学术投稿

反转录巢式PCR方法检测SARS冠状病毒

王艳;马文丽;宋艳斌;肖维威;张宝;黄海;王洪敏;马晓冬;郑文岭

关键词:SARS冠状病毒, 巢式反转录PCR
摘要:目的探索SARS冠状病毒早期诊断的有效手段.方法对临床病例样品采用反转录巢式PCR方法鉴定SARS冠状病毒.提取样品RNA,用巢式PCR外侧下游引物进行反转录,以反转录产物为模板,进行巢式第一次、第二次PCR.PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行测序鉴定.结果被检样品扩增出特异片段,经测序验证确实来自SARS相关冠状病毒.Blast比较结果与SARS冠状病毒多伦多株相应片段只有一个碱基的差异.结论反转录巢式PCR方法验证在非典型肺炎患者标本中存在SARS相关冠状病毒的序列,证实该法不失为一种检测SARS冠状病毒的快速、简便、易行的方法.
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  • 痔然消片治疗内痔出血569例临床观察

    目的观察中药复方煎剂改成片剂后治疗内痔出血的临床疗效.方法对569例门诊内痔出血患者口服痔然消片治疗6 d,并以痔宁片作为对照,计分评价两组治疗前后出血量变化情况.结果两组治疗后计分均明显降低,两组间比较无显著性差异(P>0.05).结论痔然消剂改成片剂后对内痔出血仍有显著疗效.

    作者:钱忠秀;李胜龙;尹廷宝 刊期: 2003年第05期

  • 透照法曲张静脉动力创削术治疗下肢静脉曲张1例报告

    我们应用新引进的透照法曲张静脉动力创削术(TIPP)治疗了1例双下肢单纯性大隐静脉曲张患者,现报道如下.

    作者:朱晓霞;林智琪 刊期: 2003年第05期

  • 免疫化学染色图像分析法检测细胞核因子κB

    目的探讨一种简便、安全、可定量的细胞核因子κB(NF-κB)活性的检测方法.方法以晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白(HSA-AGE)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC),NF-κB/P65免疫化学染色后,分析细胞NF-κB/p65核/浆的阳性染色比,以经典的凝胶迁徙率泳动分析法作对照.结果HSA-AGE可激活HUVECNF-κB,呈时间、剂量依赖关系,两种方法检测的趋势一致.结论免疫化学染色的图像分析法可用于定量检测NF-κB的活性.

    作者:张桂林;刘尚喜;邓燕;申洪 刊期: 2003年第05期

  • 大剂量葡萄糖诱导人视网膜内皮细胞凋亡的实验研究

    目的检验大剂量葡萄糖水平对培养的原代人视网膜毛细血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cells,HRCEC)的直接影响.方法HRCEC细胞从捐赠人眼中分离得到.细胞在含有5 mmol/L或25 mmol/L葡萄糖的培养基中培养6 d.应用锥虫蓝染色测定细胞活力、流式细胞计数分析细胞周期、TUNEL分析细胞凋亡.结果HRCEC细胞在25mmol/L葡萄糖中培养6 d,细胞活力显著下降.通过流式细胞计数和TUNEL测定,凋亡细胞的数目在大剂量葡萄糖培养基中显著升高.结论大剂量葡萄糖可诱导人视网膜毛细血管内皮细胞凋亡,这有可能是促进糖尿病性视网膜病发展的原因.

    作者:马建芳;杨中汉;宋志宏;郭颖;蔡卫斌;刘倩平;郭琳琅;高国全 刊期: 2003年第05期

  • 留置导尿中尿路感染的原因及预防措施探讨(附152例报告)

    目的分析、查找留置导尿中尿路感染发生的原因,探讨其有效的预防措施.方法对2000年3月~2002年2月在我科住院并行留置导尿的152例患者的临床资料进行总结分析.结果经采取积极的综合预防措施,152例患者中有57例发生尿路感染,发生率37.5%,低于我科既往的发生率46.6%P<0.05).结论严格掌握留置导尿适应症,严格无菌操作,缩短留置导尿的时间,预防留置导尿感染是可能的.

