贾俊龙;张丽媛;桑元坤;张文华;王玲
目的 检测烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)在卵巢子宫内膜异位囊肿患者中的表达及探讨其与新生血管生成的关系.方法 选择2016年1月1日至2016年12月31日于中山大学附属第一医院妇科行腹腔镜手术的卵巢囊肿患者80例,分为卵巢子宫内膜异位囊肿组(OEM,n=50)和卵巢子宫内膜异位囊肿患者在位内膜组(EM,n=30);对照组为同期接受孕前腹腔镜下宫颈环扎术的非子宫内膜异位症患者(NEM,n=30).检测患者血清中NAMPT水平和病灶中微血管密度(MVD)以及NAMPT、VEGF、VEGFR-2的表达,对结果进行分析.结果 OEM组中的NAMPT的血清浓度比NEM组高;OEM组病灶中的NAMPT、VEGF、VEGFR-2的表达均显著高于EM组及NEM组中的在位内膜.OEM组患者血清中NAMPT水平与病灶中MVD呈正相关(r=0.81).结论 NAMPT可能通过促进内异症病灶新生血管形成参与内异症的发生和发展.
作者:罗迪;牛刚;梁炎春;吴锦杰;谢鸿玉;李佳颖 刊期: 2018年第07期
目的 诱导表达可生物素化的人类白细胞抗原HLA-DRB1*07:01蛋白,以制备MHC四聚体,为后续研究肽段与MHCⅡ的结合力、检测抗原特异性T细胞提供必要工具.方法 从GenBank中获得HLA-DRB1*07:01的cDNA序列,人工合成基因片段时,α链、β链的跨膜区加入亮氨酸拉链,其中β链还在跨膜区加入Avi标签.α链和β链分别与表达载体pET-44a和pETduet-1-Bira连接后转入大肠杆菌Rosetta构建原核表达体系,通过氨苄青霉素(Amp)抗性基因筛选,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得目的蛋白,并用免疫印迹法分析鉴定目的蛋白.结果 成功构建了重组质粒pET-44a-HLA-DRB1*07:01 α链和pETduet-1-HLA-DRB1 *07:01β链-BirA,0.25 mmol/L的IPTG可高效诱导目的蛋白表达,α链可被HLA-DRA抗体特异识别,目的蛋白可生物素化且可被链霉素特异识别.目的蛋白主要以包涵体形式表达,经反复洗涤可获得高纯度的蛋白.结论 成功构建了HLA-DRB1*07:01蛋白的原核表达系统,并得到纯化的可生物素化重组表达蛋白,为进一步制备HLA-肽四聚体奠定了实验基础.
作者:李敏英;李文;陶爱林 刊期: 2018年第07期
目的 观察右美托咪定预给药对切口痛模型大鼠脊髓胶质细胞的影响.方法 成年雄性SD大鼠60只,随机分为4组(n=15):S组为假手术组,O组为手术对照组,D1、D2组分别为低剂量及高剂量右美托咪定组.O组、D1组和D2组大鼠行左后足切开术制备切口痛模型,D1、D2组于术前10 min分别腹腔注射右美托咪定30 μg/kg及50 μg/kg.S组和O组腹腔注射等量生理盐水.于建立切口痛模型前(T0)及术后2、6、12、24h(T1-4)观察机械缩足反射阈值(MWT),于行为学测试结束后每组随机取6只大鼠,取L4-6脊髓进行Western blot方法测定小胶质细胞标记物(OX42)和星形胶质细胞标记物(GFAP)的蛋白表达水平及测定IL-1β、IL-6和TNF-α含量.结果 与S组比较,O组大鼠T1-3时MWT值下降,脊髓OX42表达上调,脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α含量升高(P<0.05);与O组比较,D1组及D2组大鼠T1-3时MWT值升高,脊髓OX42表达下调,脊髓IL-1β、IL-6和TNF-α含量降低(P<0.05).结论 在切口痛模型中,右美托咪定主要抑制大鼠脊髓小胶质细胞OX42的表达及炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α释放.
