学术投稿

p21-活化激酶1靶向siRNA协同5-氟尿嘧啶对大肠癌细胞化疗增敏作用

青海涛;龚伟;刘思德

关键词:大肠肿瘤, p21-activatedkinase1, 5-氟尿嘧啶, 化疗增敏
摘要:目的:探讨大肠癌细胞中 p21-活化激酶 1 ( PAK1 )对 5-氟尿嘧啶( 5-FU )化疗敏感性的影响.方法:CCK8 法测定增殖;流式细胞仪测定凋亡率;Hoechst 染色法检测凋亡;Western Blot 检测Bcl-xl、Bcl-2、XIAP表达. 结果:敲除PAK1可抑制LoVo细胞的生长,而5-FU联合shRNA-PAK1 组(联合组)细胞增殖受到显著抑制(P < 0.05). 各组凋亡率:联合组(53.36 ± 4.03)%、shRNA-PAK1 转染组(26.48 ± 2.78)%、5-FU 组(15.52 ± 1.30)%,联合组凋亡率显著增高(P < 0.05). 联合组凋亡核所占比率即凋亡率高 (P <0.01).联合组Bcl-xl、Bcl-2、XIAP的表达较单独5-FU组及shRNA-PAK1组抑制更加明显.结论: RNA干扰抑制PAK1表达后LoVo细胞对5-FU的敏感性增加,更显著抑制增殖、诱导凋亡.
实用医学杂志相关文献
  • 256层螺旋CT扫描钙化积分筛查有症状疑似冠心病的临床价值

    目的:探讨钙化积分筛查有症状疑似冠心病(CAD)的临床价值. 方法: 收集接受256层螺旋CT冠状动脉成像(CTA)检查并同时做钙化积分扫描的51 例疑似冠心病患者的相关资料,所有患者30 d 内均进行了选择性冠脉造影(CAG)检查. 采用交叉表和受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析钙化积分、钙化积分和冠脉CTA的联合诊断实验. 结果:采用ROC曲线分析选择佳诊断切点,同时使敏感性和特异性达到大值的钙化积分诊断冠脉狭窄≥50%的阈值为9.35分,其敏感性为89.13%,特异性为80.00%.进行冠脉CTA与钙化积分以9.35 为诊断切点的联合诊断实验,并联实验后,诊断冠脉狭窄≥50%的敏感性较单用冠脉CTA升高(100% vs 97.82%),特异性(60% vs 60%)保持不变. 结论:钙化积分对有症状的可疑冠心病筛查有重要的临床价值,可作为冠心病诊断的参考指标之一. 钙化积分与CTA的联合诊断提高冠脉CT诊断冠心病的敏感性.

    作者:李宁;刘吉祥;信栓力;常超;韩丽英;张仁杰;李琴 刊期: 2015年第16期

  • 宫颈冷刀锥切术后病理有无宫颈上皮内瘤变对复发的影响

    目的:研究宫颈冷刀锥切术后病理中有无宫颈上皮内瘤变(CIN)对复发的影响. 方法:回顾性分析我院2010 年间共95 例因阴道镜下宫颈活检病理证实为CIN 3 ,行宫颈冷刀锥切术的患者的临床病理资料. 将其分成2组,组1 (锥切病理无CIN )和组2 (锥切病理有CIN ) ,研究2 组患者的年龄、中位妊娠次数、中位经产次数、绝经患者比率、锥切前后高危型人乳头瘤病毒(Hr-HPV)持续感染率及组织学复发率之间差异有无统计学意义. 结果:两组患者上述研究指标比较差异均无统计学意义(P > 0.05). 结论:宫颈冷刀锥切术后病理中无CIN的患者与有CIN的患者预后无显著差异,术后随访同等重要.

    作者:李倩;赵丽雅;张颐;郭科军;庞晓燕 刊期: 2015年第16期

  • Palindrome导管在老年维持性血液透析患者中的临床应用

    目的:比较新型 Palindrome 导管与 Permcath 导管在老年维持性血液透析患者中的临床应用效果. 方法: 纳入2013年5月至2015 年5 月我院采用Palindrome 导管的老年维持性血液透析患者33 例(试验组)与同期采用Permcath 导管的老年维持性血液透析患者29 例(对照组) ,观察比较两组尿素清除率(Kt/V)、尿素下降率(URR),导管相关感染、功能不良发生率及导通畅率. 结果:试验组的 Kt/V、URR 及导管通畅率显著高于对照组,平均感染率及功能不良发生率显著低于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05).结论:对于动静脉内瘘建立困难的老年维持性透析患者,使用 Palindrome 导管在透析充分性、导管感染率、通畅率等方面优于Permcath导管,是临床较好的选择.