    作者:周宏珍;尹凤华 刊期: 2003年第05期

  • 经静脉声学造影法与彩色多谱勒法对移植肾急性排异反应诊断的对比研究

    目的比较应用间歇二次谐波成像结合声学定量方法与彩色多谱勒血流显像测量阻力指数方法对移植肾急性排异时血流灌注诊断的价值.方法建立8例犬异体移植肾急性排异模型,进行经静脉声学造影及声学定量和彩色多谱勒血流显像测定阻力指数,同时进行血清肌酐(Cr)监测.结果声学定量分析所得时间-强度曲线(TIC)参数的灌注曲线下面积(AUC)、峰值强度(PI)及彩色多谱勒血流显像所得阻力指数(RI)与血清Cr值明显相关,相关系数分别为0.978、0.972和0.708;PI-Cr、AUC-Cr相关程度较RI-Cr相关程度高.结论间歇二次谐波成像技术是检测异体移植肾血流灌注的有效手段,结合声学定量分析技术所获得的TIC参数较RI与移植肾急性排异反应发生的相关性更为密切.

    作者:李卓;龚渭冰;刘红梅;崔忠林;黄红波;孙煦勇 刊期: 2003年第05期

  • 经阴道彩色多普勒超声在子宫内膜癌诊断中的价值

    目的探讨经阴道彩色多普勒超声检查(TV-CDS)对子宫内膜癌的诊断价值.方法总结42例经病理证实的子宫内膜癌患者的术前Tv-CDS结果,并将肌层浸润情况与术后组织病理学结果对比,分析子宫内膜癌在不同临床分期中的声像图特征.结果Tv-CDS诊断子宫内膜癌的符合率为95.24%,判断肌层浸润的检出率为9333%,准确判断出80.95%患者的肌层浸润深度.结论TV-CDS能为子宫内膜癌的诊断及临床分期提供有价值的依据.

    作者:谭笑 刊期: 2003年第05期

  • 甲氨喋呤与美洛昔康联合治疗强直性脊柱炎的临床观察

    目的观察甲氨喋呤(MTX)与美洛昔康(MLX)联合治疗强直性脊柱炎(AS)的疗效和安全性,探索使用MTX的合理剂量.方法将32例AS患者分成A、B两组,A组14例,B组18例.A组给予MTX(12.3±3.6)mg,口服,次/周,B组给予MTX(21.3±3.2)mg,口服,次/周;两组患者均给予MLX 7.5 mg/d.共治疗3月.结果两组各项临床指标及实验室指标较治疗前均有改善,A组总有效率为78.6%,B组总有效率为88.9%;不良反应发生率A组50.0%,B组83.3%,总有效率和不良反应发生率均元显著性差异(P<0.05).结论MTX与MLX联合应用治疗AS,疗效良好;其疗效与MTX剂量不存在相关性,但因不良反应发生率较高,MTX以小剂量为宜;在短时间(3月)内,MLX不增加MTX的毒性作用.

    作者:谢锐龙;李晓昊;康贤通 刊期: 2003年第05期

  • 超微孔膨体聚四氟乙烯在家兔体内的钙化及生物力学特性研究

    目的观察超微孔膨体聚四氟乙烯(UePTFE)在家兔体内钙化及生物力学特性改变,并与临床常用的牛心包生物瓣材料(BP)进行比较,以阐明其作为新型人工心脏瓣膜材料的可行性.方法实验设计采用析因分析的方法,将超微孔膨体聚四氟乙烯材料及牛心包生物瓣材料裁成适合大小埋植于新西兰幼兔皮下,分别于0、1、3、6月时取出材料,测定钙含量及生物力学指标,进行对比.结果超微孔膨体聚四氟乙烯材料较牛心包生物瓣材料钙化慢且程度轻,各项力学指标优于牛心包生物瓣材料.结论超微孔膨体聚四氟乙烯材料可以作为制作人工心脏瓣膜的材料.

    作者:李海波;王武军;蔡开灿;王振康;梁永;邵亚辉 刊期: 2003年第05期

  • 卵泡液中TGF β1和性激素水平的测定及临床意义

    目的探讨控制性超排卵(COH)周期取卵(OPU)日卵泡液中转化生长因子β1(TGF β1)及性激素的含量与卵母细胞成熟、受精和妊娠结局的关系.方法酶联免疫反应法测定90例COH周期OPU日卵泡液中TGF β1和性激素的含量,卵泡液按相应卵母细胞的成熟度、受精情况和妊娠结局分组.结果成熟组卵泡液中TGF β1、促黄体生成素(LH)和孕酮水平高于未成熟组[(2 824.4±1 414.4)pg/mlvs(2 015.0±1 191.7)pg/ml,(0.71±0.35)mIU/mlvs(0.54±0.21)mIU/ml,(3 837.1±942.8)ng/mlvs(3 188.1±617.4)ng/ml,均为P<0.05];受精组卵泡液中TGF β1、LH和孕酮浓度均明显高于非受精组;妊娠组卵泡液中TGF β1和LH浓度明显高于非妊娠组[(3 547.4±1 536.3)pg/mlvs(2 169.2±1 180.4)pg/ml,(0.74±0.25)mIU/mlvs(0.52±0.29)mIU/ml,均为P<0.05].雌二醇浓度各组间无显著差异.结论COH周期OPU日卵泡液中适量的LH和孕酮促进卵母细胞的成熟;TGF β1和LH浓度与相应卵泡的卵母细胞成熟及其后的受精和妊娠结局有关.