作者:肖凡;罗振中;卢俊;陈受琳;黄丹;周斌;陈琴琴;华福洲 刊期: 2018年第07期
目的 探讨CCT8在人非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系.方法 采用蛋白免疫印迹法检测CCT8在3对新鲜的NSCLC组织和癌旁组织中的表达,使用免疫组织化学法检测CCT8、Ki-67在140例NSCLC组织中的表达水平,并分析其表达水平与临床病理学特征及预后之间的关系.结果 蛋白免疫印迹实验显示CCT8在3对NSCLC癌组织中高表达,在癌旁组织中低表达;与正常肺组织相比,CCT8在NSCLC中高表达,其在高分化的NSCLC中表达低,CCT8的表达与Ki-67表达水平呈正相关,与组织学分级(P=0.001)、临床分期(P=0.015)、淋巴结转移状态(P=0.005)密切相关.Kaplan-Meier法生存分析表明CCT8的高表达与NSCLC患者的不良预后密切相关(P<0.05);多因素Cox比例风险模型分析显示,CCT8和淋巴结转移可以作为判断NSCLC预后的指标(P<0.05).结论 CCT8表达异常可能与NSCLC的发生发展关系密切;CCT8可作为判断NSCLC预后的指标.
作者:盖领;茅国新;吴锦伟;吕丽婷;姚宁华;陈洁 刊期: 2018年第07期
目的 分析体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中正常反应者采用拮抗剂方案相较于激动剂长方案的临床特点及寻找与获卵率相关的因素.方法 回顾性分析2015年1月至2017年6月汕头市中心医院生殖中心拮抗剂方案和激动剂长方案各150周期,比较两组的基本资料和临床结局.结果 拮抗剂组的Gn时间、获卵数、获卵率、OHSS发生率低于激动剂组(P<0.05);拮抗剂组启动剂量、受精率、卵子利用率高于激动剂组(P<0.05);两组的Gn用量、优胚数、优胚率、妊娠率、流产率;HCG日E2、LH、P差异均无统计学意义(P>0.05).拮抗剂组扳机次日的孕酮值是重要的获卵率独立预测指标,孕酮值越高获卵率越好,孕酮的cut-off值为31 nmol/L.结论 对正常反应者,拮抗剂方案较激动剂长方案有优势;扳机后次日的孕酮值对获卵率有较好的预测价值.
作者:杨军 刊期: 2018年第07期
目的 分析EGFR基因突变与血清癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、糖类抗原(CA19-9)水平之间的关系.从而为肺腺癌患者行EGFR基因检测及相应靶向治疗提供相对优势人群.方法 收集2015年8月至2017年7月于河北省唐山市工人医院病理科行EGFR基因突变检测的肺腺癌患者.采用突变扩增阻滞系统(ARMS)方法对EGFR基因的18至21号外显子的41个位点进行检测,采用电化学发光免疫法检测血清CEA、AFP、NSE、CA19-9水平.结果 EGFR基因突变率与患者血清肿瘤标志物CEA水平有关(x2=7.207,P=0.007),随着血清CEA水平的升高,EGFR基因突变率呈现上升趋势(x2=12.428,P=0.006).结论 血清CEA水平增高的肺腺癌患者是EGFR基因检测的优势人群.
作者:鄢丽敏;张志勇;闫继东;刘丽云;夏庆安;崔永兴 刊期: 2018年第07期
目的 探讨3,4-二羟基苯乙酮(3,4-DHAP)抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞株(RAW264.7)炎症反应的可能机制.方法 常规培养的RAW264.7细胞随机分为正常组(A);LPS组(B);3,4-DHAP组(C)、辛伐他汀组(D).酶联免疫吸附(ELISA)法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)水平;免疫印迹(Western blot)法检测磷酸化IκB(P-IκB)、总IκB、核因子-κ Bp65(NF-κBp65)蛋白表达;实时定量荧光聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测IκB mRNA表达.结果 3,4-DHAP显著抑制TNF-α、VCAM-1分泌;抑制IκB蛋白磷酸化;细胞核内NF-κBp65蛋白表达明显减少(P<0.05),抑制了NF-κBp65核转位.结论 3,4-DHAP通过抑制NF-κB核转位,有效抑制LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应.
作者:张代娟;刘江月;王建英 刊期: 2018年第07期
目的 研究孕晚期宫颈沙眼衣原体(Ct)及其不同基因型感染情况,及与胎膜早破的关系.方法 4 835例孕晚期行Ct及Ct基因型检查孕妇资料,按孕周分为A、B、C三组,三组中Ct阳性者设为研究组,标为A1、B1、C1;阴性者为对照组,标为A2、B2、C2.统计Ct感染率和基因型,比较各组胎膜早破发生率、发生时间及不同基因型胎膜早破发生率.结果 4 835例中Ct阳性277例(5.73%),不同孕周阳性率比较无差异.研究组均检出D、E、F、G、H、I、J、K基因型,以E、D、F、J为主,表达率:E型为38.27%、D型为18.05%、F型为17.69%、J型为12.64%.少量基因型为多重感染.研究组胎膜早破发生率均明显高于对照组(P<0.05).胎膜早破发生率高基因型为E(19.81%),其次为F(16.33%)、K(14.29%)、D(12.0%)、J(8.57%)、G(1.33%),H和Ⅰ型无胎膜早破.结论 晚孕期Ct感染发生率及感染基因型与早孕期相似,Ct感染与胎膜早破有相关性,E、F、K、D型胎膜早破发生率较高.
