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p53蛋白的原核表达及其鸡卵黄抗体的制备

吴敏;陈清;王雅贤

关键词:P53蛋白, 卵黄抗体, 融合表达
摘要:目的制备抗p53蛋白卵黄抗体.方法原核表达p53融合蛋白,纯化后免疫产蛋母鸡.结果融合蛋白能有效刺激母鸡产生抗体,末次免疫后其卵黄抗体滴度达到1:106,并且能维持较长时间.结论本文介绍的方法是一种简便、经济、特异、高效、均一、来源充足的抗体产生方法.
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  • 甲状腺手术并发急性呼吸道梗阻10例分析

    目的探讨甲状腺手术并发急性呼吸道梗阻的发生原因和诊治方法.方法回顾性分析11年间甲状腺手术并发急性呼吸道梗阻10例的发生原因,诊断要点,防治措施及其经验教训.结果11年间共施行甲状腺手术3 186例,发生呼吸道梗阻10例,发生率0.31%,其中气管软化2例、血肿压迫5例、气管痉挛2例、痰液阻塞1例;行气管切开或插管6例、清除血肿4例;成功9例,死亡1例.结论血肿压迫、气管软化等是甲状腺手术并发急性呼吸道梗阻常见原因.一旦发生,必须及时行气管切开或插管.

    作者:陈卫军;邓燕;梁兆煜 刊期: 2003年第05期

  • 经静脉声学造影法与彩色多谱勒法对移植肾急性排异反应诊断的对比研究

    目的比较应用间歇二次谐波成像结合声学定量方法与彩色多谱勒血流显像测量阻力指数方法对移植肾急性排异时血流灌注诊断的价值.方法建立8例犬异体移植肾急性排异模型,进行经静脉声学造影及声学定量和彩色多谱勒血流显像测定阻力指数,同时进行血清肌酐(Cr)监测.结果声学定量分析所得时间-强度曲线(TIC)参数的灌注曲线下面积(AUC)、峰值强度(PI)及彩色多谱勒血流显像所得阻力指数(RI)与血清Cr值明显相关,相关系数分别为0.978、0.972和0.708;PI-Cr、AUC-Cr相关程度较RI-Cr相关程度高.结论间歇二次谐波成像技术是检测异体移植肾血流灌注的有效手段,结合声学定量分析技术所获得的TIC参数较RI与移植肾急性排异反应发生的相关性更为密切.

    作者:李卓;龚渭冰;刘红梅;崔忠林;黄红波;孙煦勇 刊期: 2003年第05期

  • p53蛋白的原核表达及其鸡卵黄抗体的制备

    目的制备抗p53蛋白卵黄抗体.方法原核表达p53融合蛋白,纯化后免疫产蛋母鸡.结果融合蛋白能有效刺激母鸡产生抗体,末次免疫后其卵黄抗体滴度达到1:106,并且能维持较长时间.结论本文介绍的方法是一种简便、经济、特异、高效、均一、来源充足的抗体产生方法.

    作者:吴敏;陈清;王雅贤 刊期: 2003年第05期

  • 感染冠状病毒的大鼠胸腺组织超微结构观察

    目的通过对感染大鼠冠状病毒(rat coronavirus,RCV)的大鼠胸腺组织进行超微结构的研究,阐明RCV在细胞内形成的形态学机制.方法用在进行自噬性形态学研究中的Wistar大鼠做模型,常规电镜取材、固定、包埋、切片和观察.结果胸腺上皮细胞的胞质内出现大小不等的内质网池,并相互融合形成巨大的内质网湖,湖内充满RCV颗粒,称为病毒包涵体.病毒在内质网囊壁上通过出芽方式进入内质网湖基质,发育为成熟的RCV,终排出于细胞外.病毒颗粒呈圆形,直径约100~130 nm.病毒胞浆成均质状,病毒的膜蛋白有二层,外层为包膜,内层为核衣壳.包膜与核衣壳之间为低电子密度的中间层,其内有时可见1~2层较薄的膜样结构.钉突成放射状贯穿包膜,其内侧端连于核衣壳,外侧端膨大,由一层絮状的糖蛋白包绕,形成日冕状.病毒颗粒分布在胸腺上皮细胞的内质网湖、胞浆、内吞体/溶酶体以及胸腺上皮细胞间,溶酶体内的病毒无包膜和核衣壳.结论内质网湖参与RCV包膜的形成,从细胞外侵入的RCV均在内吞体/溶酶体内脱去包膜和核衣壳,脱下的包膜和核衣壳被其降解,而RCV在胸腺上皮细胞基质中进行复制.在胸腺细胞内未见有RCV.