    作者:徐丹;廖华伟;张和平;张婕;刘晓惠;冯江超;管保章 刊期: 2015年第16期

  • 冠状动脉介入治疗术后患者服药依从性及其影响因素

    目的:了解冠状动脉介入治疗(PCI)术后患者的服药依从性及其影响因素.方法: 选取PCI术后第3个月回门诊复查的冠心病患者,采用问卷调查法,对其服药依从性、对冠心病的认知等进行评估,采用t检验、方差分析、Pearson相关分析、多重线性回归分析等方法进行分析.结果: PCI术后患者服药依从性得分为5.85 ± 1.87,多因素分析结果显示自我控制信心、疾病了解程度、年龄、服药种数进入回归方程.结论:PCI术后患者的自我控制信心、疾病了解程度为服药依从性的保护性因素,而其年龄、服药种数则为服药依从性的危险因素.

    作者:颜君;杨巧红;林春喜 刊期: 2015年第16期

  • 慢性阻塞性肺疾病恒定功率运动能力与动态过度充气的关系

    目的:观察稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的恒定功率运动表现与动态过度充气间的相互关系.方法:对30例中度以上稳定期COPD患者进行常规肺通气功能、80%Wmax恒定功率自行车运动测试,分析运动耐受时间、呼吸困难程度、大摄氧量量及大公斤摄氧量百分比与深吸气量百分比变化值之间的相互关系. 结果:COPD患者均出现不同程度的运动能力下降,且在恒定功率运动中伴随显著的动态过度充气;相关分析提示,恒定功率运动大公斤摄氧量百分比与动态过度充气百分比呈负相关(r = -0.480, P = 0.007),而与静息深吸气量百分比呈正相关(r=0.667,P=0.01).结论:动态过度充气可能是COPD患者恒定功率运动受限的重要影响因子,抑制动态过度充气可能有助于改善患者的恒定功率运动表现.

    作者:曾斌;张鸣生 刊期: 2015年第16期

  • 品管圈活动在危重患儿皮肤管理中的应用

    目的:研究品管圈活动在预防和降低危重患儿皮肤损伤方面的应用价值,探索危重患儿皮肤管理的有效模式. 方法:通过品管圈活动选定主题,拟定活动计划,活动周期为6个月. 回顾性统计分析对照组71 例患儿皮肤损伤部位、采取的措施和愈合时间;现状调查护理人员引起患儿皮肤损伤的相关因素;制定相应的对策及实施方案. 结果:经实施品管圈管理后,危重患儿皮肤损伤发生率从21.7%降至8.7%,皮肤愈合时间明显缩短(P < 0.05),护士皮肤伤口护理知识掌握率从63.1%提高至92.5%. 结论:品管圈活动能有效降低危重患儿皮肤损伤率,缩短皮肤伤口愈合时间,提高护士对各种皮肤问题的预防和应对能力,是一种有效的皮肤质量管理模式.

    作者:张丹如;潘婧婧;黄建芬;邵素青;金海霞;黄凡;程健;管璇;季林梅 刊期: 2015年第16期

  • 联合应用辛伐他汀和阿司匹林对移植心脏的影响

    目的:探讨联合应用辛伐他汀和阿司匹林对移植心脏存活时间的影响及其作用机制. 方法:异位心脏移植Wistar(供体)-SD(受体)大鼠. 将实验大鼠随机分为 5 组(Sham、HT、HT + S、HT + A、HT +A + S),每组20只. 在术后第3、7、10、15、20、30和40天以免疫组化的方法检测eNOS的表达; Griess assay测定NO水平;流式细胞仪分析CD4 + CD25 + Treg 细胞;组织学检查移植心脏和血管的病理变化. 结果:辛伐他汀联合阿司匹林可显著延长移植心脏存活时间[HT + A + S 组:(39 ± 5.3) d (n = 19), HT 组:(8 ± 1.2) d (n = 18)(P < 0.001)].辛伐他汀联合阿司匹林可延迟移植心脏血管及心肌的病理变化,辛伐他汀联合阿司匹林上调eNOS 表达和 NO 分泌增加; 在各组大鼠外周血 CD4 + CD25 + Treg 细胞水平分别为 Sham组:(2.2 ± 0.5)%,HT 组:(2.9 ± 0.8)%,HT + S 组:(4.3 ± 1.0)%,HT + A 组: (8.3 ± 1.7)%, HT + A + S组: (14.3 ± 3.7)%,HT组与HT + A组(P < 0.05)或HT + A + S组(P < 0.01)差异有统计学意义. 结论:辛伐他汀联合阿司匹林可延缓血管和心肌病理变化及延长移植心脏存活时间. 其机制可能是它们激活的CD4 +CD25 +Treg细胞诱导免疫耐受及对移植心脏内皮细胞的保护作用.

