周筠;叶仁清;蔡德鸿;张桦
目的探讨克隆副溶血弧菌(Vp)耐热直接相关溶血素基因的方法.方法用PCR技术扩增目的基因双酶切载体pGEX-3X和目的基因DNA,连接并转化大肠杆菌DH5α.对重组质粒进行PCR鉴定、酶切鉴定和序列分析.结果凝胶电泳显示,标准株Vp14-91基因组DNA的PCR产物长约600 bp.阳性克隆的PCR产物也为一长约600 bp的条带,经双酶切可切出一约600bp的条带.DNA测序结果表明与GenBank中的序列有99.1%的同源性.结论利用该方法成功克隆了目的基因,为制备用于现场检测的基因探针和Vp的保护性疫苗以及Vp的致病机制研究奠定了基础.
作者:苏建新;聂军;吴振龙 刊期: 2002年第06期
目的研究特异性抗HPV16E6核酶对宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响.方法设计特异性切割HPV16E6基因的核酶,构建抗HPV16E6核酶的真核表达质粒.以脂质体法将抗HPV16E6核酶、空载体质粒分别导人CaSKi细胞,命名为CaSKi-R、CaSKi-P细胞.点杂交检测核酶在细胞中的表达,Northern blotting检测CaSKi、CaSKi-R、CaSKi-P 3种细胞中E6基因的表达.测定3种细胞的生长曲线和软琼脂克隆形成率,并以皮下接种法检测细胞在裸鼠体内的成瘤能力.流式细胞仪检测3种细胞的凋亡率,并测定c-myc、bcl-2、P53、fas、PCNA、C-erbB-2等基因的表达.结果点杂交证实该核酶能在CaSKi-R细胞中稳定表达,Northern blotting证实CaSKi-R中表达E6较CaSKi-P、CaSKi明显降低.与CaSKi细胞相比,CaSKi-R细胞生长速度、软琼脂克隆形成率明显降低,在裸鼠体内的致癌能力下降,凋亡率明显增高,出现凋亡峰,S期、G2M期细胞百分率下降;而CaSKi-P细胞无此改变.CaSKi-R细胞表达HPV16E6、C-myc、BcI-2、PCNA、C-erbB-2蛋白明显减少,而p53表达明显增高;CaSKi和CaSKi-R细胞中Fas蛋白的表达相近.CaSKi-P细胞中各基因的表达与CaSKi细胞无显著差异.结论抗HPV16E6核酶的导入能阻碍宫颈癌细胞增殖,诱导其凋亡,其原因可能在于病毒癌基因E6表达的降低,以及由此而引起的细胞内一系列基因表达的改变.
作者:郑燕芳;饶智国;张积仁 刊期: 2002年第06期
目的探讨经导管动脉化疗栓塞术(TACE)中化疗药物剂量对肝细胞癌(HCC)患者T细胞亚群的影响.方法36例不能手术切除的HCC患者随机分成A、B两组,分别行选择性TACE.A组(n=18)给予小剂量化疗药物:肿瘤直径小于5 cm者给予丝裂霉素(MMC)2~4 mg;在5~8 cm之间者给予MMC4~6 mg及表阿霉素(EPI)10 mg;大于8 cm者给予MMC6~8 mg、EPI 10 mg及卡铂(CBP)100mg.B组(n=18)给予常规剂量化疗药物(MMC 10 mg、CBP300 mg及EPI 40mg).术前和术后1周用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群(包括CD3+、CD4+、CD8+、NK、CD4+/CD8+、CD4+CD45+、CD4+CD29+、CD8+CD28+、CD8+CD28-).结果治疗前两组间各细胞亚群均无显著差异;A组患者治疗后CD3+、CD4+、CD8+、NK、CD4+/CD8+、CD4+CD29+、CD8+CD28-无显著变化,但CD4+CD45+显著下降(P<0.05),CD8+CD28+明显增高(P<0.001);B组CD4+、CD4+CD29+和CD4+/CD8+比值显著下降(P<0.05),CD8+、CD8+CD28-显著增高(P<0.05).结论常规剂量化疗药物TACE可明显抑制细胞免疫功能,而小剂量化疗药物TACE可以提高患者细胞免疫功能.
作者:卢伟;李彦豪;何晓峰;陈勇;曾庆乐;裘玉容 刊期: 2002年第06期
从小续命汤方的起源、组方的机制、临床以及实验研究等多方面评价小续命汤在脑卒中治疗中的地位.