作者:肖超群;潘淑敏;李仲均;黄素然 刊期: 2018年第07期
目的 建立血红蛋白Bart's水肿胎儿综合征诱导多能干细胞模型.方法 通过收集血红蛋白Bart's水肿胎儿综合征孕妇患者羊水标本,分离培养其中的羊水细胞;然后通过使用仙台病毒将hOct3/4、hSox2、hKlf4和hL-Myc四种因子转导羊水细胞进行重编程;后通过形态学、碱性磷酸酶染色、干细胞多能表面标志物免疫荧光、RT-PCR、EB自发三胚层分化和畸胎瘤体内分化潜能实验对获得的诱导多能干细胞进行检测分析.结果 获得的诱导多能干细胞呈现出明显的干细胞样形态,碱性磷酸酶染色、多能性标志物免疫荧光染色及逆转录PCR等检测结果均符合干细胞特征,与人胚胎干细胞特性相似.体外EB自发分化和体内畸胎瘤分化实验也证实具有完全的三胚层分化发育潜力.结论 成功建立血红蛋白Bart's水肿胎儿综合征诱导多能干细胞系,为后续疾病特异性造血分化模型的建立、疾病治疗的研究及药物开发应用奠定基础.
作者:冼业星;严金梅;陈玉嫦;李东至;孙筱放 刊期: 2018年第07期
目的 观察五苓散结合西医治疗脑转移瘤脑水肿的临床疗效以及探讨其作用机制.方法 选择脑转移瘤患者60例,随机分为两组,治疗组30例给予五苓散+西医常规脱水、激素治疗,对照组30例给予西医常规脱水、激素治疗,以中医症候评分、NIHSS评分、脑水肿改善程度、血清血管内皮生长因子(VEGF)水平为指标,观察五苓散治疗脑转移瘤脑水肿的临床疗效,并分析其作用机制.结果 治疗组的中医症候评分、NIHSS评分、脑水肿改善情况均明显优于对照组(P<0.05),差异具有统计学意义;治疗组的血清VEGF明显低于对照组(P<0.05),差异具有统计学意义.结论 五苓散结合西医治疗可减轻脑转移瘤患者的脑水肿,并明显改善临床症状,其减轻脑水肿的作用机制考虑与降低血清VEGF有关.
作者:沈有碧;郑都;黄涛;薛道金;彭子壮 刊期: 2018年第07期
目的 通过建立兔动脉粥样硬化易损斑块模型,探究伐瑞拉地(Varespladib)对动脉粥样硬化斑块稳定性的影响.方法 20只健康雄性大白兔采用高脂饲养联合颈动脉球囊内膜损伤的方法建立兔颈动脉粥样硬化模型.随机分为试验组和对照组,两组均给予高脂饲养、试验组同时给予Varespladib.18周后两组均取血检测高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-a(TNF-α)和血脂(HDL-C、LDL-C、TC)并行颈动脉超声检查,运用弹性成像技术对斑块进行评分,随后收集颈动脉行HE和免疫组织化学染色.结果 试验组稳定斑块的发生率明显高于对照组,易损斑块的发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P=0.001);试验组斑块面积占管腔总面积的百分比明显低于对照组,差异有统计学意义(P=0.001);试验组巨噬细胞CD68的阳性表达量、hs-CRP和LDL-C水平均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P=0.001).结论 Varespladib具有抑制动脉粥样硬化斑块形成,增加易损斑块稳定性的作用.
作者:范存静;邱敬涛;张晓光;卢学峰 刊期: 2018年第07期
目的 探讨血必净注射液对老年患者关节置换术后早期认知功能的影响.方法 选取择期行全髋关节置换术的老年患者60例,随机分为血必净组(X组,n=30)和对照组(C组,n=30).X组手术前30 min血必净注射液50 mL+生理盐水100 mL静滴,术后血必净注射液50 mL+生理盐水100 mL静滴,每天2次,连用5d;C组等量生理盐水静脉滴注.检测两组患者不同时间点血清中C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度.术前1d、术后7d采用简易精神状态检查量表(MMSE)对患者进行认知功能测试.结果 两组患者手术后CRP、IL-6、TNF-α明显增高(P<0.05),X组增高的幅度低于C组(P<0.05);两组术后认知功能障碍(POCD)的发生率比较差异无统计学意义,术后X组的MMSE评分高于C组(P<0.05).结论 围术期静滴血必净注射液可抑制术后炎性细胞因子CRP、IL-6、TNF-α等的释放,降低麻醉及手术创伤的应激反应,改善老年患者关节置换术后早期认知功能.
