学术投稿

超声靶向微泡破碎联合半乳糖聚乙烯亚胺介导凋亡素基因诱导肝癌细胞凋亡的研究

张园;朱惠明;李银鹏;王娜;姜岭梅;黄庆娟

关键词:肝肿瘤, 超声学, 超声靶向微泡破碎, 半乳糖聚乙烯亚胺, 凋亡素基因, 凋亡
摘要:目的:探讨超声靶向微泡破碎(ultrasound targeted microbubble destruction,UTMD)联合半乳糖聚乙烯亚胺(PEI-Gal)介导凋亡素基因(VP3)诱导肝癌细胞HepG2凋亡的影响.方法:体外培养HepG2细胞,随机分为4组:(1)对照组;(2)PEI-Gal组;(3)PEI-Gal+超声组;(4)PEI-Gal+超声+微泡组.转染24 h后荧光显微镜观察pEGFP-VP3在HepG2细胞中的表达,流式细胞仪检测转染效率,RT-PcR和Western blot分别检测VP3 mRNA和蛋白表达水平,AnnexinV-FITC/PI检测细胞凋亡率.结果:流式细胞仪、RT-PCR和Western blot分析表明,PEI-Gal+超声+微泡组的转染效率为(28.83±2.07)%、VP3 mRNA水平为0.92±0.02,蛋白水平为1.65±0.06,HepG2凋亡率为(37.40±2.12)%,均显著高于其他各组(均P<0.01).结论:UTMD联合PEI-Gal可明显提高VP3基因转染HepG2细胞的效率及在HepG2细胞内的表达,增加HepG2细胞的凋亡率.
实用医学杂志相关文献
  • 丙种球蛋白治疗婴幼儿重症手足口病疗效观察

    目的:探索婴幼儿重症手足口病的综合治疗措施,提高抢救成功率.方法:将68例重症手足口病患儿随机分成3组,均予抗病毒及对症的基础治疗:A组予小剂量[0.4 g/(kg·d)]静脉注射丙种球蛋白(IVIG),B组予1 g/(kg·d)IVIG,C组(对照组)予羚羊角治疗,观察3组神经系统症状好转时间、平均发热缓解时间、临床痊愈时间、危重症发生率.结果:两组IVIG治疗患儿与对照组相比,神经系统症状好转时间、平均发热缓解时间、临床痊愈时间均有缩短,危重症发生率有降低,差异有显著性(P<0.05).结论:重症婴幼儿手足口病和(或)存在危重症的高危因素时,及早使用IVIG,疗效显著;使用大、小剂量IVIG治疗重症手足口病疗效相近,小剂量使用IVIG更适合于基层医院首选.单用中药制剂效果有待研究.

    作者:孔卫乾;王金华;黄洁兴;陈健韵 刊期: 2012年第03期

  • PNF技术联合拮抗肌针刺对上肢痉挛性偏瘫的疗效

    目的:观察PNF技术联合拮抗肌针刺对脑卒中后上肢痉挛性偏瘫的疗效.方法:将70例脑卒中恢复期患者随机分为治疗组(37例)和对照组(33例).对照组给予常规康复训练及针刺拮抗肌治疗,治疗组在此基础上加用上肢PNF技术,均治疗4周.治疗前后采用改良Ashworth分级法、Fugl-Meyer(fugl-Meyer assessment,FMA)上肢运动功能评定量表、改良Barthel指数评定量表分别评定上肢的痉挛程度、运动功能及日常生活活动能力(activities of daily living,ADL).结果:治疗4周后,两组患者偏瘫上肢的痉挛程度均较前降低(P<0.05),运动功能及日常生活活动能力较前明显改善(P<0.01),并且治疗组优于对照组(P<0.05).结论:PNF技术联合拮抗肌针刺可有效减轻患者偏瘫上肢的痉挛程度,提高其运动功能,改善其日常生活活动能力.