作者:朱心红;陈素云;高天明 刊期: 2002年第06期
三期皮肤梅毒可分为结节性梅毒疹及梅毒树胶肿[1].2001年7月我院收治了1例结节性梅毒疹病人,现报告如下.
作者:冀航;胡志奇;周再高 刊期: 2002年第06期
1.临床资料患者男,38岁,因左膝下肿块近20年、反复疼痛5年于2001年10月9日入院.开始发现时左膝下肿块只有小手指甲大小,无不适感觉,5年前开始在左膝活动较多后感觉疼痛,近2.年来可见肿块逐渐增大、疼痛程度加重并常伴有局部肿胀.
作者:徐波;张耀旋 刊期: 2002年第06期
综述人尾加压素Ⅱ及其受体结构、分布以及对心血管的生物学效应.
作者:钟萍;李志梁;唐朝枢 刊期: 2002年第06期
作者总结了医学科技论文英文摘要中各部分时态选择的一般原则,同时探讨了语态和人称的使用方法.
作者:王征爱;宋建武 刊期: 2002年第06期
目的筛选乙型肝炎病毒(HBV)感染者转录后调节序列中与干扰素α治疗应答有关的差异位点.方法采用PCR反应产物直接测序法,对31例HBV感染者血清中HBVDNA上的转录后调节序列(HPRE)片段扩增后测序,与GenBank中来源于欧美人群的乙型肝炎序列进行比较,并结合临床资料进行分析.结果在中国慢性HBV感染者HPRE的β2区,存在3个位点变化,分别为ntl 504(T→C),占75.0%;ntl 508(C→T),占57.1%,C→G,占10.7%;nt1509(C→T),占60.7%.而在欧美HBV感染者的HBV DNA序列中均不存在上述位点变化.HPRE位点差异的发生率与HBVDNA水平未见明显相关.结论不同种族HBV感染者转录后调节序列的差异可能与干扰素α治疗的应答性有关.
作者:邢同京;骆抗先;侯金林 刊期: 2002年第06期
作者: 刊期: 2002年第06期
作者: 刊期: 2002年第06期
目的观察海马、边缘区及相关脑区的基因表达谱是否存在差异,期望寻找到海马、边缘区的特异基因.方法从引产胎儿胎脑中准确取出海马、杏仁核、边缘区和尾壳核.用mRNA差异显示技术分析上述脑区的基因表达差异,并对海马的一个差异片段进行了克隆、测序.结果4个脑区相比,海马、边缘区各发现2个差异片段,海马的一个差异片段长度为277bp,序列与编号为AC0049人类克隆序列完全同源.结论海马、边缘区等不同脑区间基因表达存在差异.
作者:宁群;舒斯云;包新民 刊期: 2002年第06期
目的探索应用原位逆转录PCR(RT-PCR)检测低拷贝的干细胞因子mRNA在白血病细胞表达的可行性.方法在普通的PE480型PCR仪进行原位RT-PCR,检测干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞的表达.结果直接法和间接法原位RT-PCR均可以检测到干细胞因子mRNA在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞表达,而常规的原位杂交则为阴性.结论(1)干细胞因子在K562、HL-60和慢性粒细胞性白血病细胞均有表达,但是表达量较低,应用原位RT-PCR可进行检测;(2)在普通的PE480型PCR仪上可以进行原位PCR.
作者:吴彬;刘晓力;宣文兰;冯茹;尹芳;周淑芸 刊期: 2002年第06期
目的提出一种医学图像中值滤波算法,以改进经典中值滤波存在的不足.方法将模式识别中的ISODATA聚类引入到中值滤波算法中,将分类的结果作为参数来确定如何进行中值滤波,以及是否需要进行中值滤波处理.结果本算法能够滤除严重的脉冲噪声干扰,同时保持图像细节.结论本算法跟经典中值滤波算法相比,提高了信噪比,增强了图像质量.
作者:席卫文;周猛 刊期: 2002年第06期
目的探讨精氨酸增强的胃肠外营养对结直肠癌患者术后的免疫功能的影响.方法随机选择在南方医院普外科住院治疗的40例结直肠癌患者,术后分别接受常规肠外营养支持或精氨酸增强的肠外营养支持(20g/d)1周,检测及分析术前、术后不同时期的免疫功能(包括CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-2R、NK、C3、C4、CH50、IgG、IgA、IgM等指标).结果结直肠患者入院时均有明显的免疫抑制,精氨酸增强的肠外营养支持组患者的免疫功能(CD4+、CD4+/CD8+、NK、IL2R)在术后第4天、第7天与对照组相比有明显改善(P<0.05).结论精氨酸能改善大肠癌患者术后的免疫功能,增进肠外营养的效果.