作者:杨淼;方华;章放香;章建平 刊期: 2018年第07期
原发性干燥综合征(primary Sjogren's syndrome,pSS)是一个主要累及外分泌腺体的慢性炎症性自身免疫病,主要累及外分泌腺包括唾液腺、泪腺等,也可累及其他脏器引发疾病.pSS的口腔症状主要表现为唾液腺受损、功能下降而出现的口干、龋齿、黏膜异常、涎腺肿大等[1-2].pSS起病隐匿、进展缓慢、临床表现多样化,易误诊或漏诊.抗核抗体谱(ANAs)是辅助诊断pSS应用多的检测项目之一,在自身免疫疾病的诊治中具有重要的应用价值.本文对87例以口腔症状为主的pSS患者ANAs检测结果进行了回顾性分析,以探讨该类患者ANAs检测结果的相互关系和临床意义.
作者:陆欢平 刊期: 2018年第07期
磁流体热疗就是将磁性纳米粒子通过特定的方式导入到肿瘤内部,然后放置在交变磁场中,磁性粒子在交变磁场的作用下作为致热源产热,从而达到治疗肿瘤的目的.此种治疗肿瘤方法的特异性和高度靶向性是其他热疗方法无法比拟的,近年来,此方面的研究越来越受到广大学者的关注,本文就磁流体热疗治疗恶性肿瘤的研究进展加以简要介绍.
作者:胡润磊;江洪;马胜林 刊期: 2018年第07期
目的 观察Wnt/β-catenin信号通路在肾缺血再灌注大鼠模型中不同时间的表达及ICG-001阻断Wnt/β-catenin信号通路对慢性肾间质纤维化的作用.方法 将SD大鼠分为4组,假手术组(Sham)、IRI 7 d组、IRI 14 d组及ICG+ IRI组.假手术组不夹闭左侧肾动脉;IRI 7 d组、IRI 14 d组及ICG+ IRI组用无创血管夹夹闭左侧肾动脉,35 min后去除血管夹;ICG+IRI组于术后第2天开始腹腔注射ICG-001.检测4组大鼠肾功能,Western blot检测肾组织β-链蛋白(β-catenin)、纤维连接蛋白(Fibronectin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平,免疫组化观察β-catenin表达部位,生化染色测胶原含量,Masson染色观察病理改变.结果 与假手术组相比,IRI7 d组Fibronectin、α-SMA、胶原含量无明显增高,病理无明显肾小管间质纤维化;而IRI 14 d组Fibronectin、α-SMA的蛋白表达水平则明显增高,胶原含量增多,肾功能减退,病理显示肾小管间质纤维化.与假手术组相比,IRI7 d组β-catenin表达增高,IRI 14 d组较IRI7 d组增高更显著.与IRI 14 d组相比,ICG+ IRI组β-catenin、Fibronectin、α-SMA的蛋白表达水平明显降低,胶原含量减少,肾功能好转,病理显示肾小管间质纤维化程度减轻.结论 Wnt/β-catenin信号通路在IRI术后7d已激活,早于肾间质纤维化出现;ICG-001阻断Wnt/β-catenin信号通路可减轻肾缺血再灌注所致慢性肾间质纤维化.
作者:黄健;刘畅;陈松;闵亚丽 刊期: 2018年第07期
目的 探讨在意识指数监测下联合使用小剂量瑞芬太尼用于无痛人流的安全性.方法 择期行无痛人流术200例,随机分为对照组和瑞芬太尼10、20、30和40 μg组.对照组采用单纯丙泊酚麻醉,其他组接受丙泊酚+相应剂量瑞芬太尼麻醉.记录各组患者丙泊酚用量、苏醒时间、丙泊酚注射痛及围术期低血压、高血压、心动过缓、心动过速、低氧血症、体动反应和恶心呕吐发生情况.结果 随着瑞芬太尼剂量增加,丙泊酚用量渐减少,苏醒时间缩短,丙泊酚注射痛发生率降低,疼痛程度减轻,体动反应发生率降低(P<0.05);各瑞芬太尼组心动过缓及低氧血症发生率随剂量增加渐升高,其中低氧血症R4组与C组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 IOC监测下联合使用小剂量瑞芬太尼有助于减少无痛人流术中丙泊酚用量,缩短苏醒时间,降低注射痛及体动反应发生率,但瑞芬太尼单次剂量达40μg时增加需警惕发生心动过缓及低氧血症的风险.
