宽范围β-HCG双标记液相免疫放射检测方法建立

韩涛；王成敏；唐宝军

关键词：免疫放射量度检测法, β-绒毛膜促性腺素, 标记免疫分析

摘要：[目的]研制一种宽范围血清β-HCG液相IRMA检测试剂.[方法]将两株高特异性抗β-HCG单克隆抗体分别标记异硫氰酸荧光素和125I混合作为标记试剂,将待测样品和标记试剂在液相中生成双标记夹心免疫复合物,加入连接抗异硫氰酸荧光素的磁性微粒子分离.[结果]本法小检出值34.42 mIU/ml,标准曲线范围75～7500 mIU/ml,批内和批间CV分别为4.0%和8.8%,回收率在90%～110%,平均为101.7%.[结论]双标记液相IRMA是一种新型检测方法,高检出值7500 mIU/ml是常规高检出值500mIU/ml的15倍,血清高值不必稀释,对临床应用具有简便快速的优点.

中国医学检验杂志相关文献

儿童肺炎支原体感染中C-反应蛋白的检测价值

近几年来,肺炎支原体感染在儿童呼吸道疾病的发病率有所增加,并已受到临床医生的广泛重视,我们对住院患儿的肺炎支原体抗体和CRP含量进行了分析,以了解CRP对肺炎支原体感染的临床价值.

作者：马洪刚；王艳华；孙静；祁百胜刊期： 2006年第04期
重症肝炎并发DIC早期诊断中D-二聚体乳胶试验的应用

D-二聚体乳(D-Dimer)是交联纤维蛋白经纤溶酶水解产生的一种特异降解产物.利用抗D-二聚体单克隆抗体包被乳胶颗粒进行凝集试验,是对血中D-二聚体定性检测,定性阳性反映体内纤溶活性增强,有助于重症肝炎并发DIC早期诊断.

作者：邹单东刊期： 2006年第04期
ACE基因多态性及线粒体5178A/C基因型与心肌梗死的关系研究

[目的]探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性及线粒体(mt)5178A/C基因型与心肌梗死的关系.[方法]采用PCR法检测心肌梗死患者84例及正常对照80例的ACE I/D多态性.采用PCR-RFLP方法检测心肌梗死患者84例及正常对照者80例的mt5178A/C基因型.并对结果进行统计学分析.[结果]在心肌梗死患者中,ACE基因的DD基因型频率及D等位基因频率显著高于正常对照组(均P＜0.05),DD与非DD及D与I的比数比(OR)分别为2.443(1.265-4.716)及1.703(1.098-2.638).mt5178C等位基因频率也明显高于正常对照组(P=0.021),mt5178C与mt5178A的比数比为2.254(1.114-4.563).[结论]ACE基因DD基因型及mt5178C与心肌梗死有关,可能是发生心肌梗死的重要危险因素.

作者：李立艳；魏殿军；刘鹏飞刊期： 2006年第04期
一种检测输血用1号抗凝液细菌内毒素的方法

输血用1号抗凝液是血液中心和血站常用的血液保存液,它的主要成分是枸橼酸和枸橼酸钠,由于大量枸橼酸根离子的存在,在用BET凝胶法检测细菌内毒素时产生阳性抑制作用,如果不排除干扰,就会出现假阴性的结果[1].笔者通过向供试液中加入无热原的饱和Ca(OH)2溶液,以补充Ca2+的方法以排除试验过程枸橼酸根离子的干扰,取得了良好的效果,现将实验过程报告如下:

作者：王洪；王欣；王学刚；张晓寒刊期： 2006年第04期
L-吡咯烷酮酰-4-硝基苯胺的合成及其临床应用

[目的]制备L-吡咯烷酮酰-4-硝基苯胺,用吡咯烷酮芳胺酶(PYRase)法快速检出链球菌等病原菌.[方法]采用L-谷氨酸与水加热生成焦谷氨酸,再与对硝基苯胺反应制得L-吡咯烷酮酰-4-硝基苯胺;将其制成酶底物纸片,对底物浓度、适pH、反应温度及时间进行了探讨,确定了实验的佳条件.[结果]本法底物佳浓度为2 mg/ml,适pH 7.2,反应温度37℃,反应时间10 min.以此条件用自制底物与进口品进行比较其效果完全一致.鉴定了标准菌株9株,临床分离菌株154株.正确率达100%.[结论]本法可代替常规检验方法提前2～3 d报告结果,为链球菌等鉴定提供了一种快速、简便、准确的新方法.