作者:宋京翔;卿三华;黄祥成;齐德林 刊期: 2002年第06期
目的观察胶原涂层煅烧骨-成骨细胞复合物植人体内后成骨性能,探讨治疗骨缺损的新方法.方法以牛松质骨制成煅烧骨(TBC),并涂以胶原制成胶原涂层煅烧骨(TBCc),培养兔骨膜成骨细胞(POB),构建复合物TBCc-POB;将该复合物移植到BALB/c裸小鼠背部右侧皮下,4周取材;同时将该复合物植入兔背部右侧肌袋内,8周取材.两种动物均在对侧相应部位植入单纯TBCc作为对照,并在相应时间内取组织块常规处理后光镜、电镜观察.结果植入材料在皮下及肌袋处均有成骨细胞大量生长、增殖,并有软骨组织、骨组织形成,而对照组则没有.结论将TBCc-POB材料植入体内后,成骨细胞能够存活并产生软骨组织和骨组织.
作者:顾为望;许永华;曹宏卿;张保东;卢开柏 刊期: 2002年第06期
报道7例鼻咽、鼻腔外扩展的鼻咽纤维血管瘤的诊治体会,探讨范围广泛的巨大鼻咽纤维血管瘤的手术径路、手术方法和注意事项.
作者:郭梦和;李永贺;黄以乐 刊期: 2002年第06期
目的探讨转录因子Sp1、Sp3对JurkatT细胞端粒酶活性和端粒酶逆转录酶(hTERT)的调节作用.方法用脂质体将Sp1、Sp3表达载体转入Jurkat T细胞,用Westem blotting方法检测蛋白表达水平;用端粒酶PCR-ELSA法检测细胞端粒酶活性并用银染显示端粒酶活性梯度;用RT-PCR方法检测hTERTmRNA水平.结果Sp1、Sp3载体转化36 h的细胞Sp1、Sp3蛋白水平分别升高59.6%(P〈0.01)和36.8%(P〈0.05);随着Sp1表达水平的增加,端粒酶活性和hTERT mRNA水平明显增加,增加率分别为38.5%(P〈0.05)和25.4%(P〈0.05).而Sp3表达载体对端粒酶活性和hTERT mRNA水平无明显影响.结论转录因子Sp1通过调节hTERT mRNA转录水平而调节Jurkat T细胞端粒酶活性,Sp3无此作用.
作者:庞建新;程希远;吴曙光 刊期: 2002年第06期
目的构建凝血栓蛋白-1I重复序列真核表达载体.方法采用RT-PCR技术,从人胎儿肺组织中扩增凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,通过连接反应构建重组克隆载体和重组表达载体,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,双酶切鉴定及测序.结果获得了预期的扩增产物——凝血栓蛋白-1 I型重复序列基因,测序结果经GenBank分析,一致性为99%.结论成功构建了PcDNA3.1+/TSP-1 I型重复序列真核表达载体.
作者:李小卫;刘伊丽;吴平生;周忠江 刊期: 2002年第06期
目的用荧光PCR(fluorescence PCR,F-PCR)方法研制结核分支杆菌(TB)DNA检测试剂盒,通过临床试验评价其性能,并与其他方法进行比较.方法F-PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法.由于采用完全闭管荧光检测,避免了PCR后处理导致的假阳性污染;又采用了荧光检测技术,可以提高检测的灵敏性.应用F-PCR检测了297份肺结核病人和249份非结核对照者的痰液标本,以改良罗氏培养法、金胺荧光染液涂片法、Abbott公司的LCx试剂盒检测作为对照.结果设计合成了TB F-PCR诊断试剂盒.检测阳性率49.1%,灵敏性89.2%,特异性98.8%,符合率93.6%.结论F-PCR在灵敏性上显著优于培养法和涂片法,与LCx试剂盒检测无显著差异.F-PCR试剂盒可以检测TB的真实感染情况,对于临床诊断和疗效考察有一定的指导意义.
作者:程钢;何蕴韶;周新宇;邓文国;李虎 刊期: 2002年第06期