作者:刘民强;李仁宰;何俊永;石浩文;马明飞;何仁亮 刊期: 2018年第07期
鼻咽癌治疗方式是以放射治疗为主的综合治疗,其5年生存率从20世纪80年代的50%上升至20世纪90年代的70%[1-2],复发是鼻咽癌治疗失败的主要原因之一.对复发累及颈内动脉且需手术治疗的病例,有必要术前行颈内动脉闭塞试验评估脑血流代偿情况.本研究回顾我院2012年5月至2016年12月行颈内动脉闭塞试验患者的临床资料并进行分析.
作者:陈锐聪;白小欣;陈锦华;邹志敏;刘诗万;蔡军;黎劭学 刊期: 2018年第07期
目的 探讨体外受精-胚胎移植中,首次胚胎移植不同周期的妊娠结局.方法 选择女方年龄< 40岁首次行胚胎移植的患者,将首次移植周期分为新鲜胚胎移植周期组和冻融胚胎移植周期组,对首次移植不同周期的妊娠结局进行了回顾性分析.研究不同移植周期的妊娠结局有何差异.结果 首次移植中,新鲜胚胎移植周期组的年龄、受精率、优质胚胎率、移植日内膜厚度和平均移植优质胚胎数均显著高于冻融胚胎移植组(P<0.05),而基础激素黄体生成素、平均获卵数、可利用胚胎率和单胎率则相反(P<0.05).结论 首次移植只要移植胚胎数一致,两种移植方式临床妊娠率相同,但减少移植优质胚胎数可显著降低多胎妊娠的发生,并且不影响抱婴率.
作者:贾俊龙;张丽媛;桑元坤;张文华;王玲 刊期: 2018年第07期
目的 分析LHX6基因在肺癌组织和肺癌细胞系中的甲基化情况及其表达,并初步探索LHX6基因生物学功能.方法 采用甲基化特异性PCR (MSP)方法对88例配对肺癌患者肺癌组织和癌旁正常组织以及肺癌细胞系中LHX6基因甲基化情况进行检测;应用RT-PCR,qPCR和免疫组化方法对正常肺组织、肺癌组织、癌旁组织和肺癌细胞系中的LHX6基因mRNA和蛋白表达情况进行检测;对LHX6基因过表达处理检测该基因对肿瘤细胞的生长、增殖影响探索其生物学功能.结果 LHX6基因在肺癌组织与肺癌细胞系中发生明显高甲基化(P<0.01),且该基因在肺癌组织和肺癌细胞系中呈现了表达下降情况(P<0.01).过表达LHX6基因后可以明显抑制肿瘤细胞的生长和增殖.结论 LHX6基因在肺癌中是一个受甲基化调控的基因,该甲基化程度影响该基因表达,该基因具有抑制肺癌的作用,是一个典型的抑癌基因.
作者:张明谦;李艳;毕瑜;罗文娟;韩飞 刊期: 2018年第07期
目的 探讨前交叉韧带(ACL)解剖重建中股骨侧分别使用不同固定方式对术后骨道扩大的影响和临床疗效.方法 回顾性分析2014年6月至2015年6月自体腘绳肌腱单束解割重建ACL患者60例,随机分为Rigidfix固定组和Endobutton固定组(各30例),记录患者手术前后膝关节KT-1000测量值、IKDC评分及Lysholm评分评估膝关节功能恢复情况;使用多排螺旋CT测量重建术后股骨侧隧道4个位置的直径,分析术后骨道扩大的变化.结果 所有患者均获得12个月随访,两组患者手术前后的膝关节IKDC评分、Lysholm评分及KT-1000测量位移值差异无统计学意义(P>0.05).术后12个月两组患者股骨侧骨道扩大相比,P1位置骨道直径差异有统计学意义(P<0.05),余位置骨道差异无统计学意义(P>0.05).结论 ACL单束解剖重建中股骨侧使用Rigidfix固定组较Endobutton固定骨隧道内口扩大较小,而股骨隧道其他位置骨道扩大二者无明显差异;ACL重建术后骨道扩大不影响术后膝关节功能恢复.
作者:李嘉;朴海旺;常乾坤;刘向林;徐丛 刊期: 2018年第07期