作者：解红武；张淑萍；陶遵威；路秀文；刘惠芝；王文彤；王金良；白纯刊期： 2006年第04期
丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的临床评价

[目的]对研制的丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)ELISA检测试剂进行临床特异性及敏感性评价.[方法]制备抗HCV-核心区(Core)抗原四株单克隆抗体,研制出双抗体夹心检测HCV-core抗原酶联免疫检测(ELISA)试剂.三家临床单位收集抗HCV阴性样品3040份,HBsAg阳性100份,抗HIV阳性40份,从10万份抗-HCV筛查出临界样品28人份.[结果]3040份阴性样品检测有3份HCV-cAg阳性,3份经HCV PCR检测有1份阳性,100份HBsAg阳性,40份抗HIV阳性样本检测均为阴性,在10万份抗HCV抗体筛查样品中,选择28份抗-HCV检测临界样品进行HCV-cAg检测,有4份阳性,4份HCV-cAg阳性样品中有3份HCV-RNA检测阳性.[结论]研制的双抗体夹心HCV-核心抗原ELISA试剂具有很好的特异性和灵敏度.

作者：张贺秋；王国华；李少波；刘劭钢；陈坤；宋晓国；冯晓燕；凌世淦刊期： 2006年第04期
半胱氨酸与老年期痴呆关系的研究

[目的]探索血浆总半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)水平与老年期痴呆(Elderly Dementia,ED)的关系.[方法]选择ED患者129例和健康老人69人,采用高效液相色谱仪和荧光检测仪进行血浆总Hcy水平测定.[结果]患者组血浆总Hcy水平(27.65±11.74μmol/L),显著高于对照组(12.39±2.37μmol/L),P值＜0.001.[结论]血浆总Hcy水平升高可能是ED发生的高危因素之一.

作者：刘建农；周正祥；周渊东刊期： 2006年第04期
超敏C反应蛋白预测心血管疾病研究进展

随着高敏感检测技术的使用,对C反应蛋白(CRP)的使用赋予了新的用途和意义.近年来,愈来愈多的学者已普遍认识到,CRP与心血管疾病密切相关,低浓度的CRP的检测可作为心血管疾病独立的危险因子.本文就心血管疾病是一种慢性炎性反应、CRP与心血管疾病的相关性及其在预测心血管疾病过程中的局限性做了简要的综述.从中可见,CRP可预测心血管事件的发生,但其确切机制还有待进一步研究.

作者：李旭刊期： 2006年第04期
用Advia 120评估ADP对体外血小板的活化作用

[目的]用Bayer Advia 120血细胞分析仪提供的血小板参数平均血小板内含物浓度(mean platelet component concentration,MPC)评价ADP在体外对血小板的活化作用,为研究血小板活化提供实验依据.[方法]取健康献血者抗凝新鲜全血,提取富血小板血浆(PRP),分别以低中高浓度(0.8 μmol/L、4.0 μmol/L、20.0 μmol/L)的ADP作诱导剂,用Bayer Advia 120血细胞分析仪检测MPC随时间变化的关系.[结果]MPC减低存在一定时间依赖关系,初20 min较迅速,在60 min基本达到大活化程度.不同浓度ADP作用结果比较,低中浓度组P值为0.192(P＞0.05),无显著性差异.低高、中高组P值分别为0.008、0.024(P＜0.05),有显著性差异.[结论]ADP诱导血小板MPC减低存在一定的剂量依赖关系,但低、中浓度之间差别不明显,高浓度对血小板的活化作用较低、中浓度强.中、高浓度ADP作用20 min基本可以保证得到活化的血小板,高浓度ADP作用60 min可以得到充分活化活化的血小板.