    作者:王润妹;宋成宪;李舜;刘小蓝;习丽明 刊期: 2012年第03期

  • 辛伐他汀对大鼠血管平滑肌细胞增殖及FGFR1与p21ras表达的干预作用

    目的:观察辛伐他汀对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中FGFRI、p21ras蛋白表达的影响.方法:体外培养大鼠VSMC,建立VSMC增殖模型,应用不同浓度的辛伐他汀干预,MTT法测定细胞增殖活力;免疫印迹法检测FGFR1与p21ras蛋白的表达.结果:与对照组比较.辛伐他汀各浓度组细胞增殖活力均显著降低(P<0.05);与对照组(FGFR1 208.07±10.70,p21ras 202.43±12.36)相比,低剂量组(FGFR1 181.47±7.43,p21ras 182.00±8.98)的FGFR1、p21ras表达差异无显著性(P>0.05),中剂量组(FGFR1 144.90±9.03,p21ras147.03±9.13)、高剂量组(FGFR1 104.43±8.08,p21ras 100.3 ±8.37)的表达均较明显降低(P<0.05),中、高剂量组FGFR1、p21ras表达较低剂量组均显著降低(P<0.05),高剂量组表达又较中剂量组显著降低(P<0.05),呈剂量依赖性.结论:辛伐他汀能抑制VSMC增殖,该作用是通过抑制FGFR1、p21ras蛋白表达实现的,这可能是辛伐他汀治疗动脉粥样硬化、再狭窄及高血压等心血管疾病的重要机制之一.

    作者:侯慧芳;刘国庆;王永玲;孙银平;郭勇 刊期: 2012年第03期

  • 白细胞介素-17对英夫利昔单抗治疗类风湿关节炎疗效的预测作用

    目的:通过检测类风湿关节炎(BA)患者在接受英夫利昔单抗治疗前后外周血中白细胞介素-17(IL-17)的基因表达水平,探讨IL-17能否在英夫利昔单抗治疗RA疗效预测中发挥作用.方法:分别提取BA患者(n=20)和健康志愿者(n=20)的外周血单核细胞(PBMC),通过real-time PCR方法测定PBMC中IL-17的基因表达水平.观察英夫利昔单抗治疗3个月后,IL-17基因表达水平与疾病活动度评分(DAS)改变的相关性,以及治疗前IL-17/TNF-α基因表达水平与治疗反应之间的关系.结果:在RA患者的PBMC中IL-17基因的表达水平明显高于健康志愿者(P<0.05).英夫利昔单抗治疗3个月后,IL-17基因表达水平与DAS的改变无显著相关性.虽然本研究发现RA患者治疗前的IL-17/TNF-α基因表达水平比值越低,则倾向于时治疗反应越好,但两者间无显著相关性(r=-0.28,P=0.070).结论:从本研究现有的结果来看,IL-17尚不足以对英夫利昔单抗治疗RA的疗效起到良好的预测作用,其相关关系仍需进一步研究.

    作者:丁振华;王小冬;熊俊慧;陈坚 刊期: 2012年第03期

  • 探讨鉴别诊断肺癌与肺感染患者的生物标志物

    目的:探讨肺癌与肺感染患者之间生化成分含量以及蛋白组学变化,用于筛选诊断恶性胸腔积液的生物标志物.方法:(1)分别测定肺癌和肺感染患者血清和胸腔积液总蛋白、白蛋白、甘油三酯等10项生化成分含量,进一步比较两组之间各项指标的胸腔积液与血清的比值.(2)基质辅助激光电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析TTR蛋白化学修饰.结果:(1)肺癌患者血清中CHO、ApoA-1、TTR蛋白含量明显高于肺感染患者;而肺感染患者胸腔积液中ADA的活性高于肺癌患者.(2)计算个体胸腔积液与血清生化成分含量比值,肺癌患者,TTR蛋白比例显著高于肺感染患者,ADA减低,与血清变化趋势相同,但更加明显.(3)肺癌患者及肺感染患者血清TTR蛋白均出现3种修饰类型,而肺癌患者胸腔积液中cysgdly-TTR明显增高.结论:联合分析胸腔积液与血清TTR蛋白的比值和化学修饰,可能有助于鉴别诊断肺癌与肺感染.

