党森涛;陆晓和;周瑾;白浪 刊期: 2004年第08期
目的构建PcDNA4/His C-MBL表达载体,在哺乳细胞中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL).方法应用PCR从含有中国人野生型MBL cDNA的质粒pGEM-MBL中扩增目的基因片段,将其克隆至PcDNA4/His C真核表达载体.经酶切及测序鉴定后,以电穿孔法转染CHO细胞,以RT-PCR分析其mRNA表达,通过Ni-NTA琼脂糖柱层析纯化目的蛋白并以SDS-PAGE和Western-blotting鉴定,以其为免疫原免疫小鼠后取鼠血清进行ELISA检测分析目的蛋白的免疫活性.结果从pGEM-MBL中扩增得到约750 bp的cDNA片段,构建成重组载体经酶切出现约5 100和750 bp片段,测序鉴定与预期的完全一致.RT-PCR证实转染细胞有MBLmRNA表达,纯化蛋白经SDS-PAGE电泳可见约29000、58 000和87 000条带,其中29 000蛋白带可与6-His抗体反应.纯化蛋白免疫小鼠所获抗血清ELISA效价是1:819 200,与天然人MBL和重组MBL三聚体糖识别域反应的ELISA效价均为1:25 600.结论获得了表达中国人MBL的CHO细胞株和重组人MBL,为MBL分子的进一步研究提供了条件.
作者:白志军;张丽芸;林佐贤;卢晓;陈政良 刊期: 2004年第08期
目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化成神经元样细胞的作用及其对诱导后的神经元样细胞保护作用,为治疗神经系统疾病提供更优良的细胞.方法体外培养MSCs至第5代后,分别用BDNF、β-巯基乙醇(β-ME)诱导MSCs,诱导后的第1、3和6小时计算两组神经元样细胞数,对各时间点两组神经元样细胞阳性率进行了比较;诱导后行神经细胞标记抗体的免疫细胞化学、RT-PCR及蛋白质印迹鉴定.结果两组诱导剂诱导后的细胞均呈神经元样细胞的形态;BDNF组诱导分化后细胞的存活时间远较β-ME组长;BDNF组在诱导后6 h近于诱导高峰,而β-ME在诱导2 h即达高峰,但随后神经元样细胞渐死亡.免疫细胞化学结果显示在两组诱导后细胞的巢蛋白(Nestin)、神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白-2 MAP-2)、神经丝蛋白(NF)表达均呈阳性,而胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达呈阴性;RT-PCR显示NSE、NFL,MAP-2的mRNA表达阳性,GFAP有较弱的表达;蛋白质印迹可见两组诱导剂诱导的细胞均表达神经元的特异性标记抗体NSE.结论BDNF能单独诱导MSCs分化形成神经元样细胞,而且分化后细胞的存活时间长,有望用于治疗脑缺血、神经变性等疾病.
作者:黄文;张成;陈松林;张为西;姚晓黎;曾缨;黄慧;冯善伟;柳太云 刊期: 2004年第08期
目的检测广东汉族人群HLA-Cw及HLA-A、B、DRB1基因频率,分析该人群HLA-Cw等位基因多态性及其单体型特点.方法骨髓移植供者185例,抗凝血提取DNA,半量全自动PCR-RSSO分型检测HLA-A、B、Cw、DRB1基因型.结果在分辨水平检出Cw等位基因11个,其中分布频率较高的依次为:Cw*03(0.2580)、Cw*07(0.1887)、Cw*01(0.1732)、Cw*08(0.1070).统计分析呈现显著连锁不平衡的HLA-Cw-A单体型7个,HLA-Cw-B单体型20个,HLA-Cw-DRB1单体型10个.结论广东汉族群体HLA-Cw基因具有较为丰富的多态性,其与HLA-A、B、DRB1间连锁不平衡单体型具有地区性遗传特征.
作者:马红京;肖露露;尹晓林;郭坤元;叶欣 刊期: 2004年第08期
目的探讨恶性腹膜间皮瘤的诊治方法.方法回顾分析16例恶性腹膜间皮瘤临床表现、实验检查及治疗方法.结果16例中术前确诊3例,剖腹探查10例,急诊手术1例,腹腔镜探查2例.随访12例,半年内死亡2例,2年内死亡7例,1例生存超过2年.另2例为近1年内患者,继续治疗中.结论恶性腹膜间皮瘤无特异性症状,诊断困难,误诊率高.诊断主要依据脱落细胞检查、腹腔穿刺活检、腹腔镜及剖腹探查.预后差,综合治疗有望延长患者生存期.
作者:王浩;厉周;黄宗海 刊期: 2004年第08期
目的建立中医阴阳数字模型.方法采用计算机二进制数字语言解构和重建中医阴阳理论.结果建立了中医阴阳二进制数字模型并成功模拟了中医阴阳理论的主要内容.结论可以通过二进制数字语言对中医理论进行合理解构和重建,实现中医药理论的数字化.