    作者:朴英杰;徐锡金;朴仲贤 刊期: 2003年第05期

  • 牙本质不同表面状态对其粘接界面影响的扫描电镜观察

    目的研究牙本质表面的干燥或湿润状态对牙本质粘结界面微观结构的影响.方法用扫描电镜观察和比较两类5种粘结系统在干燥或湿润的牙本质表面进行粘结时形成的粘结界面的微观结构.结果湿粘结时5种粘结系统在粘结界面获得良好的渗透图象;干燥粘结时,两种以丙酮为溶剂的粘结系统在干燥粘结时形成的粘结界面,与湿粘结时有明显的区别,混合层较薄,并有明显的不完全渗透的结构和混杂层的形成;以酒精和水为溶剂的粘结系统在两种不同粘结状态时粘结界面的超微结构没有明显的区别.结论使用新型的湿粘结系统时,牙本质粘结表面应该保持一定的湿润度,以保证粘结剂在粘结界面的良好渗透,获得较高的粘结强度.

    作者:李潇;朱光第;李洪涛;施长溪;赵信义 刊期: 2003年第05期

  • 2353例机动车交通伤害住院患者的流行病学分析

    目的了解机动车交通伤害住院患者的基本状况及其分布特征,以加强相应的防范措施.方法抽取湖南邵阳某医院1997~2001年间所有交通伤害住院患者的病案资料,按国际疾病分类标准(ICD-9E)进行诊断分类,对其基本特征进行描述性统计分析.结果5年间该院收治交通伤害住院患者2 353例,占同期该院总住院患者的3.16%,占同期伤害住院病例数的33.27%,男女性别比为2.37:1,以15~44岁年龄组所占比例大(55.97%),职业分布以农民多(34.0%).交通伤害易损伤的部位是头部(33.57%),入院时病情以中度为主(69.9%),治愈率为64.5%.不同年龄的转归差异有显著性,随着年龄的增长,治愈率下降.结论机动车交通伤害对城乡居民的健康危害大,是一个不容忽视的公共卫生问题,严重影响受伤者的生活质量.应通过制订相应的法规和制度、开展健康教育来控制和预防伤害的发生.

    作者:廖红梅;廖建坤 刊期: 2003年第05期

  • 甲氨喋呤与美洛昔康联合治疗强直性脊柱炎的临床观察

    目的观察甲氨喋呤(MTX)与美洛昔康(MLX)联合治疗强直性脊柱炎(AS)的疗效和安全性,探索使用MTX的合理剂量.方法将32例AS患者分成A、B两组,A组14例,B组18例.A组给予MTX(12.3±3.6)mg,口服,次/周,B组给予MTX(21.3±3.2)mg,口服,次/周;两组患者均给予MLX 7.5 mg/d.共治疗3月.结果两组各项临床指标及实验室指标较治疗前均有改善,A组总有效率为78.6%,B组总有效率为88.9%;不良反应发生率A组50.0%,B组83.3%,总有效率和不良反应发生率均元显著性差异(P<0.05).结论MTX与MLX联合应用治疗AS,疗效良好;其疗效与MTX剂量不存在相关性,但因不良反应发生率较高,MTX以小剂量为宜;在短时间(3月)内,MLX不增加MTX的毒性作用.

    作者:谢锐龙;李晓昊;康贤通 刊期: 2003年第05期

  • 结节病15例临床分析

    目的总结结节病的临床特征,提高临床医生对本病的认识和诊治水平.方法对15例结节病患者的临床资料进行回顾性分析.结果15例结节病患者,以呼吸系统症状为首发表现者7例,以肺外表现为首发症状者6例,无症状者2例.X线及胸CT提示双肺门及纵隔对称性淋巴结肿大者13例,12例患者血管紧张素转化酶升高,血沉加快者10例,结核纯蛋白衍化物试验仅1例阳性.结论肺结节病多见于中青年成人,临床症状不典型,在诊断上应综合其临床表现、胸部X片、CT及实验室检查结果.

    作者:黄文杰;李伟峰;徐虹;方怡;李志斌 刊期: 2003年第05期

  • 软脂酸对体外原代培养大鼠胰岛细胞凋亡作用的实验研究

    目的观察软脂酸诱导体外原代培养胰岛细胞的凋亡,初步探讨软脂酸在2型糖尿病发病中的机制.方法应用分离的体外单层培养SD大鼠胰岛细胞,与不同浓度软脂酸(分别为0、0.125、0.250、0.500mmol/L)共同孵育48h,用放免法测定培养液中胰岛素含量,PI/Hoechst33342双染法荧光显微镜观察胰岛细胞凋亡的形态变化.结果0.250、0.5mmol/L软脂酸可抑制高糖刺激下的胰岛素分泌,促进胰岛细胞的凋亡.结论软脂酸可诱导胰岛细胞凋亡,凋亡程度与游离软脂酸浓度有关.