    作者:段红茹;王庆艳;马玉株;宋林;葛鹏;孙续国 刊期: 2012年第03期

  • 沙利度胺对三阴乳腺癌干细胞微球体的干预研究

    目的:以紫杉醇为对照,研究沙利度胺(thalidomide,TLD)对三阴乳腺癌干细胞(TNBCSCs)微球体的干预情况.方法:(1)采用微球体形成试验、CCK-8法、Transwell侵袭试验,研究TLD对TNBCSCs生物学行为的影响作用.(2)采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测TLD对TNBCSCs的血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.结果:与空白对照组相比,TLD处理后的微球体形成率明显减少,同时干细胞的增殖、侵袭能力均降低,VEGF的表达下降明显,差异有统计学意义.结论:TLD可以影响干细胞微球体的形成,抑制其体外增殖、侵袭及VEGF的表达.

    作者:耿杰;张洁;韩正祥;高向阳;杜秀平 刊期: 2012年第03期

  • 以肺炎为表现的肺黏膜相关淋巴组织淋巴瘤1例

    患者女,59岁,反复咳嗽、咳痰2个月,咯血20 d.曾在当地医院就诊.胸部CT示右肺炎症改变,可见支气管充气征,电子支气管镜检查示右肺上叶黏膜充血水肿,细胞学未见肿瘤细胞,诊断为肺炎,行抗感染(青霉素类)治疗20余天,复查胸部CT病灶未见明显吸收.

    作者:胡根;许飞 刊期: 2012年第03期

  • 循证护理在糖尿病手术患者感染控制中的应用

    目的:运用循证护理方法以降低糖尿病患者术后感染的发生.方法:成立循证小组,检索相关文献结合临床实际工作,选择佳护理证据,制定护理方案,对2009-2010年接受手术的糖尿病患者(观察组)实施循证护理方法,与2007-2008年间接受常规手术护理的糖尿病患者(对照组)比较术后感染的发生率.结果:采用循证护理方法后,观察组糖尿病患者的术后感染率为8.82%,单纯切口感染发生率为4.59%,而对照组术后感染率为15.76%.单纯切口感染发生率为7.85%,两组间差异具有显著性(P<0.01).结论:应用循证护理的方法,规范对糖尿病手术患者术中管理,能减少手术后感染的发生,对糖尿病手术患者术后康复意义重大.

    作者:郭月琼;许俐文;熊欢 刊期: 2012年第03期

  • 益气通脉汤对冠心病心力衰竭患者心功能及N端脑钠肽前体的影响

    目的:观察自拟益气通脉汤在冠心病心力衰竭治疗中的疗效,及对左室功能、血浆N端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平的影响.方法:80例符合冠心痛心力衰竭诊断标准的患者,随机分为治疗组和对照组各40例,对照组采用常规西医治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用益气通脉汤口服,观察两组治疗前及治疗后8周的心功能分级、6 min步行距离、心脏超声指标和NT-prpBNP水平变化,评估其有效性.结果:治疗组较对照组能显著改善患者的左室功能并延长6min步行距离(P<0.05),显著降低血浆NT-proBNP水平,增加左心室射血分数(P<0.05).结论:益气通脉汤可明显改善冠心痛心力衰竭患者的心脏功能,提高运动耐量及生存质量,改善心室重构,不良反应少.

    作者:林营;陈智;陈苗苗 刊期: 2012年第03期

  • 真性桡动脉瘤1例

    患者男,44岁,会计.主因发现左腕部搏动性包块3年就诊.无外伤史及介入治疗史,查体:左桡动脉处可见-2.0 cm×3.0 cm的椭圆形包块,可触及搏动,尺动脉搏动良好,Allen试验阳性.