作者：徐士欣；肖振霞刊期： 2006年第04期
1069株葡萄球菌耐药状况分析

[目的]了解我院医院感染葡萄球菌耐药状况.[方法]将分离到的葡萄球菌采用K-B法做药敏试验,按CLSI/NC-CLS 2000标准判断结果.[结果]2001年1月～2005年12月共检出葡萄球菌1069株,其中金黄色葡萄球菌594株,对苯唑西林耐药532株,耐药率为89.56%;表皮葡萄球菌308株,对苯唑西林耐药237株,耐药率为76.94%;溶血性葡萄球菌161株,对苯唑西林耐药132株,耐药率为81.99%.检出的葡萄球菌对青霉素、红霉素、克林霉素、复合磺胺均呈高度耐药,只有万古霉素100%敏感.[结论]了解医院感染葡萄球菌的耐药状况,对临床合理选择抗生素十分重要,万古霉素可作为葡萄球菌重症感染的首选药物.

作者：孙民；吴玲；范冬耀；靳本华；刘冉刊期： 2006年第04期
微柱凝胶卡在Rh血型鉴定上的应用

交叉配血试验,过去是单一的盐水配血法,只能检测出血清中的完全抗体;后来发展到抗人球法,酶法,再到聚凝胺配血法,现在又发展到抗人球蛋白微柱凝胶技术,后几种方法均可检测出血清中的不完全抗体,但微柱凝胶技术由于标本用量少,灵敏度高,特异性强,操作简便,结果可较长时间保存等优点[1].我们自2004年2月～2005年2月对本院输血的病人应用微柱凝胶卡进行Rh血型鉴定,现将结果报告如下:

作者：李凤莲；张娟；潘军；吴晨霞刊期： 2006年第04期
一种免疫透射比浊法前白蛋白试剂盒的性能评价

[目的]了解免疫透射比浊法前白蛋白试剂盒的性能指标.[方法]测定该试剂盒的检测下限、精密度、准确度、线性范围.[结果]免疫透射比浊法转铁蛋白试剂盒的检测下限为2.79 mg/dl,批内及批间CV均小于10%,准确度为94.65%,线性范围为0～100 mg/dl.[结论]免疫透射比浊法前白蛋白试剂盒可以满足临床检测的需要.

作者：多力昆江·祖农刊期： 2006年第04期
γ型重链病一例报告

重链病(HCD)是免疫球蛋白的合成异常.它不同于多发性骨髓瘤,也有异于淋巴细胞瘤[1].世界上发现已超过百例,我国于1981年开始有病例报道.目前仅发现α、γ、δ、μ4种重链病,ε尚未见报道[2].γ重链病(γ-HCD)只产生IgG重链而无轻链的合成.其特征是在患者血清或尿液中存在异常的γ重链.新近,我们发现了一例γ重链病患者,现报告如下.

作者：赵敏；许新华；文军刊期： 2006年第04期
拉米夫定抗乙肝病毒治疗YMDD变异研究

[目的]探讨拉米夫定治疗后乙肝病毒发生YMDD变异情况,及未接受拉米夫定治疗的乙型肝炎患者中是否存在天然变异的情况.[方法]采用聚合酶链式反应(PCR)结合Taqman荧光技术对海南地区110例慢性乙肝患者进行HBV YMDD检测,一组80例接受拉米夫定治疗及保肝治疗,另一组30例为对照组只给予保肝治疗,治疗1年对患者HBV多聚酶基因YMDD基序定性检测,观察是否有突变.[结果]拉米夫定治疗组在用药1年后有31例发生YMDD突变,其中YIDD变异有15例,YVDD变异有7例,YIDD+YVDD变异有9例,变异株中有19例伴HBV DNA、ALT水平高于正常水平;而对照组有11例发生YMDD突变,其中YIDD变异有2例,YVDD变异有1例,YIDD+YVDD变异有8例.[结论]在未经抗病毒治疗的慢性乙肝患者中存在YMDD变异株,临床上在应用拉米夫定对慢性乙型肝炎患者进行抗病毒治疗前,应对患者是否存在YMDD变异加以重视.

作者：覃西；李志霞；钱士匀刊期： 2006年第04期
两种方法采血对白细胞、血小板计数结果的影响探讨

[目的]比较塑料子弹头内EDTA-K2干粉抗凝血与真空抗凝管内静脉咖白细胞、血小板计数结果的差异.[方法]采集门诊健康人静脉血分别注入含EDTA-K2的真空采血器和干粉子弹头中,均迅速混匀.使用CD-1700血细胞分析仪分5个时段测定静脉血,并做对比实验.[结果]真空采血器中的抗凝血,2 h内测定结果均无显著性的差异;干粉子弹头中的抗凝血,即刻测定时白细胞总数与前者相比有不同程度的假性升高,直方图的小细胞群会出现一个很高的截距,MID的百分率也会不同程度的增高;PLT则不同程度的假性降低,直方图会出现锯齿波或尾部抬高.但将其抗凝血静置30 min后直至2 h内再测定,其结果趋于稳定且与前者相比无显著性差异.[结论]用塑料子弹头内干粉抗凝的全血,尤其是手指血,要求放置30 min再进行测定,以提高结果的准确性.