    作者:朱进国 刊期: 2015年第16期

  • 成人Still病关节外部位的18F-FDG PET/CT表现

    目的:总结成人Still病关节外部位 18F-FDG PET/CT 特点, 加深对该病的认识, 提高 18F-FDG PET/CT对成人Still病的辅助诊断价值. 方法: 回顾性分析12 例经临床和实验室确诊为成人Still病的患者,加入年龄、性别、病程、治疗情况等一般性资料,分析并总结其关节外部位 18F-FDG PET/CT特征. 结果:12例患者中,均未发现实体恶性肿瘤. 肝脏、脾脏、骨髓及淋巴结均有不同程度的高摄取,脾脏异常摄取10例,肝脏异常摄取4例,骨髓异常摄取12例,淋巴结异常摄取8例. 肝、脾、骨髓及淋巴结同时摄取者3例,肝、脾、骨髓同时摄取者2 例. 其中肝脏SUVmax 为2.74 ± 0.89,脾脏 SUVmax 平均值 3.68 ± 1.24,胸 10 ~12椎体SUVmax平均值为4.36 ± 1.35,腰2 ~ 4椎体SUVmax平均值为4.26 ± 1.25.其中8例淋巴结摄取,部位分别为腹膜后、盆腔及盆壁、腹股沟、双侧颈部、肝门、腋窝等,SUVmax 平均值3.76 ± 1.41. 结论:成人Still病关节外部位 18F-FDG PET/CT上表现有一定特点,可表现为肝、脾、骨髓、淋巴结的同时或单独弥漫性均匀性摄取,并发或不并发胸腔积液.

    作者:潘博;汪世存;展凤麟;倪明;刘昕;谢强;谢吉奎 刊期: 2015年第16期

  • 低位小切口与胸乳入路腔镜甲状腺手术临床疗效比较分析

    目的:比较低位小切口与腔镜胸乳入路甲状腺手术临床疗效.方法: 将64例适合行甲状腺单侧部分切除的患者分为实验组(30 例)与对照组(34 例),分别行小切口甲状腺切除术与经胸乳入路腔镜甲状腺切除术,比较其临床治疗效果. 结果:两组患者均顺利完成手术,术后无声音嘶哑、饮水呛咳、切口感染、抽搐等并发症,随访1 ~ 3年均未复发.实验组患者的手术时间、术中出血量、术后引流量、术后住院时间及住院费用均明显少于对照组,两组比较差异有统计学意义(P < 0.05). 实验组无皮肤淤斑及皮下积液,对照组分别出现3 例皮肤淤斑及2 例皮下积液,两组比较有明显差异(P < 0.05). 而术后疼痛持续时间及颈前皮肤麻木感两组比较无差异(P > 0.05).结论: 两种手术方式均是较好的甲状腺手术方式,均能取得良好的临床效果;小切口甲状腺手术具有创伤小,切口愈合美观,费用低等优势,是值得推广的手术方式.

    作者:孙雪峰 刊期: 2015年第16期

  • 亚临床甲状腺功能减退症与糖尿病肾脏疾病的相关性

    目的:探讨亚临床甲状腺功能减退症( SCH )与糖尿病肾脏疾病( DKD )的相关性.方法:入选我科住院合并 DKD 的 2 型糖尿病患者 404 例, 根据 FT3、FT4、TSH 分组, 甲功正常组 331 例, SCH 组73 例,比较两组临床指标及相关并发症的差异,分析 SCH 与 DKD 的相关性. 结果:与甲功正常组相比,SCH 组肌酐高(P < 0.001),尿素氮高(P < 0.001),肾小球滤过率(eGFR)低(P < 0.001),差异均有统计学意义;两组相比,SCH 组肾功能不全[eGFR < 60 mL/(min·1.73 m2)]比例显著高于甲功正常组( 47 . 95% vs . 22 . 96%, P < 0 . 001 ). 将 eGFR 作为因变量,进行多因素 Logistic 回归分析, SCH 是 DKD患者肾功能不全的独立危险因素( OR:2 . 015 , 95%CI:1 . 090 ~ 3 . 723 , P = 0 . 025 ). 结论:DKD 合并 SCH患者肾脏损害较甲功正常患者严重, 发生肾功能不全风险高;SCH 可能是 DKD 患者肾功能不全的独立危险因素.