    作者:姜一真;薛耀明;邓燕;朱姿英 刊期: 2003年第05期

  • 痔然消片治疗内痔出血569例临床观察

    目的观察中药复方煎剂改成片剂后治疗内痔出血的临床疗效.方法对569例门诊内痔出血患者口服痔然消片治疗6 d,并以痔宁片作为对照,计分评价两组治疗前后出血量变化情况.结果两组治疗后计分均明显降低,两组间比较无显著性差异(P>0.05).结论痔然消剂改成片剂后对内痔出血仍有显著疗效.

    作者:钱忠秀;李胜龙;尹廷宝 刊期: 2003年第05期

  • 新鲜羊膜移植治疗眼表疾病的临床观察

    目的观察新鲜羊膜移植治疗眼表疾病的临床效果.方法采用新鲜羊膜移植治疗翼状胬肉、复发性翼状胬肉、蚕蚀性角膜溃疡、病毒性角膜溃疡、睑球粘连38例(52眼),术后随访3~12月.结果38例术后均未见新鲜羊膜植片急性排斥反应,术后翼状胬肉及角膜溃疡患者在随访期间未见复发,睑球粘连者恢复了眼球的运动功能.结论新鲜羊膜移植可有效地用于角结膜的重建,充分清除眼表的病变组织和羊膜移植片的缝合固定,对羊膜移植重建眼表功能极其重要.

    作者:罗海燕;彭庶民;王永建 刊期: 2003年第05期

  • 自控呼吸法在呼吸门控触发冲击波治疗尿路结石中的应用

    目的总结体外冲击波碎石术(ESWL)中创造性应用呼吸门控技术的临床经验.方法424例病人依标准选择后,行ESWL治疗,按所采用的呼吸方法分为3组,即自主呼吸组(A组)、一般呼吸组(B组)和自控呼吸组(C组),随访3~6个月,观察各组ESWL后疗效差异,评价治疗效果.结果各病之间疗效有显著性差异(P<0.01),C组高(96.40%),而A组(83.87%)与B组(86.67%)有效率接近,故差异主要来自于C组同A、B两组之间.所有病例均未见严重并发症发生.结论住呼吸门控技术中应用自控呼吸法触发冲击波治疗尿路结石有高的有效率,无明显并发症,是一种值得倡导的方法.

    作者:刘成山;郑少斌 刊期: 2003年第05期

  • 低分子肝素与前列腺素E1脂微球联合应用预防异基因外周血干细胞移植后肝静脉闭塞病

    目的观察低分子肝素和前列腺素E1脂微球联合应用对异基因外周血干细胞移植后肝静脉闭塞病的预防作用.方法对21例异基因外周血干细胞移植病人在移植第-7天至第+30天联合应用低分子肝素和前列素E1脂微球,观察临床效果.结果21例病人中只有2例在第+18、+21天发生肝静脉闭塞病.低分子肝素和前列腺素E1脂微球联合应用未观察到明显的毒副作用.结论低分子肝素和前列腺素E1脂微球联合应用对预防异基因外周血干细胞移植后肝静脉闭塞病是安全和有效的.

    作者:宋朝阳;李玉华;郭坤元;吴秉毅 刊期: 2003年第05期

  • 纤维化及正常肝组织中血管紧张素Ⅱ 1型受体mRNA的表达

    目的探讨纤维化及正常肝组织中血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)mRNA的表达情况.方法应用半定量逆转录聚合酶链反应法检测18例肝癌周围纤维化肝组织和12例正常肝脏组织中AT1RmRNA的表达,同时逆转录AT1R特异性片段和内参片段(GAPDH),以二者的积分吸光度比值作为该受体mRNA的相对表达量.结果纤维化肝组织AT1R mRNA的相对表达量明显高于正常肝组织(1.27±0.45vs 0.71±0.21,P<0.01).结论AT1R可能在肝纤维化的发生发展中起一定的作用.