    作者:齐一侠;张建;俞恒锡 刊期: 2012年第03期

  • 姜黄素逆转耐药作用与Caspase-3关系研究

    目的:探讨姜黄素逆转结肠癌耐药细胞HCT-8/5-FU耐药性与Caspase-3活化的关系.方法:CCK-8法测定姜黄素对耐药细胞耐药逆转作用:荧光显微镜、DNA琼脂糖凝胶电泳及全自动荧光酶标仪观察无细胞毒作用的姜黄素、5-氟尿嘧啶(5-FU)及二者联合作用时细胞凋亡情况、Caspase-3酶活性变化.结果:姜黄素能逆转HCT-8/5-FU耐药性;当姜黄素与5-FU诱导耐药细胞凋亡情况相似时,姜黄素组表达更高的Caspase-3,联合用药诱导耐药细胞凋亡,增强Caspase-3酶活性大于两单用药组之和.结论:姜黄素能逆转结肠癌耐药细胞多药耐药性,解除部分5-FU对耐药细胞Caspase-3活化的抑制,诱导耐药细胞凋亡可能为其逆转机制之一.

    作者:杨春梅;崔晓博;罗强;孙黎;刘华;张林西 刊期: 2012年第03期

  • 超声靶向微泡破碎联合半乳糖聚乙烯亚胺介导凋亡素基因诱导肝癌细胞凋亡的研究

    目的:探讨超声靶向微泡破碎(ultrasound targeted microbubble destruction,UTMD)联合半乳糖聚乙烯亚胺(PEI-Gal)介导凋亡素基因(VP3)诱导肝癌细胞HepG2凋亡的影响.方法:体外培养HepG2细胞,随机分为4组:(1)对照组;(2)PEI-Gal组;(3)PEI-Gal+超声组;(4)PEI-Gal+超声+微泡组.转染24 h后荧光显微镜观察pEGFP-VP3在HepG2细胞中的表达,流式细胞仪检测转染效率,RT-PcR和Western blot分别检测VP3 mRNA和蛋白表达水平,AnnexinV-FITC/PI检测细胞凋亡率.结果:流式细胞仪、RT-PCR和Western blot分析表明,PEI-Gal+超声+微泡组的转染效率为(28.83±2.07)%、VP3 mRNA水平为0.92±0.02,蛋白水平为1.65±0.06,HepG2凋亡率为(37.40±2.12)%,均显著高于其他各组(均P<0.01).结论:UTMD联合PEI-Gal可明显提高VP3基因转染HepG2细胞的效率及在HepG2细胞内的表达,增加HepG2细胞的凋亡率.

    作者:张园;朱惠明;李银鹏;王娜;姜岭梅;黄庆娟 刊期: 2012年第03期

  • 社区契约式管理对老年高血压患者服药依从性的影响

    目的:探讨社区契约式管理对城市老年高血压患者服药依从性及治疗效果的影响.方法:选择本辖区管理的193例符合条件的城市老年高血压患者,对患者及家属实施知识、契约式管理和家庭支持干预.并对患者进行实施前后服药性调查,评估其血压控制情况.结果:实施社区契约式管理后患者服药依从性明显好转.治疗主动性增高,血压控制理想.结论:实施社区契约式管理能提高城市老年高血压患者服药的依从性,对控制患者的血压水平有积极作用.

    作者:曾静;周亚萍;彭淑梅;卢惠卿;黄祝疆 刊期: 2012年第03期

  • 64排CT检测颈动脉粥样斑块与缺血性脑卒中及颅内动脉瘤关系的研究

    目的:探讨颈动脉粥样斑块与缺血性脑卒中、颅内动脉瘤的关系.方法:分别对104例缺血性脑卒中患者和126例健康体检者进行回顾性分析.所有病例均行头颈部64排CT血管造影,分析并记录颈动脉粥样斑块的类型、狭窄程度及颅内动脉瘤.结果:(1)梗塞侧颈动脉的中度狭窄率、重度狭窄或闭塞率明显高于正常侧,差异具有统计学意义(P<0.001).梗塞侧颈动脉的易损斑块率明显高于正常侧,差异具有统计学意义(P<0.001).(2)颈动脉粥样硬化组颅内动脉瘤发生率高于无硬化组,差异具有统计学意义(P=0.037).结论:(1)颈动脉狭窄、易损斑块是缺血性脑卒中的重要危险因素.(2)颈动脉粥样硬化对颅内动脉瘤的发生、发展起着重要作用,同时增加了患者的危险性.(3)64排CT能清晰显示颈动脉狭窄及粥样斑块的形态和成分,可作为临床首选的检查方法.