    作者:姜宏卫;刘鹏;马瑜瑾;邢丽培;崔巧丽;王霖蕾;黄珂;范梦琳 刊期: 2015年第16期

  • 川崎病患儿对静脉注射免疫球蛋白治疗反应的病例对照研究

    目的:研究大剂量静脉注射丙种球蛋白(IVIG)治疗川崎病无反应的影响因素. 方法:回顾分析2008年7月至2013年12月期间163例住院川崎病患儿的临床资料, 根据首次对IVIG的治疗效果将患儿分为IVIG敏感型和IVIG无反应型,对比两型川崎病患儿的临床特点及实验室检查指标.结果:两组患儿在发病年龄、性别、IVIG 治疗前发热时间、临床表现完全与否及血 WBC、CK-MB、PLT、ESR 方面差异无显著性(P > 0.05). 无反应型组无菌性脓尿、颈部淋巴结肿大、冠状动脉损害发生率及外周血中性粒细胞比例、CRP、AST、ALT、总胆红素显著高于敏感型组(P < 0.001),而血白蛋白、高密度脂蛋白、钠离子浓度则低于IVIG敏感型患儿(P < 0.05). 结论:无菌性脓尿、冠状动脉损害、颈部淋巴结肿大发生率及外周血中性粒细胞比例增高;血CRP、AST、ALT、总胆红素浓度增高;血浆白蛋白和钠离子浓度减少是川崎病患儿 IVIG无反应的危险因素.

    作者:王从军;雷中劲 刊期: 2015年第16期

  • 无锡地区4630例妊娠期妇女25-羟维生素D水平的分析

    目的:了解本地区不同孕期妇女血清 25-羟维生素 D 水平及营养状况,初步探讨其临床意义.方法:选择2013 年6 月至2014 年 8 月在本院做产检的健康孕妇 4 630 例,采用电化学发光法测定其血清25-羟维生素D水平, 并对结果进行统计学分析. 结果:4 630 例妊娠期妇女25-羟维生素D水平为30.75 (22.5,41.9)nmol/L,属于不足的水平. 随着妊娠的发展,维生素D缺乏的检出率逐渐升高,不同孕期25-羟维生素D水平不同,且差异有统计学意义(P < 0.05).夏秋季25-羟维生素D水平高于冬春季,且差异有统计学意义(P < 0.05).结论:无锡地区孕妇25-羟维生素D水平不足,妊娠期合理补充维生素D的这一观点还需进一步引起当地医务工作者及社会的高度重视.

    作者:邹萍 刊期: 2015年第16期

  • 超低位直肠癌保肛手术的临床疗效及生存质量分析

    目的:探讨超低位直肠癌保肛手术的可行性及临床应用价值. 方法:回顾性分析我院2009 年1月至 2013 年9 月收治的226 例接受超低位直肠癌根治术患者的临床资料, 并采用 Pearson χ2及 t 检验对117例超低位直肠癌保肛手术(观察组)与109例Miles手术(对照组)的术后短期并发症、肿瘤的局部复发、远处转移、生存率及生存质量等方面进行对比分析.结果:本组病例行传统的Dixon手术108例、直肠翻转肛门内拖出切割缝合改良Dixon手术9例,Miles手术109例,整个手术进程顺利. 观察组的术中出血量较对照组少,肛周湿疹发生率较对照组高(P < 0.05);其手术时间、术中收获淋巴结数、切口感染、肛门排气时间、尿潴留及其他术后短期并发症与对照组比较差异无统计学意义(P > 0.05),但该组患者术后生活质量较高(P < 0.05).随访12 ~ 57个月,观察组与对照组术后肿瘤的局部复发率、远处转移率及生存率差异无统计学意义(P > 0.05). 结论:严格把握手术指征,超低位直肠癌保肛手术可行,能够改善患者术后的生存质量.