    作者:王卫卫;杨希山;吴平生;王捷;张宏斌;李旭;郑文岭 刊期: 2003年第05期

  • 银汞合金充填术后牙体组织受力分析

    目的观察5种基底料对银汞合金修复后牙体组织的应力分布和变形影响.方法建立下颌第一磨牙二维有限元计算模型,基底厚度均为0.5 mm,银汞合金厚2mrn,采用合面中央集中加载,计算窝洞侧壁牙体组织上的应力分布和变形情况.结果高应力集中和较大水平变形主要发生在洞底线角局部,低弹性模量基底材料可以加剧这一趋势.普通型氧化锌丁香油水门汀和氢氧化钙组局部的大压应力集中是磷酸锌水门汀组的3.3倍,是玻璃离子和加强型氧化锌丁香油水门汀组的2倍.变形较磷酸锌水门汀组增加了40%,较玻璃离子水门汀增加了25%.结论不同弹性模量的基底料对银汞合金充填后牙齿的强度有明显影响,弹性模量越低,局部牙体组织内产生的应力越高,断裂的可能性越大,从力学性能上看,磷酸锌水门汀是目前临床上常用基底料中为理想的.

    作者:赵守亮;张少峰;李芸;刘晗;王美青 刊期: 2003年第05期

  • 免疫化学染色图像分析法检测细胞核因子κB

    目的探讨一种简便、安全、可定量的细胞核因子κB(NF-κB)活性的检测方法.方法以晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白(HSA-AGE)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC),NF-κB/P65免疫化学染色后,分析细胞NF-κB/p65核/浆的阳性染色比,以经典的凝胶迁徙率泳动分析法作对照.结果HSA-AGE可激活HUVECNF-κB,呈时间、剂量依赖关系,两种方法检测的趋势一致.结论免疫化学染色的图像分析法可用于定量检测NF-κB的活性.

    作者:张桂林;刘尚喜;邓燕;申洪 刊期: 2003年第05期

  • 下咽癌中基质金属蛋白酶-2的表达及其临床意义

    目的检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在下咽癌及癌旁正常粘膜组织中的表达,探讨MMP-2与下咽癌组织生物学行为、转移及预后之间的关系.方法运用免疫组化二步法检测32例下咽癌组织及癌旁组织中MMP-2抗体的表达,按不同的标准分组后进行统计学处理.结果32例下咽癌组织中MMP-2蛋白表达阳性率为53.1%;癌旁正常粘膜组织与肿瘤组织中的阳性表达率比较、发生转移组与未发生转移组肿瘤组织中的阳性表达率比较均有显著性差异;染色阳性组3年生存率明显低于阴性组.结论MMP-2与下咽癌的转移有关,并且可能影响肿瘤患者的预后.

    作者:李琦;李湘平;梁勇;刘雄 刊期: 2003年第05期

  • 反转录巢式PCR方法检测SARS冠状病毒

    目的探索SARS冠状病毒早期诊断的有效手段.方法对临床病例样品采用反转录巢式PCR方法鉴定SARS冠状病毒.提取样品RNA,用巢式PCR外侧下游引物进行反转录,以反转录产物为模板,进行巢式第一次、第二次PCR.PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行测序鉴定.结果被检样品扩增出特异片段,经测序验证确实来自SARS相关冠状病毒.Blast比较结果与SARS冠状病毒多伦多株相应片段只有一个碱基的差异.结论反转录巢式PCR方法验证在非典型肺炎患者标本中存在SARS相关冠状病毒的序列,证实该法不失为一种检测SARS冠状病毒的快速、简便、易行的方法.

    作者:王艳;马文丽;宋艳斌;肖维威;张宝;黄海;王洪敏;马晓冬;郑文岭 刊期: 2003年第05期

  • 透照法曲张静脉动力创削术治疗下肢静脉曲张1例报告

    我们应用新引进的透照法曲张静脉动力创削术(TIPP)治疗了1例双下肢单纯性大隐静脉曲张患者,现报道如下.

    作者:朱晓霞;林智琪 刊期: 2003年第05期

  • 应用改进的AdEasy系统制备重组腺病毒

    目的改进AdEasy系统,使之更简便、高效、快捷.方法pAdtrack经酶切线性化后,转化经氯化钙处理的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒.后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒.荧光显微镜下细胞中重组腺病毒观察绿色荧光蛋白的表达.结果应用氯化钙法由pAdtrack转化AdEasier-1细菌,可获得极高比例的(20/20)阳性重组腺病毒克隆.结论应用改进后的AdEasy系统构建腺病毒相比于传统AdEasy系统,方法更简便、成功率更高、实验周期更短、对实验室的条件要求低.

    作者:汤福祥;郑权;黄宗海;张庆国;车小燕 刊期: 2003年第05期

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