    作者:刘伟;吕国士;王德韧 刊期: 2012年第03期

  • 小鼠Nestin启动子的克隆及其表达载体的构建

    目的:克隆Nestin基因启动子序列,并研究其调控能力.方法:用高保真酶PCR扩增出小鼠Nestin启动子全序列、核心序列,pcDNA3.1质粒双酶切切掉CMV启动子序列,将Nestin基因启动子序列插入到原CMV启动子位置,pEGFP-N1质粒双酶切下EGFP序列,克隆入pcDNA3.1多克隆位点中,重组构建质粒,分别用Nestin启动子全序列和核心序列调控EGFP基因的表达.重组质粒分别转染Nestin+细胞和Nestin-细胞,观察EGFP基因在细胞内的表达情况.结果:成功克隆出Nestin基因启动子全序列和核心序列.经酶切鉴定及测序证实正确.二序列皆能调控EGFP在各种细胞内的表达.结论:Nestin基因启动子全序列和核心序列具有非特异性调控能力.

    作者:张丽;袁红花;袁凤刚;朱孝荣 刊期: 2012年第03期

  • 99mTc-ECD SPECT脑血流断层显像两种不同半定量指标评价烟雾病血管重建术疗效的比较

    目的:使用99mTc-ECD SPECT脑血流灌注断层显像评价双侧比值法和小脑比值法半定量指标时烟雾病患者血管重建术后疗效评价的作用.方法:血管造影诊断为烟雾病的患者232例,其中97例为单侧颈内动脉狭窄,135例为双侧同时狭窄.血管重建术前及重建术后1周分别用99mTc-ECD进行脑血流灌注断层显像,232例均分别采用双侧比值法和小脑比值法统计目测和定量脑血流灌注减低率,利用脑血流灌注断层图像,勾画12分法感兴趣区,左右镜像相应区域对比,计算比值,以比值绝对值大于10%确定为灌注减低:然后利用双侧小脑半球、颞叶和基底节区清晰的层面勾画各自感兴趣区,计算机自动计算出大脑半球各部位与小脑比值.结果:血管重建术前后局灶性或弥漫性血流灌注减低者双侧比值法目测检出率分别为81.5%和37.1%.定量检出率为52.6%和22.0%.目测与定量检出符合率为64.5%和59.3%.小脑比值法治疗前后目测栓出率分别为95.7%和48.3%.定量检出率为87.9%和44.8%,两者符合率为91.9%和92.9%.无论血管重建术前还是术后,小脑比值法和双侧比值法差异均有显著性(均P<0.05).双侧比值法和小脑比值法对于单侧血管狭窄患者脑血流灌注减低的检出率分别为90.7%和94.8%,对于双侧血管狭窄患者脑血流灌注减低的检出率分别为22.2%和92.6%,两者之间差异具有明显统计学意义(P<0.01).结论:99mTc-ECD SPECT脑血流灌注断层显像小脑比值法半定量指标对评价烟雾痛的血管重建术的疗效比双侧比值法具有更加准确、客观的重要价值.

    作者:马潞娜;张东;李立伟;王骁;李海林 刊期: 2012年第03期

  • 肠内外营养对极低、超低出生体重儿营养摄入和生长发育的影响

    目的:探讨不同肠内外营养治疗手段对极低与超低出生体重儿营养摄入的影响和不同营养方式与生长发育情况的关系.方法:84例极低出生体重儿(包括超低出生体重儿)按照肠外营养(PN)应用的时间分为两组,组1:PN<10 d,平均(4.97±2.25)d,共计37例;组2:应用PN≥10 d,平均(14.11±5.70)d.共计47例.记录两组出生体重及住院期间的体重变化(每天测量1次),逐日记录两组生后4周内的脂肪、蛋白质、碳水化合物、液体及能量摄入量,比较分析两组生后4周内的营养摄入和生长情况.结果:组1在生后第2、3、4周摄入能量、总液体量、蛋白质、脂肪均大于组2,组1能量早于组2达到120 Kcal/(kg·d),而生后第1周两组则相差不大.且早期建立肠内营养、PN时间短的婴儿体重下降幅度小,平均体重增长快,恢复至出生体重时间早,体重较早达到出院标准(2 000 g),住院时间短.结论:早期进行胃肠道喂养、应用PN时间短的营养方式能提供更足够的能量及营养素以满足极低与超低出生体重儿的生长发育.