    作者:葛明晓;李红;邢福祺;孔令红;陈士岭 刊期: 2003年第05期

  • 新鲜羊膜移植治疗眼表疾病的临床观察

    目的观察新鲜羊膜移植治疗眼表疾病的临床效果.方法采用新鲜羊膜移植治疗翼状胬肉、复发性翼状胬肉、蚕蚀性角膜溃疡、病毒性角膜溃疡、睑球粘连38例(52眼),术后随访3~12月.结果38例术后均未见新鲜羊膜植片急性排斥反应,术后翼状胬肉及角膜溃疡患者在随访期间未见复发,睑球粘连者恢复了眼球的运动功能.结论新鲜羊膜移植可有效地用于角结膜的重建,充分清除眼表的病变组织和羊膜移植片的缝合固定,对羊膜移植重建眼表功能极其重要.

    作者:罗海燕;彭庶民;王永建 刊期: 2003年第05期

  • 软脂酸对体外原代培养大鼠胰岛细胞凋亡作用的实验研究

    目的观察软脂酸诱导体外原代培养胰岛细胞的凋亡,初步探讨软脂酸在2型糖尿病发病中的机制.方法应用分离的体外单层培养SD大鼠胰岛细胞,与不同浓度软脂酸(分别为0、0.125、0.250、0.500mmol/L)共同孵育48h,用放免法测定培养液中胰岛素含量,PI/Hoechst33342双染法荧光显微镜观察胰岛细胞凋亡的形态变化.结果0.250、0.5mmol/L软脂酸可抑制高糖刺激下的胰岛素分泌,促进胰岛细胞的凋亡.结论软脂酸可诱导胰岛细胞凋亡,凋亡程度与游离软脂酸浓度有关.

    作者:姜一真;薛耀明;邓燕;朱姿英 刊期: 2003年第05期

  • 开放性颅脑损伤合并海水浸泡脑组织病理变化的实验研究

    目的观察重型开放性颅脑损伤后海水浸泡对脑组织病理改变的影响.方法利用改进的兔重型开放性颅脑损伤模型进行30 min海水浸泡,对照组不进行海水浸泡.分别在干预结束后0、3、8 h在挫裂伤区取材,固定于10%福尔马林,作HE染色,光镜下观察创伤组织的病理改变.结果浸泡组和对照组在伤后先后出现了严重的创伤性脑水肿,但水肿高峰期出现时间不一致,对照组早在干预结束后3 h即出现创伤性水肿改变,干预结束后8 h水肿依旧;而海水浸泡组在干预结束后8 h才出现明显的水肿,但水肿呈现进一步加重趋势.结论海水浸泡延迟了创伤性脑水肿高峰的出现,但发生的创伤性脑水肿重于单纯创伤.

    作者:杨立斌;余新光;荆俊杰;林欣 刊期: 2003年第05期

  • 肝硬化腹水患者治疗前后血浆神经肽Y的变化及意义

    目的研究肝硬化(LC)失代偿期伴腹水患者,以及患者经治疗腹水消退后血浆神经肽Y(NPY)水平的变化,了解NPY与肝功能及腹水的关系.方法放射免疫法检测LC失代偿期伴腹水患者20例的血浆NPY水平,以及腹水消退后血浆NPY水平.结果LC腹水患者血浆NPY水平明显低于正常人(P<0.01);腹水消退后血浆NPY水平较前明显升高(P<0.01),但仍明显低于正常人(P<0.01).结论LC患者血浆NPY水平的下降与肝功能损害的程度有关,血中NPY的减少可能参与了LC血流动力学的改变及腹水的形成.

    作者:李根武;伍灵达;朱艺 刊期: 2003年第05期

  • 结节病15例临床分析

    目的总结结节病的临床特征,提高临床医生对本病的认识和诊治水平.方法对15例结节病患者的临床资料进行回顾性分析.结果15例结节病患者,以呼吸系统症状为首发表现者7例,以肺外表现为首发症状者6例,无症状者2例.X线及胸CT提示双肺门及纵隔对称性淋巴结肿大者13例,12例患者血管紧张素转化酶升高,血沉加快者10例,结核纯蛋白衍化物试验仅1例阳性.结论肺结节病多见于中青年成人,临床症状不典型,在诊断上应综合其临床表现、胸部X片、CT及实验室检查结果.