    作者:茆家定;吴佩;杨光;武平 刊期: 2015年第16期

  • 慢性咽炎与心血管危险因素的关系

    目的:探讨慢性咽炎与心血管危险因素的关系. 方法:采用病例对照研究方法,选取在我院门诊就诊的慢性咽炎患者作为病例组,并选择来自于同一地区、职业相近、年龄和性别匹配的非慢性咽炎患者作为对照组.应用二分类Logistic回归分析心血管危险因素与慢性咽炎的关系.结果:纳入分析3 911 例,其中病例组和对照组分别为1 657和2 254 例. 校正人口学因素和吸烟、规律运动后,慢性咽炎与肥胖、血压升高、高血糖、高甘油三酯和高尿酸血症呈正相关(P < 0.05). 随着心血管危险因素聚集数的增加,个体患有慢性咽炎的风险逐步增加(P for trend < 0.001),呈明显剂量效应关系.与无心血管危险因素相比,心血管危险因素为6的个体患有慢性咽炎的风险增加了3.88 倍(95%CI: 1.57 ~ 9.60). 结论:慢性咽炎与心血管危险因素存在着正关联,提示慢性咽炎和心血管危险因素的同防同控具有重要意义.

    作者:苗壮;姜丹泉 刊期: 2015年第16期

  • 术前胫骨力线X线定位对提高膝关节置换术后假体力线的作用

    目的:膝关节置换术后假体力线是取得长期疗效的关键因素,但是传统手术方法并不能取得满意的假体力线结果,本研究探讨术前胫骨力线X线定位对改善术后假体冠状位力线作用. 方法: 选取2012年8月至2014年8月需行单侧人工膝关节置换术患者106例,采用随机分组方法,其中术前定位组 54 例,传统手术组52例. 术前定位组术前采用X线定位胫骨冠状力线并在皮肤上标志,术中胫骨截骨冠状位力线参照术前标志线. 比较2 组患者手术时间、术中出血、术后假体冠状位力线的差异以及2组患者术后力线不良的例数,并进行统计学分析. 结果: 2 组患者手术时间以及术中出血量、术后假体股骨角,以及股骨假体力线不良率比较差异无显著性,术前定位组术后胫骨假体角以及下肢力线角均优于传统手术组(分别为91.01° vs. 91.86°, P = 0.01; 181.48° vs. 182.17°, P = 0.04),术前定位组胫骨假体力线不良率以及下肢力线角不良率比传统手术组少(分别为7.4% vs. 25%, P = 0.01; 5.6% vs. 23.1%, P = 0.01).结论:术前胫骨冠状位力线X线定位不增加膝关节置换术手术时间以及术中出血量, 可以有效提高术后胫骨假体以及下肢冠状位力线.

    作者:王新光;史占军;郭汉明;肖军 刊期: 2015年第16期

  • 计算机辅助快速成型技术在复杂骨盆骨折诊断与治疗中的应用

    目的:评价计算机辅助快速成型技术在复杂骨盆骨折诊断与治疗中的应用价值. 方法: 对 22例复杂骨盆骨折患者行薄层 CT 扫描获取骨盆二维数据,采用计算机辅助技术重建三维模型,快速成型技术制出与实体1:1大小的骨盆模型.依此对骨盆骨折做出明确的诊断、分型,制定手术方案,模拟手术,指导手术治疗. 结果:所有患者术中所见与三维重建图像及快速成型模型非常相似,术前的模拟缩短了手术时间,减少了出血量.随访6 ~ 24个月,术后2 ~ 4周患者可在床上坐起,6周后可扶拐下地活动.所有患者均获得了良好的骨折复位. 根据Majeed功能评分标准,优:16例,良:3例,优良率86.4%. 结论: 计算机辅助快速成型技术能直观、精确地显示骨盆的立体形态和各解剖结构的空间关系,对骨盆骨折的诊断、分型及治疗有很好的临床指导作用.

    作者:李宝丰;章莹;谢会斌;郭晓泽;王非;夏虹 刊期: 2015年第16期

  • 男性特发性低促性腺激素性性腺功能减退症与垂体柄阻断综合征临床特点分析

    目的:分析特发性低促性腺激素性性腺功能减退症(IHH)与垂体柄阻断综合征(PSIS)的临床特点, 以提高对该类疾病的诊治水平. 方法: 回顾性分析我科35例IHH 患者及15例PSIS患者的临床表现、内分泌检查和影像学特点. 结果:IHH 患者表现为性发育不良. PSIS 患者表现为身材矮小及性发育不良.内分泌检查:IHH 患者均为低促性腺激素性性腺功能减退,不伴其他垂体激素缺乏.PSIS患者均为低促性腺激素性性腺功能减退,伴生长激素缺乏. GnRH 兴奋试验:PSIS 患者的LH 及T峰值均低于IHH 患者.磁共振检查:IHH 患者中13例垂体MRI未见异常,12例垂体体积小,10例垂体微腺瘤.PSIS患者垂体MRI均显示垂体体积小,垂体柄纤细或显示不清,垂体后叶异位.结论:IHH 与PSIS均表现为低促性腺激素性性腺功能减退,对于身材矮小的患者,应考虑到垂体柄阻断综合征可能,垂体MRI有特异性表现.