作者:秦建增;陈宝田 刊期: 2004年第08期
目的克隆日本血吸虫8k CaBP(Sj8CaBP)基因启动子区并对该序列进行分析.方法提取日本血吸虫基因组DNA,并按ClontechUniversal Genome WalkerTM Kit的操作手册说明,建立日本血吸虫基因组DNA文库.根据手册要求及Sj8CaBP基因的cDNA序列,设计合成该基因染色体步移的特异性引物与试剂盒提供的端子引物进行巢式PCR.将得到的PCR产物克隆测序,测序结果用启动子区的分析软件及与其cDNA序列比对进行分析.结果得到的Sj8CaBP基因长度为1 079 bp(GenBank登录号AY262018),该基因包含Sj8CaBP基因完整的开放阅读框(ORF),包括1个内含子及2个外显子,在其5'端UTR区具有明显的启动子区,包括TATA盒及CAAT盒,没有发现GC盒及一些血吸虫基因启动子区所常见的AP-1(Active protein 1)结合位点.结论从日本血吸虫基因组文库中获得一个长1 079bp的Sj8CaBP基因片段(GenBank登录号为AY262018),经分析证明,该片段包含一个启动子区,具有TATA盒及CAAT盒的结构及1个内含子2个外显子.
作者:彭鸿娟;陈晓光;周晓红;沈树满 刊期: 2004年第08期
目的研究鼻咽癌常规放疗和调强放疗(IMRT)受照剂量的差异.方法用放疗计划系统分别进行鼻咽癌常规放疗和调强放疗计划设计,计算肿瘤量70 Gy时正常组织受照剂量-体积直方图和所需照射的总跳数.用X射线能量为6MV的加速器实施放疗计划.根据方野散射线和漏射线剂量率的测量值和总跳数,估算射野外不同距离正常组织所受辐射剂量.结果调强放疗射野内正常组织受照剂量低于28 Gy的体积是常规放疗的1.43~1.81倍,而高于35 Gy时,受照体积仅为常规放疗的0.73~0.30倍;射野外正常组织所受散射线和漏射线照射剂量的估计值约为常规放疗的2倍.结论鼻咽癌常规放疗与调强放疗相比,正常组织受照剂量和受照体积具有成倍差异,调强放疗漏射线和散射线是常规骀放疗的2倍.
作者:张书旭;徐海荣;林生趣;李文华 刊期: 2004年第08期
目的观测并评价止血气雾剂对肢体动脉破裂伤口的止血效果.方法剪断30头猪的共30条股动脉,按照向伤口喷洒止血气雾剂前是否辅助其他止血方法分为:指压止血+止血气雾剂、止血带止血+止血气雾剂和单纯喷止血气雾剂止血这3种方法制作动脉破裂止血模型,每种模型均制作10个,术后12 h内观察止血效果.结果止血带组的止血成功率为90%,指压法组的止血成功率30%,单纯喷止血气雾剂的止血成功率为10%.结论对于肢体动脉破裂伤口,采用先扎止血带暂时止血,之后喷洒止血气雾剂,10min后放松止血带的止血方法成功率高,是首选的止血方法.
作者:孙鸿涛;裴国献;王运斗;张洪涛;张敬良 刊期: 2004年第08期
目的分析甲状腺癌骨转移的临床及影像学表现,探讨其临床及影像特点和诊断价值.方法经病理证实为甲状腺癌骨转移10例,对其X线、CT表现进行回顾性分析.10例均行X线平片检查,其中3例做CT扫描.结果甲状腺癌具隐匿病史,在骨转移病例,先发现骨转移,后查出原发灶者3例,7例在原发灶或甲状腺结节的基础上出现骨转移.甲状腺癌骨转移以溶骨性转移为主,多发于上半身的骨骼,表现为膨胀性囊状破坏区,呈大片状、地图样骨缺损,范围大、广泛为其特点.结论甲状腺癌可发生骨转移,以溶骨型为主,可有成骨性转移.
作者:刘光俊 刊期: 2004年第08期
目的观察L-精氨酸(L-Arg)对兔右冠状动脉缺血再灌注(IR)窦房结(SAN)传导时间(SACT)和恢复时间(SNRT)及房室结(AVN)传导有效不应期(AVERP)的影响.方法在体成年兔右冠状动脉缺血再灌注模型分4组:正常对照组,IR(缺血90 min,再灌注90 min)+生理盐水组,IR+L-Arg组和IR+左型精氨酸甲酯(L-NAME)组.在不同时相分别测定各组心房快速起搏或程序电刺激后的SACT、SNRT和AVERP.结果IR+L-Arg组缺血期及再灌注早期3项指标均有不同程度的下降,而再灌注后期升高;IR+L-NAME组结果却基本相反(P<0.01).3组组内比,IR+L-Arg组和L-NAME组于缺血期与再灌早期3项指标均升高;再灌注后期,IR+L-Arg组无治疗意义甚至加重SAN和AVN损伤,而IR+L-NAME组3项指标下降.结论随着缺血时间延长SAN功能损伤加重;早期再灌注损伤敏感;组织内适当补充L-Arg,于缺血期和再灌早期对SAN电生理功能和AVERP恢复是有益的,于再灌注后期可能加重损伤.