作者：王志萍；万江涛；向湘媛；贺红；韩春俐刊期： 2006年第04期
脓汁查抗酸阳性杆菌感染一例报道

患者,王丽莹,女,47岁,患者主诉,左侧乳房始终有一溃疡,并流脓汁,看过好多地方,用过好多抗菌素,始终未治愈.患者,于2005年5月20日来我院就诊,临床医生建议做普通细菌培养及厌氧菌培养,培养后均无细菌生长.这时,我建议临床医生查一个抗酸染色,疑似结核菌感染.

作者：鲁宪琴；王国栋刊期： 2006年第04期
肿瘤标志物的联合检测及其检测新技术的研究进展

肿瘤是严重威胁人类健康的高发病率和高死亡率性疾病,大量研究和防治资料证实早期诊断和早期治疗是防治肿瘤与降低死亡率的有效办法.因此,长期以来寻找能早期诊断的肿瘤标志物(TM)成为了人们关注的焦点.目前使用的TM并没有想象的那么理想,其灵敏性及特异性尚不高,使用TM作为早期诊断的依据还有许多问题需要解决.近年国内外学者围绕这些问题展开大量研究[1～3],本文就TM联合检测的应用进展及新研究技术进行综述.

作者：陈新瑛；刘运德刊期： 2006年第04期
超敏-CRP在急性冠状动脉综合征中的临床意义

[目的]探讨血清超敏-CRP(hs-CRP)在急性冠脉综合征中(ACS)的临床意义.[方法]应用乳胶增强免疫透射比浊法检测了97例ACS患者(30例稳定型心绞痛,27例不稳定型心绞痛,40例急性心肌梗塞)及42例健康对照组的hs-CRP水平,并分析治疗前后hs-CRP水平的差异.[结果]ACS患者中hs-CRP浓度与对照组相比明显增高,差异具有统计学意义(P＜0.01).ACS各组hs-CRP水平在治疗前后比较有统计学意义(P＜0.01).[结论]ACS患者血清hs-CRP水平显著升高,提示ACS患者可能存在炎症反应.检测hs-CRP对ACS的辅助诊断、疗效观察及预后判断具有重要意义.

作者：张琳刊期： 2006年第04期
临床化学检验的条形码管理

[目的]应用条形码技术识别检验标本,替代传统的检验标本处理程序,提高效率,减少误差.[方法]在windowsXP操作系统中采用SQL server2000系统数据库,用power builder8.0编制工作程序,用网卡连接数台检验仪器,与医院HIS系统无缝连接.[结果](1)建立新的检验流程:依据HIS系统的检验医嘱,确认信息的准确;将检验项目和各种组合在计算机条形码系统中分类并赋予条形码标记;检验设备自动扫描和识别条形码标签上的信息并进行检验;将检测结果传送LIS工作站.(2)样本编程和条形码扫描双设置;双硬盘设置.[结论]条形码系统的建立提高了工作效率,信息的传递安全、快速、准确.

作者：王金和；侯楹；王鹏刊期： 2006年第04期
2型糖尿病大鼠GLUT4mRNA表达与胰岛素分泌关系的探讨

[目的]探讨2型糖尿病大鼠GLUT4mRNA表达与胰岛素分泌的关系,进一步阐明胰岛素抵抗发病机制.[方法]采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),分析大鼠骨骼肌、心肌和脂肪组织中GLUT4mRNA表达,放射免疫方法测定血清胰岛素含量.[结果]2型糖尿病大鼠骨骼肌、心肌和脂肪组织中GLUT4mRNA表达比正常对照组相对应组织中的表达低,其基础胰岛素、口服葡萄糖后胰岛素水平比正常对照组显著降低.[结论]2型糖尿病大鼠胰岛素分泌量与组织中GLUT4mRNA表达具有一致性表型.

作者：田刚；于立宏；蔡军；王金良刊期： 2006年第04期