    作者:张娜娜;魏会刚;沈涵;白瑜;周洁 刊期: 2015年第16期

  • 口服曲美他嗪与地尔硫卓对经桡动脉介入时桡动脉损伤的保护作用

    目的:通过超声测量血流介导的血管舒张(FMD)来评价口服曲美他嗪及地尔硫卓对经桡动脉介入术时桡动脉损伤的保护作用. 方法:入选住院行择期经桡动脉介入术的患者180 例,随机分为曲美他嗪组、地尔硫卓组及空白对照组,分别测量基线、介入术后 24 h、术后 10 周的 FMD ,比较 3 组患者的桡动脉直径及FMD. 结果:术后24 h,各组FMD明显低于基线(P < 0.01). 术后10周,地尔硫卓组及对照组FMD仍显著低于基线时[地尔硫卓组:(10.4 ± 3.4)% vs(6.3 ± 2.9)%,P < 0.01];对照组(10.5 ± 3.5)% vs (4.3 ± 1.9)%, P<0.01). 曲美他嗪组没有显著差别[(10.1 ± 3.6)% vs (9.2 ± 3.6)%,P=0.09]. t检验显示曲美他嗪组、 地尔硫卓组及空白对照组在介入术后 24 h [(5.5 ± 4.0)%,(6.3 ± 2.9)%,(4.1 ± 3)%,(2.1 ± 1)%,P<0.05],术后10周的FMD有明显差别[(5.5 ± 4.0)%,(9.2 ± 3.6)%,(4.3 ± 1.9)%, P<0.05].多因素logistic回归分析显示,相对于冠心病发生率、肝素剂量、鞘与桡动脉直径比值、置管时间、桡动脉痉挛、使用曲美他嗪及地尔硫卓等,口服曲美他嗪是FMD下降超过50%的独立预测因子. 结论:术后即刻口服地尔硫卓及曲美他嗪均可以减轻经桡动脉介入操作时其对内皮功能的损伤,但曲美他嗪优于地尔硫卓.

    作者:余德龙;顾晔;胡立群 刊期: 2015年第16期

  • 子宫腺肌病发病机制研究新进展

    子宫腺肌病(AM)是指子宫内膜腺体或间质向肌层良性浸润并生长, 引起痛经、 月经过多等症状的常见妇科疾病. 迄今尚无某种成熟理论可独立完整地解释其发生发展机制. 本文通过对其发病机制新研究进展做一综述,旨在为AM的预防、早期诊断及治疗的探索提供理论依据.

    作者:桂涛;黄美华;朱利;曹鹏;万贵平 刊期: 2015年第16期

  • 东亚钳蝎钙通道样毒素的重组表达及活性研究

    目的:原核表达东亚钳蝎钙通道样毒素,分离纯化并初步探讨其生物学活性. 方法:将东亚钳蝎钙通道样毒素 BmCa 基因重组到 PET-GST 表达载体中, 转化入大肠杆菌 BL21 并 IPTG 诱导表达, Ni-SuperChelating Resin 柱亲和层析纯化融合蛋白,尿素梯度透析法复性融合蛋白,采用激光共聚焦显微镜观察其对大鼠骨骼肌细胞内钙浓度的影响.结果:成功构建PET-GST-BmCa 原核表达质粒,诱导后表达分子量约为33 kD 的融合蛋白,经亲和层析得较高纯度的融合蛋白,复性后激光共聚焦扫描显微镜检测显示表明重组蛋白能可逆性的升高骨骼肌细胞内[Ca2+]i. 结论:成功构建PET-GST-BmCa 重组质粒,获得BmCa基因工程菌株, 并表达纯化得到可作用于钙通道的重组蝎毒素蛋白.

    作者:覃媛;张曼;黄劭;顾少菊 刊期: 2015年第16期

实用医学杂志

实用医学杂志

主管:广东省卫生厅

主办:广东省医学情报研究所