    作者:黄文杰;李伟峰;徐虹;方怡;李志斌 刊期: 2003年第05期

  • p53蛋白的原核表达及其鸡卵黄抗体的制备

    目的制备抗p53蛋白卵黄抗体.方法原核表达p53融合蛋白,纯化后免疫产蛋母鸡.结果融合蛋白能有效刺激母鸡产生抗体,末次免疫后其卵黄抗体滴度达到1:106,并且能维持较长时间.结论本文介绍的方法是一种简便、经济、特异、高效、均一、来源充足的抗体产生方法.

    作者:吴敏;陈清;王雅贤 刊期: 2003年第05期

  • 谷胱甘肽S-转移酶M1基因缺失与子宫内膜异位症易感性的关系

    目的探讨谷胱甘肽S-转移酶M1(GSTM1)基因遗传缺失与子宫内膜异位症(内异症)易感性的关系.方法采用PCR技术对76例经腹腔镜或手术证实为内异症的患者(内异症组)和80例非内异症的妇科手术患者(对照组)的GSTM1基因型进行检测.两组均为广东籍汉族妇女.结果GSTM1空白基因型频率在内异症组和对照组中分别为65.8%和46.3%,差异具有显著性(x2=6.03,P=0.014).GSTM1空白基因型的个体患内异症的风险是GSTM1非空白基因型个体的2.24倍(OR=2.24,95%CI=1.17~4.27).结论GSTM1基因缺失可能是广东汉族妇女内异症发病的危险性因素之一.

    作者:彭冬先;何援利;丘立文;杨芳;林敬明 刊期: 2003年第05期

  • 2353例机动车交通伤害住院患者的流行病学分析

    目的了解机动车交通伤害住院患者的基本状况及其分布特征,以加强相应的防范措施.方法抽取湖南邵阳某医院1997~2001年间所有交通伤害住院患者的病案资料,按国际疾病分类标准(ICD-9E)进行诊断分类,对其基本特征进行描述性统计分析.结果5年间该院收治交通伤害住院患者2 353例,占同期该院总住院患者的3.16%,占同期伤害住院病例数的33.27%,男女性别比为2.37:1,以15~44岁年龄组所占比例大(55.97%),职业分布以农民多(34.0%).交通伤害易损伤的部位是头部(33.57%),入院时病情以中度为主(69.9%),治愈率为64.5%.不同年龄的转归差异有显著性,随着年龄的增长,治愈率下降.结论机动车交通伤害对城乡居民的健康危害大,是一个不容忽视的公共卫生问题,严重影响受伤者的生活质量.应通过制订相应的法规和制度、开展健康教育来控制和预防伤害的发生.

    作者:廖红梅;廖建坤 刊期: 2003年第05期

  • 应用改进的AdEasy系统制备重组腺病毒

    目的改进AdEasy系统,使之更简便、高效、快捷.方法pAdtrack经酶切线性化后,转化经氯化钙处理的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒.后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒.荧光显微镜下细胞中重组腺病毒观察绿色荧光蛋白的表达.结果应用氯化钙法由pAdtrack转化AdEasier-1细菌,可获得极高比例的(20/20)阳性重组腺病毒克隆.结论应用改进后的AdEasy系统构建腺病毒相比于传统AdEasy系统,方法更简便、成功率更高、实验周期更短、对实验室的条件要求低.

    作者:汤福祥;郑权;黄宗海;张庆国;车小燕 刊期: 2003年第05期

  • 下咽癌中基质金属蛋白酶-2的表达及其临床意义

    目的检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在下咽癌及癌旁正常粘膜组织中的表达,探讨MMP-2与下咽癌组织生物学行为、转移及预后之间的关系.方法运用免疫组化二步法检测32例下咽癌组织及癌旁组织中MMP-2抗体的表达,按不同的标准分组后进行统计学处理.结果32例下咽癌组织中MMP-2蛋白表达阳性率为53.1%;癌旁正常粘膜组织与肿瘤组织中的阳性表达率比较、发生转移组与未发生转移组肿瘤组织中的阳性表达率比较均有显著性差异;染色阳性组3年生存率明显低于阴性组.结论MMP-2与下咽癌的转移有关,并且可能影响肿瘤患者的预后.

    作者:李琦;李湘平;梁勇;刘雄 刊期: 2003年第05期

南方医科大学学报杂志

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