作者:王庆志;戴景兴;韩培立;原林 刊期: 2004年第08期
目的探讨住院肺结核病人延误诊断的原因.方法对我所1999年1月~2003年12月住院的458例入院前延误诊断肺结核患者进行回顾性分析.结果与结论延误诊断的原因为:(1)患者对某些呼吸系统症状未引起重视,延误就诊时间;(2)首诊医师仅依靠胸部X线检查,忽视了痰菌及其它检查;(3)非专科医师对因症就诊患者忽略了结核病的存在.
作者:董秋兰;李艳明;吴东玲;郭红革;魏长春 刊期: 2004年第08期
目的探讨高压交变电磁场对脑卒中病人康复治疗的临床治疗的效果及机制.方法选择脑卒中病人115例,分为治疗组55例和对照组60例,对比分析治疗前后患者血清脂蛋白及其亚组分和血液流变学指标的变化,以Barthel指数和功能独立性评定法(FIM)进行康复评定.结果治疗组显效29例;好转24例,无效2例,与对照组比较P<0.05;治疗后血清甘油三酸酯(TG)、总胆固醇(Tc)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)浓度升高,Tc/HDL-c、LDL-c/HDL-c比率降低,降低了全血和血浆粘度,与对照组比较P<0.01;治疗组患者的Barthel指数增加了(38.4±5.3),与对照组比较P<0.05;治疗组患者的FIM评分与对照组比较增加了(34.7±5.3),与对照组比较P<0.0l;治疗组患者一年内脑卒中再发率下降明显,与对照组比较P<0.05.结论高压交变电磁场能改善脂蛋白代谢,改变血液流变学性质,提高脑卒中患者ADL能力及功能独立性,对脑血管疾病有显著的防治作用.
作者:邓爱文;袁雪光;魏东;张建宏;冉春风;王敏 刊期: 2004年第08期
目的研究犬单侧膈神经离断后不同时期呼吸肌腺嘌呤核苷酸含量变化.方法选取8只成年健康杂种犬,离断其左侧膈神经,分别取其同侧肋间肌和膈肌组织,用高效液相色谱法测量膈神经离断前及离断后1、2个月呼吸肌中腺嘌呤核苷酸含量.结果犬肋间肌三磷酸腺苷(ATP)的含量三个时间组相比均无差别;而二磷酸腺苷(ADP)的含量上升,膈神经离断后2月组与离断后1月组相比,有统计学差别(P<0.05);犬肋间肌总腺苷酸(TAN)含量以膈神经离断后1月组为低,但并无统计学差别;肋间肌腺苷酸能荷(AEC)以膈神经离断后1个月为低,与离断前组和离断后2月组相比,均有统计学差别(P<0.05).犬的膈肌ATP、ADP及TAN、AEC含量在膈神经离断后2个月分别为:9.05±12.70,2.99±2.57,14.72±13.98,0.57±0.29;与膈神经离断前及离断后1个月相比,有统计学意义(P<0.05).结论犬膈神经离断后膈肌能量代谢明显下降,肋间肌有一定程度代偿.
作者:田建昌;陈钢;肖飞;马俊杰;蔡瑞君 刊期: 2004年第08期
目的探讨原位肝移植术后并发症的诊治经验.方法回顾性分析我院18例次原位肝移植(其中2例再次肝移植)病人术后各种并发症的诊治经过.结果对16例患者(5例终末期肝硬化、7例原发性肝癌、l例肝癌术后肝功能衰竭、l例肝豆状核变性、l例慢性肾功能衰竭合并肝炎后肝硬化、1例急性暴发性肝功能衰竭)进行原位肝移植.手术成功12例,术后长存活已超过4年.术后并发症包括:腹腔内出血3例、脑血管病变2例、肺部感染6例、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)2例、肝上下腔静脉狭窄2例、肝动脉血栓形成l例、胆道结石或胆泥3例、胆漏1例、急性排斥反应2例、慢性排斥反应2例、急性肾功能衰竭2例.围手术期死亡6例,直接死亡原因:脑出血1例、ARDS 1例、急性肾功能衰竭1例、肝动脉血栓1例、急性排斥反应l例、肝功能衰竭1例.结论肝移植围手术期采取合理的防治措施能有效减少肝移植术后并发症的发生,对肝移植术后并发症的及时诊断和正确处理是提高肝移植成功率的关键.
作者:苏树英;陈焕伟;甄作均;许卓明;计勇 刊期: 2004年第08期