    作者:凌雅;钱燕;姜赛芝;余震 刊期: 2012年第03期

  • 改良NOTES及TUES在腹腔镜结直肠手术中的应用

    目的:探讨经自然腔道内镜手术(natural orifice tragslaminal endoscopic surgery,NOTES)及经脐入路内镜手术(TUES)技术在腹腔镜腹部外科手术中的临床应用价值.方法:采用NOTES及,TUES技术,自行设计了肛门转换器,标本切除后经此肛门转换器拖出,完成了5例免辅助切口腹腔镜乙状结肠癌根治术.采用,TUES完成右半结肠及直肠癌各1例.结果:手术过程用时平均260min,术中平均失血量约为110mL,全组无手术死亡病例,无术后出血、吻合口漏等并发症,随访0.5-1年无腹壁穿刺孔或切口肿瘤复发,术后患者腹部切口未见明显瘢痕,美容效果良好.结论:经过我们加以改良,NOTES及TUES技术在腹腔镜腹部外科临床实际运用中操作更为简单、实用,改进后的技术对器械要求不高,既克服了单孔技术的操作难度大的问题,也改良了NOTES技术因入路带来的伦理、感染、内瘘等问题,同时仍然具备NOTES及TUES技术入路隐蔽、体表无创口或微小瘢痕、创伤小等特点,有临床实用价值及广泛的应用前景.

    作者:杜吉义;陈江;李家辉;刘叔仁 刊期: 2012年第03期

  • 抗菌肽PGG酰胺化合成物的生物学特性研究

    目的:对比人工设计合成的抗菌肽PGG与它的酰胺化产物PGG-NH2的生物学特性.方法:根据NCCIS的方法,以天然蜂毒肽Melittin为对照,测定抗菌肽时大肠埃希菌和表皮葡萄球菌的低抑菌浓度(MIC);同时测定在不同盐浓度及不同MgCl2浓度下对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC.使用5%的红细胞悬液,与抗菌肽混合孵育后540 nm的吸光度评价溶血性,用超声完全溶解后红细胞悬液作为评价标准.结果:PGG-NH2对大肠埃希菌和表皮葡萄球菌MIC为4-8 μg/mL和8~16 μg/mL;随着离子浓度的增加,抗菌肽对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC出现不同程度的增高,NaCl和MgCl2浓度对PGG-NH2活性的影响小于PGG;100 μg/mL PGG-NH2的溶血性小于10%.结论:PGG-NH2有较强的抗菌活性,比PGG耐受更高的离子强度,同时具有更低的溶血性.

    作者:陈曼;胡启飞;吴民泸;代娟;赖翼;段佳慧;陈登榜 刊期: 2012年第03期

  • 泛福舒联合流感疫苗佐治老年支气管扩张患者的临床疗效观察

    目的:探讨泛福舒联合流感疫苗对老年支气管扩张患者的临床意义.方法:将54例老年支气管扩张患者于缓解期随机分成疫苗组和对照组.疫苗组病例于观察开始前口服泛福舒以及每年我国流感高发季节前接种灭活流感疫苗.两组患者均观察2年,每4周随访1次.对咳嗽、咳痰、咯血等症状以及胸部影像学资料进行临床评价;登记疫苗组1、2年内肺炎复发次数及再发肺部感染的相距时间,与对照组进行回顾性对比分析.结果:疫苗组1年再发肺部感染病例明显低于对照组,而再发肺部感染的相距时间延长,但两年内再发肺部感染病例与对照组差异无差显性.结论:泛福舒联合流感疫苗接种是临床佐治老年支气管扩张的一个有效方法,值得临床推广.

    作者:卢树标;吕文慧 刊期: 2012年第03期

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